雙莉華 范彩霞 黃康 吳晨 撫州市中心血站質(zhì)管科 （江西 撫州 344000）

內(nèi)容提要： 目的：探究分析在基層血站全自動(dòng)酶免分析儀與自動(dòng)核酸純化儀的運(yùn)用價(jià)值。方法：選取2020年1月～2022年12月某基層血站無(wú)償獻(xiàn)血樣本共計(jì)76528例，其中，2020年檢測(cè)總數(shù)為24407例，2021年檢測(cè)總數(shù)為25709例，2022年檢測(cè)總數(shù)為26412例，使用全自動(dòng)酶免分析儀與自動(dòng)核酸純化儀，首先實(shí)施酶免檢測(cè)，如若檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性直接判定，對(duì)于特殊樣本，實(shí)施酶免檢測(cè)與核酸并行檢測(cè)，觀察分析在乙型肝炎病毒檢測(cè)、丙型肝炎病毒檢測(cè)、艾滋病毒檢測(cè)、梅毒檢測(cè)中不合格情況。結(jié)果：①分析2020年～2022年酶免檢測(cè)結(jié)果，在2020年，乙型肝炎陽(yáng)性病毒檢出率最高達(dá)到0.37%，梅毒病毒陽(yáng)性檢出率0.33%次之；在2021年，乙型肝炎病毒陽(yáng)性檢出率最高達(dá)到0.40%，梅毒病毒陽(yáng)性檢出率0.14%次之；在2022年，乙型肝炎病毒陽(yáng)性檢出率達(dá)到0.33%，梅毒病毒陽(yáng)性檢出率0.11%次之。②2020年核酸檢測(cè)共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)51例，陽(yáng)性率0.21%；2021年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)33例，陽(yáng)性率0.13%，人類免疫缺陷病毒陽(yáng)性數(shù)1例，陽(yáng)性率0.004%；2022年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)42例，陽(yáng)性率0.16%。結(jié)論：利用全自動(dòng)酶免分析儀與自動(dòng)核酸純化儀，進(jìn)行核酸檢測(cè)和免疫檢測(cè)平行篩查，能夠發(fā)揮優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的作用，可降低輸血傳播疾病殘余風(fēng)險(xiǎn)，有效控制輸血傳播的病毒性疾病，為輸血者提供安全保障。

隨著我國(guó)公益事業(yè)快速發(fā)展，社會(huì)大眾的公益觀念穩(wěn)步提升，無(wú)償獻(xiàn)血得到國(guó)家政策的大力支持，促使自愿無(wú)償獻(xiàn)血志愿者數(shù)量逐漸增加[1]。無(wú)償獻(xiàn)血為臨床輸血提供寶貴的血液資源，為了提高臨床輸血的安全性，要嚴(yán)格篩查血液樣本，以便第一時(shí)間發(fā)現(xiàn)不符合標(biāo)準(zhǔn)的血液產(chǎn)品，確保血液質(zhì)量，以降低輸血過(guò)程中出現(xiàn)的不良輸血事件[2]。過(guò)去基層血站對(duì)血液篩查主要利用血清酶聯(lián)免疫吸附方法進(jìn)行檢驗(yàn)，能夠及時(shí)檢出乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病病毒、梅毒病毒等，但是也無(wú)法將弱陽(yáng)性、灰區(qū)樣本有效排出。在血液檢驗(yàn)中，核酸檢測(cè)運(yùn)用更加普遍，有較高的敏感性，能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)弱陽(yáng)性、灰區(qū)樣本，保證血液篩查的有效性[3]。為了提高基層血站血液篩查的有效性，現(xiàn)對(duì)全自動(dòng)酶免分析儀與自動(dòng)核酸純化儀的運(yùn)用價(jià)值展開如下匯報(bào)。

表1.2020年～2022年酶免檢測(cè)結(jié)果(n/%)

表2.2020年～2022年核酸檢測(cè)結(jié)果(n/%)

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年1月～2022年12月某基層血站無(wú)償獻(xiàn)血樣本共計(jì)76528例，其中，2020年檢測(cè)總數(shù)為24407例，2021年檢測(cè)總數(shù)為25709例，2022年檢測(cè)總數(shù)為26412例，每份血液樣本5mL。其中，38744例為男性，37784例為女性，年齡18～60歲，平均（34.42±3.21）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①全部獻(xiàn)血者均滿足GB18467-2011獻(xiàn)血者健康檢查要求；②全部獻(xiàn)血者均為無(wú)償獻(xiàn)血。排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除難以配合獻(xiàn)血工作的獻(xiàn)血者；②排除存在凝血功能障礙的獻(xiàn)血者。

儀器設(shè)備：①酶免檢測(cè)。Uranus AE150全自動(dòng)酶免儀（產(chǎn)地：深圳愛康公司）或EVO ELISA200（產(chǎn)地：瑞士帝肯公司）。②核酸檢測(cè)。ChiTas-BSS1200自動(dòng)核酸純化儀（產(chǎn)地：蘇州新波生物公司）和ABI-7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀（產(chǎn)地：愛普拜斯生物公司）或cobass201全自動(dòng)核酸血液篩查系統(tǒng)（產(chǎn)地：羅氏有限公司），DL-42M醫(yī)用低溫離心機(jī)（產(chǎn)地：湖南平凡科技公司）。

檢測(cè)試劑：①酶免檢測(cè)試劑廠家：廈門新創(chuàng)所提供的HBsAg、HCV抗體、HIV抗體和TP檢測(cè)試劑，另一廠家由北京萬(wàn)泰提供的HBsAg、TP檢測(cè)試劑以及珠海麗珠提供的HCV抗體、HIV抗體檢測(cè)試劑。②核酸檢測(cè)試劑廠家：上海浩源生物科技有限公司、羅氏診斷產(chǎn)品有限公司。

1.2 方法

根據(jù)試驗(yàn)的技術(shù)要求，采用相應(yīng)類型的真空采血管本在血液采集完成后從血袋血液中留取分別留取1管5～6mL血液標(biāo)本，用于酶免和核酸檢測(cè)。酶免檢測(cè)標(biāo)本3000r/min離心15min；核酸檢測(cè)標(biāo)本在采集后4h之內(nèi)宜采用水平離心機(jī)進(jìn)行離心，離心力為1500～1800g，在低溫條件下離心20min。一般情況下，本血站采取血清學(xué)與核酸順序檢測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè)，如若酶免檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性，直接判定為不合格，將酶免檢測(cè)為合格的標(biāo)本再進(jìn)行核酸檢測(cè)，檢測(cè)為有反應(yīng)的判為不合格。如若遇到特殊標(biāo)本，例如機(jī)采獻(xiàn)血樣本或者因血庫(kù)血液庫(kù)存量比較少的情況下，則采取血清學(xué)與核酸并行檢測(cè)模式，將血液標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行酶免檢測(cè)與核酸檢測(cè)，酶免檢測(cè)和核酸檢測(cè)均陰性的或無(wú)反應(yīng)的判為合格。

1.3 觀察指標(biāo)

嚴(yán)格按照檢測(cè)試劑以及儀器操作說(shuō)明書進(jìn)行操作，利用ELISA檢測(cè)技術(shù)對(duì)血液樣本進(jìn)行乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎抗體、艾滋病病毒和梅毒抗體的檢測(cè)，利用核酸檢測(cè)技術(shù)對(duì)血液樣本進(jìn)行HBV/HCV/HIV核酸聯(lián)合檢測(cè)，分析檢測(cè)結(jié)果。

2.結(jié)果

2.1 2020年～2022年酶免檢測(cè)結(jié)果分析酶免檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)過(guò)酶免檢測(cè)，2020年共檢出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)91例（陽(yáng)性率0.37%），丙型感染陽(yáng)性數(shù)19例（陽(yáng)性率0.08%），人類免疫缺陷病毒陽(yáng)性數(shù)14例（陽(yáng)性率0.06%），梅毒陽(yáng)性數(shù)81例（陽(yáng)性率0.33%）；2021年共檢出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)104例（陽(yáng)性率0.40%），丙型感染陽(yáng)性數(shù)15例（陽(yáng)性率0.06%），人類免疫缺陷病毒陽(yáng)性數(shù)15例（陽(yáng)性率0.06%），梅毒陽(yáng)性數(shù)36例（陽(yáng)性率0.14%）；2022年共檢出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)87例（陽(yáng)性率0.33%），丙型感染陽(yáng)性數(shù)17例（陽(yáng)性率0.06%），人類免疫缺陷病毒陽(yáng)性數(shù)13例（陽(yáng)性率0.05%），梅毒陽(yáng)性數(shù)29例（陽(yáng)性率0.11%），見表1。

2.2 2020年～2022年核酸檢測(cè)結(jié)果分析

經(jīng)過(guò)核酸檢測(cè)，2020年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)51例，陽(yáng)性率0.21%；2021年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)33例，陽(yáng)性率0.13%，人類免疫缺陷陽(yáng)性數(shù)1例，陽(yáng)性率0.004%；2022年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)42例，陽(yáng)性率0.16%，見表2。

3.討論

無(wú)償獻(xiàn)血主要針對(duì)志愿者在自愿、無(wú)償?shù)臈l件下自行捐獻(xiàn)適量血液的一種行為，在無(wú)償獻(xiàn)血中獲得血液資源是臨床輸血的主要來(lái)源渠道，可在不同疾病治療中合理使用[4,5]。在無(wú)償獻(xiàn)血者血液樣本收集完畢后，為了提高臨床輸血的安全性，保證血液的質(zhì)量，需要對(duì)血液樣本開展輸血傳播病原體進(jìn)行系統(tǒng)檢查，以便第一時(shí)間發(fā)現(xiàn)受到污染的血液樣本，保證臨床輸血安全可靠，以免造成血液資源的浪費(fèi)，防止臨床輸血過(guò)程中出現(xiàn)不良輸血事件[6]。由此可見，重視基層血站血液樣本篩查檢驗(yàn)工作非常關(guān)鍵。

患者在輸血治療期間，血液質(zhì)量安全作為確保臨床治療效果的前提條件，而血液安全問(wèn)題，在基層血站工作中最為重要。對(duì)血液樣本進(jìn)行安全篩查，作為確保血液安全性的有效方法，也是臨床預(yù)防血液傳播傳染病疾病的有效手段。當(dāng)前，在臨床血液篩查過(guò)程中，利用酶免檢驗(yàn)和核酸檢驗(yàn)方式。其中，酶免檢驗(yàn)主要以抗體、抗原檢測(cè)為主，但是病毒抗體和抗原容易出現(xiàn)蛋白結(jié)構(gòu)變異，導(dǎo)致病毒在窗口期容易對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)影響，從而出現(xiàn)誤檢、漏檢的問(wèn)題[7,8]。病毒窗口期主要針對(duì)被病毒感染到此種病毒可能被某一種檢驗(yàn)方式篩查、檢出的一段時(shí)間，且處于窗口期的病毒難以被及時(shí)檢出，且存在傳染性。然而，核酸檢驗(yàn)的靈敏度與特異性都比較高，在血液樣本檢驗(yàn)過(guò)程中，即使樣本含有少許病毒核酸，也能及時(shí)被檢出，使免疫檢測(cè)中的病毒窗口期進(jìn)一步縮短。根據(jù)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，核酸檢測(cè)能夠使乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、艾滋病毒的平均感染窗口期縮短，且核酸檢測(cè)能進(jìn)一步避免病毒變異、隱性感染情況等，有效解決臨床誤檢、漏檢的問(wèn)題[9]。

為了提高血液樣本篩查的有效性，合理運(yùn)用先進(jìn)的全自動(dòng)酶免分析儀器、自動(dòng)核酸純化儀器，展開酶免檢測(cè)與核酸檢測(cè)，一般情況下，采取血清學(xué)與核酸順序檢測(cè)模式進(jìn)行檢測(cè)，如若酶免檢驗(yàn)結(jié)果呈陽(yáng)性，直接判定為不合格，將酶免檢測(cè)為合格的標(biāo)本再進(jìn)行核酸檢測(cè)，檢測(cè)為有反應(yīng)的判為不合格。如若遇到特殊標(biāo)本，例如機(jī)采獻(xiàn)血樣本或者因血庫(kù)血液庫(kù)存量比較少的情況下，則采取血清學(xué)與核酸并行檢測(cè)模式，將血液標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行酶免檢測(cè)與核酸檢測(cè)，酶免檢測(cè)和核酸檢測(cè)均陰性的或無(wú)反應(yīng)的判為合格。本次研究結(jié)果顯示：①分析2020年～2022年酶免檢測(cè)結(jié)果，在2020年，乙型肝炎陽(yáng)性病毒檢出率最高達(dá)到0.37%，梅毒病毒陽(yáng)性檢出率0.33%次之；在2021年，乙型肝炎病毒陽(yáng)性率最高達(dá)到0.40%，梅毒病毒陽(yáng)性率0.14%次之；在2022年，乙型肝炎病毒陽(yáng)性率達(dá)到0.33%，梅毒病毒陽(yáng)性檢出率0.11%次之。②2020 年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)51 例，陽(yáng)性率0.21%；2021年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)33例，陽(yáng)性率0.13%，人類免疫缺陷病毒陽(yáng)性數(shù)1例，陽(yáng)性率0.004%；2022年共檢測(cè)出乙型肝炎陽(yáng)性數(shù)42例，陽(yáng)性率0.16%。由此可見，在基層血站血液樣本檢測(cè)過(guò)程中，借助全自動(dòng)酶免分析設(shè)備、自動(dòng)核酸純化設(shè)備，展開酶免檢測(cè)后，對(duì)特殊血液樣本進(jìn)行核酸檢測(cè)，能夠及時(shí)檢出假陰性樣本，提高血液檢驗(yàn)的有效性，保障臨床輸血安全可靠。然而，出現(xiàn)假陽(yáng)性樣本的原因主要包括以下幾點(diǎn)：①實(shí)驗(yàn)室操作者沒(méi)有根據(jù)試劑要求和儀器要求實(shí)施檢驗(yàn)，促使血液樣本檢驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性；②血液樣本在運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室中儲(chǔ)存不當(dāng)，核酸物質(zhì)由于儲(chǔ)存環(huán)境溫度比較高、運(yùn)輸時(shí)間比較長(zhǎng)等外界因素影響而出現(xiàn)分解現(xiàn)象[10]；③血液樣本在抽取過(guò)程中，病毒濃度比較低，難以及時(shí)判定；④在血液樣本留存確認(rèn)環(huán)節(jié)中，因病毒顆粒處于血漿內(nèi)的泊松分布，使病毒濃度分布不均勻，留取樣本病毒濃度比較低，無(wú)法及時(shí)檢出。

綜上所述，血液檢驗(yàn)容易受諸多因素的干擾，導(dǎo)致血液檢驗(yàn)容易存在誤檢、漏檢的可能性。然而，借助先進(jìn)的全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)、自動(dòng)核酸純化系統(tǒng)，做好酶免檢驗(yàn)與核酸檢驗(yàn)工作，能夠使病毒窗口期縮短，提高陽(yáng)性檢出率，為臨床用血與治療干預(yù)提供可靠的輸血保障。為此，各個(gè)基層血站建議推廣全自動(dòng)酶免分析系統(tǒng)、自動(dòng)核酸純化系統(tǒng)的臨床應(yīng)用，在檢測(cè)過(guò)程中規(guī)范操作標(biāo)準(zhǔn)，才能確保基層血站血液質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)。