王學(xué)之，楊 虹

（上海市東方醫(yī)院吉安醫(yī)院檢驗(yàn)科，上海 343000）

缺血性腦卒中又被稱為腦梗死，是由腦動脈阻塞所致的腦部供血障礙，腦局部因缺氧、缺血發(fā)生組織壞死，繼而表現(xiàn)出的神經(jīng)功能缺損癥狀[1]。缺血性腦卒中作為臨床較為常見的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，好發(fā)于中老年人群，且具有起病急、預(yù)后差等特點(diǎn)，同時也是導(dǎo)致老年人群致殘和死亡的重要危險因素[2]。急性缺血性腦卒中（acute ischemic stroke，AIS）作為腦卒中疾病的主要類型，占60%～80%，發(fā)病密度為246.8/10萬，病死率達(dá)114.8/10萬，因而盡早確診并給予相應(yīng)的治療對優(yōu)化患者臨床療效、改善患者預(yù)后等方面具有重要意義[3-4]?，F(xiàn)階段針對AIS疾病的診斷流程包括癥狀分析、影像學(xué)檢查及神經(jīng)心理學(xué)評分等，但上述方案存在一定滯后性，無法為臨床治療提供及時信息，故尋找一種簡單、有效的診斷方法尤為重要[5]。近年來隨著對AIS的研究發(fā)現(xiàn)，AIS的發(fā)生與進(jìn)展受多種因素影響，且有關(guān)炎癥反應(yīng)與缺血性腦血管相關(guān)疾病的關(guān)系逐漸受到重視。因此，血清炎癥因子可能對AIS發(fā)生與預(yù)后評估具有一定臨床價值[6]。血清淀粉樣蛋白（SAA）可有效反映體內(nèi)炎癥狀況，與炎癥誘導(dǎo)有關(guān)，同時也參與了AIS的病理過程。脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2）與炎癥反應(yīng)相關(guān)，且受體內(nèi)炎癥介質(zhì)調(diào)節(jié)，其可通過參與炎癥反應(yīng)和血小板激活等機(jī)制參與AIS的病理過程；而腫瘤壞死因子-α（TNF-α）則屬于一種常用的炎癥因子，其在AIS發(fā)病、病變進(jìn)展等方面發(fā)揮了重要作用[7]?；诖耍狙芯客ㄟ^檢測血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平，探討其與AIS嚴(yán)重程度之間的關(guān)系，以期為AIS疾病的發(fā)生與進(jìn)展評估提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020年5月至2022年7月上海市東方醫(yī)院吉安醫(yī)院收治的114例AIS患者為觀察組，另同期選擇35例健康體檢者為健康對照組進(jìn)行回顧性分析。觀察組研究對象中男72例，女42例；年齡60～85歲，平均年齡（71.54±6.97）歲。對照組研究對象中男20例，女15例；年齡62～87歲，平均年齡（72.31±7.36）歲。兩組研究對象的一般資料對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。觀察組患者按照美國國立衛(wèi)生研究院卒中量表（NIHSS）評分分為輕度組44例，中度組38例，重度組32例。輕度組年齡53～80歲，平均年齡（72.65±7.15）歲；中度組年齡52～78歲，平均年齡（70.8±6.61）歲；重度組年齡51～79歲，平均年齡（71.17±6.25）歲。三組患者一般資料對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究已獲得上海市東方醫(yī)院吉安醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。診斷標(biāo)準(zhǔn)：AIS患者均符合《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》[8]，并通過影像學(xué)檢測確診。納入標(biāo)準(zhǔn)：①觀察組符合診斷標(biāo)準(zhǔn)；②對照組通過CT、磁共振等影像學(xué)檢測證實(shí)為健康體檢者；③年齡≥18周歲，且臨床資料齊全者；④AIS患者均為首次發(fā)病且發(fā)病時間＜24 h者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①腦出血、急性腦外傷、顱內(nèi)感染以及腦死亡者；②伴有惡性腫瘤、血液疾病及免疫系統(tǒng)疾病者；③近1個月內(nèi)行手術(shù)、溶栓及抗凝等藥物治療者；④伴有精神類疾病者。

1.2 檢測方法 采集所有受試者（AIS患者、健康體檢者）入院或體檢當(dāng)天的4 mL靜脈血，以3 500 r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行10 min離心后取上清液，并將其置于-20 ℃的冰箱中待用。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平，使用多功能酶標(biāo)儀（山東方科儀器有限公司，型號：FK-SY96S）檢測，配套試劑盒，檢測嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo) ①對比觀察組和對照組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α指標(biāo)表達(dá)水平。②對比輕度、中度及重度神經(jīng)功能障礙組患者血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α指標(biāo)表達(dá)水平。③采用多因素Logistic回歸分析篩選影響AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的危險因素。④采用Pearson相關(guān)性分析血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α指標(biāo)水平與AIS患者NIHSS評分的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以()表示，采用t檢驗(yàn)，組間采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson法進(jìn)行相關(guān)性分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較 觀察組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平顯著高于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表1。

表1 兩組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較（）

表1 兩組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較（）

SAA：淀粉樣蛋白；Lp-PLA2：脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；TNF-α：腫瘤壞死因子-α。

組別例數(shù)SAA（mg/L）Lp-PLA2（μg/L）TNF-α（μg/L）觀察組11419.64±7.54255.73±54.8518.56±6.43對照組35 1.92±0.87206.48±56.62 5.74±1.49 t值13.8434.61211.674 P值＜0.001＜0.000＜0.000

2.2 不同神經(jīng)功能障礙組間的血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較 重度組患者的血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α高于中度組、輕度組，且中度組高于輕度組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表2。

表2 不同神經(jīng)功能障礙組間的血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較（）

表2 不同神經(jīng)功能障礙組間的血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平比較（）

SAA：淀粉樣蛋白；Lp-PLA2：脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2；TNF-α：腫瘤壞死因子-α。

組別例數(shù)SAA（mg/L）Lp-PLA2（μg/L）TNF-α（μg/L）輕度組4417.54±7.64215.44±21.35 8.71±2.51中度組38 24.34±10.83240.53±26.6013.36±6.12重度組32 33.82±13.38267.36±33.5420.67±9.35 F值21.97934.54833.729 P值＜0.001＜0.001＜0.001

2.3 影響AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的多因素Logistic回歸分析 以AIS患者NISS評分為（輕中度=“0”，重度=“1”）因變量，將血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平（“原值帶入”）作為自變量，進(jìn)行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示：血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α高水平是影響AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的危險因素，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05），見表3。

表3 影響AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的多因素Logistic回歸分析

2.4 AIS患者血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平與NIHSS評分的相關(guān)性分析 相關(guān)性結(jié)果顯示，AIS患者血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平與NIHSS評分呈正相關(guān)（r=0.567，P＜0.001；r=0.468，P＜0.001；r=0.487，P＜0.001），見圖1～圖3。

圖1 血清SAA與NIHSS評分的相關(guān)性

圖2 血清Lp-PLA2與NIHSS評分的相關(guān)性

圖3 血清TNF-α與NIHSS評分的相關(guān)性

3 討論

據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)[9]顯示，全球范圍內(nèi)腦血管疾病對健康的危害排名居于第2位。AIS作為臨床常見且多發(fā)的腦血管疾病類型之一，現(xiàn)已逐漸成為威脅人們健康的公共衛(wèi)生問題。既往研究[10]表明，AIS的發(fā)生與糖尿病、冠心病、高血壓、高血脂等基礎(chǔ)疾病及長期抽煙、酗酒等不良生活習(xí)慣密切相關(guān)，且其患病率隨年齡增加呈逐年上升趨勢。因而有效控制上述危險因素對AIS的預(yù)防也具有重要意義?，F(xiàn)階段臨床針對AIS的診斷多通過影像學(xué)檢查進(jìn)行判定。近年來生物標(biāo)志物檢測在AIS中的診斷及預(yù)后評估中具有較好的臨床應(yīng)用價值，且這個新興和快速發(fā)展的領(lǐng)域已成為腦血管疾病領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。而隨著對AIS病理機(jī)制的深入研究，越來越多的學(xué)者發(fā)現(xiàn)，炎性細(xì)胞因子在AIS的發(fā)生、進(jìn)展中發(fā)揮了重要作用。同時也有研究[11]發(fā)現(xiàn)，AIS發(fā)病早期，患者機(jī)體將進(jìn)入應(yīng)激狀態(tài)，體內(nèi)炎癥應(yīng)激指標(biāo)釋放IL-6、TNF-α等炎癥因子并刺激肝臟細(xì)胞合成和釋放SAA。也有相關(guān)研究[12]認(rèn)為，炎癥因子在AIS中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷中發(fā)揮重要作用并與AIS患者神經(jīng)功能缺損相關(guān)，亦可進(jìn)一步加劇腦組織損傷狀態(tài)。因此，通過尋找炎性細(xì)胞因子可能對AIS疾病的診斷、預(yù)后評估等方面帶來較大的臨床價值。

本研究結(jié)果顯示，觀察組研究對象血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平與健康對照組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而重度組AIS患者血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平高于中度組與輕度組，提示血清SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平在AIS患者中可反應(yīng)其病情嚴(yán)重程度。相關(guān)研究[13]報道，AIS發(fā)病期間機(jī)體可過度釋放SAA進(jìn)入血液，SAA含量與AIS患者頸動脈斑塊面積大小密切相關(guān)。當(dāng)肝臟受到炎性反應(yīng)刺激時可釋放SAA，繼而影響體內(nèi)巨噬細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞，并可直接參與AIS疾病的發(fā)生與進(jìn)展。此外，SAA載體蛋白為高密度蛋白，其可影響機(jī)體自由基的清除能力，促使膽固醇升高，加速斑塊形成，加重患者病情嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示，觀察組SAA水平高于健康對照組，SAA水平升高是AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的危險因素，且與AIS患者NHISS評分呈正相關(guān)（r=0.567，P=0.000）。而SAA水平升高可加重炎癥反應(yīng)，影響免疫調(diào)節(jié)，繼而導(dǎo)致病情加重。這提示AIS疾病的發(fā)生、進(jìn)展與SAA水平異常升高密切相關(guān)，且隨著AIS患者病情加重，SAA水平逐漸升高，因而檢測AIS患者血清SAA水平有助于判斷患者預(yù)后及轉(zhuǎn)歸。Lp-PLA2是臨床備受關(guān)注的炎性細(xì)胞因子之一，因其參與了低密度脂蛋白膽固醇氧化修飾、誘導(dǎo)單核細(xì)胞向巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化，促進(jìn)動脈粥樣斑塊形成，加速斑塊增大、提高斑塊不穩(wěn)定性，同時脫落以及破裂的動脈粥樣斑塊可誘發(fā)AIS。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組Lp-PLA2水平高于對照組，同時重度組Lp-PLA2水平高于中度組和輕度組，Lp-PLA2水平升高是AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的危險因素，且相關(guān)性結(jié)果顯示，AIS患者Lp-PLA2水平與其NIHSS評分呈正相關(guān)（r=0.468，P＜0.001），與既往研究報道[14]相符。這提示臨床可通過檢測AIS患者Lp-PLA2水平用于輔助AIS疾病的診斷和治療。Lp-PLA2異常升高可能提示患者存在心血管風(fēng)險因素，而這些因素均會導(dǎo)致血管壁發(fā)生損傷和炎癥反應(yīng)，促使血管內(nèi)膜損傷和病變增加，繼而導(dǎo)致AIS患者病情加重。TNF-α主要是由T細(xì)胞、B細(xì)胞以及單核-巨噬細(xì)胞分泌的一種具有多生物學(xué)活性的細(xì)胞因子；在健康人體中TNF-α多為低表達(dá)，當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)炎癥時TNF-α水平隨著增高。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AIS患者血清TNF-α水平高于健康對照組，AIS重度組TNF-α水平高于輕、中度組，TNF-α水平升高是AIS患者發(fā)生重度神經(jīng)功能障礙的危險因素，且本研究相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，AIS患者血清TNF-α水平與NIHSS評分呈正相關(guān)（r=0.487，P＜0.001）。這提示TNF-α表達(dá)于不同嚴(yán)重程度的AIS患者血清存在差異，其可作為診斷及評估AIS疾病的可靠指標(biāo)。TNF-α異常升高可能會激活炎癥介質(zhì)、釋放自由基等，導(dǎo)致神經(jīng)組織損傷越來越嚴(yán)重，同時也會對神經(jīng)內(nèi)皮的黏附、分裂和分化產(chǎn)生影響，并可能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，導(dǎo)致血管功能變差、血栓形成等，加重患者病情。但本研究為回顧性、單中心研究，結(jié)果可能存在一定偏倚，因而，相關(guān)研究結(jié)論仍需進(jìn)行更多研究的加以驗(yàn)證。

綜上所述，AIS患者外周血SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平與其NIHSS評分呈正相關(guān)，SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平異常升高則提示AIS發(fā)生及進(jìn)展的概率越大。后續(xù)在對AIS患者的診治過程中可通過SAA、Lp-PLA2、TNF-α水平變化情況對AIS進(jìn)行評估。