doi：10.3969/j.issn.1000-4440.2024.05.017

收稿日期：2024-01-30

基金項(xiàng)目：國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2022YFD2200400）

作者簡(jiǎn)介：呂夢(mèng)煬（1998-），女，河北秦皇島人，碩士研究生，研究方向?yàn)楣麡湓耘嘤N。（Tel）18232394008;（E-mail）892415636@qq.com

通訊作者：王東升，（Tel）13603235351;（E-mail）wdsgfly@126.com

摘要：" 分析尾梢去除處理對(duì)基部芽激素含量的影響，可為了解隱芽萌發(fā)條件提供一定的參考。本研究以燕秋為試驗(yàn)材料，分別在花后第1 d（TA，5月25日）、第21 d（TB，6月14日）和第41 d（TC，7月4日）進(jìn)行尾梢去除處理，并在每次去除尾梢后第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取1次基部芽。采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）技術(shù)測(cè)定不同處理的板栗結(jié)果枝基部芽中的獨(dú)腳金內(nèi)酯（SL）含量、赤霉素（GA）含量、生長(zhǎng)素（Auxin）含量、細(xì)胞分裂素（CTK）含量、脫落酸（ABA）含量及其比值變化。結(jié)果表明，對(duì)板栗結(jié)果枝去除尾梢后均促進(jìn)了基部芽平均萌發(fā)一年生枝條總數(shù)；TA 處理提高了基部芽平均萌發(fā)一年生結(jié)果枝占比（16.67%）、一年生枝平均發(fā)育枝枝長(zhǎng)及結(jié)果枝枝粗；TB處理、TC處理后基部芽只萌發(fā)出了發(fā)育枝。對(duì)照基部芽未萌發(fā)，僅頂端芽萌發(fā)一年生枝，平均為3.0個(gè)，其中結(jié)果枝占比為20.00%。尾梢去除后SL含量在TA處理下降幅度較大；GA含量在TB處理下降幅度較大；Auxin含量在TA處理下降，TB處理上升幅度較大；CTK含量波動(dòng)幅度與對(duì)照相似，差異不顯著；ABA含量在TC處理上升幅度較大，而在TA處理下降。吲哚-3-乙酸（IAA）含量與ABA含量的比值總體下降，其中TC處理下降幅度較大；IAA含量與GA含量的比值在TC處理上升幅度較大，波動(dòng)較明顯；ABA含量與GA含量的比值在TA處理下降，TC處理上升幅度較大。此外，相關(guān)性分析結(jié)果顯示，對(duì)照基部芽赤霉素含量和脫落酸含量呈顯著正相關(guān)（r=0.646），而處理基部芽29種激素間相關(guān)性主要集中在細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素之間，其中IA（吲哚-3-丙烯酸）含量與IAA-Ala、ICA（吲哚-3-甲酸）、TRA（色胺）、cZROG（順式-玉米核苷-O-糖苷）、ABA-GE（脫落酸葡萄糖酯）、DHZ7G（雙氫玉米素-7-糖苷）、ICAld（吲哚-3-甲醛）、tZOG（反式-玉米素-9-B-葡萄糖苷）的含量呈極顯著正相關(guān)；IPR（異戊烯腺嘌呤核苷）含量、tZR（玉米素核苷）含量均與TRA含量、ILA（吲哚-3-乳酸）含量、cZROG（順式-玉米核苷-O-糖苷）含量呈極顯著負(fù)相關(guān)。綜合考慮，對(duì)板栗進(jìn)行尾梢去除后會(huì)促進(jìn)基部芽的萌發(fā)，同時(shí)TA處理會(huì)促使基部腋芽萌發(fā)結(jié)果枝。尾梢去除后整體上降低了GA的含量，低水平的GA含量有助于促進(jìn)腋芽生長(zhǎng)。低水平的ABA含量有助于基部芽萌發(fā)結(jié)果枝；高水平ABA含量與GA含量的比值會(huì)抑制腋芽萌發(fā)結(jié)果枝。合理區(qū)間內(nèi)的低水平IAA含量，可能會(huì)促進(jìn)板栗基部芽萌發(fā)結(jié)果枝。

關(guān)鍵詞：" 板栗；尾梢處理；基部芽；液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)；激素

中圖分類號(hào)：" S664.2""" 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：" A""" 文章編號(hào)：" 1000-4440（2024）05-0922-13

Effects of tail tip removal treatments on the content of hormones in the basal buds of chestnut fruiting branches

LYU Mengyang1，2，3，" MA Yate1，2，3，" XIAO Lijing1，2，3，" ZHANG Hai’e2，4，" QI Yongshun1，2，3，4，" ZHANG Jingzheng2，4，" WANG Dongsheng2，4，5

（1.College of Horticultural Science and Technology， Hebei Normal University of Science and Technology， Qinhuangdao 066004， China;2.Engineering Research Center of Chestnut Industry Technology， Ministry of Education， Hebei Normal University of Science and Technology， Qinhuangdao 066004， China;3.Hebei Key Laboratory of Horticultural Germplasm Excavation and Innovative Utilization， Qinhuangdao 066004， China;4.Hebei Collaborative Innovation Center of Chestnut Industry， Qinhuangdao 066004， China;5.Hebei Yanshan Characteristic Agricultural Technology Research Institute， Qinhuangdao 066004， China）

Abstract：" Analyzing the effects of tail tip removal treatments on the content of hormones in basal buds can provide a certain reference for understanding the germination conditions of hidden buds. In this study， Yanqiu was used as the experimental material. Tail tip removal treatments were performed on the first day （TA， May 25）， 21st day （TB， June 14） and 41st day （TC， July 4） after flowering. The basal buds were taken on the 5th， 10th， 15th， and 20th days after each removal of the tail tip. The contents and ratios of strigolactone （SL）， gibberellin （GA）， auxin， cytokinin （CTK） and abscisic acid （ABA） in the basal buds of chestnut fruiting branches after different treatments were determined by liquid chromatography tandem mass spectrometry （LC-MS/MS）. The results showed that the average number of one-year-old branches germinated from the basal buds was promoted after the removal of tail tip of chestnut fruiting branches. TA treatment increased the ratio of fruiting branches （16.67%）， branch length of developing branches and the diameter of fruiting branches. After TB treatment and TC treatment， only developing branches germinated from the basal buds. The basal buds of the control did not germinate， and only the top buds germinated one-year-old branches， with an average of three branches， and the ratio of fruiting branches was 20.00%. The SL content decreased greatly in TA treatment. The content of GA decreased greatly in TB treatment. The content of auxin decreased in TA treatment， and increased greatly in TB treatment. The fluctuation range of CTK content was similar to that of the control， and the difference was not significant. The ABA content increased greatly in TC treatment， but decreased in TA treatment. The ratio of indole-3-acetic acid （IAA） content to ABA content decreased overall， and it decreased greatly in TC treatment. The ratio of IAA content to GA content increased greatly in TC treatment， and the fluctuation was obvious. The ratio of ABA content to GA content decreased in TA treatment， and increased significantly in TC treatment. In addition， correlation analysis showed that there was a significant positive correlation between gibberellin content and abscisic acid content in the control （r=0.646）. The correlation between 29 hormones in the treatments was mainly concentrated between cytokinin and auxin. Among them， the content of IA （3-indoleacrylic acid） was significantly positively correlated with the contents of IAA-Ala ， ICA （indole-3-carboxylic acid）， TRA （tryptamine）， cZROG （cis-zeatin O-glucoside riboside）， ABA-GE （abscisic acid-glucosyl ester）， DHZ7G （dihydrozeatin-7-glucoside）， ICAld （indole-3-carboxaldehyde）， tZOG （trans-zeatin-O-glucoside）. The IPR （N6-isopentenyladenosine） content and tZR （trans-zeatin riboside） content were significantly negatively correlated with TRA content， ILA （indole-3-lactic acid） content and cZROG （cis-zeatin-O-glucoside riboside） content. In summary， the removal of tail tip of the chestnut could promote the germination of the basal buds， and the TA treatment could promote the germination of the fruiting branches from the basal axillary buds. After the removal of the tail tip， the content of GA decreased as a whole， and the low level of GA was helpful to promote the growth of axillary buds. The low level of ABA content was helpful for the germination of fruiting branches from basal buds. High levels of the ratio of ABA content to GA content could inhibit the germination of fruiting branches from axillary buds. The low level of IAA content in a reasonable range may promote the germination of chestnut fruiting branches from basal buds.

Key words：" chestnut;tail tip treatment;basal bud;liquid chromatography tandem mass spectrometry;hormone

板栗（Castanea mollissima Bl.）為殼斗科栗屬植物。結(jié)果枝頂芽下2～3節(jié)位置為板栗的結(jié)果部位，結(jié)果部位著生于葉腋間。尾梢是指從結(jié)果部位到枝頂端的部分（也稱之為果前梢），其上著生混合花芽和葉芽，結(jié)果枝基部為隱芽，中間部位沒有芽體。一般而言，尾梢上的芽第2年會(huì)萌發(fā)成新的結(jié)果枝或者發(fā)育枝，而基部芽保持休眠狀態(tài)不萌發(fā)。自然狀態(tài)下，板栗結(jié)果部位不斷外移，最后造成樹體外圍樹枝彼此相接，整個(gè)栗園密不透風(fēng)，郁閉嚴(yán)重。生產(chǎn)上，栗農(nóng)大多利用修剪措施來促進(jìn)基部芽的萌發(fā)，從而改善樹形結(jié)構(gòu)，提高板栗的產(chǎn)量和品質(zhì)。

前人的研究中，改善樹形結(jié)構(gòu)，冬剪措施較為普遍。張樹航等和高春國(guó)在對(duì)板栗進(jìn)行輪替更新試驗(yàn)時(shí)發(fā)現(xiàn)在板栗結(jié)果枝基部2～3 cm處進(jìn)行修剪，基部芽第2年可抽生預(yù)備枝，具有增產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的作用。夏季進(jìn)行板栗尾梢去除，具有提前節(jié)約樹體營(yíng)養(yǎng)和降低冬剪勞動(dòng)強(qiáng)度等優(yōu)勢(shì)。目前，生產(chǎn)上板栗去除尾梢等夏剪措施相對(duì)還較少。在其他果樹中夏剪上常用的摘心處理與尾梢去除處理相類似，對(duì)促進(jìn)分枝起重要作用。蘋果樹上常常采用摘心處理來提高坐果率，促進(jìn)腋芽萌發(fā)，增加分枝。與傳統(tǒng)修剪技術(shù)相比，種植密集的茶園幼樹經(jīng)摘心修剪可形成良好的生長(zhǎng)勢(shì)。

諸多研究結(jié)果表明，基部腋芽的萌發(fā)及分化與芽?jī)?nèi)激素的種類及含量密切相關(guān)。參與腋芽生長(zhǎng)調(diào)控的主要激素有赤霉素（GA）、脫落酸（ABA）和吲哚-3-乙酸（IAA）。生長(zhǎng)素（Auxin）作為最早被研究證實(shí)參與植物腋芽發(fā)育的植物激素，一般對(duì)植物側(cè)枝萌發(fā)起抑制作用。Wang等在模擬擬南芥和番茄營(yíng)養(yǎng)發(fā)育過程中生長(zhǎng)素的作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，在腋生分生組織（Ams）形成的腋芽區(qū)域生長(zhǎng)素含量較低，促進(jìn)了側(cè)枝的萌發(fā)。對(duì)麻風(fēng)樹進(jìn)行GA處理后，能夠顯著促進(jìn)其側(cè)芽的生長(zhǎng)，起正向調(diào)節(jié)作用，而在對(duì)擬南芥的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，ABA對(duì)其腋芽生長(zhǎng)起負(fù)向調(diào)控作用。獨(dú)腳金內(nèi)酯（SL）調(diào)控植物側(cè)枝發(fā)育也是近年來研究熱點(diǎn)之一，其對(duì)植物側(cè)枝的抑制作用在豌豆、擬南芥中已被證實(shí)。Tantikanjana等發(fā)現(xiàn)細(xì)胞分裂素對(duì)植物分枝的控制可能是通過降低起始部位細(xì)胞分裂素水平來抑制擬南芥腋生分生組織生長(zhǎng)。

在板栗上，對(duì)激素的研究多集中于花芽分化上。程華等研究發(fā)現(xiàn)低含量的ABA有利于打破板栗花芽休眠，促進(jìn)花簇原基的分化。李從玉等在板栗雄花芽臨界分化期內(nèi)發(fā)現(xiàn)，雄花芽中赤霉素3（GA3）含量低于同期葉芽含量，表明低含量的GA3可促進(jìn)板栗雄花芽分化。郭成圓等研究發(fā)現(xiàn)，在整個(gè)板栗雛梢分化過程中，GA3含量在冬前和冬后花序原基分化期處于較高水平，表明GA3與板栗花性別分化密切相關(guān)，同時(shí)較高含量的GA3有利于板栗花序原基的分化；研究還發(fā)現(xiàn)內(nèi)源激素GA3含量和玉米素核苷含量間的平衡關(guān)系在板栗雛梢分化的過程中起著重要的調(diào)控作用。

目前，前人關(guān)于修剪措施對(duì)基部芽中激素含量的影響的研究也多應(yīng)用在其他果樹上，板栗上的激素研究多集中在促進(jìn)花芽分化上，且多集中于ABA和GA等激素，對(duì)使用尾梢去除影響基部芽中各類激素含量的變化鮮有報(bào)道。本研究擬在不同時(shí)期對(duì)板栗進(jìn)行尾梢去除處理，探究去除尾梢對(duì)結(jié)果枝基部芽激素含量變化的影響。利用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）技術(shù)對(duì)獨(dú)腳金內(nèi)酯（SL）、赤霉素（GA）、生長(zhǎng)素（Auxin）、細(xì)胞分裂素（CTK）、脫落酸（ABA）5類激素含量進(jìn)行測(cè)定，分析它們對(duì)結(jié)果枝基部芽中激素含量的影響，以期為了解隱芽萌發(fā)條件、尾梢去除時(shí)機(jī)選擇提供一定的參考和借鑒。

1" 材料與方法

1.1" 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)地位于河北科技師范學(xué)院校試驗(yàn)基地（E119°52′，N39°93′），屬暖溫帶半濕潤(rùn)大陸性季風(fēng)氣候，年平均氣溫11.8 ℃，年平均降水527 mm。供試樣品為燕秋。選取64株長(zhǎng)勢(shì)一致的板栗樹，其中60株用于激素含量測(cè)定，4株用于一年生枝萌發(fā)狀況測(cè)定。

本試驗(yàn)共分3次進(jìn)行尾梢去除處理，即在結(jié)果枝最頂端雌花出現(xiàn)后第1 d（5月25日，TA）、第21 d（6月14日，TB）、第41 d（7月4日，TC）去除尾梢，以不去尾梢為對(duì)照（CK）。選擇樹冠中層?xùn)|南西北4個(gè)方位，在雌花上部1～2 cm處剪去尾梢。測(cè)定基部芽的激素含量時(shí)，每個(gè)處理選取15棵樹，每次去除100根枝條尾梢。TA處理、TB處理、TC處理后分別在第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取1次基部芽，每次3個(gè)重復(fù)；CK與TA處理、TB處理、TC處理取芽時(shí)間一致，共取12次，同時(shí)將CK劃分為CKA、CKB、CKC（表1）。取芽時(shí)用鑷子小心夾取，用錫箔紙包好，做好標(biāo)記，隨后置于液氮中冷凍，然后轉(zhuǎn)入-80 ℃超低溫冰箱中儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

測(cè)定一年生枝萌發(fā)狀況時(shí)，每個(gè)處理選取1棵樹，在樹冠中部處理15根枝條，第2年6月份測(cè)定各處理枝條基部芽萌發(fā)一年生枝類型及個(gè)數(shù)，落葉后測(cè)定各一年生枝長(zhǎng)度及枝粗。隨機(jī)選取每株樹的5個(gè)枝條，重復(fù)3次，測(cè)定枝長(zhǎng)和枝粗。枝長(zhǎng)用卷尺測(cè)量，精確到0.10 cm；枝粗在距離一年生枝基部3 cm處用游標(biāo)卡尺測(cè)量，精確到0.01 mm。

1.2" 儀器與試劑

試驗(yàn)儀器：液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（QTRAP 6500+型）購(gòu)自AB-SCIEX公司；離心機(jī)（5424R型）購(gòu)自Eppendorf公司；球磨儀（MM400型）購(gòu)自Retsch公司；離心濃縮儀（Centrivap型）購(gòu)自LABCONCO公司；多管渦旋振蕩器（MIX-200型）購(gòu)自上海凈信實(shí)業(yè)發(fā)展有限公司；超聲清洗儀（KQ5200E型）購(gòu)自昆山舒美超聲儀器有限公司。

甲醇、乙腈（色譜純）購(gòu)自Merck公司，乙酸、甲酸（色譜純）購(gòu)自Sigma-Aldrich公司。

1.3" 試驗(yàn)方法

1.3.1" 樣本前處理" 取出超低溫保存的板栗芽樣本，用研磨儀研磨1 min至粉末狀。稱取50 mg板栗芽粉末，分別加入10 μl質(zhì)量濃度為100 ng/ml的內(nèi)標(biāo)混合溶液、1 ml提取劑（甲醇∶水∶甲酸=15∶4∶1，體積比）混勻，隨后于4 ℃用多管渦旋振蕩器渦旋10 min，再以12 000 r/min離心5 min，取全部上清液至新的離心管中進(jìn)行濃縮；濃縮后用100 μl 80%的甲醇溶液復(fù)溶，過0.22 μm濾膜后，置于進(jìn)樣瓶中，用于液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)分析。

TA、TB、TC分別代表雌花序出現(xiàn)第1 d、第21 d、第41 d時(shí)去除尾梢；CKA、CKB、CKC為TA、TB、TC的對(duì)照。TA1～TA4為TA處理中去除尾梢后第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取芽處理；TB1～TB4為TB處理中去尾梢后第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取芽處理；TC1～TC4為TC處理中去尾梢后第5 d、第10 d、第15 d、第20 d取芽處理；CKA1～CKA4、CKB1～CKB4、CKC1～CKC4分別為TA1～TA4、TB1～TB4、TC1～TC4的對(duì)照。

1.3.2" 色譜質(zhì)譜條件采集" 液相條件：色譜柱，ACQUITY UPLC HSS T3 C18柱（粒徑1.8 μm，100.0 mm×2.1 mm）。流動(dòng)相：A相，超純水（加入0.04%的乙酸）；B相，乙腈（加入0.04%乙酸）；流速：0.35 ml/min；柱溫：40 ℃ ；進(jìn)樣量：2 μl。

質(zhì)譜條件：電噴霧離子源溫度 550 ℃，正離子模式下質(zhì)譜電壓5 500 V，負(fù)離子模式下質(zhì)譜電壓-4 500 V。

1.4" 數(shù)據(jù)處理

使用Excel 2021分析數(shù)據(jù)并繪制獨(dú)腳金內(nèi)酯、赤霉素、生長(zhǎng)素、脫落酸和細(xì)胞分裂素等激素含量占比柱狀圖；使用DPS進(jìn)行顯著性差異分析，通過Duncan’s法進(jìn)行P＜0.05水平下單因素多重比較分析；用SPSS對(duì)5類激素進(jìn)行相關(guān)性分析，通過R語(yǔ)言繪制29種激素含量相關(guān)性熱圖。

2" 結(jié)果與分析

2.1" 激素標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將混合標(biāo)準(zhǔn)品溶液用超純水逐級(jí)稀釋配制成0.01 ng/ml、0.05 ng/ml、0.10 ng/ml、0.50 ng/ml、1.00 ng/ml、5.00 ng/ml、10.00 ng/ml、50.00 ng/ml、100.00 ng/ml、200.00 ng/ml、500.00 ng/ml共11個(gè)不同含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，過0.22 μl濾膜，依次進(jìn)樣10.00 μl，獲取各個(gè)含量的標(biāo)準(zhǔn)品溶液對(duì)應(yīng)的定量信號(hào)質(zhì)譜峰強(qiáng)度數(shù)據(jù)，以外標(biāo)含量與內(nèi)標(biāo)含量比為橫坐標(biāo)，外標(biāo)峰面積與內(nèi)標(biāo)峰面積比為縱坐標(biāo)，繪制激素含量的標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中相關(guān)系數(shù)均高于0.990 00（表2）。

2.2" 尾梢去除處理對(duì)基部芽萌發(fā)的影響

進(jìn)行尾梢去除處理后，處理部位及基部芽萌發(fā)狀態(tài)如圖1所示。對(duì)板栗結(jié)果枝進(jìn)行尾梢去除處理后均促進(jìn)了基部芽平均萌發(fā)一年生枝條總數(shù)（表3），數(shù)值介于1.20～2.20。TB處理和TC處理基部芽平均萌發(fā)的一年生枝全部為發(fā)育枝，發(fā)育枝占比（發(fā)育枝占比=一年生發(fā)育枝個(gè)數(shù)/一年生枝條總數(shù)×100%）為100.00%。TA處理平均萌發(fā)一年生發(fā)育枝占比為83.33%，結(jié)果枝占比（結(jié)果枝占比=一年生結(jié)果枝個(gè)數(shù)/一年生枝條總數(shù)×100%）為16.67%。對(duì)照頂端芽萌發(fā)，萌發(fā)的發(fā)育枝占比為80.00%，結(jié)果枝占比為20.00%。TA處理提高了一年生枝平均發(fā)育枝枝長(zhǎng)和一年生枝平均結(jié)果枝枝粗。

2.3" 尾梢去除處理后不同取芽時(shí)期基部芽激素含量分析

由5類激素含量測(cè)定結(jié)果（表4、表5）可知，CKA1的獨(dú)腳金內(nèi)酯含量最高，為12.77 ng/g，顯著高于相同取芽時(shí)期其他處理；TB3處理最低，為3.57 ng/g，顯著低于相同取芽時(shí)期TA3和TC3 2個(gè)處理。TA處理、TB處理獨(dú)腳金內(nèi)酯含量均呈下降趨勢(shì)，顯著低于TC處理，其中TA處理下降幅度較大，為42.21%；TC處理則迅速上升，升高106.53%。CKA下降趨勢(shì)較大，為58.48%，CKC則升高了73.81%，顯著高于CKA、CKB。處理與對(duì)照整體上變化趨勢(shì)較一致。

CKC4的赤霉素含量顯著高于相同取芽時(shí)期其他處理，TB3處理的赤霉素含量最低。整體上看，去除尾梢后赤霉素含量的變化趨勢(shì)均為降低。處理中赤霉素含量變化趨勢(shì)最大為TB處理。對(duì)照中CKC的赤霉素含量變化趨勢(shì)最大，為29.29%。

保留時(shí)間為被分離樣品組分從進(jìn)樣開始到柱后出現(xiàn)該組分含量極大值時(shí)的時(shí)間。

CKA1的生長(zhǎng)素含量最高，顯著高于相同取芽時(shí)期其他處理；TB2處理生長(zhǎng)素含量最低，且各處理含量為1 081.25～3 387.96 ng/g。TA處理生長(zhǎng)素含量下降了33.89%，TB處理、TC處理生長(zhǎng)素含量呈上升趨勢(shì)，其中TB處理上升幅度較大，為20.70%，顯著高于TA處理。CKA、CKB生長(zhǎng)素含量呈下降趨勢(shì)，其中CKA下降了55.84%，顯著低于其他2個(gè)對(duì)照；而CKC上升了36.54%。整體上，TA處理、CKA和CKB生長(zhǎng)素含量呈下降趨勢(shì)；TB、TC和CKC生長(zhǎng)素含量呈上升趨勢(shì)。

CKC4細(xì)胞分裂素含量最高，CKC1最低；TA處理、TC處理細(xì)胞分裂素含量呈上升趨勢(shì)，TB呈下降趨勢(shì)，其中TC處理上升幅度較大，顯著高于TB處理。CKA、CKC細(xì)胞分裂素含量呈上升趨勢(shì)變化，CKB細(xì)胞分裂素含量呈下降趨勢(shì)，CKC細(xì)胞分裂素含量變化幅度顯著高于其余2個(gè)對(duì)照，變化幅度較大。整體上，處理與對(duì)照細(xì)胞分裂素含量變化趨勢(shì)一致，差異不顯著。

TC4處理脫落酸含量最高；TB1處理脫落酸含量最低。TA處理脫落酸含量下降，TB處理、TC處理上升，TC處理脫落酸含量上升幅度較大，為64.60%，但與其余2個(gè)處理相比無(wú)顯著差異。CKA、CKC脫落酸含量上升，CKB下降，其中CKC上升幅度較大，顯著高于其余2個(gè)對(duì)照。

由5類激素含量比值及其變化（表6、表7）可知，CKA1的IAAc/ABAc（吲哚-3-乙酸含量與脫落酸含量的比值）最高，TB2處理最低。處理和對(duì)照的IAAc/ABAc變化趨勢(shì)均為降低，但處理之間IAAc/ABAc變化趨勢(shì)差異不顯著；CKA的IAAc/ABAc變化趨勢(shì)則顯著低于CKB。

TA2處理IAAc/GAc（吲哚-3-乙酸含量與赤霉素含量的比值）最高，TB1最低。TA處理IAAc/GAc呈下降趨勢(shì)，TB處理、TC處理上升。其中TA處理IAAc/GAc變化趨勢(shì)顯著低于其他2個(gè)處理，TC處理上升幅度較大，為67.40%。CKA、CKB IAAc/GAc呈下降趨勢(shì)，CKC上升，但三者之間變化趨勢(shì)差異不顯著。

CKA1的ABAc/GAc（脫落酸含量與赤霉素含量的比值）最低，TC4處理最高。TA處理呈下降趨勢(shì)，TB和TC處理則迅速上升，變化幅度顯著高于TA處理，其中TC處理上升幅度較大，為112.10%。對(duì)照呈上升趨勢(shì)，但變化趨勢(shì)之間差異不顯著。整體上， TA處理降低了ABAc/GAc，TB和TC處理與對(duì)照則提高了ABAc/GAc，其中TB、TC處理后ABAc/GAc變化趨勢(shì)顯著高于TA處理。

2 285.72±190.56a各處理見表1。同一列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示同一種激素同一取芽時(shí)期不同處理間差異顯著（P＜0.05）。

變化趨勢(shì)為正數(shù)表示上升，負(fù)數(shù)表示下降；同一列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示同一種激素不同處理間差異顯著（P＜0.05）；" TA、TB、TC、CKA、CKB、CKC見表1。

對(duì)不同時(shí)期去除尾梢后的基部芽激素含量進(jìn)行檢測(cè)，共檢測(cè)出5類30種激素，其中獨(dú)腳金內(nèi)酯類1種，赤霉素類2種，生長(zhǎng)素類13種，細(xì)胞分裂素類12種，脫落酸類2種（圖2～圖6）。獨(dú)腳金內(nèi)酯僅檢測(cè)到5DS（5-脫氧獨(dú)腳金醇）（圖2），CKA1獨(dú)腳金內(nèi)酯含量最高，顯著高于相同取芽時(shí)期其他處理；TB3最低。各處理中共檢測(cè)到GA53（赤霉素53）和GA19（赤霉素19）2種赤霉素（圖3），其中GA19是主要激素類型，其含量在各時(shí)期占比均最高。此外，在TC4中僅測(cè)到GA19，未檢測(cè)到GA53。雖然各處理中檢測(cè)到13種生長(zhǎng)素（圖4），但I(xiàn)BA（吲哚-3-丁酸）含量?jī)H在CKA1和TA1中被檢測(cè)到，含量值為68.62～103.35 ng/g；IAA-Phe-Me（吲哚乙酸-苯丙氨酸甲酯）除在CKA1、CKA2、CKA3、CKA4、 CKB1、CKB2、CKB3、CKC2、CKC3、TA1、TA2、TA3、TA4、TC4未檢測(cè)到外，其余處理均檢測(cè)到；IA（吲哚-3-丙烯酸）則在CKA1、CKA2、CKA3、TA1、TA2、TA3中未檢測(cè)到。相較于其他幾類生長(zhǎng)素，TRP（L-色氨酸）含量最高（圖4，圖中TRP含量縮小1/100倍展示）。除TRP外，IAA-Ala和TRA（色胺）含量次之。各處理中共檢測(cè)出12種細(xì)胞分裂素（圖5），含量占據(jù)前三的分別為tZOG（反式-玉米素-9-B-葡萄糖苷）、tZR（玉米素核苷）和2MeScZR（2-甲硫基順式玉米素核苷）。共檢測(cè)到aba（脫落酸）和ABA-GE（脫落酸葡萄糖酯）2種脫落酸（圖6），其中ABA-GE在各個(gè)時(shí)期占比均最大，TC4處理的ABA-GE含量最大。

2.4" 尾梢去除處理后基部芽激素含量間的相關(guān)性分析

對(duì)不同取芽時(shí)期對(duì)照與處理的板栗基部芽中5類激素含量進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果（表8）表明，對(duì)照中赤霉素含量和脫落酸含量表現(xiàn)出較強(qiáng)的相關(guān)性（r=0.646），呈顯著正相關(guān)。對(duì)29種激素進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果（圖7）發(fā)現(xiàn)，進(jìn)行尾梢處理后各激素含量間相關(guān)性主要集中在細(xì)胞分裂素含量和生長(zhǎng)素含量之間；其中IA含量與IAA-Ala、ICA（吲哚-3-甲酸）、TRA、cZROG（順式-玉米核苷-O-糖苷）、ABA-GE、DHZ7G（雙氫玉米素-7-糖苷）、ICAld（吲哚-3-甲醛）、tZOG（反式-玉米素-9-B-葡萄糖苷）的含量之間極顯著正相關(guān)。IPR（異戊烯腺嘌呤核苷）含量、tZR（玉米素核苷）含量均與TRA含量、ILA含量、cZROG含量呈極顯著負(fù)相關(guān)；對(duì)照間相關(guān)性主要集中在生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素和脫落酸之間。IA含量與ABA-GE、IAA-Ala、ICA、tZOG、cZROG、DHZ7G的含量之間呈極顯著正相關(guān)；IA含量和IPR含量、aba含量呈極顯著負(fù)相關(guān)；aba含量和tZOG含量、cZROG含量呈顯著負(fù)相關(guān)。

CKC40.83±0.02cd196.04±18.58c187.10±42.51c各處理見表1。同一列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示同一種激素同一取芽時(shí)期不同處理間差異顯著（P＜0.05）；IAAc/ABAc：吲哚-3-乙酸含量與脫落酸含量的比值；IAAc/GAc：吲哚-3-乙酸含量與赤霉素含量的比值；ABAc/GAc：脫落酸含量與赤霉素含量的比值。

變化趨勢(shì)為正數(shù)表示上升，負(fù)數(shù)表示下降；同一列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示同一種激素同一取芽時(shí)期不同處理間差異顯著（P＜0.05）；IAAc/ABAc：吲哚-3-乙酸含量與脫落酸含量的比值；IAAc/GAc：吲哚-3-乙酸含量與赤霉素含量的比值；ABAc/GAc：脫落酸含量與赤霉素含量的比值。TA、TB、TC、CKA、CKB、CKC見表1。

3" 討論

植物激素是指對(duì)植物的生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生顯著調(diào)節(jié)作用的微量有機(jī)物質(zhì)。分生組織的形成是腋芽發(fā)育的開始，分生組織分化形成側(cè)芽原基，側(cè)芽原基進(jìn)一步分化形成側(cè)芽進(jìn)而發(fā)育成側(cè)枝，分枝是決定產(chǎn)量的關(guān)鍵因素之一。研究發(fā)現(xiàn)植物腋芽發(fā)育和最終分枝的形成受多種內(nèi)外因素共同調(diào)控，其中植物激素在調(diào)控植物分枝發(fā)育和花芽分化過程中起關(guān)鍵作用。

板栗尾梢去除是在最頂端距離雌花1～2 cm處剪去尾梢，因此只有在雌花萌發(fā)后，才能確定尾梢部位。根據(jù)前人的研究結(jié)果，在河北秦皇島地區(qū)，5月30日為板栗的子房形成期，6月4日為雌花盛開期，6月9日為雄蕊原基形成期，6月14日-6月19日為雛梢分化始期，6月24日-7月4日為雄花序原基出現(xiàn)期，7月9日-7月19日為雄花序原基分化盛期，7月24日為冬前雛梢分化期。從5月到7月是芽分化的重要時(shí)期，激素變動(dòng)劇烈，本研究選擇5月25日、6月14日、7月4日這3個(gè)時(shí)期去除尾梢，有利于檢測(cè)去除時(shí)期與基部芽萌發(fā)間的特殊聯(lián)系。

SL作為近年來推出的新型植物激素，對(duì)植物側(cè)芽萌發(fā)起負(fù)向調(diào)控作用。范吳蔚等研究發(fā)現(xiàn)SL抑制了煙草腋芽的生長(zhǎng)。同時(shí)在水稻、擬南芥和豌豆中也確定其具有抑制植物分枝和腋芽生長(zhǎng)的作用。本研究發(fā)現(xiàn)TA處理SL含量下降趨勢(shì)較大。處理與對(duì)照相比SL含量變化趨勢(shì)差異不顯著，說明去除尾梢處理對(duì)SL含量變化影響不大。

GA作為調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵激素，許多研究結(jié)果表明其對(duì)腋芽萌發(fā)生長(zhǎng)起著負(fù)向調(diào)控作用。Luisi等在對(duì)豌豆頂端優(yōu)勢(shì)的研究中發(fā)現(xiàn)，赤霉素對(duì)側(cè)芽生長(zhǎng)起到了抑制作用。本研究中，對(duì)板栗去除尾梢后基部芽中GA含量呈降低趨勢(shì)，其中TB處理GA含量下降幅度較大。結(jié)合去除尾梢均能促進(jìn)基部芽萌發(fā)側(cè)枝的結(jié)果，推測(cè)低水平GA有利于腋芽的萌發(fā)。

Auxin作為最早被發(fā)現(xiàn)的植物激素，作用具體表現(xiàn)為引起頂端優(yōu)勢(shì)，抑制側(cè)芽生長(zhǎng)。許多研究結(jié)果表明低水平的IAA有助于促進(jìn)腋芽萌發(fā)。在本研究中，TA處理基部芽中生長(zhǎng)素含量降低，而TB處理和TC處理則提高了其含量。TA處理生長(zhǎng)素含量變化趨勢(shì)顯著低于TB處理、TC處理，結(jié)合處理與對(duì)照生長(zhǎng)素含量變化以及萌發(fā)一年生枝情況可發(fā)現(xiàn)，合理區(qū)間中低水平的IAA含量可能會(huì)促進(jìn)基部芽萌發(fā)結(jié)果枝。

許多研究發(fā)現(xiàn)，ABA對(duì)植物的腋芽和側(cè)枝生長(zhǎng)的發(fā)育起著重要的負(fù)調(diào)控作用，高含量的ABA會(huì)抑制側(cè)芽萌發(fā)、阻礙分枝生長(zhǎng)，這在對(duì)玉米、擬南芥等物種的研究中得到了驗(yàn)證。本研究發(fā)現(xiàn)，TB處理、TC處理提高了ABA的含量，TA處理降低了ABA的含量。結(jié)合TA處理提高了萌發(fā)結(jié)果枝占比的結(jié)果，表明低水平的ABA有利于結(jié)果枝的萌發(fā)。

內(nèi)源激素的平衡對(duì)植物側(cè)枝的生長(zhǎng)發(fā)育也起著關(guān)鍵作用。不同激素間的相互協(xié)作對(duì)植物生長(zhǎng)有促進(jìn)或拮抗作用。Geuns等對(duì)煙草進(jìn)行打頂試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)，腋芽中的ABA含量下降，可能是IAA與ABA相互作用調(diào)控側(cè)芽發(fā)育。Cline等評(píng)估脫落酸與生長(zhǎng)素對(duì)頂端優(yōu)勢(shì)的相互作用時(shí)發(fā)現(xiàn)，ABA受生長(zhǎng)素的誘導(dǎo)從而調(diào)控側(cè)芽生長(zhǎng)。本研究發(fā)現(xiàn)，處理與對(duì)照IAAc/ABAc變化趨勢(shì)相似，差異不顯著，說明IAAc/ABAc值可能在去除尾梢后對(duì)板栗腋芽萌發(fā)的作用不明顯。

前人的研究結(jié)果表明，平衡ABA含量和GA含量的比值可調(diào)控種子的休眠或萌發(fā)。較高的GA3含量與ABA含量的比值可解除茶樹的休眠，促進(jìn)茶樹提早萌發(fā)；在對(duì)食用玫瑰滇紅進(jìn)行去頂試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)腋芽的長(zhǎng)度和GA含量與ABA含量的比值正相關(guān)，說明較高的GA含量與ABA含量的比值有利于玫瑰的腋芽萌發(fā)。本研究發(fā)現(xiàn)， TA處理降低了ABAc/GAc，TB處理、TC處理與對(duì)照則提高了ABAc/GAc，其中TB處理、TC處理后ABAc/GAc變化趨勢(shì)顯著高于TA處理和CKB、CKC。結(jié)合TB處理、TC處理未萌發(fā)結(jié)果枝，推測(cè)高水平ABAc/GAc會(huì)抑制腋芽萌發(fā)結(jié)果枝。

本研究的目的是通過對(duì)板栗進(jìn)行尾梢去除，打破芽體休眠，為掌握基部芽萌發(fā)的條件提供一定的參考和借鑒。本研究結(jié)果表明，去除尾梢后均促進(jìn)了基部芽萌發(fā)一年生枝條總數(shù)。尾梢去除可降低結(jié)果枝基部芽中GA含量，低水平的GA有利于促進(jìn)腋芽的生長(zhǎng)。TA處理提高了基部芽平均萌發(fā)一年生結(jié)果枝占比，低水平的ABA有利于促進(jìn)結(jié)果枝的萌發(fā)。TB處理、TC處理未萌發(fā)結(jié)果枝，高水平ABAc/GAc會(huì)抑制腋芽萌發(fā)結(jié)果枝。合理區(qū)間內(nèi)低水平的IAA有利于腋芽萌發(fā)結(jié)果枝。綜合考慮，對(duì)板栗進(jìn)行尾梢去除后會(huì)促進(jìn)基部芽的萌發(fā)，TA處理會(huì)促使基部芽萌發(fā)結(jié)果枝。

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（責(zé)任編輯：陳海霞）