張志明， 陳玉潔， 余秋凡， 管紅霞， 肖 勇， 張 琦

（無錫市疾病預(yù)防控制中心，江蘇 無錫 214023）

0 引言

自2019年新型冠狀病毒出現(xiàn)以來，疫情時有反復(fù)，不斷出現(xiàn)新型毒株，嚴(yán)重影響社會的正常秩序和人民生活，全球化增加大規(guī)模疫情暴發(fā)的不確定性，生物安全問題需要所有人予以重視。2021年4月15日，《中華人民共和國生物安全法》正式開始實施，其中明確規(guī)定進(jìn)行感染性微生物操作或檢測等中高風(fēng)險活動的實驗室需要依法進(jìn)行生物安全實驗室備案，生物安全上升到國家戰(zhàn)略層面，社會各層面也積極推動完善生物安全工作。病原微生物實驗室的生物安全備案工作是保證感染性微生物相關(guān)的檢驗、生產(chǎn)活動合法合規(guī)的重中之重。通過備案能夠有效提升生物實驗室的基礎(chǔ)建設(shè)、管理水平和安全意識，強(qiáng)化主管部門的督查監(jiān)管作用。本文對無錫市2021年生物安全備案情況進(jìn)行階段性總結(jié)，分析梳理備案過程中發(fā)現(xiàn)的常見問題，分析生物安全實驗室備案的下一步工作重點，為準(zhǔn)備申請備案的單位提供借鑒。

1 對象與方法

1.1 對象

2021年無錫市轄區(qū)范圍內(nèi)申請病原微生物實驗室生物安全備案的單位。

1.2 方法

（1）評審人員。備案工作由無錫市生物安全委員會組織開展，評審專家為長期工作于三級醫(yī)療機(jī)構(gòu)和市疾病控制中心的實驗室生物安全領(lǐng)域的專家，且經(jīng)過培訓(xùn)統(tǒng)一審查標(biāo)準(zhǔn)，保證了評審的一致性。

（2）評審標(biāo)準(zhǔn)?，F(xiàn)場評審標(biāo)準(zhǔn)征求生物安全委員會專家意見，依據(jù)《實驗室生物安全通用要求》（GB 19489—2008）及《病原微生物實驗室生物安全通用準(zhǔn)則》（WS 233—2017）制定，包含硬件設(shè)施、運(yùn)行管理和生物安全管理體系等內(nèi)容。具體評估內(nèi)容包括建筑設(shè)計設(shè)施裝飾（分區(qū)、標(biāo)識、空間大小、門禁、門窗、送排風(fēng)、氣流通風(fēng)、給水排水、配電、照明、通信、墻壁、地面、實驗臺、櫥柜）、設(shè)備器材（消毒、廢棄物處置、應(yīng)急設(shè)施、消防安全）和組織管理（人員機(jī)構(gòu)、體系文件）。

（3）統(tǒng)計分析。使用Excel分析現(xiàn)場評審情況。

2 評審統(tǒng)計分析

2.1 申報備案機(jī)構(gòu)基本情況

2021年無錫市共有40 家單位申請病原微生物實驗室備案，均為初次備案申請，實驗室的生物安全防護(hù)水平均為二級（BSL-2），包括醫(yī)療機(jī)構(gòu)29 家，企業(yè)11家。其中醫(yī)療機(jī)構(gòu)又包括6 個類別，分別是：綜合醫(yī)院、?？漆t(yī)院、社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心、核酸檢測基地、疾病控制中心、療養(yǎng)院，具體數(shù)量分布見表1。3 家綜合醫(yī)院和4 家?？漆t(yī)院均為二級醫(yī)院，40 家單位中有19家進(jìn)行了新冠核酸檢測工作的備案。

表1 病原微生物實驗室備案申報單位類別組成

無錫市生物安全備案活動已經(jīng)開展多年，主要的醫(yī)療機(jī)構(gòu)已經(jīng)完成備案，總體備案工作穩(wěn)步進(jìn)行，備案情況見表2（數(shù)據(jù)截至2021年12月31日）。因此，2021年申請備案的主要群體為相關(guān)企業(yè)、二級醫(yī)療機(jī)構(gòu)、社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心、核酸檢測基地。

表2 全市醫(yī)療衛(wèi)生機(jī)構(gòu)病原微生物實驗室備案情況

2.2 現(xiàn)場評審情況

通過專家現(xiàn)場評審，對于硬件設(shè)施、運(yùn)行管理和生物安全管理體系的具體方面進(jìn)行檢查，發(fā)現(xiàn)不合規(guī)范較多的審查項目主要集中在分區(qū)布局、路線標(biāo)識、門禁系統(tǒng)、儀器設(shè)備、廢棄物處置、消防設(shè)施、應(yīng)急設(shè)備、氣流負(fù)壓、生物安全制度建設(shè)和人員培訓(xùn)，每個審查項目不符合規(guī)范單位的數(shù)量見表3。

表3 實驗室現(xiàn)場評審不符合項情況分析

2.2.1 硬件設(shè)施

分區(qū)布局不規(guī)范的有11 家，其中?？漆t(yī)院4 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心2 家，核酸檢測基地5 家；主要常見問題有采樣區(qū)與檢驗區(qū)未分開、生活區(qū)與工作區(qū)未分開、物流人流與樣本運(yùn)輸通道未分開、缺少清潔區(qū)；核酸檢測基地缺少輔助用房，接受樣品區(qū)大小與檢測能力不匹配，傳遞窗太小。門禁系統(tǒng)不符合規(guī)范的有17家，其中企業(yè)3 家，療養(yǎng)院1 家，?？漆t(yī)院2 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心6 家，核酸檢測基地5 家；主要問題有未設(shè)立門禁系統(tǒng)、不同分區(qū)緩沖間的門無互鎖功能、缺少自動閉門系統(tǒng)。儀器設(shè)備存在問題有17 家，其中包括?？漆t(yī)院2 家，綜合醫(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心2 家，核酸檢測基地10 家；主要問題有生物安全柜和高壓滅菌鍋安裝后未校驗、缺少儀器標(biāo)準(zhǔn)使用流程和使用記錄臺賬、核酸檢測基地收樣區(qū)域缺少生物安全柜、高壓滅菌鍋無法滿足檢測需要。氣流和負(fù)壓方面有2 家實驗室存在問題，均為企業(yè)，主要問題為負(fù)壓實驗室未進(jìn)行壓力校驗或儀器運(yùn)行后不滿足負(fù)壓條件。

2.2.2 運(yùn)行管理

醫(yī)療廢棄物處理共有7 家單位不符合規(guī)范，其中企業(yè)4 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心2 家，檢測基地1 家；主要問題有消毒滅菌記錄不完整、沒有消毒效果指示帶、缺少消毒效果生物監(jiān)測記錄、缺少紫外消毒設(shè)備。消防設(shè)施存在問題的有13 家，其中企業(yè)2 家，疾控中心1 家，?？漆t(yī)院1 家，綜合醫(yī)院1 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心3 家，核酸檢測基地5 家；主要問題有缺少滅火器、滅火器類型不是適用于精密儀器的CO2滅火器。緊急撤離路線或生物危害標(biāo)識不符合規(guī)范的有29 家，其中企業(yè)6 家，?？漆t(yī)院3 家，綜合醫(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心7 家，核酸檢測基地8 家，疾控中心和療養(yǎng)院各1 家；主要問題有缺少緊急撤離路線、緊急撤離路線設(shè)計不合理、缺少生物危害標(biāo)識、生物危害標(biāo)識未正確張貼。應(yīng)急措施有問題的有19 家，其中企業(yè)3 家，疾控1 家，?？漆t(yī)院2 家，綜合醫(yī)院1 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心5 家，檢測基地7 家；主要問題包括無洗眼裝置、缺少應(yīng)急照明、缺少急救箱。生物安全制度建設(shè)不規(guī)范的單位有21 家，其中企業(yè)6 家，療養(yǎng)院1 家，?？漆t(yī)院3 家，綜合醫(yī)院2 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心7 家，核酸檢測基地2 家；主要問題包括實驗室日常操作活動監(jiān)督制度不完善、生物安全風(fēng)險評估不完善、未設(shè)立生物安全委員會、生物安全主要負(fù)責(zé)人不明確、沒有制定應(yīng)急預(yù)案、無可行性高的安全手冊。人員培訓(xùn)存在問題的有12 家單位，其中企業(yè)5 家，療養(yǎng)院1 家，?？漆t(yī)院3 家，社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心1 家，核酸檢測基地2 家；主要問題包括缺少實驗室人員生物安全培訓(xùn)記錄、未進(jìn)行應(yīng)急預(yù)案演練、高壓滅菌鍋操作人員無上崗證。

3 提升生物安全實驗室備案水平的建議

隨著生物技術(shù)的發(fā)展和醫(yī)療機(jī)構(gòu)服務(wù)水平的不斷提升，病原微生物相關(guān)操作的風(fēng)險也有所增加。我國針對生物安全實驗室的立法建標(biāo)逐步完善，病原微生物實驗室備案管理必將是一個長期工作［1］。無錫市備案工作整體穩(wěn)步推進(jìn)，主要的醫(yī)療機(jī)構(gòu)已經(jīng)完成備案，2021年申請備案的單位除了常規(guī)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)及企業(yè)，還有很多核酸檢測基地，新冠肺炎疫情的反復(fù)造成了核酸檢測基地的集中備案。社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心、一二級醫(yī)療機(jī)構(gòu)、各類企業(yè)和其他未定級醫(yī)療機(jī)構(gòu)仍是接下來申報備案工作的重點對象。

生物安全實驗室備案工作應(yīng)該嚴(yán)格要求，嚴(yán)防不符合要求的實驗室通過備案，現(xiàn)場評審可以有效發(fā)現(xiàn)問題，提高備案管理質(zhì)量［2］。通過對現(xiàn)場評審結(jié)果分析，證實大部分申請備案的病原微生物實驗室符合備案基本要求，但是不符合規(guī)范方面也普遍存在。病原微生物實驗室建設(shè)存在問題是難以避免的，①由于建設(shè)單位缺乏相關(guān)經(jīng)驗，②實驗室建設(shè)過程缺少行業(yè)專家進(jìn)行指導(dǎo)。由于實驗室備案工作的專業(yè)技術(shù)性，病原微生物實驗室的籌建需要更加科學(xué)合理的規(guī)劃［3］，并且在投入使用前的評審階段需要相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜以u估，及時整改不合規(guī)范的地方。申請備案的實驗室通過專家現(xiàn)場評審并經(jīng)過一定時間的整改后，不符合項的有效整改率達(dá)到100%，才能達(dá)到備案要求。不同類型的醫(yī)療機(jī)構(gòu)存在的問題有很多共性，申請備案的相關(guān)責(zé)任人應(yīng)該予以重視，籌建規(guī)劃階段就應(yīng)當(dāng)充分考慮這些問題，同時主管部門也需要將出現(xiàn)問題較多的方面作為評審和督察的重點。評審中出現(xiàn)的問題可以歸納為硬件設(shè)施建設(shè)不完善和運(yùn)行管理機(jī)制不健全，下面進(jìn)行具體情況分析，并且提出相應(yīng)建議。

3.1 完善硬件設(shè)施建設(shè)

部分?？漆t(yī)院實驗室是由老舊的普通實驗室改建，缺乏整體規(guī)劃，因此存在布局分區(qū)不合理的問題，個別實驗室工作區(qū)和生活區(qū)、清潔區(qū)和污染區(qū)混亂，樣本運(yùn)輸通道沒有與人員通道分離，如果操作人員的安全意識不強(qiáng)，很容易引起污染，造成嚴(yán)重后果。門禁系統(tǒng)和儀器設(shè)備合格率較低，均為57.5%。所有的二級病原微生物實驗室均需要加裝門禁系統(tǒng)及自動閉門系統(tǒng)［4］，切實發(fā)揮其作用，嚴(yán)格管理實驗室出入人員，減少病原潛在的外溢風(fēng)險。關(guān)鍵儀器設(shè)備的定期校檢是整個實驗室安全運(yùn)轉(zhuǎn)的保障，特別是生物安全柜和高壓滅菌鍋，必須要保證工作過程能發(fā)揮有效作用，安裝完成后就需要有CNAS／CMA 認(rèn)證資質(zhì)的第3 方檢驗機(jī)構(gòu)進(jìn)行校檢，使用過程中也需要定期校檢［5］，使用單位應(yīng)當(dāng)制定好校檢計劃，由專人負(fù)責(zé)執(zhí)行。二級實驗室中負(fù)壓條件不是必需的，可以采用自然通風(fēng)，注意氣流的方向應(yīng)該由清潔區(qū)流向污染區(qū)。當(dāng)發(fā)生生物安全柜故障導(dǎo)致大量的污染因子外溢等事故時，機(jī)械通風(fēng)的安全性遠(yuǎn)高于自然通風(fēng)［6］，為了提高安全性，目前備案的大部分二級實驗室采用負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)。負(fù)壓實驗室通風(fēng)應(yīng)采用全新風(fēng)直流系統(tǒng)，使污染區(qū)到清潔區(qū)形成定向氣流，而不是循環(huán)空氣［7］，進(jìn)行壓力校準(zhǔn)，保證氣流穩(wěn)定。正確的負(fù)壓實驗室壓力校準(zhǔn)應(yīng)該提前開啟生物安全柜，待氣流穩(wěn)定后進(jìn)行壓力校準(zhǔn)，送風(fēng)口不能位于生物安全柜等排風(fēng)裝置的上方，避免形成縱向干擾和局部渦流。室內(nèi)相鄰相通的區(qū)域之間應(yīng)保持不小于-15 Pa的壓力梯度為宜［8］。2021年申請備案的核酸檢測基地建設(shè)時間通常較短，整體建設(shè)不夠完善，功能和布局存在一些問題。很大一部分檢測基地是移動式方艙改建，空間較小，噴灑消毒很不方便，執(zhí)行任務(wù)時標(biāo)本量大，人員密集，因此生物安全風(fēng)險較高［9］；缺少輔助性區(qū)域，如缺少存放試劑耗材的庫房、缺少處理醫(yī)療廢棄物的區(qū)域、樣品接收區(qū)域無法配備生物安全柜。對此，建議建設(shè)輔助用房來解決相關(guān)問題，同時注意輔助用房也要符合生物安全要求，有密封性，不可用簡易透風(fēng)的集裝箱板房。

3.2 健全運(yùn)行管理機(jī)制

要保證實驗室安全穩(wěn)定的運(yùn)行，除了可靠的儀器設(shè)備，還要落實運(yùn)行過程中的各方面安全措施。除了嚴(yán)格按照儀器操作規(guī)程進(jìn)行試驗，比較關(guān)鍵的就是醫(yī)療廢物處理，滅菌效果不好會導(dǎo)致感染事故發(fā)生［10］。

廢棄物處置不規(guī)范主要為各類企業(yè)，缺少完整的可溯源滅菌記錄，缺少滅菌效果指示帶，難以監(jiān)測滅菌效果。高壓滅菌鍋的操作有一定危險性，需要特種設(shè)備上崗證，且需要定期校檢安全閥和壓力表，以免發(fā)生事故［11］。消防設(shè)施和應(yīng)急設(shè)備是在緊急情況下必不可少，不同類型的機(jī)構(gòu)均有相關(guān)問題，除了個別未配備消防設(shè)備，其他常見問題就是滅火器是干粉或水基類型，這類滅火器使用后對于儀器設(shè)備具有不可逆損傷。應(yīng)急照明、急救箱、洗眼器等應(yīng)急裝置的配備需要備案單位查缺補(bǔ)漏，切實整改到位。

現(xiàn)場評審中出現(xiàn)問題比較集中的是路線標(biāo)識和生物安全管理體系建立，合格率分別為27. 5%和47.5%。緊急撤離路線和生物危害標(biāo)識是備案單位最容易忽略的問題，標(biāo)識系統(tǒng)能夠很好地完善生物安全管理體系，可一定程度避免生物安全事故的發(fā)生，標(biāo)識系統(tǒng)應(yīng)具備規(guī)范化、人性化、簡潔化的特點［12］。除了張貼相應(yīng)的標(biāo)識，也要加強(qiáng)相關(guān)培訓(xùn)，提高實驗室工作人員的安全意識，確保從業(yè)人員對各種標(biāo)識有正確的認(rèn)識，做好相應(yīng)的防護(hù)措施。生物管理體系的建立，不同類型機(jī)構(gòu)之間存在較大差異，基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)和企業(yè)相對薄弱，主要原因可能是相關(guān)經(jīng)驗太少以及缺少這方面專門的負(fù)責(zé)人，生物安全管理體系文件應(yīng)當(dāng)包括管理手冊、程序文件和作業(yè)指導(dǎo)書（包括質(zhì)量記錄）［13］，編寫單位應(yīng)當(dāng)仔細(xì)學(xué)習(xí)生物安全相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)及技術(shù)規(guī)范，做好管理體系自查工作［14］，詢問生物安全委員會的意見建議，確保建立完整的生物安全管理體系。管理制度建設(shè)還需要完善風(fēng)險評估、應(yīng)急預(yù)案、人員培訓(xùn)；引起病原微生物實驗室生物安全事故的一個重要因素就是管理因素［15］，應(yīng)避免生物實驗室的風(fēng)險，進(jìn)一步完善實驗室建設(shè)和生物安全管理體系，將風(fēng)險降到最低。

4 結(jié)語

通過病原微生物實驗室的備案管理，可以有效減少生物安全方面的潛在風(fēng)險，有助于提高實驗室建設(shè)的質(zhì)量。本文重點分析了現(xiàn)場評審過程中發(fā)現(xiàn)的問題，從硬件設(shè)施建設(shè)和運(yùn)行管理機(jī)制兩大方面總結(jié)了實驗室備案過程各個環(huán)節(jié)存在的常見問題，對于需要進(jìn)行備案的單位具有借鑒意義。然而，病原微生物實驗室的備案過程也要結(jié)合各單位自身的實際情況，針對現(xiàn)有的設(shè)施設(shè)備進(jìn)行改建改造，必須做到安全、高效。

病原微生物實驗室的管理涉及很多方面，申請單位應(yīng)當(dāng)對照相關(guān)要求和規(guī)定完善各方面的建設(shè)，主管部門進(jìn)行備案管理時也應(yīng)全面具體。對于需要備案而未完成備案的實驗室，由于不具備條件而沒有申請備案，這對于生物安全管理是一個巨大隱患，也是將來的工作重點和難點，需要不斷改進(jìn)完善，應(yīng)對好這方面的挑戰(zhàn)。