【摘要】目的 探討乳腺癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）的表達(dá)與臨床病理特征及預(yù)后轉(zhuǎn)歸的關(guān)系。方法 選取2018年6月至2020年12月北京市房山區(qū)第一醫(yī)院收治的76例乳腺癌患者為乳腺癌組，另選取同期北京市房山區(qū)第一醫(yī)院收治的76例良性乳腺病變患者為良性乳腺病變組進(jìn)行回顧性分析。比較兩組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況。分析乳腺癌患者M(jìn)MP-1、MMP-2陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系。根據(jù)生存狀況將乳腺癌組患者分為死亡組（28例）和存活組（48例），比較兩組患者乳腺組織MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況。結(jié)果 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)率高于良性乳腺病變組（Plt;0.05）。乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經(jīng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體（ER）陽性患者的MMP-1陽性表達(dá)占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經(jīng)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性患者（Plt;0.05）。乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經(jīng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陽性患者的MMP-2陽性表達(dá)占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經(jīng)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性患者（Plt;0.05）。死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)占比高于存活組（Plt;0.05）。結(jié)論 乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在異常高表達(dá)，且參與了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移等過程，與患者預(yù)后轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】乳腺癌；基質(zhì)金屬蛋白酶-1；基質(zhì)金屬蛋白酶-2；臨床病理特征；預(yù)后轉(zhuǎn)歸

【中圖分類號】R737.9 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【文章編號】2096-2665.2023.15.0004.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2023.15.002

Analysis of the relationship between the expression of matrix metalloproteinase-1 and matrix metalloproteinase-2 in breast cancer tissues and clinicopathologic features， prognosis and outcome

WANG Weili， LIU Shufang

（Department of Pathology， The First Hospital of Fangshan District of Beijing， Beijing， 102400， China）

【Abstract】Objective To discuss the relationship between the expression of matrix metalloproteinase-1 （MMP-1） and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） and clinicopathologic features， prognosis and outcome in breast cancer tissues. Methods A total of 76 patients with breast cancer admitted to the First Hospital of Fangshan District of Beijing from June 2018 to December 2020 were selected as breast cancer group. Another 76 patients with benign breast lesions admitted to the First Hospital of Fangshan District of Beijing were selected as the benign breast lesions group. Retrospective analysis were conducted. The positive expression of MMP-1 and MMP-2 in breast tissues of the two groups was compared. The relationship between the expression of MMP-1 and MMP-2 and the clinicopathologic features of breast cancer patients were analyzed. In addition， all breast cancer patients were divided into the death group （28 cases） and the survival group （48 cases） according to the difference in survival status， and the differences in the expression of MMP-1 and MMP-2 between the two groups were analyzed. Results The expression rates of MMP-1 and MMP-2 in breast tissue of breast cancer group were higher than those of benign breast lesions group （ Plt;0.05）. The positive rate of MMP-1 expression in patients in clinical stage Ⅲ to Ⅳ， menopause， lymph node metastasis and estrogen receptor （ER） - positive breast cancer was higher than that in patients in clinical stage Ⅰ to Ⅱ， premenopause， no lymph node metastasis and ER- negative breast cancer （Plt;0.05）. The positive rate of MMP-2 expression in patients with clinical stage Ⅲ to Ⅳ， menopause， lymph node metastasis and ER-positive breast cancer was higher than that in patients with clinical stage Ⅰ to Ⅱ， premenopause， no lymph node metastasis and ER-negative breast cancer （Plt;0.05）. The positive rates of MMP-1 and MMP-2 expression in the death group were higher than those in the survival group （Plt;0.05）. Conclusion There are abnormally high expressions of MMP-1 and MMP-2 in breast cancer tissues， and they are involved in the occurrence， development， metastasis and other processes of breast cancer， which are closely related to the prognosis of patients.

【Keywords】Breast cancer; Matrix metalloproteinase-1; Matrix metalloproteinase-2; Clinicopathological features; Prognostic and outcome

乳腺癌屬于婦科臨床較為常見的一種生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，隨著人們生活方式的改變及精神壓力的與日俱增，該病發(fā)病率正呈逐年攀升趨勢，已成為嚴(yán)重威脅女性生命健康安全的重大疾病之一[1]。早期積極有效的診治對改善患者預(yù)后具有極其重要的意義，因此研究乳腺癌發(fā)生機(jī)制及其有關(guān)分子標(biāo)記物具有一定的現(xiàn)實(shí)意義[2-3]。基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）主要是通過降解細(xì)胞外基質(zhì)和基膜等途徑促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的遷移、侵襲[4]。其中基質(zhì)金屬蛋白酶-1（MMP-1）、基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）屬于MMP家族的重要成員，在腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移中有著至關(guān)重要的作用，有望成為評估乳腺癌疾病發(fā)生、發(fā)展的關(guān)鍵性生物學(xué)標(biāo)記物。鑒于此，本研究分析乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2表達(dá)的病理意義，以期為乳腺癌的防治提供新的靶點(diǎn)與思路，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月至2020年12月北京市房山區(qū)第一醫(yī)院收治的76例乳腺癌患者為乳腺癌組，另選取同期北京市房山區(qū)第一醫(yī)院收治的76例良性乳腺病變患者為良性乳腺病變組進(jìn)行回顧性分析。乳腺癌組患者年齡34～71歲，平均年齡（49.12±5.16）歲；BMI 19～24 kg/m²，平均BMI（21.34±1.32）kg/m²。良性乳腺病變組患者年齡37～72歲，平均年齡（49.74±5.26）歲；BMI為19～23 kg/m²，平均BMI（21.37±1.29）kg/m²。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。根據(jù)生存狀況將乳腺癌組患者分為死亡組（28例）和存活組（48例）。死亡組患者年齡34～70歲，平均年齡（49.17±4.99）歲；BMI 19～23 kg/m²，平均BMI（21.29±1.35）kg/m²。存活組患者年齡35～71歲，平均年齡（49.24±3.27）歲；BMI 20～24 kg/m²，平均BMI（21.34±1.28）kg/m²。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05），組間具有可比性。本研究經(jīng)北京市房山區(qū)第一醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①乳腺癌組患者符合《中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范（2017年版）》[5]中乳腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)，良性乳腺病變組患者符合《乳腺超聲檢查和診斷共識》[6]中良性乳腺病變的診斷標(biāo)準(zhǔn)，且兩組患者均經(jīng)病理檢查確診；②均為成年女性；③入組前均無放化療或手術(shù)等抗腫瘤治療史；④預(yù)計(jì)生存期gt;6個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴其他惡性腫瘤者；②合并自身免疫性疾病者；③精神障礙、無法自主溝通者。

1.2 研究方法 采集兩組患者乳腺組織，常規(guī)石蠟包埋切片處理，脫蠟后以3 mol/L磷酸緩沖液（PBS）（北京中杉金橋生物科技有限公司，規(guī)格：23.48 g/袋）清洗后置入10 g乙二胺四乙酸（EDTA）緩沖液（北京中杉金橋生物科技有限公司，規(guī)格：500 mL/瓶），放置在室溫條件下自然冷卻20 min。以兔血清（北京中杉金橋生物科技有限公司，規(guī)格：1 mL/瓶）室溫封閉切片，15 min后清除多余液體，分別滴加一抗MMP-1、MMP-2，置于4 ℃條件下孵育過夜。隨后以PBS沖洗，繼續(xù)滴加二抗，室溫條件下孵育20 min。PBS沖洗后滴加二氨基聯(lián)苯氨（DAB）（北京中杉金橋生物科技有限公司，規(guī)格：100 mL/瓶）顯色，用5 g蘇木精（武漢宏茲生物技術(shù)有限公司，規(guī)格：500 mL/瓶）復(fù)染，梯度乙醇及二甲苯（北京益利精細(xì)化學(xué)品有限公司，規(guī)格：500 mL/瓶）脫水透明，以中性樹膠封片，借助顯微鏡（OLYMPUS，型號：BX51）觀察切片，隨機(jī)選擇5個(gè)400倍鏡視野，觀察細(xì)胞染色情況及陽性細(xì)胞占比情況，以免疫組織化學(xué)法測定MMP-1、MMP-2及雌激素受體（ER）陽性表達(dá)，染色計(jì)分1～3分，陽性細(xì)胞占比計(jì)分1～5分。以兩者乘積為最終結(jié)果，gt;2分即陽性[7]。乳腺癌組患者的臨床分期參考《介紹乳腺癌TNM分期系統(tǒng)（第7版）》[8]。對兩組患者均開展為期2年的隨訪觀察，隨訪方式包括電話隨訪、來院復(fù)診及上門隨訪，隨訪頻率為3個(gè)月/次。根據(jù)觀察組患者2年內(nèi)的生存狀況分為死亡組（28例）和存活組（48例）。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較乳腺癌組患者與良性乳腺病變組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況。②分析乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系。③分析乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-2陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系。④比較死亡組患者與存活組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)數(shù)資料以[例（%）]表示，組間比較采用χ²檢驗(yàn)。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌組與良性乳腺病變組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況比較 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)率高于良性乳腺病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表1。

2.2 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系 乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經(jīng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陽性患者的MMP-1陽性表達(dá)占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經(jīng)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表2。

2.3 乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-2陽性表達(dá)與病理特征的關(guān)系 乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經(jīng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陽性患者的MMP-2陽性表達(dá)占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經(jīng)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表3。

2.4 死亡組與存活組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)情況比較 死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)占比高于存活組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05），見表4。

3 討論

乳腺癌主要是由多種致病因素共同作用導(dǎo)致，相關(guān)研究通過分析該病病因發(fā)現(xiàn)，生殖因素、遺傳易感因素及機(jī)體性激素水平等均與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)[9]，然而上述因素僅能解釋其中1/2的乳腺癌病例。有研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，MMP家族多個(gè)成員可通過多種途徑介導(dǎo)乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程，且有評估乳腺癌浸潤、轉(zhuǎn)移的潛在價(jià)值[10-11]。因此，本研究對乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2表達(dá)與臨床病理特征、預(yù)后轉(zhuǎn)歸的關(guān)系并予以分析。

本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)率高于良性乳腺病變組。這提示乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在異常高表達(dá)。分析原因，MMP-1、MMP-2均屬于MMP家族重要成員之一，可通過降解多種基質(zhì)物質(zhì)，進(jìn)而對細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜等造成一定的破壞，進(jìn)一步導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移，這在既往有關(guān)研究報(bào)道中得以佐證[12-13]。MMP-1屬于間質(zhì)膠原酶，可對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原產(chǎn)生降解作用，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移[14-15]。MMP-2屬于Ⅳ型膠原酶，可降解基底膜骨架成分，進(jìn)而為腫瘤細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移提供條件[16]。本研究結(jié)果還顯示，乳腺癌組臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、絕經(jīng)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陽性患者的MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)占比高于臨床分期Ⅰ～Ⅱ期、未絕經(jīng)、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER陰性患者。這表明MMP-1、MMP-2表達(dá)均會促進(jìn)乳腺癌患者病情的進(jìn)展及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[17]。另外，死亡組患者乳腺組織中MMP-1、MMP-2陽性表達(dá)占比高于存活組，反映了隨著MMP-1、MMP-2表達(dá)的升高，乳腺癌患者死亡風(fēng)險(xiǎn)增加?？紤]原因可能因上述兩項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)水平升高，患者病情加重，臨床治療難度增加，預(yù)后較差[18]。

綜上所述，乳腺癌組織中MMP-1、MMP-2存在高表達(dá)，介導(dǎo)了乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后轉(zhuǎn)歸。

參考文獻(xiàn)

[1]師金，梁迪，李道娟，等.全球女性乳腺癌流行情況研究[J].中國腫瘤， 2017， 26（9）： 683-690.

[2]張鵬，桑梅香，陳晗，等.人乳頭狀瘤病毒16型、18型感染患者P53和Rb蛋白表達(dá)與乳腺癌預(yù)后的關(guān)聯(lián)性分析[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2019， 18（21）： 2270-2273.

[3]孫勇，鹿彬，張鵬. miR-132和MMP-16在乳腺癌患者血清中的表達(dá)及臨床意義[J].河北醫(yī)藥， 2020， 42（2）： 196-199.

[4]薛蘭輝，胡海峰，王志尚，等.新輔助化療聯(lián)合改良根治術(shù)治療對乳腺癌患者預(yù)后及金屬蛋白酶組織抑制劑-1/2、基質(zhì)金屬蛋白酶-2/9的影響[J].實(shí)用醫(yī)院臨床雜志， 2021， 18（5）： 93-96.

[5]中國抗癌協(xié)會乳腺癌專業(yè)委員會.中國抗癌協(xié)會乳腺癌診治指南與規(guī)范（2017年版）[J].中國癌癥雜志， 2017， 27（9）： 695-759.

[6]中華醫(yī)學(xué)會超聲醫(yī)學(xué)分會.乳腺超聲檢查和診斷共識[J].中華放射學(xué)雜志， 2014， 48（9）： 718-722.

[7]中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會.原發(fā)性乳腺癌規(guī)范化診療指南（試行）[J/CD].中國醫(yī)學(xué)前沿雜志（電子版）， 2013， 5（5）： 30-37.

[8]薛衛(wèi)成.介紹乳腺癌TNM分期系統(tǒng)（第7版）[J].診斷病理學(xué)雜志， 2010， 17（4）： 241-244.

[9]朱偉，楊霜，崔立娟，等.乳腺癌組織KiSS-1、MMP-2表達(dá)水平與老年乳腺癌患者改良根治術(shù)預(yù)后的關(guān)系[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2022， 43（15）： 1869-1873， 1880.

[10]劉玉梅，張靜.三陰乳腺癌患者乳腺不同組織RECK、HIF-1α、MMP9蛋白表達(dá)水平變化及臨床意義分析[J].中國醫(yī)刊， 2020， 55（10）： 1104-1107.

[11]張振. 非特殊型浸潤性乳腺癌MMP11蛋白與臨床特征及預(yù)后的關(guān)系[J]. 遼寧醫(yī)學(xué)雜志， 2022， 36（1）： 10-13.

[12]鄭少秋， 黃榕權(quán)， 張雅潔. 基質(zhì)金屬蛋白酶2和9及血管內(nèi)皮生長因子C在乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用[J]. 中華病理學(xué)雜志， 2010， 39（4）：240-244.

[13]許子志，王川，許東興，等. 分化和DNA結(jié)合抑制因子1基因?qū)DA-MB-231乳腺癌細(xì)胞株MMP9表達(dá)的影響[J]. 中國實(shí)用醫(yī)藥， 2013， 8（19）： 1-2.

[14]楊文國.血清CA15-3、CA125聯(lián)合MMP-1和IL-10檢測在乳腺癌診斷和預(yù)后評估中的價(jià)值探討[J].標(biāo)記免疫分析與臨床， 2018， 25（8）： 1107-1113.

[15]王麗霞，毛俊，陶雅軍，等. 乳腺癌干細(xì)胞亞群中MMP-9和BRMS1的表達(dá)及其臨床病理意義[J]. 臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志， 2013， 29（5）： 472-47胡長軍，楊勇，王紅星，等. 乳腺癌中MMP-9、Her-2和nm23的表達(dá)及其臨床意義[J]. 醫(yī)學(xué)信息， 2013， 26（25）： 435-436.

[16]任甜甜，王巧真，周風(fēng)華，等. CREST與MMP-2、MMP-9在乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用及關(guān)系[J]. 中國老年學(xué)雜志， 2015， 35（23）： 6700-6702.

[17]艾斯卡爾·阿尤甫，古力米熱·布然江，歐江華. 乳腺癌組織中Twist、MMP-2和MMP-9的表達(dá)及意義[J]. 中國腫瘤臨床與康復(fù)， 2012， 19（3）： 193-195.