溫小惠，高曉玲，許小康，鄔向東

江西省部分地區(qū)近3年雞新城疫抗體水平調(diào)查與分析

溫小惠1，高曉玲2，許小康2，鄔向東3*

（1. 江西省贛州市贛縣區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，江西 贛州 341100；2. 江西省上饒市萬年縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心，江西 上饒 335500；3.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 動物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，江西 南昌 330045）

【目的】為了解江西省養(yǎng)禽場的雞新城疫病毒（NDV）免疫抗體水平狀況。【方法】對2020—2022年來自江西省宜春市、上饒市、撫州市、九江市、贛州市5地區(qū)的部分養(yǎng)禽場1 153份血清樣本進(jìn)行NDV抗體檢測?！窘Y(jié)果】江西省部分地區(qū)養(yǎng)禽場的NDV抗體陽性率91.5%。其中，宜春市、上饒市、九江市、贛州市的新城疫抗體陽性率分別為：94.7%、95.6%、88.5%、71.9%，均好于國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%要求；僅撫州市陽性率69.4%。2020—2022年3年來江西省5市NDV免疫抗體陽性率呈現(xiàn)上升趨勢；春、冬兩季雞群抗體陽性率較低；江西省5市各地NDV抗體平均效價均在4 Log2以上，多分布于6 Log2～9 Log2?！窘Y(jié)論】近年來江西省家禽NDV免疫抗體水平比較高，而且呈逐步上升趨勢。

新城疫；抗體水平；血凝抑制；陽性率

【研究意義】新城疫（Newcastie disease，ND）最早于1926年在印度尼西亞的爪哇島（Java）和英格蘭的新城（Newcastleupon-Tyne）發(fā)現(xiàn)[1-2]，是由新城疫病毒（NDV）引起的雞和多種禽類急性、熱性、敗血性的高度接觸性傳染病[3]。ND作為我國原農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的一類動物疫病，憑借其傳播速度快、感染率和致死率高，被列為重要病毒性疾病[4]。2002—2003年在加利福尼亞州的NDV爆發(fā)導(dǎo)致300萬只鳥的銷毀和超過1.6億美元的財務(wù)損失[5]。江西省是家禽飼養(yǎng)大省之一，其飼養(yǎng)量居全國第12位，2020年末，全省家禽業(yè)產(chǎn)值高達(dá)330億元，占畜牧業(yè)總產(chǎn)值的30%左右[6]。因此，做好新城疫防控工作對于江西省來說意義非凡。目前來說還沒有針對新城疫的特效藥物，主要是靠疫苗免疫[7]。雖然對于該病各地區(qū)已經(jīng)形成了較為完善的免疫程序，但了解該病在江西的防控水平和程度是完整防疫程序中不可或缺的一部分，其中，衡量該病防控水平最關(guān)鍵的指標(biāo)就是雞群抗體陽性率的高低。疫苗接種應(yīng)根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部制定的免疫方案進(jìn)行，所使用的疫苗應(yīng)符合農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的來源要求，ND免疫抗體陽性率應(yīng)高于70%[8]?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】為控制雞ND的流行，幾十年來我國一直以疫苗預(yù)防為主進(jìn)行防控，并取得較理想效果。但仍不時有慢性ND的出現(xiàn)，為此我國各地對該病一直進(jìn)行血清抗體檢/監(jiān)測，整體趨勢較好。蘇琪[9]報道西安市2011—2015年3 465份血清樣品中，NDV抗體合格率均在70%以上，五年間其合格率分別為：94%、94%、92%、97%、89%、93%。劉華棟[10]報道了山西2007—2016年的NDV抗體變化，發(fā)現(xiàn)山西地區(qū)雞ND抗體呈波動式上升。王銀[11]報道了2017—2019年四川省宜賓市雞新城疫免疫抗體情況，1 808份血清樣品合格率81.89%、平均血凝抑制價（HI）5.8 Log2；2017—2019年合格率分別是75.96%、81.66%、95.51%。陳國權(quán)[12]報道了貴州2015—2018年雞ND免疫抗體合格率90.48%。程圣芳[13]報道了安徽省六安市2014—2019年2 679份雞血清NDV抗體水平合格率96.57%?？梢姴煌貐^(qū)免疫抗體水平差異仍比較大，但基本都在國家要求的群體合格率70%以上。綜上研究可見，ND免疫效果各地相差仍比較大，但最近數(shù)年，江西省家禽ND免疫抗體檢測少見報道?！颈狙芯壳腥朦c】為了解江西省近年來的商品雞場ND免疫抗體情況，筆者針對近來年收集的江西省主要養(yǎng)禽場商品雞血清樣品，進(jìn)行ND免疫水平調(diào)查分析，對江西省ND的防控具有現(xiàn)實意義。【擬解決的關(guān)鍵問題】通過對近幾年江西省部分地區(qū)商品雞血清進(jìn)行采集，檢測其新城疫免疫抗體；對檢測數(shù)據(jù)分年份、季節(jié)和地區(qū)等情況開展分析，以期為江西省對新城疫的防控提供參考資料。

1 材 料

1.1 血清樣品

本試驗所用血清樣本為2020—2022年來自江西省宜春市、上饒市、撫州市、贛州市、九江市的部分養(yǎng)禽場送檢血清，5地市38批1 153份血清樣本。

1.2 主要儀器與試劑

各量程單道可調(diào)微量移液器，德國愛本德公司產(chǎn)品；LRH-250F型恒溫培養(yǎng)箱，上海一恒科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；MH-2型微量振蕩器，其林貝爾公司產(chǎn)品；NDV抗體檢測試劑盒，國華科技生物公司產(chǎn)品；1%雞紅細(xì)胞懸液，由實驗室采自青年健康公雞新鮮血液配制，現(xiàn)配現(xiàn)用。

2 方 法

2.1 血凝試驗（HA）

微量法HA試驗：取96孔U型血凝板，用微量移液器在第1排1～12孔內(nèi)加入30 μL生理鹽水，更換槍頭。吸取30 μL抗原液加入第1孔，反復(fù)吹吸3～5次混勻，從第1孔吸取30 μL加入第2孔，反復(fù)吹吸3～5次混勻后吸取30 μL加入第3孔，如此進(jìn)行倍比稀釋至第11孔，從第11孔吸取30 μL棄去，第12孔不加作陰性對照孔。然后在1～12孔依次分別加入30 μL的生理鹽水和60 μL體積為1%的雞紅細(xì)胞懸液。震蕩混勻，20～25 ℃室溫靜置10～15 min，觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：在生理鹽水對照孔內(nèi)出現(xiàn)正確結(jié)果的情況下，將板傾斜45°，觀察血凝板。能使紅細(xì)胞完全凝集的病毒最高稀釋度為該病毒的血凝價，此效價為1個血凝單位（HAU）。

2.2 4單位抗原的配制

根據(jù)測得的抗原血凝效價，抗原效價值除以4即為稀釋倍數(shù)，用生理鹽水將抗原液稀釋為4單位抗原液[14]。

2.3 微量β法HI試驗：

在96孔U型血凝板的第1～11孔內(nèi)加入30 μL生理鹽水，吸取30 μL待檢血清加入第1孔，依次倍比稀釋至第10孔，再從第10孔棄去30 μL混合液。第12孔加入60 μL生理鹽水，第1～11孔均加入4 HAU抗原液30 μL，混勻，37 ℃恒溫箱靜置15～30 min，第11孔為4 HUA對照，第12孔為生理鹽水對照。取出后每孔加入60 μL 1%的雞紅細(xì)胞懸液，混勻，室溫靜置30 min，觀察結(jié)果。

結(jié)果判定：以完全抑制4個HAU抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI滴度。陽性對照血清的結(jié)果符合HI要求，陰性血清效價低于2 Log2，試驗成立[15]。被檢樣品HI效價不高于2 Log2時判為陰性；HI效價等于3 Log2時為疑似，可疑樣品重檢1次；HI效價不低于4 Log2時判為陽性，認(rèn)為抗體合格[16]。

3 結(jié)果與分析

3.1 不同地市養(yǎng)禽場抗體陽性率

本次共調(diào)查江西省內(nèi)宜春、上饒、撫州、九江、贛州5地市，檢測具體結(jié)果見表1。所調(diào)查的5市陽性率由高到低依次排序為：上饒市、宜春市、贛州市、九江市、撫州市，高至94.7%，低至69.4%，差異明顯，且可看出，在本次調(diào)查抽樣中，除撫州市外的其余4個市均達(dá)到且高于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的70%陽性率。

表1 江西省不同地市養(yǎng)禽場NDV免疫抗體調(diào)查結(jié)果

3.2 不同年份抗體陽性率

本次調(diào)查中，江西省5個地市2020—2022年共取樣1 153份，其中2020年200份，2021年683份，2022年270份，具體調(diào)查結(jié)果見表2。其中，以抽樣批次最多及跨度最大的上饒市為例比較了2020—2022年調(diào)查結(jié)果，見表3。2020—2022年江西省所抽樣抗體陽性率呈上升趨勢，且3年來的陽性率均達(dá)90%以上。其中上饒市2020—2022年抗體陽性率均在90%以上，且上升趨勢明顯，2022年抽樣抗體陽性率高達(dá)98.33%。

表2 2020—2022年5區(qū)NDV免疫抗體調(diào)查結(jié)果

表3 上饒市2020—2022年5區(qū)NDV免疫抗體調(diào)查結(jié)果

3.3 不同季節(jié)抗體陽性率

根據(jù)新城疫的發(fā)病特點可知，新城疫多發(fā)于氣候多變的季節(jié)。因此，調(diào)查分析不同季節(jié)雞群新城疫抗體水平特點，有助于實際生產(chǎn)經(jīng)營中免疫流程的完善。將本次調(diào)查中樣本依氣象劃分法[17]，分為春、夏、秋、冬四季，得出結(jié)果見表4。

由表4可見，不同季節(jié)雞群抗體水平陽性率有差異。其中春季陽性率最低（85.3%），夏季陽性率最高（95.8%）。春、冬季兩季雞群抗體陽性率相對低于其他季節(jié)。

表4 NDV抗體水平在不同季節(jié)的陽性率調(diào)查結(jié)果

3.4 5市中不同抗體效價分布

抗體陽性率是衡量群體免疫水平的指標(biāo)，而抗體效價是衡量個體抗體水平高低的指標(biāo)，本次所調(diào)查的江西5市抗體效價分布結(jié)果見表5和表6?？梢?，NDV抗體效價（Log2）分布情況：宜春市樣本多分布于6～8，上饒市樣本多分布于7～9，撫州市樣本多分布于5～7，九江市樣本多分布于4～6，贛州市樣本抗體多分布于8～10。江西省5地市總體抗體效價（Log2）多分布于6～9。

表5 江西省5市NDV抗體效價分布結(jié)果

表6 江西省5市NDV抗體效價分布比例

5地市部分養(yǎng)禽場NDV抗體效價均值調(diào)查結(jié)果見表7?？梢?地市部分養(yǎng)禽場NDV抗體效價均值均大于4 Log2。其中最高是贛州市（8.40 Log2），最低的是撫州市（4.85 Log2）。雖然NDV抗體群體陽性率在69.40%，但其NDV抗體水平均值也在4 Log2以上。

表7 江西省5市NDV抗體效價均值

4 結(jié)論與討論

新城疫是OIE列為必須報告的動物疫病，廣泛分布于許多國家。新城疫病毒主要感染家雞，也可以感染其他家禽和野鳥，經(jīng)?？蓮镍澓鸵吧W鵡體內(nèi)分離到強毒力的病毒。雖然水禽和海鳥對其有較強抵抗力，但近年來其發(fā)病率在逐漸增加，如鴨、鵝的新城疫常有報道，并可作為帶毒者。故本病一直是養(yǎng)禽業(yè)重點防范的疫病，本病的防疫也一直是養(yǎng)殖者關(guān)注的重點。

目前國內(nèi)雞新城疫的疫情相對穩(wěn)定，但疫苗防控仍是控制本病的關(guān)鍵[18-19]。在各地長期的全面疫苗免疫普及下，雞新城疫基本得到有效控制。這從全國各地的調(diào)查結(jié)果來看，雞群中NDV免疫抗體水平均較高可以得到證實[20-21]。

本次調(diào)查中的江西省5地市中宜春市、上饒市、九江市、贛州市的新城疫抗體水平超過了國家標(biāo)準(zhǔn)要求，尤其是宜春市和上饒市的抗體陽性率遠(yuǎn)超出國家規(guī)定水平，可以看出這2市新城疫免疫防控工作比較優(yōu)秀。而撫州市的新城疫抗體陽性率雖稍低，也接近70%，這說明撫州市的新城疫免疫防控工作還需進(jìn)一步加強。近3年來江西省5地市綜合抗體陽性率呈現(xiàn)上升趨勢，這說明近年來雞群對新城疫的防控工作進(jìn)步明顯。通過對不同季節(jié)的江西省5地市綜合抗體陽性率調(diào)查結(jié)果可知，春、冬兩季雞群抗體陽性率較低，而且仍有個別雞群的NDV抗體水平不夠理想，各地市的樣本抗體效價水平分布不一，值得注意。

在未來的防疫工作中，各地應(yīng)重視這一特點，在多變的季節(jié)可采取調(diào)整免疫程序或加強飼養(yǎng)管理控制環(huán)境因素等措施，來保障防控工作的順利進(jìn)行。在實際免疫防控工作中應(yīng)重視群體，全面地系統(tǒng)地開展各項新城疫防控工作是今后努力的方向，爭取擁有更廣的防控工作覆蓋面。

目前HI試驗因為操作簡便，HI抗體能夠大體反映體液免疫中抗體的出現(xiàn)和消長規(guī)律，具有一定的代表性，故通常采用HI效價對免疫效果時行監(jiān)測和評價。但事實上，雞體內(nèi)形成對新城疫有抵抗力的因素很多，包括與體液免疫有關(guān)的HI抗體、中和抗體、沉淀抗體，與細(xì)胞免疫有關(guān)的各種因子，與非特異性免疫有關(guān)的干擾素、補體和特異性免疫效應(yīng)細(xì)胞等等，都可影響雞群的免疫力。因此，提高雞群對新城疫的免疫力最終要落實在良好的飼養(yǎng)管理上。

本次調(diào)查結(jié)果顯示，江西省宜春市、上饒市、九江市、贛州市、撫州市部分養(yǎng)禽場的NDV免疫抗體陽性率分別為：94.7%、95.6%、88.5%、71.9%、69.4%；除撫州市外均達(dá)到了國家要求的70%。平均NDV抗體HI價分別為：7.41 Log2、8.22 Log2、5.13 Log2、8.40 Log2、4.85 Log2，都在4 log2之上。5地市NDV免疫抗體總體陽性率91.5%，平均HI效價為7.49 Log2，均超過國家標(biāo)準(zhǔn)。

2020—2022年，江西省5地市養(yǎng)禽場NDV免疫抗體總體陽性率分別為：90.00%、91.22%、93.33%，均在90%以上，并呈上升趨勢；春、夏、秋、冬四季NDV免疫抗體水平分別為：85.3%、95.4%、94.2%、91.1%，表明春、冬兩季的抗體陽性率稍低，可能與天氣變化影響家禽的免疫力有關(guān)。

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Investigation and Analysis of Antibody Level of Newcastle Disease Virus in Jiangxi in the Last Three Years

WEN Xiaohui1, GAO Xiaoling2, XU Xiaokang2, WU Xiangdong3*

（1. Center for Agricultural Technology Extension of Ganxian, Ganzhou, Jiangxi 341100, China; 2. Center for Animal Husbandry and Veterinary Service of Wannian, Shangrao, Jiangxi 335500, China; 3. School of Animal Science and Technology, Jiangxi Agricultural University, Nanchang 330045, China）

This study was conducted to understand the immunological antibody level of Newcastle Disease Virus (NDV) in poultry farms in Jiangxi Province.The total number of 1 153 serum samples from some poultry farms in Yichun, Shangrao, Fuzhou, Jiujiang and Ganzhou in Jiangxi Province from 2020 to 2022 were tested to analyze the antibody level of NDV.The results showed that the positive rate of NDV antibody was 91.5%. Among them, the positive rates of Newcastle Disease Virus antibody in Yichun City, Shangrao City, Jiujiang City and Ganzhou were 94.7%, 95.6%, 88.5% and 71.9%, respectively, all exceeding the requirement of 70% stipulated by The Ministry of Agriculture and Rural Affairs. However, the positive rate of NDV antibody in Fuzhou City was only 69.4%. The positive rates of NDV antibody in 5 cities of Jiangxi Province had shown an increasing trend in the past three years from 2020 to 2022. While, the rates were relatively low in chicken flocks in spring and winter. The average titer of NDV antibody in different regions of 5 cities in Jiangxi Province was over 4 Log2, mostly distributed between 6 Log2-9 Log2.In recent years in Jiangxi Province, there has been a relatively high level of NDV antibody, with a gradual increase year by year.

Newcastle disease virus; antibody level; hemagglutination inhibition; positive rate

10.3969/j.issn.2095-3704.2023.04.72

S855.3

A

2095-3704（2023）04-0478-06

2023-06-15

2023-10-09

江西省引進(jìn)培養(yǎng)創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)高層次人才“千人計劃”項目（jxsq2018102118）

溫小惠（2000—），女，主要從事獸醫(yī)臨床與管理研究，gxyyscz@163.com；*通信作者：鄔向東，副教授，dxywxd2006@126.com。

溫小惠, 高曉玲, 許小康, 等. 江西省部分地區(qū)近3年雞新城疫抗體水平調(diào)查與分析[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2023, 46(4): 478-483.