卓惠燕,鐘朋軒,李有強(qiáng)

(廣州市番禺區(qū)婦幼保健院檢驗(yàn)科,廣東 廣州 511400)

降鈣素原(PCT)是由116個(gè)無激素活性氨基酸糖蛋白組成的降鈣素前肽物質(zhì),其半衰期為25～30 h[1]。健康人體血漿PCT水平低于0.05 ng/mL。在受到嚴(yán)重寄生蟲、細(xì)菌、真菌感染時(shí),PCT水平可明顯升高,若PCT>0.5 ng/mL則提示嚴(yán)重細(xì)菌感染[2]。PCT作為一種新的炎癥指標(biāo)已被廣泛應(yīng)用于感染性疾病的診斷、鑒別診斷、療效監(jiān)測(cè)等,并被國際膿毒癥協(xié)會(huì)推薦為膿毒癥的診斷和療效評(píng)價(jià)指標(biāo)[3]。

臨床上主要用化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫熒光法檢測(cè)血清或血漿PCT水平[4]。檢測(cè)血清PCT具有用血量大、需離心分離標(biāo)本、檢驗(yàn)周期較長等缺點(diǎn),且嬰幼兒患者靜脈血采集難度較大。全血PCT檢測(cè)可克服上述局限性。本研究探討了采用酶聯(lián)免疫熒光法檢測(cè)血清PCT與采用免疫層析法檢查全血PCT的臨床價(jià)值。

1 資料與方法

1.1一般資料 采集2022年1-3月本院住院患者的乙二胺四乙酸二鉀抗凝全血(96份)及促凝血標(biāo)本(96份)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法 血液標(biāo)本的采集參考美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)《診斷性靜脈血液標(biāo)本采集》[5],由專業(yè)抽血護(hù)士執(zhí)行。將收集的促凝血標(biāo)本以3 500 r/min離心5 min,獲得血清標(biāo)本。排除明顯溶血、脂血和黃疸標(biāo)本。血清PCT檢測(cè)采用Biomerieux VIDAS30熒光免疫分析儀(酶聯(lián)免疫熒光法),全血PCT檢測(cè)采用i-ReaderS干式免疫分析儀(免疫層析法),i-ReaderS干式免疫分析儀由上海艾瑞德生物科技有限公司提供,試劑為儀器配套試劑,所有儀器在檢測(cè)標(biāo)本前均進(jìn)行了儀器的校準(zhǔn)和性能驗(yàn)證。

2 結(jié) 果

2.1血清和全血PCT檢測(cè)結(jié)果比較 192份標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果覆蓋了低值、中值、高值的范圍。血清PCT水平為(5.88±0.89)ng/mL,全血PCT水平為(5.56±0.84)ng/mL,二者比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.25,P>0.05)。

2.2血清和全血PCT檢測(cè)結(jié)果的線性回歸分析 以血清PCT檢測(cè)數(shù)據(jù)作X軸,全血PCT檢測(cè)數(shù)據(jù)作Y軸,構(gòu)造的回歸方程為Y=0.921X+0.163,二者具有良好的線性關(guān)系(r=0.974,P<0.05)。見圖1。

圖1 線性回歸分析

2.3血清和全血PCT檢測(cè)結(jié)果的一致性分析 血清與全血PCT檢測(cè)結(jié)果平均差值為0.302,偏差處于臨床可接受范圍之內(nèi)。差值95%置信區(qū)間(95%CI)為-3.589～4.193,4.16%的點(diǎn)落在95%一致性的界限之外,即數(shù)據(jù)基本落在95%CI內(nèi),提示二者一致性較好。見圖2。

圖2 Bland-Altman圖

3 討 論

當(dāng)機(jī)體存在細(xì)菌感染時(shí),肝臟巨噬細(xì)胞、甲狀腺C細(xì)胞會(huì)合成與分泌PCT,使血液中PCT水平迅速升高,其水平可隨感染程度的不同而相應(yīng)升高或降低[6]。魏鋒等[7]通過對(duì)76例膿毒血癥和嚴(yán)重膿毒血癥患者的病情和預(yù)后情況進(jìn)行分析時(shí)發(fā)現(xiàn),嚴(yán)重膿毒血癥患者PCT水平遠(yuǎn)高于膿毒血癥患者,提示隨著病情嚴(yán)重程度的增加,膿毒血癥患者血清PCT水平可逐漸升高。李龍珠等[8]研究表明,膿毒血癥患者血清PCT水平高低與患者進(jìn)一步發(fā)生心肌損傷的關(guān)系密切。因此,PCT可作為區(qū)別膿毒血癥與非感染性原因引起的全身炎性反應(yīng)的重要標(biāo)志物,其在膿毒血癥診斷、降低死亡率、緩解抗生素濫用等方面具有舉足輕重的作用[9]。

目前,PCT的檢測(cè)主要采用血漿和血清標(biāo)本,這2種標(biāo)本制備耗時(shí)較長,在標(biāo)本量大時(shí)不利于降低檢驗(yàn)科工作負(fù)荷,而且血清PCT檢測(cè)費(fèi)用相對(duì)于全血PCT檢測(cè)費(fèi)用高,在復(fù)查可疑結(jié)果時(shí)所帶來的成本也會(huì)更高。隨著臨床檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展,全血PCT檢測(cè)逐漸應(yīng)用于臨床,并且全血PCT相關(guān)檢測(cè)儀器的精密度、準(zhǔn)確度、線性范圍、攜帶污染率等性能,以及與血清、血漿標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性、一致性分析等研究顯示,大部分全血PCT檢測(cè)儀器均能達(dá)到實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量要求,同時(shí)滿足臨床需求[10-11]。張盼等[12]通過采集40例疑似感染患兒血清及末梢血標(biāo)本,分別采用TZ-310型干式熒光免疫分析儀和量子點(diǎn)免疫熒光層析儀對(duì)標(biāo)本PCT水平進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,血清與末梢血PCT檢測(cè)結(jié)果一致性、相關(guān)性良好。末梢血標(biāo)本采血量少,檢測(cè)簡(jiǎn)便,出結(jié)果快速,更適用于采血困難的嬰幼兒患者。

本研究使用的i-ReaderS干式免疫分析儀,主要用于檢測(cè)靜脈血和末梢血C反應(yīng)蛋白,也可用于檢測(cè)靜脈血和末梢血PCT。全血PCT檢測(cè)耗時(shí)短,用量少,分析時(shí)間在15 min以內(nèi),可大大降低臨床周轉(zhuǎn)時(shí)間,提高報(bào)告發(fā)送速度,從而更快地發(fā)布危急值,提醒臨床進(jìn)行干預(yù)[13]。因此,全血PCT檢測(cè)在婦幼專科醫(yī)院中具有更好的應(yīng)用前景。全血PCT的應(yīng)用使聯(lián)合檢測(cè)PCT、C反應(yīng)蛋白、血清淀粉樣蛋白等炎癥指標(biāo)成為可能。聯(lián)合檢測(cè)炎癥指標(biāo)有利于指導(dǎo)臨床抗生素的使用,能極大地提高細(xì)菌感染診斷的敏感性和特異性。賈文婷等[14]通過對(duì)51例細(xì)菌性感染新生兒及60例非細(xì)菌性感染新生兒進(jìn)行全血PCT、超敏C反應(yīng)蛋白水平檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn),PCT聯(lián)合超敏C反應(yīng)蛋白檢測(cè)可進(jìn)一步提高診斷細(xì)菌感染性疾病的準(zhǔn)確性和特異性。

本研究結(jié)果顯示,血清PCT水平略高于全血PCT水平,提示采用不同檢測(cè)方法可使結(jié)果存在一定偏差,但偏差處于臨床允許誤差內(nèi)。PCT主要存在于血清或血漿中,血液紅細(xì)胞比容的大小影響了全血標(biāo)本中血清或血漿PCT水平。血細(xì)胞比容大,則單位體積中參與反應(yīng)的血清或血漿PCT相對(duì)減少,反之亦然[15-16],這也是導(dǎo)致全血PCT檢測(cè)結(jié)果略低于血清PCT檢測(cè)結(jié)果的原因之一。本研究結(jié)果顯示,血清與全血PCT檢測(cè)結(jié)果無顯著差異,二者具有良好的線性關(guān)系(r=0.974,P<0.05)。提示血清PCT檢測(cè)與全血PCT檢測(cè)具有較好的相關(guān)性。在進(jìn)行一致性檢驗(yàn)時(shí),本研究采用了Bland-Altman分析法。該方法綜合了檢測(cè)過程中的隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差,是評(píng)價(jià)一致性檢驗(yàn)的較好方法。本研究結(jié)果顯示,血清與全血PCT檢測(cè)結(jié)果的絕大多數(shù)差值位于95%一致性界限內(nèi),偏差均值為0.302,處于臨床上可接受范圍,提示這2種檢測(cè)結(jié)果具有一致性。這與SHENG等[17]研究結(jié)果相似,該研究指出全血PCT檢測(cè)與常規(guī)血清和血漿PCT相比,未見顯著不同結(jié)果,而且前者在兒科和其他臨床科應(yīng)用具有一定優(yōu)勢(shì)。

綜上所述,采用免疫層析法檢測(cè)全血PCT與采用酶聯(lián)免疫熒光法檢測(cè)血清PCT具有較好的一致性。對(duì)懷疑有血液感染且采血困難的嬰幼兒患者、貧血患者等,采用全血PCT檢測(cè)方法能更快、更好地判斷病情。