王志煒,劉秀蘭,李峰,錢坤艷

1.鹽城市疾病預(yù)防控制中心,江蘇 鹽城 224001; 2.南通市崇川區(qū)疾病預(yù)防控制中心

機會致病菌在平衡的微生態(tài)環(huán)境下一般對人體不致病,如果機體免疫力下降、濫用抗生素等因素打破了平衡,機會致病菌常常會乘虛侵入機體引發(fā)疾病。學(xué)齡前兒童特別是3～5歲的小兒,免疫功能尚未完全成熟[1],托幼機構(gòu)是集體生活,如果環(huán)境不潔、保育不當(dāng),孩子很容易受到機會致病菌的攻擊導(dǎo)致疾病發(fā)生,其中最常見的為呼吸道疾病[2-3]。近年來由于抗生素的濫用,不僅導(dǎo)致兒童病原譜發(fā)生改變,且耐藥率上升,臨床治療難度不斷加大。本研究通過檢測鹽城市托幼機構(gòu)100名健康兒童咽拭子標本,分析機會致病菌分布和耐藥情況,為學(xué)齡前兒童呼吸道疾病病原學(xué)診斷、藥物選擇和規(guī)范用藥提供參考。

1 材料與方法

1.1 對象 隨機選擇鹽城市區(qū)4所幼兒園不同班級的健康學(xué)齡前兒童100名。納入標準:①近7天內(nèi)無頭痛、發(fā)燒、咽痛、咳嗽等呼吸道感染癥狀;②近7天內(nèi)未服用抗生素;③無其他急性或慢性疾病。

1.2 方法 由專業(yè)人員用一次性壓舌板固定好兒童的舌頭,用浸有生理鹽水的無菌棉拭子在兒童咽部后壁擦拭3～5次。無菌采集咽拭子標本后,立即采用四區(qū)劃線法接種血平板和巧克力血平板各一塊,盡快送回實驗室置于恒溫恒濕培養(yǎng)箱,巧克力血平板置于5% CO2培養(yǎng)箱,均35℃培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果。采用細菌半定量培養(yǎng)新法(十二級法)半定量計數(shù)菌落[4]。于平板計數(shù)區(qū)域計數(shù)100個散在菌落,按照各種菌落的相對數(shù)量判定結(jié)果:若各平板均無某菌落,記為(-);若僅1～4個,記為少量(<0.1);5～14個記為0.1;15～24個記為0.2;25～34個記為0.3;余類推;純培養(yǎng)記為1.0。對培養(yǎng)結(jié)果計數(shù)≥0.1的菌落,用VITEK 2 GP或VITEK 2 GN卡片插入VITEK 2 Compact全自動微生物鑒定儀鑒定細菌種類,并分別使用VITEK 2 AST-GP67藥敏卡進行金黃色葡萄球菌和腸球菌的藥敏試驗,VITEK 2 AST-GP68對肺炎鏈球菌進行藥敏試驗,流感嗜血桿菌和甲型溶血性鏈球菌則采用K-B法進行藥敏試驗。K-B法嚴格按照《M100 抗微生物藥物敏感性試驗執(zhí)行標準》(2019版)的要求操作。

1.3 統(tǒng)計分析 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行分析,計數(shù)資料采用[n(%)]表示。

2 結(jié)果

2.1 機會致病菌檢出情況 100個咽拭子標本培養(yǎng)結(jié)果,有12個標本為(-),27個標本為少量(<0.1),棄去。剩余61個標本共檢出機會致病菌84株,其中葡萄球菌屬21株,占25.00%,21株葡萄球菌中金黃色葡萄球菌17株(血漿凝固酶陽性的5株、血漿凝固酶陰性的12株)、表皮葡萄球菌4株;甲型溶血性鏈球菌19株,占22.62%;肺炎鏈球菌16株,占19.05%;流感嗜血桿菌9株,占10.71%;腸球菌屬8株,占9.52%;卡他莫拉菌7株,占8.33%;大腸埃希氏菌4株,占4.76%。

2.2 機會致病菌藥敏測定結(jié)果 對檢出的機會致病菌金黃色葡萄球菌(包括血漿凝固酶陽性和陰性)、甲型溶血型鏈球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和腸球菌進行藥敏試驗。結(jié)果金黃色葡萄球菌對青霉素、紅霉素、克林霉素耐藥率分別為41.18%、52.94%、29.41%;肺炎鏈球菌對青霉素和紅霉素耐藥率均為25.00%,對克林霉素耐藥率為18.75%,對復(fù)方新諾明耐藥率為6.25%;甲型溶血性鏈球菌對青霉素耐藥率15.79%,對紅霉素和克林霉素耐藥率均為10.52%;流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率為33.33%;腸球菌對青霉素和紅霉素耐藥率均為25.00%,對克林霉素、復(fù)方新諾明耐藥率均為12.50%。見表1。

表1 托幼機構(gòu)100名兒童咽部機會致病菌耐藥情況[n(%)]

3 討論

本研究表明,鹽城市托幼機構(gòu)學(xué)齡前兒童咽試子機會致病菌檢出率61.00%,共檢出84株機會致病菌,以葡萄球菌、甲型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和腸球菌為主,占比依次為25.00%、22.62%、19.01%、10.71%和9.52%。葡萄球菌屬中金黃色葡萄球菌是兒童臨床感染最常見的致病菌之一,感染后發(fā)病急、病情進展快,可并發(fā)多種疾病,累及多個組織器官,如治療不及時則死亡率高。隨著抗菌藥物的廣泛使用,葡萄球菌對多種抗菌藥物的耐藥率逐年上升,尤其需要引起重視。甲型溶血性鏈球菌是呼吸道重要的正常菌群之一,當(dāng)機體抵抗力下降或發(fā)生某些損傷時,可引起牙齦膿腫、中耳炎、心內(nèi)膜炎、泌尿道感染、腦膜炎等。肺炎鏈球菌是引起社區(qū)獲得性肺炎的主要病原菌[5],也是化膿性腦膜炎的常見病原菌,亦是1歲以上兒童細菌性腦膜炎的重要病原菌[5-6]。流感嗜血桿菌是引起兒童細菌性感染的常見病原體之一,其中b 型流感嗜血桿菌甚至可導(dǎo)致腦膜炎、肺炎、膿毒血癥、脊髓炎等多種嚴重侵襲性疾病。隨著相應(yīng)疫苗陸續(xù)引入國家免疫計劃,b 型流感嗜血桿菌引起的疾病發(fā)病率及重癥率得到有效改善,無莢膜不可分型流感嗜血桿菌逐漸成為優(yōu)勢菌株,可導(dǎo)致兒童中耳炎,引起慢性持續(xù)性感染或聽力損害[7]?？ㄋ湍c球菌雖為咽部常見機會致病菌,但很少引起呼吸道感染[8]。

本研究對樣本中檢出的主要機會致病菌進行藥敏試驗,結(jié)果顯示對臨床常用藥物多有不同程度的耐藥,金黃色葡萄球菌對青霉素、紅霉素和克林霉素耐藥率分別為41.18%、52.94%、29.41%,紅霉素耐藥率與叢萌倩等[9]報道相當(dāng)。肺炎鏈球菌對青霉素和紅霉素耐藥率均為25.00%,低于唐萍等[10]的報道;對克林霉素耐藥率為18.75%,對復(fù)方新諾明的耐藥率為6.25%,有多耐藥菌出現(xiàn)。隨著抗菌藥物的廣泛使用,流感嗜血桿菌對藥物的耐藥性逐年增高。我國細菌耐藥監(jiān)測(CHINET)顯示,2014—2019 年流感嗜血桿菌對氨芐西林、氨芐西林/舒巴坦、頭孢克洛、頭孢呋辛及阿奇霉素的耐藥率均有所上升,其中氨芐西林耐藥率從48.10%升至 69.00%[11],本研究中流感嗜血桿菌對氨芐西林耐藥率為33.33%。上述機會致病菌對青霉素、紅霉素、克林霉素、氨芐西林耐藥性較為突出,對于上呼吸道感染治療效果不佳的兒童,建議檢測病原,根據(jù)病原的藥物敏感性給藥。

本研究還折射出鹽城市學(xué)齡前兒童抗生素使用的普遍性和不規(guī)范性:一是OTC藥物的自主服用,二是臨床廣譜抗生素處方的大范圍使用。王紫荊等[12]對某醫(yī)院處方統(tǒng)計顯示,廣譜抗生素使用占比在70.00%左右。建議呼吸道感染性疾病高發(fā)季節(jié)應(yīng)加強學(xué)齡前兒童機會致病菌監(jiān)測,增強針對性用藥,加強兒科呼吸道疾病抗生素應(yīng)用的規(guī)范性和合理性監(jiān)管,從而改善日益嚴重的耐藥性問題。