李 沛,蔣 娟,李穩(wěn)超,滕 江,趙昕鈺,左景茹,陳君霖,廖 琳,劉曉強*

(1.西北農(nóng)林科技大學動物醫(yī)學院,陜西楊陵 712100;2.富平縣畜牧發(fā)展中心,陜西富平 711700;3.西藏瓊結(jié)縣農(nóng)牧綜合服務中心,西藏瓊結(jié) 856800)

近年來隨著奶山羊養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,奶山羊乳房炎問題日顯突出,發(fā)病率達2%～19%[1]。臨床型乳房炎平均發(fā)病率為6%,最高可達20%[2]。乳房炎不僅影響奶山羊的繁育,還影響產(chǎn)奶量和奶品質(zhì)[3]。銀翹蒲黃散是西北農(nóng)林科技大學獸醫(yī)藥理學教研室研發(fā)的用于奶山羊乳房炎的中獸藥,主要由金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等中藥組成,具有清熱解毒、抗菌消炎、消癰下乳、通經(jīng)活血之功效。為評價銀翹蒲黃散對奶山羊的安全性,本試驗參照農(nóng)業(yè)部《獸藥研究技術指導原則匯編》和《獸用中藥、天然藥物安全藥理學研究技術指導原則》[4-5],進行銀翹蒲黃散對奶山羊的安全性試驗,考察奶山羊以推薦劑量的1、3、5倍劑量連續(xù)給藥后,臨床反應及生理生化指標變化,為銀翹蒲黃散的臨床應用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗用動物 健康成年奶山羊40只,由富平縣某奶山羊養(yǎng)殖合作社提供,試驗期間常規(guī)飼養(yǎng)。

1.1.2 試驗藥品 銀翹蒲黃散主要含有金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等11味中藥組成,具有熱解毒、消癰下乳、通經(jīng)活血之功效,擬用于泌乳動物乳房炎的治療,使用劑量為50 g/只。所有中藥均購自陜西省楊凌示范區(qū)國華藥店。將藥物依據(jù)組方配藥,粉碎為粗粉,臨用前適量溫水溶解。

1.1.3 主要試劑 白蛋白(ALB)測定試劑盒,上海泛柯實業(yè)有限公司;丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)試劑盒,天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒,江蘇晶美生物科技有限公司;尿素氮(BUN)試劑盒,上海吉至生化科技有限公司;肌酐(SCr) 測定試劑盒,上海源葉生物科技有限公司;山羊總蛋白(TP)測定試劑盒,上海泛柯實業(yè)有限公司。

1.1.4 主要儀器 電子分析天平,奧豪斯儀器有限公司產(chǎn)品;漩渦振蕩器,其林貝爾儀器制造公司產(chǎn)品;MTN-81全自動血細胞分析儀,長春曼特諾醫(yī)療器械公司產(chǎn)品; H1650R高速冷凍離心機,湘儀儀器有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 試驗動物分組處理 將受試奶山羊隨機分為4組,包括3個試驗組(1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組)和對照組,每組10頭。1倍劑量組、3倍劑量組和5倍劑量組的奶山羊每次分別經(jīng)胃管灌服銀翹蒲黃散100、150、250 g,每天1次,連續(xù)3 d。對照組灌服生理鹽水600 mL,每天1次,連續(xù)3 d。

1.2.2 評價指標

1.2.2.1 奶山羊生理指標 于給藥前和給藥后對受試奶山羊的精神、食欲及糞尿情況進行觀察。糞尿觀察主要包括排糞排尿動作、次數(shù)及糞尿顏色、氣味、形狀等異常情況。同時,測量給藥前及給藥后試驗奶山羊的呼吸頻率、心率及體溫。

1.2.2.2 血常規(guī)檢測 試驗前試驗組和對照組采空白抗凝血各1次;給藥后3 d、7 d各采抗凝血1次。用全自動血細胞分析儀檢測血液學指標。測指標主要有:紅細胞計數(shù)(RBC)、白細胞計數(shù)(WBC)、淋巴細胞數(shù)(LYM)及血紅蛋白(HGB)。

1.2.2.3 血清生化指標檢測 給藥前對試驗組和對照組各采空白血1次,分別于給藥后3 d、7 d采血,4℃條件下4 000 r/min離心30 min,分離血清用于測定血清生化指標。主要檢測指標包括血清尿素氮(BUN)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)和總蛋白(TP)。

2 結(jié)果

2.1 銀翹蒲黃散對奶山羊生理指標的影響

連續(xù)給藥3 d后,試驗組奶山羊未出現(xiàn)精神異常、食欲廢止、嘔吐、便秘或腹瀉等異常反應,排糞排尿次數(shù)、排泄物顏色、氣味、形狀等均正常。由表1可知,對照組奶山羊的呼吸頻率、心率、體溫在試驗前后均未出現(xiàn)明顯變化,各組與對照組相比均無顯著性差異(P>0.05)。

表1 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊呼吸頻率、心率和體溫的影響

2.2 銀翹蒲黃散對奶山羊血液學指標的影響

連續(xù)給藥3 d后,3 d、7 d各組奶山羊血液學指標檢測結(jié)果見表2和表3。各組的血常規(guī)參數(shù)沒有明顯變化。對照組與試驗組間的紅細胞數(shù)(RBC)、白細胞數(shù)(WBC)、血紅蛋白(HGB)和淋巴細胞數(shù)(LYM)的含量無顯著性差異(P>0.05)。結(jié)果表明,銀翹蒲黃散對受試奶山羊的血液學指標不會產(chǎn)生明顯的不良影響。

表2 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血常規(guī)的影響(給藥前)

表3 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血液學指標的影響(給藥后第3、7天)

2.3 銀翹蒲黃散對奶山羊血清生化指標的影響

由表4和表5可知,連續(xù)給藥3 d后,奶山羊血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)、白蛋白(ALB)以及總蛋白(TP)活性與給藥前相比無顯著性差異(P>0.05)。試驗組與對照組相比較,各血液生化指標活性差異不顯著(P>0.05)。表明銀翹蒲黃散對奶山羊的肝臟、腎臟功能以及物質(zhì)代謝并無不良影響。

表4 不同劑量的銀翹蒲黃散對奶山羊血清生化指標的影響(給藥前)

表5 不同劑量的銀翹蒲黃翹對奶山羊血清生化指標的影響(給藥后第3、7天)

3 討論

抗菌藥物在應對泌乳動物乳房炎方面發(fā)揮了重要作用,但長期使用會引起細菌的耐藥性、獸藥殘留和環(huán)境污染等問題,加之國家限抗、替抗政策的出臺[6]。臨床治療動物乳房炎也越來越傾向于中草藥治療,中草藥含有豐富的活性物質(zhì),各味中草藥之間互相協(xié)調(diào)輔助,可同時產(chǎn)生抗炎、抗菌、鎮(zhèn)痛、抗氧化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種功效。

靶動物安全性評價是藥物臨床應用判斷標準之一[7]。根據(jù)受試奶山羊的臨床體征,不同劑量組奶山羊均未出現(xiàn)異常反應,精神狀態(tài)良好,飲水、飲食、排糞和排尿正常,體溫、心率和呼吸也均正常,說明銀翹蒲黃散對奶山羊無不良影響。藥3 d與7 d后血常規(guī)指標均在正常范圍,表明銀翹蒲黃散在一定劑量范圍內(nèi)對奶山羊的血常規(guī)指標無不良影響。銀翹蒲黃散所含的主要成份為金銀花、連翹、蒲公英、黃芪、王不留行、乳香等,單味或復方均毒性低,安全可靠。蒲公英可化熱毒,消惡腫,具有抑菌、抗氧化、抗炎等多種藥理作用[6,8-9]。連翹和黃芩也屬于臨床常用中草藥[10-11]。銀翹藍芩口服液含有金銀花、連翹、黃芩等,許春燕對靶動物雞連續(xù)飲水給藥7 d,不同劑量組與對照組相比,血液生理學與生化學指標以及臟器系數(shù)差異不顯著(P>0.05),且各臟器無明顯組織病變[12]。血液生化指標中,血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、白蛋白和總蛋白是評價肝臟功能的重要標志,尿素氮和肌酐是評價腎臟功能的重要指標,可反映機體肝臟、腎臟及總體代謝功能的正常與否。本試驗中1倍和3倍劑量組奶山羊用藥后其血液生化指標變化均處于參考值正常范圍內(nèi),與給藥前相比較差異不顯著(P>0.05),表明銀翹蒲黃散對奶山羊的肝、腎功能及機體代謝不會產(chǎn)生不良影響。但是5倍劑量組奶山羊的血清生化指標和對照組比顯著升高(P<0.05),其原因可能是該散劑中所含的沒藥、乳香及知母在劑量較大時產(chǎn)生一定毒性[13]。綜上所述,銀翹蒲黃散不超過3倍推薦劑量時具有良好的安全性。