唐艷梅，李冰，高爽，張煜彤

（1.云南醫(yī)藥健康職業(yè)學(xué)院，云南昆明 650000；2.云南省中醫(yī)醫(yī)院，云南昆明 650010；3.云南昆船機(jī)械制造有限公司，云南昆明 650200；4.昆明理工大學(xué)，云南昆明 650200）

中藥材重金屬含量超標(biāo)不僅影響藥效，嚴(yán)重的還會(huì)危害健康[1]。傳統(tǒng)中藥主要采用水煎法，飲湯而棄渣，因此水溶性物質(zhì)對(duì)中藥的質(zhì)量安全影響較大。2020 版《中華人民共和國藥典》[2]中重金屬及有害元素最大限量標(biāo)準(zhǔn)需要計(jì)算最大限量理論值（L，mg/kg）和中藥材及飲片經(jīng)煎煮或提取后農(nóng)藥的轉(zhuǎn)移率（t，%）。本研究團(tuán)隊(duì)曾對(duì)單味藥材中重金屬的轉(zhuǎn)移率進(jìn)行了分析[3-5]，但規(guī)律性和數(shù)據(jù)仍不夠完善。中藥往往以復(fù)方的形式使用，因此研究高頻復(fù)合藥方中的重金屬及有害元素的轉(zhuǎn)移率具有實(shí)際意義。四君子湯、四物湯、血府逐瘀湯臨床應(yīng)用廣泛,具有促進(jìn)腸黏膜損傷修復(fù)，防治動(dòng)脈粥樣硬化，用于冠心病、糖尿病、消化道疾病等[6-8]。本研究課題的方劑選擇依托李冰醫(yī)師二十多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，結(jié)合2021 年云南省中醫(yī)醫(yī)院老年病科的處方權(quán)重比，選取了四君子湯、四物湯、血府逐淤湯作為研究對(duì)象，3 個(gè)方劑權(quán)重占比分別為四君子湯 18.2%、四物湯 6.9%、血府逐淤湯 3.4%，占總處方數(shù)的28.5%。臨床許多疾病治療的藥方在這3 個(gè)經(jīng)典方劑上加減應(yīng)用，在消化道科、心內(nèi)科、婦科的運(yùn)用占比實(shí)際高于老年病科，因此具有廣泛的運(yùn)用基礎(chǔ)，符合臨床高頻使用特性。

電感耦合等離子體-質(zhì)譜法（ICP-MS）與其他元素檢測方法相比擁有檢測時(shí)間短、性能優(yōu)越、靈敏度高與結(jié)果準(zhǔn)確等優(yōu)勢[9-10]，是目前在元素分析中最有前途的分析手段。本文采用微波消解-ICP-MS，對(duì)湯劑中有害元素重金屬和砷轉(zhuǎn)移率進(jìn)行考察，結(jié)合國內(nèi)外安全限量指標(biāo)客觀評(píng)價(jià)中藥的安全性。

1 材料與方法

1.1 試劑

（1）四物湯：黨參10 g、白術(shù)10 g、茯苓10 g、炙甘草6 g；（2）四君子湯：當(dāng)歸10 g、川芎8 g、白芍10 g、熟地黃12 g；（3）血府逐淤湯：桃仁12 g、紅花9 g、當(dāng)歸9 g、生地黃9 g、川芎5 g、赤芍6 g、牛膝9 g、桔梗5 g、柴胡3 g、枳殼6 g、甘草3 g。以上藥材購于云南省東駿大藥房，每種方劑各平行抓取2 副。經(jīng)李冰醫(yī)師鑒定，符合要求。

銅、鉛、鎘、砷、鉻、汞等元素標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 μg/mL），國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心；ICP-MS 調(diào)諧液及內(nèi)標(biāo)液，美國PE 公司；水為《分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法》（GB/T 6682—2008）規(guī)定的一級(jí)水。

1.2 儀器

NexION?350 型電感耦合等離子體質(zhì)譜儀，美國PE 公司；Multiwave3000 微波消解儀，奧地利Anton Paar 公司；Arium Comfort Ⅱ純水超純水一體機(jī)，德國賽Sartorius 公司。

1.3 樣品制備

以上三個(gè)方劑各平行抓取2 份，其中1 份藥材置于真空干燥箱中低溫60 ℃烘干，用粉碎機(jī)粉碎混勻，過100 目篩，四分法縮分后裝入干凈的棕色玻璃瓶中，待測；另外1 份按日本標(biāo)準(zhǔn)湯劑規(guī)定（日本漢方）制備[11]。將三個(gè)方劑藥材分別粉碎后，加20 倍量的純水，用燒杯煎煮30 min 以上，過濾后濃縮，其中四君子湯和四物湯濃縮至50 mL，血府逐瘀湯濃縮至100 mL，得待測液。

1.4 樣品測定與實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證

分別精密稱取0.3 g 中藥材粉末和精密移取2 mL濃縮湯液，采用微波消解后按文獻(xiàn)[5]中實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行含量測定，同法同時(shí)制備空白溶液。由于所采用的實(shí)驗(yàn)方法和條件均與原文獻(xiàn)一致，故僅以隨行質(zhì)量控制來確認(rèn)方法的適用性。并選取了其中的四物湯進(jìn)行了回收率試驗(yàn)，結(jié)果均符合殘留檢測要求。金屬元素轉(zhuǎn)移率（t）=藥湯重金屬含有量/藥材重金屬含有量×100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法精密度和回收率

配制鉛、鎘、砷、鉻、銅的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液及汞單元素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，得到系列標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和定量限；再配成含鉛、鎘、砷、鉻、銅、汞質(zhì)量濃度分別為100 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、50 μg/L、4 μg/L、200 μg/L 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，并用混合溶液做進(jìn)樣精密度（n=5），RSD分別為3.1%、5.9%、2.8%、1.4%、2.8%、3.7%。

取四物湯供試品粉末和溶液，分別加入Cr 1.0 μg/g、5.0 μg/g、10.0 μg/g，As 0.1 μg/g、0.5 μg/g、1.0 μg/g，Cd 0.1 μg/g、0.2 μg/g、0.5 μg/g，Cu 5.0 μg/g、10.0 μg/g、20.0 μg/g，Pb 0.5 μg/g、2.0 μg/g、5.0 μg/g 和Hg 0.05 μg/g、0.10 μg/g、0.20 μg/g 3 個(gè) 梯 度 濃 度 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照樣品處理過程進(jìn)行處理、測定，平均回收率分別為Cr 104.5%、As 92.0%、Cd 88.0%、Cu 105.5%、Pb 94.5%、Hg 95.5%。

數(shù)據(jù)顯示，該方法準(zhǔn)確度和精密度較高，可用于檢測中藥材中金屬元素含量。

2.2 樣品中重金屬元素及砷含量

同時(shí)測定藥粉和煎煮液樣品中Pb、Cd、As、Cr、Hg、Cu 等元素的含量，每個(gè)樣品平行測定2 次，并計(jì)算元素轉(zhuǎn)移率，結(jié)果見表1。

表1 藥材樣品和煎煮液中重金屬及砷含量與轉(zhuǎn)移率

2020 版《中華人民共和國藥典》中藥材Pb、Cd、As、Hg、Cu 的限量標(biāo)準(zhǔn)分別為5 μg/g、1 μg/g、2 μg/g、0.1 μg/g 和20 μg/g，Cr 在加拿大藥材相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中的限量為20 μg/g[12]。由分析結(jié)果可知，三個(gè)湯劑藥材中的重金屬與砷含量全部合格，尤其是Pb 低于標(biāo)準(zhǔn)限量的1/10，反映了現(xiàn)今對(duì)中藥材重金屬污染的治理效果明顯。

采用一級(jí)評(píng)估方式和暴露評(píng)估[13]對(duì)安全性進(jìn)行探討，以每天一副中藥（200 g 藥材/副）來計(jì)算，不考慮轉(zhuǎn)移率，連服藥7 d 或者30 d，按所測得的最高含量值參照以上標(biāo)準(zhǔn)得到表2 最大暴露量數(shù)據(jù)。

表2 標(biāo)準(zhǔn)與最大暴露評(píng)估比較

由表2 可以看出，除了Cr、Cd 超過標(biāo)準(zhǔn)，其余均在安全范圍。美國國家衛(wèi)生基金會(huì)（NSF）認(rèn)為，補(bǔ)充物質(zhì)攝入量不超過最大耐受量的10%不會(huì)引起健康風(fēng)險(xiǎn)，中藥不是每天必需品，由表1 可以看出，Cr、As、Cd、Pb、Hg、Cu 的t 值分別為 4.81%～18.56%、4.46%～25.35%、7.08%～9.93%、8.54%～15.26%、2.96%～4.58%、11.60%～13.91%，實(shí)際用藥中要綜合考慮藥材重金屬平均含量和轉(zhuǎn)移率，Cr 和As 也要考慮價(jià)態(tài)和形態(tài)。因此，評(píng)估得到服用中藥湯劑重金屬和砷的風(fēng)險(xiǎn)較小。

3 結(jié)論

本文選取臨床高頻應(yīng)用的四君子湯、四物湯、血府逐瘀湯，研究其藥材中重金屬元素及砷的含量及轉(zhuǎn)移率，評(píng)估其安全風(fēng)險(xiǎn)，發(fā)現(xiàn)血府逐瘀湯煎煮液中元素Cr 的含量相對(duì)較高，除四君子湯中元素As的轉(zhuǎn)移率為25.35%，其余測定元素的轉(zhuǎn)移率均低于20%。整體上服用中藥湯劑時(shí)重金屬和砷的健康風(fēng)險(xiǎn)較小。