嚴(yán)詩(shī)云（通信作者），吳靜標(biāo)，韓芝斌，姚燕麗，曹春玲，黃燕虹

廣東省醫(yī)療器械質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所 （廣東廣州 510663）

尿酸是嘌呤堿基的代謝產(chǎn)物，大部分從腎臟排泄。尿酸升高的主要危害是引起痛風(fēng)，同時(shí)是心血管疾病的危險(xiǎn)因素。血清中尿酸的檢測(cè)，是腎功能及心血管疾病檢查的重要項(xiàng)目。尿酸的測(cè)定方法主要包括磷鎢酸法、尿酸酶法、高效液相色譜-質(zhì)譜法。目前，臨床實(shí)驗(yàn)室主要采用靈敏度、特異度和準(zhǔn)確性均較高，且操作較為簡(jiǎn)單的尿酸酶法[1]。但需注意的是，在實(shí)際檢測(cè)過(guò)程中由于受到多種因素的影響，可能會(huì)導(dǎo)致出現(xiàn)誤差。為減少檢測(cè)誤差，獲得更精準(zhǔn)且客觀的數(shù)據(jù)，應(yīng)嚴(yán)格控制全自動(dòng)生化分析儀的檢測(cè)過(guò)程，加強(qiáng)質(zhì)量管理，以有效提高儀器的精密度及檢測(cè)質(zhì)量[2]。Westgard 多規(guī)則法結(jié)合Levey-Jennings 質(zhì)控圖的質(zhì)控方法，可以確定誤差類型、誤差率且假失控率更低，在臨床實(shí)驗(yàn)室被廣泛應(yīng)用[3-9]。

為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，本研究根據(jù)《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》[10]，對(duì)日立7180、貝克曼AU680 兩套生化檢測(cè)系統(tǒng)[11]測(cè)定尿酸含量的精密度和準(zhǔn)確度結(jié)果進(jìn)行分析，通過(guò)質(zhì)控圖聯(lián)合Westgard 多規(guī)則法分析評(píng)價(jià)2 套檢測(cè)系統(tǒng)的內(nèi)部質(zhì)控結(jié)果，旨在將該方法應(yīng)用于日常質(zhì)量控制，以降低生化檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)誤差，提高檢測(cè)質(zhì)量，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料

1.1 儀器

日立7180 型全自動(dòng)生化分析儀、貝克曼AU680 型全自動(dòng)生化分析儀、MixMax 漩渦混勻器、可調(diào)移液器（100～1000 μl）、反滲透+EDI 純水系統(tǒng)。

1.2 試劑和樣本

試劑A：廣州科方生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)的尿酸測(cè)定試劑盒（尿酸酶法）（批號(hào)：210108）及配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

試劑B：貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（蘇州）有限公司生產(chǎn)的尿酸測(cè)定試劑盒（尿酸酶-過(guò)氧化物酶法）（批號(hào)：AUZ8902）及配套校準(zhǔn)品和質(zhì)控品。

質(zhì)控樣本：英國(guó)朗道實(shí)驗(yàn)診斷有限公司生產(chǎn)的人基質(zhì)定值生化質(zhì)控血清水平2（批號(hào)：1326UN，標(biāo)示濃度為：340 μmol/L）、水平3（批號(hào)：1005UE，標(biāo)示濃度為：560 μmol/L）。

A 檢測(cè)系統(tǒng)：試劑A、日立7180 型全自動(dòng)生化分析儀。

B 檢測(cè)系統(tǒng)：試劑B、貝克曼AU680 型全自動(dòng)生化分析儀。

2 方法及結(jié)果

2.1 精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn)

將人基質(zhì)定值生化質(zhì)控血清水平2、水平3 按說(shuō)明書(shū)要求充分溶解后，使用A 和B 檢測(cè)系統(tǒng)分別重復(fù)檢測(cè)10 次，計(jì)算日內(nèi)精密度，連續(xù)檢測(cè)20 d，計(jì)算日間精密度。并計(jì)算測(cè)定濃度與標(biāo)示濃度相對(duì)偏差，得到準(zhǔn)確度結(jié)果。見(jiàn)表1。

表1 A 與B 檢測(cè)系統(tǒng)尿酸的準(zhǔn)確度偏差及精密度比較

結(jié)果顯示，A 與B 檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定2 個(gè)水平質(zhì)控血清的精密度和準(zhǔn)確度偏差均達(dá)到行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1207-2013[12]批內(nèi)精密度和準(zhǔn)確度的相關(guān)要求，且質(zhì)控血清的日內(nèi)和日間精密度結(jié)果均＜1%，A 檢測(cè)系統(tǒng)的水平3 質(zhì)控血清準(zhǔn)確度相對(duì)偏差較B 檢測(cè)系統(tǒng)小，結(jié)果更接近靶值。

2.2 繪制Levey-Jennings 質(zhì)控圖

計(jì)算A 與B 檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定水平2、水平3 的日內(nèi)10 次重復(fù)測(cè)試結(jié)果均數(shù)（M），用于統(tǒng)計(jì)20 d 日間試驗(yàn)結(jié)果的均數(shù)（M）和標(biāo)準(zhǔn)差（SD），進(jìn)而以“d”（組號(hào)）為橫坐標(biāo)，測(cè)定濃度為縱坐標(biāo)，M 為靶值，M±2SD 為警戒限，M±3SD 為失控限，運(yùn)用Excel 軟件繪制Levey-Jennings 質(zhì)控圖，見(jiàn)圖1～4。

圖1 A 檢測(cè)系統(tǒng)水平2 質(zhì)控血清Levey-Jennings 質(zhì)控圖

圖2 A 檢測(cè)系統(tǒng)水平3 質(zhì)控血清Levey-Jennings 質(zhì)控圖

圖3 B 檢測(cè)系統(tǒng)水平2 質(zhì)控血清Levey-Jennings 質(zhì)控圖

圖4 B 檢測(cè)系統(tǒng)水平3 質(zhì)控血清Levey-Jennings 質(zhì)控圖

2.3 繪制Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖

將不同水平的質(zhì)控測(cè)定值轉(zhuǎn)換為Z 分?jǐn)?shù)形式（公式1），繪制在單個(gè)質(zhì)控圖上進(jìn)行比較，可以直觀地反映實(shí)驗(yàn)的系統(tǒng)誤差與隨機(jī)誤差[13]，見(jiàn)圖5 ～6。

圖6 B 檢測(cè)系統(tǒng)水平2 和水平3 質(zhì)控血清Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖

式中xi為第i 次測(cè)定值，M 為所有測(cè)定值的均數(shù)，SD 為所有測(cè)定值的標(biāo)準(zhǔn)差。

2.4 確定質(zhì)量控制規(guī)則

Levey-Jennings 質(zhì)控圖、Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖均結(jié)合Westgard 多規(guī)則理論的質(zhì)控規(guī)則，確定6 條規(guī)則，即12S、13S、22S、R4S、41S、10X。（1）合格：所有質(zhì)控樣品的濃度測(cè)定值均在M±2SD 范圍內(nèi)，或|Z|＜2；（2）警告：12S表示有1 個(gè)質(zhì)控樣品測(cè)定值超過(guò)M±2SD，或出現(xiàn)1 次2 ＜|Z|＜3；（3）失控：13S表示有1 個(gè)質(zhì)控樣品測(cè)定值超過(guò)M±3SD 或出現(xiàn)1 次|Z|＞3；22S表示有2 個(gè)連續(xù)質(zhì)控樣品測(cè)定值超過(guò)M±2SD 或連續(xù)2 次出現(xiàn)2 ＜|Z|＜3；R4S表示相鄰2 個(gè)質(zhì)控樣品測(cè)定值超過(guò)4SD，即一個(gè)質(zhì)控超過(guò)M+2SD，另一個(gè)質(zhì)控超過(guò)M-2SD，或連續(xù)2 次Z 之間差值＞4；41S表示4 個(gè)連續(xù)質(zhì)控樣品測(cè)定值同時(shí)超過(guò)M±SD，或連續(xù)4次|Z|＞1；10x表示連續(xù)10個(gè)質(zhì)控樣品測(cè)定值在M 同側(cè)，或連續(xù)10 次Z＞0[6]。

2.5 結(jié)果分析

日立7180 檢測(cè)水平2 的20 組結(jié)果濃度范圍為332.8～341.7 μmol/L，水平3 的20 組結(jié)果濃度范圍為558.9～573.1 μmol/L；貝克曼AU680 檢測(cè)水平2 的20 組結(jié)果濃度范圍為346.5～357.9 μmol/L，水平3 的20 組結(jié)果濃度范圍為586.2～599.2 μmol/L。

由Levey-Jennings 質(zhì)控圖可知，2 套系統(tǒng)水平2、水平3 的測(cè)定值均未超過(guò)失控限3SD。結(jié)合Westgard 多規(guī)則法分析，日立7180 檢測(cè)的20 組結(jié)果，水平2 和水平3 分別有9 個(gè)和11 個(gè)結(jié)果低于靶值，11 個(gè)和9 個(gè)結(jié)果高于靶值，水平2 第20 組結(jié)果為332.80 μmol/L，超 出M-2SD（332.81 μmol/L），提示警告1 次。貝克曼AU680 檢測(cè)的20 組結(jié)果中，水平2 和水平3 分別有11 個(gè)和8 個(gè)低于靶值，9 個(gè)和12 個(gè)高于靶值，水平2 和水平3 第17 組的結(jié)果分別為357.89 μmol/L 和599.20 μmol/L，超出M+2SD（357.84 μmol/L 和598.96 μmol/L），分別提示警告1 次；水平3 第10 組至第20 組連續(xù)11 組結(jié)果在M同側(cè)，均高于M，違反10X規(guī)則，提示失控1 次。

分析Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖，日立7180 檢測(cè)水平2 質(zhì)控血清的第20 組結(jié)果|Z|=2.003，違反12s 規(guī)則，提出警告1 次，檢測(cè)水平3 質(zhì)控血清，所有組的|Z|值均＜2。貝克曼AU680 檢測(cè)水平2、水平3 質(zhì)控血清的第17 組結(jié)果均出現(xiàn)2＜|Z|＜3，分別為2.01 和2.07，均違反12s 規(guī)則，提出警告1 次，水平3 第10 組至第20 組，連續(xù)11 次Z＞0，違反10x規(guī)則，提示失控1 次，此結(jié)果與Levey-Jennings 質(zhì)控圖結(jié)果一致。

3 討論

本研究通過(guò)2 套系統(tǒng)分別檢測(cè)同一組質(zhì)控品，計(jì)算精密度和準(zhǔn)確度，結(jié)果顯示，精密度結(jié)果較為一致，均在1%以內(nèi)，準(zhǔn)確度偏差亦滿足行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)YY/T 1207-2013《尿酸測(cè)定試劑盒（尿酸酶過(guò)氧化物酶偶聯(lián)法）》[12]的規(guī)定，兩套系統(tǒng)均能滿足日常進(jìn)行試劑盒性能檢測(cè)的要求。

同時(shí)本研究進(jìn)行2 套系統(tǒng)的尿酸含量檢測(cè)，并繪制Levey-Jennings 質(zhì)控圖及Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖，結(jié)合Westgard 多規(guī)則理論分析2 套系統(tǒng)內(nèi)部質(zhì)控結(jié)果，觀察是否出現(xiàn)失控情況，并分析造成失控原因，提出解決方案。日立7180 檢測(cè)水平3 的結(jié)果均為合格，水平2 的結(jié)果提出1 次警告，貝克曼AU680水平2結(jié)果提出1次警告，水平3結(jié)果提出1次警告及1 次失控，失控類型為違反10x 規(guī)則，即從第10～20 天的結(jié)果連續(xù)11 組均高于平均值。當(dāng)出現(xiàn)結(jié)果失控時(shí)，及時(shí)查找失控原因并排除誤差，分析可能存在的影響因素并及時(shí)糾正，以保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[3]。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室的具體情況分析出現(xiàn)失控結(jié)果的原因，主要是因?yàn)? 套系統(tǒng)檢測(cè)的是同一份樣本，且先進(jìn)行的是日立7180 的檢測(cè)，等待檢測(cè)及轉(zhuǎn)移樣本的過(guò)程，導(dǎo)致AU680 樣本檢測(cè)時(shí)已放置的時(shí)間較長(zhǎng)。另外，由于貝克曼AU680 不能設(shè)置檢測(cè)重復(fù)次數(shù)，且為保證樣本的可重復(fù)性，未將樣本分裝至多個(gè)樣本杯，實(shí)驗(yàn)過(guò)程為反復(fù)進(jìn)行10 次單次檢測(cè)，吸樣等待過(guò)程也會(huì)導(dǎo)致液體蒸發(fā)造成濃度偏高，即樣本放置溫度導(dǎo)致的系統(tǒng)誤差。針對(duì)該原因，實(shí)驗(yàn)室完善了實(shí)驗(yàn)過(guò)程操作規(guī)程，規(guī)定樣本復(fù)溫后的檢測(cè)時(shí)間，并對(duì)操作人員進(jìn)行相關(guān)培訓(xùn)，以減少該類失控情況的發(fā)生。

Levey-Jennings 質(zhì)控圖和Z- 分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖與Westgard 多規(guī)則法的聯(lián)合，可以降低假失控率和假報(bào)警率，其13s 和R4s 規(guī)則能夠敏銳發(fā)現(xiàn)隨機(jī)誤差，22s、41s 和10x 規(guī)則能夠準(zhǔn)確判斷系統(tǒng)誤差，從而提高誤差檢出能力[5]，呈現(xiàn)內(nèi)部質(zhì)控的準(zhǔn)確性。由于本次實(shí)驗(yàn)使用的是不同廠家的試劑盒，試劑盒的溯源過(guò)程及參考區(qū)間存在差異，未能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性進(jìn)行評(píng)價(jià)，在未來(lái)的研究中將考慮使用同一廠家的試劑盒在不同儀器上進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)合一致性結(jié)果和質(zhì)控方法，來(lái)評(píng)價(jià)儀器的性能差別，為實(shí)驗(yàn)室間比對(duì)及監(jiān)督抽驗(yàn)結(jié)果的判定提供參考。

綜上所述，Levey-Jennings 質(zhì)控圖和Z-分?jǐn)?shù)質(zhì)控圖聯(lián)合Westgard 多規(guī)則法是使用較多的室內(nèi)質(zhì)控方法，能及時(shí)發(fā)現(xiàn)失控結(jié)果，并及時(shí)提出解決措施，對(duì)于提高檢測(cè)結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確性具有重要意義。日常進(jìn)行尿酸檢測(cè)時(shí)，可以聯(lián)合使用質(zhì)控圖與Westgard 多規(guī)則法，以提高檢驗(yàn)結(jié)果質(zhì)量[14]。