喬梁

慢性乙型肝炎(CHB)是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的慢性進(jìn)展性疾病,部分患者可演變?yōu)楦斡不⒏嗡ソ呋蚋渭?xì)胞癌等[1]。藥物是治療慢性乙型肝炎的主要手段,但效果并不理想,相關(guān)研究[2-3]發(fā)現(xiàn),治療效果與藥物對HBV清除能力、機(jī)體免疫應(yīng)答能力有關(guān)。HBV侵襲后,機(jī)體會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞及體液免疫應(yīng)答,其強(qiáng)度、范圍、性質(zhì)決定了HBV感染后病毒的消長及病變程度。細(xì)胞因子由細(xì)胞分泌,是具有生物活性的小分子蛋白質(zhì),可介導(dǎo)多種免疫細(xì)胞間的相互作用。白細(xì)胞介素-17(IL-17)是γδT細(xì)胞、Th17細(xì)胞重要效應(yīng)因子,具有較強(qiáng)的促炎作用[4]。研究[5-6]指出,在慢性HBV感染中,機(jī)體會(huì)出現(xiàn)輔助性T細(xì)胞(Th17)/調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)失衡現(xiàn)象,且以Th17升高為主,而Th17及其IL-17A、白細(xì)胞介素-23(IL-23)等效應(yīng)分子高表達(dá)可促進(jìn)肝臟炎性反應(yīng)發(fā)生發(fā)展,且與肝纖維化有關(guān)。DNA檢測雖能了解病情變化,但定量檢測復(fù)雜且費(fèi)用較高,而血清檢測具有快捷、低廉等優(yōu)勢,了解IL-17、IL-23水平變化有助于評估病情。本研究主要探討慢性乙型肝炎患者外周血IL-17、IL-23水平與乙肝病毒脫氧核糖核酸(HBV-DNA)的關(guān)系,為臨床早期預(yù)測乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性提供參考?，F(xiàn)分析如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn),選取我院2020年1月—2022年12月收治的99例慢性乙型肝炎患者為研究對象,根據(jù)入院時(shí)HBV-DNA水平分為陰性組(HBV-DNA<1×102IU/mL,36例)、低載量組(1×102IU/mL≤HBV-DNA≤1×104IU/mL,28例)、中載量組(1×105IU/mL≤HBV-DNA≤106IU/mL,22例)、高載量組(HBV-DNA>1×107IU/mL,13例),4組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 4組一般資料比較

1.2 選例標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn):(1)符合慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[7];(2)乙肝病毒標(biāo)志物結(jié)果呈陽性;(3)心肺等其他臟器功能正常;精神功能正常。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)藥物性、酒精性、其他病毒性肝炎;(2)妊娠與哺乳期女性;(3)自身免疫性肝炎;(4)血液系統(tǒng)疾病;(5)臨床資料不全;(6)惡性腫瘤。

1.3 方法 采集患者入院時(shí)肘靜脈血液約5 mL,離心分離,3 000 r/min,半徑8 cm,時(shí)間10 min,取血清,使用西門子ADVIA2400型全自動(dòng)生化分析儀測定肝功能指標(biāo),包括丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)水平,使用酶聯(lián)免疫吸附法測定IL-17、IL-23水平;使用美國ABI-7300 PCR分析儀、采用熒光定量PCR法測定HBV-DNA水平。

1.4 觀察指標(biāo) (1)比較4組入院時(shí)外周血IL-17、IL-23水平。(2)比較4組入院時(shí)肝功能指標(biāo)。(3)分析IL-17、IL-23與肝功能指標(biāo)、HBV-DNA水平的相關(guān)性。(4)偏回歸分析慢性乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性的影響因素。(5)分析IL-17、IL-23不同水平慢性乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性的危險(xiǎn)度。

2 結(jié)果

2.1 4組外周血IL-17、IL-23水平比較 4組外周血IL-17、IL-23水平比較,高載量組>中載量組>低載量組>陰性組,組間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 4組外周血IL-17、IL-23水平比較

2.2 4組肝功能指標(biāo)比較 4組AST、ALT、GGT、ALP水平比較,高載量組>中載量組>低載量組>陰性組,組間比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 4組肝功能指標(biāo)比較

2.3 相關(guān)性分析 入院時(shí)外周血IL-17、IL-23水平與AST、ALT、GGT、ALP、HBV-DNA水平均呈正相關(guān)(P<0.05)。見表4。

表4 相關(guān)性分析

2.4 偏回歸分析 以慢性乙型肝炎患者HBV-DNA檢測是否呈陽性為因變量,將患者入院時(shí)外周血IL-17、IL-23水平作為自變量,對自變量進(jìn)行賦值(以99例的平均值為界:≤平均值=1,>平均值=2,IL-17(≤265.42 pg/mL=1,>265.42 pg/mL=2);IL-23(≤111.45 pg/mL=1,>111.45 pg/mL=2)。Logistic回歸分析顯示,外周血IL-17(>265.42 pg/mL)、IL-23(>111.45 pg/mL)水平是慢性乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表5。

表5 偏回歸分析

2.5 危險(xiǎn)度分析 以入院時(shí)外周血IL-17、IL-23水平的平均值為界,將慢性乙型肝炎患者分為高水平、低水平,結(jié)果顯示入院時(shí)外周血IL-17、IL-23高水平患者HBV-DNA呈陽的危險(xiǎn)度是低水平的1.651、2.255倍(P<0.05)。見表6。

表6 危險(xiǎn)度分析

3 討論

慢性乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展及轉(zhuǎn)歸與機(jī)體的細(xì)胞免疫功能密切相關(guān),宿主免疫功能紊亂是慢性乙型肝炎HBV持續(xù)感染患者肝組織損傷的關(guān)鍵,免疫異常與細(xì)胞因子及其網(wǎng)絡(luò)有關(guān),細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)由致炎、抗炎因子構(gòu)成,兩者過度表達(dá)所引起的炎性過程即慢性乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展過程[8-11]。因此,積極了解慢性乙型肝炎患者HBV感染情況及免疫細(xì)胞因子水平,對臨床早期預(yù)測具有重要作用。

IL-17主要由細(xì)胞分泌產(chǎn)生,是一種前炎癥細(xì)胞因子,與炎癥反應(yīng)密切相關(guān),其家族包括6個(gè)成員的配體、5個(gè)受體,其中發(fā)揮主要作用的為IL-17A,即IL-17。IL-17與多種炎性疾病緊密相關(guān),在慢性乙型肝炎患者外周血液中也能檢測到IL-17。陳誠等[12]研究發(fā)現(xiàn),慢性乙型肝炎患者高水平的血清IL-17通過抑制肝細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)育調(diào)節(jié)基因-1(DEL-1)表達(dá),能促進(jìn)HBV感染,引起肝組織損傷。本研究發(fā)現(xiàn),隨著慢性乙型肝炎患者HBV載量增加,其外周血IL-17水平顯著升高,且兩者呈正相關(guān)。IL-17A通過誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞募集,可促進(jìn)肝臟炎性反應(yīng)發(fā)生,而肝星狀細(xì)胞膜表面可高表達(dá)IL-17受體,IL-17A也能刺激肝臟庫普弗細(xì)胞分泌白細(xì)胞介素-6、白細(xì)胞介素-1β等細(xì)胞因子,進(jìn)一步激活肝星狀細(xì)胞,加重肝細(xì)胞炎性反應(yīng)、纖維化程度[13-16]。IL-17雖然能介導(dǎo)抗病毒反應(yīng)清除病毒,但也會(huì)引起干細(xì)胞損傷,加重病情,其主要與中性粒細(xì)胞趨化、參與炎性反應(yīng)、放大炎性反應(yīng)有關(guān)。另外,本研究還發(fā)現(xiàn),外周血IL-17>265.42 pg/mL是慢性乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性的危險(xiǎn)因素,故而積極監(jiān)測其水平變化對臨床早期預(yù)測、及早干預(yù)具有重要作用。

IL-23是機(jī)體重要的免疫調(diào)節(jié)因子,由活化的樹突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞等分泌,在炎性反應(yīng)中具有重要作用,可調(diào)節(jié)T淋巴、自然殺傷細(xì)胞的生長發(fā)育及作用[17]。有學(xué)者研究[18]發(fā)現(xiàn),在免疫清除期、再活動(dòng)期,慢性乙型肝炎患者IL-23表達(dá)水平均高于免疫控制期,故認(rèn)為在免疫激活狀態(tài)下,IL-23可能通過IL-23/IL-17軸作用于Th17細(xì)胞,從而參與機(jī)體免疫調(diào)節(jié),并認(rèn)為IL-23是造成Th17/Tregs比例失調(diào)的重要原因之一。在本研究中,隨著HBV-DNA載量增加,慢性乙型肝炎患者IL-23表達(dá)水平呈升高趨勢發(fā)展,且入院時(shí)外周血IL-23>111.45 pg/mL是慢性乙型肝炎患者HBV-DNA呈陽性的危險(xiǎn)因素,可見,IL-23表達(dá)水平與慢性乙型肝炎患者HBV-DNA載量緊密相關(guān)。HBx蛋白可誘導(dǎo)NF-kB活化,從而通過Erk-p65/p50信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)IL-23分泌,而IL-23可刺激慢性乙型肝炎HBV感染患者肝臟、外周血中Th17細(xì)胞分泌IL-17,加重病情[19-20]。

另外,本研究還發(fā)現(xiàn),入院時(shí)外周血IL-17、IL-23高水平患者HBV-DNA呈陽性的危險(xiǎn)度是低水平的1.651、2.255倍,說明,積極監(jiān)測慢性乙型肝炎HBV感染患者IL-17、IL-23水平變化,對預(yù)測HBV-DNA呈陽性具有重要作用。

綜上,慢性乙型肝炎外周血IL-17、IL-23呈異常表達(dá),且與HBV-DNA具有相關(guān)性,故而臨床可積極監(jiān)測其水平變化,以早期預(yù)測HBV-DNA呈陽性,更好地指導(dǎo)臨床干預(yù)。