哈斯高娃

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院老年醫(yī)學中心一區(qū),內(nèi)蒙古呼和浩特市 010059)

冠心病是冠狀動脈粥樣硬化導致血管閉塞或狹窄,進而造成心肌損傷、心肌收縮力下降、心輸出量不足等的常見心血管疾病,部分冠心病患者可并發(fā)心力衰竭[1]。冠心病是導致心力衰竭的常見原發(fā)病,心力衰竭又是冠心病的終末階段,可增加患者死亡風險。目前,心力衰竭的臨床治療手段以緩解患者臨床癥狀、控制病情進展為主[2],仍缺乏特效藥。因此,積極尋找影響冠心病患者并發(fā)心力衰竭的因素,對指導臨床早期干預意義重大。研究顯示,不同程度的動脈粥樣硬化患者發(fā)生心腦血管并發(fā)癥的概率不盡相同,可能與多基因變異影響血栓形成、血脂代謝、血管收縮和舒張等過程有關(guān)[3]。CD40是腫瘤壞死因子超家族成員,其基因位于20號染色體,由8個內(nèi)含子和9個外顯子組成,參與動脈粥樣硬化的發(fā)展,與心血管疾病的發(fā)生有關(guān)[4]。但關(guān)于CD40基因多態(tài)性與冠心病患者并發(fā)心力衰竭的關(guān)系,目前鮮有研究報告。鑒于此,本研究分析CD40基因多態(tài)性與冠心病患者并發(fā)心力衰竭的關(guān)系,以期為預防冠心病患者并發(fā)心力衰竭提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2019年5月至2021年11月內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院收治的189例冠心病患者作為研究對象。納入標準:(1)符合冠心病的診斷標準[5];(2)無心房顫動、早搏等心律失常。排除標準:(1)合并認知功能障礙、精神疾病者;(2)合并嚴重肝、腎功能不全及自身免疫性疾病者;(3)合并惡性腫瘤、心肌炎、風濕性心臟病及其他類型心臟病者;(4)非冠心病引起的心力衰竭者;(5)合并感染、慢性炎癥,以及近3個月使用過糖皮質(zhì)激素者。189例冠心病患者中,男性103例、女性86例,年齡37～72(54.63±11.13)歲,體質(zhì)指數(shù)18.30～33.40(25.46±4.32)kg/m2,冠心病類型為隱匿型冠心病63例、心肌梗死70例、心絞痛56例,合并高血壓、高脂血癥各75例、59例,有吸煙史94例,有飲酒史98例。本研究經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學附屬醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準,所有研究對象均對本研究知情同意。

1.2 CD40基因多態(tài)性分析 抽取患者治療前的空腹靜脈血5 mL,置于乙二胺四乙酸抗凝管,使用Blood Genome DNA Extraction試劑盒(TaKaRa公司,批號:L001752A)提取外周血基因組DNA,操作步驟嚴格按照試劑盒說明進行。通過熒光分光光度法檢測280 nm、260 nm紫外線處的A值,當A260/A280為1.8～2.0時,表明DNA純度較好,可用于后續(xù)基因型的鑒定。另采用瓊脂糖凝膠電泳法檢測基因DNA的完整性。由上海捷瑞生物技術(shù)公司設計并合成引物,CD40基因上游引物序列為5′-CCTCTTCCCCGCCCTCTTCC-3′,下游引物序列為5′-GAAACTCCTGCGCGGTGAAT-3′。擴增體系包括2.0 μL DNA模板(濃度為100 ng/μL)、0.5 μL上游引物(濃度為20 μmoL/L)、0.5 μL下游引物(濃度為20 μmoL/L),12.5 μL脫氧核苷三磷酸預混液(濃度為2.5 mmoL/L),加入滅菌雙蒸水將總體系補充至25 μL。PCR反應條件:94 ℃預變性3 min; 94 ℃變性30 s, 53 ℃退火45 s, 72 ℃延伸45 s,共30個循環(huán);72 ℃末端延伸5 min。PCR產(chǎn)物的酶切反應:取10 μL PCR擴增產(chǎn)物,加入6 U限制性內(nèi)切酶NcoⅠ(TaKaRa公司)進行酶切,37 ℃反應6 h,加入2 μL 10×Loading Buffer終止反應。用溴化乙啶對酶切產(chǎn)物進行染色,3%瓊脂糖凝膠電泳1 h,最后利用紫外可見光分析裝置(HITACHI公司,型號:U-2000型)觀察電泳條帶,判斷基因型。

1.3 心力衰竭的判斷標準 于患者入院后,參照《中國心力衰竭診斷和治療指南2018》[6]判斷患者是否并發(fā)心力衰竭,據(jù)此將其分為并發(fā)組(53例)和未并發(fā)組(136例)。

1.4 一般資料的收集 收集冠心病患者的一般資料,包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、高血壓情況、高脂血癥情況、冠心病類型、吸煙史(連續(xù)或累積吸煙1年以上,平均≥1支/d)、飲酒史(連續(xù)或累積飲用啤酒、黃酒、白酒或葡萄酒等1年以上,飲酒量女性>140 g/周、男性>280 g/周)、入院時心率、入院時冠狀動脈Gensini評分[7]、入院時左心室射血分數(shù)(left ventricular ejection fraction,LVEF)。

1.5 統(tǒng)計學分析 采用SPSS 18.0軟件進行統(tǒng)計學分析。計量資料以(x±s)表示,組間比較采用兩獨立樣本t檢驗;計數(shù)資料以例數(shù)(百分比)表示,組間比較采用χ2檢驗;采用Hardy-Weinberg遺傳定律檢驗兩組基因型是否處于遺傳平衡狀態(tài);采用多因素Logistic回歸模型分析冠心病患者并發(fā)心力衰竭的影響因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 遺傳平衡檢驗結(jié)果 并發(fā)組、未并發(fā)組CD40基因的基因型實際值與理論值差異無統(tǒng)計學意義(χ2=5.069,P=0.079;χ2=1.427,P=0.490),提示基因多態(tài)性分布均處于遺傳平衡狀態(tài),具有群體代表性。

2.2 兩組CD40基因的基因型頻率和等位基因頻率的比較 兩組CD40基因的基因型頻率、等位基因頻率比較,差異均有統(tǒng)計學意義(均P<0.05),其中并發(fā)組CD40基因的CC基因型頻率和C等位基因頻率均高于未并發(fā)組。見表1。

表1 兩組CD40基因的基因型頻率和等位基因頻率的比較[n(%)]

2.3 兩組患者一般資料的比較 并發(fā)組中年齡≥60歲患者比例、心肌梗死患者比例、患者入院時冠狀動脈Gensini評分、入院時LVEF<35%患者比例均高于未并發(fā)組(均P<0.05),見表2。

表2 兩組患者一般資料的比較

2.4 CD40基因多態(tài)性與冠心病患者并發(fā)心力衰竭的關(guān)系 將冠心病患者是否并發(fā)心力衰竭作為因變量(未并發(fā)=0,并發(fā)=1),將冠心病患者的一般資料、CD40基因的基因型作為自變量(變量賦值情況見表3),進行多因素Logistic回歸分析。結(jié)果顯示,校正混雜因素后,CD40基因的基因型是冠心病患者并發(fā)心力衰竭的影響因素(P<0.05),相較于CD40基因TT基因型,攜帶CD40基因CC基因型的冠心病患者并發(fā)心力衰竭的風險增加。見表4。

表3 變量賦值情況

3 結(jié) 論

冠心病是常見的心血管疾病,多見于老年人群,近年來其發(fā)病率呈上升趨勢[8]。流行病學調(diào)查顯示,我國成人的心力衰竭發(fā)病率約為0.9%,其隨著我國人口老齡化的加劇呈上升趨勢[9]。心力衰竭作為各種心臟疾病的終末階段,致死率高,嚴重影響人們的身體健康和生活質(zhì)量[10]。有研究顯示,冠心病患者心力衰竭的發(fā)生與年齡、吸煙、肥胖、飲酒、炎癥反應及遺傳等多種因素有關(guān)[11-12]。有學者指出,CD40作為炎癥因子,以無活性的狀態(tài)存在于血小板,與斑塊穩(wěn)定性和心血管事件發(fā)生風險有關(guān)[13]。CD40主要表達于B淋巴細胞,具有促進記憶性B淋巴細胞分化的作用,并且可以通過活化B淋巴細胞來促進抗體的產(chǎn)生,進而使抗體與自身抗原形成復合物,參與心血管疾病的發(fā)生、發(fā)展過程[14]。研究顯示,CD40與斑塊穩(wěn)定性密切相關(guān),在動脈粥樣硬化斑塊中廣泛表達,并介導炎癥反應[15-16]。故本研究探討CD40基因多態(tài)性與冠心病患者并發(fā)心力衰竭的關(guān)系,以期指導臨床工作。

本研究結(jié)果顯示,并發(fā)組CD40基因的CC基因型頻率和C等位基因頻率均高于未并發(fā)組,校正混雜因素后CD40基因的基因型是冠心病患者并發(fā)心力衰竭的影響因素(均P<0.05),說明CD40基因可能參與冠心病患者并發(fā)心力衰竭的過程,相較于TT基因型,CC基因型可增加冠心病患者并發(fā)心力衰竭的風險。有研究顯示,攜帶C等位基因的個體的CD40基因轉(zhuǎn)錄效率比攜帶T等位基因的個體高15%～32%,表明C等位基因可以促進CD40基因的表達[17]。而CD40基因過度激活會導致自身免疫性疾病或慢性炎癥性疾病患者促炎性細胞因子異常表達,誘發(fā)急性炎癥反應,影響動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性,加重心臟血管狹窄、堵塞情況,從而加重心肌細胞的缺血、缺氧,導致心肌細胞損傷、壞死,心肌收縮力減弱,心室泵血和充盈功能下降,進而增加患者發(fā)生心力衰竭的風險[18]。

綜上所述,CD40基因多態(tài)性與冠心病患者并發(fā)心力衰竭有關(guān),其中攜帶CC基因型可增加冠心病患者并發(fā)心力衰竭的風險。因此,臨床應對攜帶上述基因型的冠心病患者給予高度關(guān)注,及時制訂相關(guān)干預措施以預防心力衰竭的發(fā)生。