翟弋焱,陳美琳,王 偉,時(shí) 銳,黃佳奇,張景媛,張繁芹,吳嘉瑞#

(1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院,北京 100029; 2.魯南制藥集團(tuán)股份有限公司中藥共性技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,山東 臨沂 276000)

盆腔炎性疾病(pelvic inflammatory disease,PID)是女性?xún)?nèi)生殖器及其周?chē)Y(jié)締組織、盆腔腹膜發(fā)生的炎癥病變,該病是一類(lèi)婦科常見(jiàn)病,主要包括盆腔腹膜炎、子宮內(nèi)膜炎和輸卵管炎等[1]。PID具有發(fā)病率高、病程長(zhǎng)和病情反復(fù)等特點(diǎn)。相關(guān)研究結(jié)果表明,在一些發(fā)展中國(guó)家PID的發(fā)病率高達(dá)40%,嚴(yán)重影響了女性的身心健康,降低其生活質(zhì)量[2]。倘若未能及時(shí)治療,則可能引起PID后遺癥或并發(fā)癥。PID后遺癥過(guò)去多稱(chēng)為慢性盆腔炎,美國(guó)疾病預(yù)防控制中心(CDC)認(rèn)為慢性盆腔炎實(shí)際上又是一次新的盆腔炎發(fā)作。多數(shù)學(xué)者及文獻(xiàn)中也已摒棄了這個(gè)術(shù)語(yǔ),改為PID的后遺癥(SPID)[3]。根據(jù)臨床診斷,SPID大致分為近期與遠(yuǎn)期2種,近期包括輸卵管卵巢膿腫、肝周?chē)椎?甚至可以導(dǎo)致死亡;遠(yuǎn)期后遺癥包括不孕癥、慢性盆腔結(jié)締組織炎、異位妊娠和PID反復(fù)發(fā)作等[4-5]。

西醫(yī)對(duì)PID的治療采用抗菌藥物、手術(shù)治療和理療(激光療法、微波療法)為主。在治療中,一方面普遍存在抗菌藥物濫用的情況,使患者承擔(dān)藥品不良反應(yīng)和昂貴的醫(yī)療費(fèi)用;另一方面,治療療程較短,容易造成PID反復(fù)發(fā)作[6]。由于PID急性期的臨床表現(xiàn)多以發(fā)熱、腹痛和帶下為主,SPID的臨床表現(xiàn)多以帶下過(guò)多、月經(jīng)失調(diào)和不孕癥為主,與中醫(yī)古籍中論述的“癥瘕”“婦人腹痛”“帶下”“痛經(jīng)”和“月經(jīng)不調(diào)”等病證相似。中醫(yī)認(rèn)為,PID發(fā)病是由于經(jīng)期、產(chǎn)后,婦女正氣虛弱造成濕熱邪毒內(nèi)侵,正邪交鋒導(dǎo)致氣滯血瘀、濕熱壅盛、熱毒熾盛[7]。丹白顆粒是由紅藤敗醬湯和四物湯加減而成的中成藥顆粒制劑,主要針對(duì)PID瘀熱濕阻的發(fā)病機(jī)制,其由牡丹皮、大血藤、紫花地丁、三棱、莪術(shù)、敗醬草、川芎、白花蛇舌草、白英、土茯苓、墓頭回、椿皮、白芍和當(dāng)歸14味中藥組成,在臨床常被用于治療PID,但具體作用機(jī)制尚不明確,值得深入研究[8]。本研究主要使用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對(duì)接的方法對(duì)丹白顆粒治療PID的機(jī)制進(jìn)行探索。

1 資料與方法

1.1 丹白顆?；钚猿煞值暮Y選與靶點(diǎn)預(yù)測(cè)

在中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)(TCMSP, http: //tcmspw.com/)中,以“牡丹皮”“大血藤”“紫花地丁”“三棱”“莪術(shù)”“敗醬草”“川芎”“白花蛇舌草”“白英”“土茯苓”“墓頭回”“椿皮”“白芍”和“當(dāng)歸”為關(guān)鍵詞檢索化學(xué)成分。設(shè)置口服生物利用度(OB)≥30%、類(lèi)藥性(DL)≥0.18,檢索中國(guó)知網(wǎng)、PubMed等數(shù)據(jù)庫(kù),查詢(xún)丹白顆?；瘜W(xué)成分研究相關(guān)的文獻(xiàn)。最后結(jié)合二者結(jié)果使用Uniprot(https://www.uniprot.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢(xún)靶蛋白所對(duì)應(yīng)的基因名[9]。

1.2 PID相關(guān)靶點(diǎn)的篩選

使用DisGeNET與GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù),以關(guān)鍵詞“pelvic inflammatory disease”or“Sequelae of Pelvic Inflammatory Disease”檢索獲得盆腔炎相關(guān)基因,合并2個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)的結(jié)果為PID的相關(guān)靶點(diǎn)。

1.3 丹白顆?；瘜W(xué)成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

使用Cytoscape 3.8.2軟件構(gòu)建丹白顆?；瘜W(xué)成分與靶點(diǎn)的網(wǎng)絡(luò)圖。根據(jù)介數(shù)、緊密度和度值等參數(shù)篩選關(guān)鍵靶點(diǎn)。

1.4 蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用(PPI)網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建與模塊分析

對(duì)藥物靶點(diǎn)與疾病的靶點(diǎn)取交集,使用STRING(https://cn.string-db.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)分析得到PPI網(wǎng)絡(luò),將網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果使用Cytoscape軟件可視化,使用MCODE插件進(jìn)行模塊分析。

1.5 基因本體(GO)功能富集分析與京都基因與基因組百科全書(shū)(KEGG)通路富集分析

使用R軟件對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)中的基因進(jìn)行GO與KEGG分析。

1.6 分子對(duì)接

根據(jù)預(yù)測(cè)網(wǎng)絡(luò)結(jié)果找尋其相對(duì)應(yīng)的化合物,從PubChem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得化合物的SDF格式文件,通過(guò)RCSB PDB(https://www.rcsb.org/)數(shù)據(jù)庫(kù)篩選獲得蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。最后使用Autodock Vina 1.1.2進(jìn)行運(yùn)算對(duì)接。整理分析對(duì)接結(jié)果,根據(jù)結(jié)合能進(jìn)行升序排列,使用PyMol 2.3.2軟件進(jìn)行可視化處理。

2 結(jié)果

2.1 成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

成分靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖包括460個(gè)節(jié)點(diǎn),2 363條邊,其中70個(gè)化合物與377個(gè)靶點(diǎn)相關(guān)聯(lián),見(jiàn)圖1。

2.2 潛在靶點(diǎn)的PPI網(wǎng)絡(luò)圖

對(duì)化合物與疾病靶點(diǎn)取交集得到240個(gè)交集靶點(diǎn),繪制韋恩圖,見(jiàn)圖2。將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING網(wǎng)站進(jìn)行分析,使用Cytoscape軟件可視化PPI網(wǎng)絡(luò)圖,圖中有198個(gè)節(jié)點(diǎn),1 159條邊,見(jiàn)圖3。使用MCODE功能進(jìn)行模塊分析,見(jiàn)圖4。得分高的模塊意味著其中的靶點(diǎn)關(guān)系更密切,可能共同參與某種生物途徑。

2.3 GO功能富集與KEGG通路富集分析

對(duì)PPI網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行GO與KEGG富集分析。PPI網(wǎng)絡(luò)的分析得到186條KEGG通路和3 730條GO功能條目。在GO條目中包括3 324條生物過(guò)程相關(guān)條目、166條細(xì)胞成分和240條分子功能相關(guān)條目。P值最低的10條通路為癌癥通路、脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化通路、磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信號(hào)通路、人巨細(xì)胞病毒感染、乙型肝炎、癌癥中的蛋白多糖、卡波西肉瘤相關(guān)性皰疹病毒感染、化學(xué)致癌-受體激活信號(hào)通路、前列腺癌及血流剪切應(yīng)力與動(dòng)脈粥樣硬化,見(jiàn)圖5—6。

菱形代表化合物的靶點(diǎn);正六邊形代表藥物;圓形代表藥物的化學(xué)成分;A—H代表藥物的共有成分the rhombus represents the target of the compound; the hexagon represents the drug; the circle represents the chemical composition of the drug; and the A to H represents the common composition of the drug圖1 丹白顆粒的成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖Fig 1 Components-target network diagram of Danbai granules

圖2 丹白顆粒與PID的交集靶點(diǎn)圖Fig 2 Intersection target map of Danbai granules and pelvic inflammatory disease

每個(gè)節(jié)點(diǎn)的大小代表了其度值,顏色由淺到深代表了緊密中心由大到小the size of each node represents its degree value, and the color from light to dark represents the tight center from large to small圖3 丹白顆粒相關(guān)靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖Fig 3 PPI network diagram of related targets of Danbai granules

A.模塊一(score: 6.692);B.模塊二(score: 4.444);C.模塊三(score: 4.375)A. module 1 (score: 6.692); B. module 2 (score: 4.444); C. module 3 (score: 4.375)圖4 丹白顆粒治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的PPI網(wǎng)絡(luò)模塊Fig 4 PPI network module of Danbai granules in the treatment of rheumatoid arthritis

2.4 藥物-成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖

對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行參數(shù)篩選得到關(guān)鍵基因,分別為磷脂酰肌醇3激酶催化亞單位α異構(gòu)體(PIK3CA)、肉瘤基因(SRC)、腫瘤蛋白53(TP53)、熱休克蛋白90α(HSP90AA)、蛋白激酶B1(Akt1)、絲裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、絲裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、雌激素受體1(ESR1)、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)、v-rel 網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過(guò)多癥病毒癌基因同源物A(RELA)和白細(xì)胞介素6(IL-6)。對(duì)部分分析結(jié)果進(jìn)行展示(見(jiàn)圖7),得到藥物-成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖(見(jiàn)圖8)。

2.5 分子對(duì)接

使用AutoDockTools 1.5.6 軟件對(duì)關(guān)鍵靶點(diǎn)及其相對(duì)應(yīng)的化合物進(jìn)行分子對(duì)接。將部分對(duì)接結(jié)果進(jìn)行可視化,見(jiàn)圖9。一般來(lái)說(shuō),結(jié)合能越小,配體化合物與受體蛋白的結(jié)合效果越好。

圖5 丹白顆粒治療PID的PPI網(wǎng)絡(luò)模塊GO和KEGG富集分析結(jié)果Fig 5 Results of GO and KEGG enrichment analysis of Danbai granules in the treatment of PID PPI network module

圖6 丹白顆粒治療PID的PPI網(wǎng)絡(luò)GO和KEGG富集分析結(jié)果Fig 6 Results of GO and KEGG enrichment analysis of Danbai granules in the treatment of PID PPI network

五角星代表丹白顆粒的作用位點(diǎn)the pentagram represents the check point of Danbai granules圖7 丹白顆粒作用于PI3K-Akt信號(hào)通路示意圖Fig 7 Schematic diagram of Danbai granules acting on PI3K-Akt signaling pathway

橢圓形代表藥物,菱形代表關(guān)鍵化合物,V形代表關(guān)鍵靶點(diǎn),矩形代表通路;hsa05167(卡波西肉瘤相關(guān)皰疹病毒感染),hsa05161(乙肝通路),hsa05205(癌癥中的蛋白多糖),hsa05163(人巨細(xì)胞病毒感染),hsa05417(脂質(zhì)與動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路),hsa04668(TNF信號(hào)通路),hsa04625(C型凝集素受體信號(hào)通路信號(hào)通路),hsa05135(耶爾森氏菌感染信號(hào)通路),hsa05152(肺結(jié)核信號(hào)通路),hsa05166(人T細(xì)胞白血病病毒1型感染信號(hào)通路)oval represents drugs, rhombus represents key compounds, V represents key targets, and rectangles represent pathways. Hsa05167 (Kaposi sarcoma-associated herpesvirus infection), hsa05161 (hepatitis B pathway), hsa05205 (proteoglycans in cancer), hsa05163 (human cytomegalovirus infection), hsa05417 (lipids and atherosclerosis signaling pathway), hsa04668 (TNF signaling pathway), hsa04625 (C-type lectin receptor signaling pathway signaling pathway), hsa05135 (Yersinia infection signaling pathway), hsa05152 (pulmonary tuberculosis signaling pathway), hsa05166 (human T-cell leukemia virus type 1 infection signaling pathway)圖8 藥物-成分-靶點(diǎn)-通路網(wǎng)絡(luò)圖Fig 8 Drug-component-target-pathway network diagram

A.木犀草素作用于IL-6(結(jié)合能:-35.15 kJ/mol);B.槲皮素作用于Akt1(結(jié)合能:-26.36 kJ/mol);C.槲皮素作用于IL-6(結(jié)合能:-33.89 kJ/mol);D.木犀草素作用于TNF-α(結(jié)合能:-30.12 kJ/mol);E.槲皮素作用于TNF-α(結(jié)合能:-29.71 kJ/mol);F.槲皮素作用于MAPK1(結(jié)合能:-35.98 kJ/mol);G.柚皮素作用于ESR1(結(jié)合能:-36.82 kJ/mol);H.木犀草素作用于RELA(結(jié)合能:-38.49 kJ/mol)A. luteolin act on IL6 (affinity: -35.15 kJ/mol); B. quercetin on Akt1 (affinity: -26.36 kJ/mol); C. quercetin act on IL6 (affinity: -33.89 kJ/mol); D. luteolin act on TNF-α (affinity: -30.12 kJ/mol); E. quercetin act on TNF-α (affinity: -29.71 kJ/mol); F. quercetin act on MAPK1 (affinity: -35.98 kJ/mol); G. naringenin act on ESR1 (affinity: -36.82 kJ/mol); H. luteolin act on RELA (affinity: -38.49 kJ/mol)圖9 分子對(duì)接Fig 9 Molecular docking

3 討論

PID病情較為反復(fù),中醫(yī)藥由于其多靶點(diǎn)、多通路的作用機(jī)制,能在一定程度上更好地干預(yù)該類(lèi)慢性疾病[10]。研究結(jié)果表明,PID的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程主要包括病原微生物的感染、免疫系統(tǒng)的激活與炎癥因子的釋放等階段。然而,當(dāng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)被激活后,炎癥因子過(guò)度釋放會(huì)加重感染部位的損傷,長(zhǎng)期反復(fù)導(dǎo)致了PID的產(chǎn)生[11-12]。

本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對(duì)接的方法對(duì)丹白顆粒治療PID的作用機(jī)制進(jìn)行了探討。通過(guò)文獻(xiàn)檢索結(jié)合數(shù)據(jù)庫(kù)挖掘的方法獲得丹白顆粒中的70個(gè)化合物與377個(gè)靶點(diǎn)。使用分子對(duì)接技術(shù)對(duì)預(yù)測(cè)的關(guān)鍵化合物與靶點(diǎn)進(jìn)行了驗(yàn)證。如槲皮素是處方中牡丹皮、敗醬草、土茯苓、白花蛇舌草、墓頭回和椿皮中的化學(xué)成分,具有抗炎、抗菌和抗腫瘤等多種藥理活性[13]。司麗君等[14]觀(guān)察了槲皮素對(duì)伴刀豆球蛋白A誘導(dǎo)的T細(xì)胞和脂多糖誘導(dǎo)的B細(xì)胞增殖的影響,結(jié)果顯示,經(jīng)槲皮素處理后的T細(xì)胞數(shù)量、B細(xì)胞數(shù)量以及炎癥因子數(shù)量均顯著降低,表明槲皮素具有良好的抗炎作用,能促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖,抑制T細(xì)胞、B細(xì)胞的增殖和炎癥因子的產(chǎn)生。木犀草素是處方中敗醬草的化學(xué)成分,具有抗炎、抗菌、抗糖尿病和抗過(guò)敏等多種藥理作用。木犀草素可以減少自由基的生成,通過(guò)影響核因子κB(NF-κB )信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路、JAK-STAT信號(hào)通路等炎癥通路以及花生四烯酸的代謝抑制炎癥因子的產(chǎn)生與表達(dá)[15]。周霄楠等[16]通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證了木犀草素對(duì)于脂多糖誘導(dǎo)的細(xì)胞炎癥模型的調(diào)控作用,結(jié)果顯示,木犀草素可以顯著抑制脂多糖誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)一氧化氮(NO)、TNF-α、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)以及IL-6含量的升高,具有良好的抗炎效果。山柰酚是處方中牡丹皮、敗醬草、白芍和椿皮的化學(xué)成分,具有抗氧化、抗炎和抗腫瘤等多種藥理活性。如山柰酚可通過(guò)抑制炎癥因子IL-1β誘導(dǎo)的前列腺素E2和NO的產(chǎn)生,進(jìn)一步抑制炎癥反應(yīng)[17-18]。柚皮素具有抗炎、抗菌、抗腫瘤、抗纖維化和抗心律失常等藥理活性[19]。研究結(jié)果表明,柚皮素能抑制環(huán)氧化酶2的表達(dá)進(jìn)而減少前列腺素的合成,還能減少炎癥因子TNF-α、NF-κB等的生成,從而減輕炎癥反應(yīng)[20-21]。上述化合物都是通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)結(jié)合分子對(duì)接驗(yàn)證得到的關(guān)鍵化合物,因此其可能是丹白顆粒發(fā)揮治療PID作用的核心成分。

PPI網(wǎng)絡(luò)的預(yù)測(cè)結(jié)合文獻(xiàn)挖掘結(jié)果顯示,PIK3CA、SRC、TP53、HSP90AA、Akt1、MAPK3、MAPK1、ESR1、EGFR、TNF-α、RELA和IL-6可能是丹白顆粒治療PID的關(guān)鍵靶點(diǎn)。費(fèi)紅梅[22]對(duì)124例盆腔炎患者進(jìn)行了血清炎癥因子檢測(cè),發(fā)現(xiàn)患者血清中TNF-α、IL-1β等水平顯著高于正常對(duì)照組,血清IL-4以及CD4+/CD8+水平明顯低于對(duì)照組,由此可見(jiàn),TNF-α等炎癥因子可能是導(dǎo)致PID反復(fù)的原因之一。生殖系統(tǒng)感染后,Toll樣受體(TLR)首先在免疫系統(tǒng)中被激活,其是一種模式識(shí)別受體,可以識(shí)別病原相關(guān)的分子模式[23]。輸卵管炎是PID的一種,陳曉等[24]建立了輸卵管炎小鼠模型,使用熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)小鼠輸卵管組織中TLR2的mRNA水平,以及使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)小鼠血清TNF-α的表達(dá),結(jié)果顯示,模型組血清TNF-α水平顯著高于空白組,而TLR2 mRNA的表達(dá)在28 d時(shí)顯著低于3 d時(shí),表明輸卵管炎可能是由TLR2通過(guò)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)產(chǎn)生大量TNF-α所誘發(fā)的。IL-6與PID密切相關(guān),可能會(huì)導(dǎo)致盆腔局部組織粘連,加重原有損傷[25]。畢海平等[26]將60例婦科就診患者分為對(duì)照組與盆腔炎組,檢測(cè)兩組患者血清IL-6水平,結(jié)果顯示,盆腔炎組患者血清IL-6水平遠(yuǎn)高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。RELA是NF-κB的亞單位之一,它能精準(zhǔn)地調(diào)控NF-κB信號(hào)通路,在一系列免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)相關(guān)的疾病中發(fā)揮著重要作用[27]。子宮內(nèi)膜炎同樣也是PID的一種,馬紅霞等[28]、尤昭玲等[29]使用革蘭菌制作恒河猴子宮內(nèi)膜炎模型,發(fā)現(xiàn)其血清炎癥因子TNF-α、IL-1的表達(dá)水平升高,而二者表達(dá)水平升高后會(huì)促使NF-κB的激活,從而形成正向反饋導(dǎo)致原有炎癥加重,接著使用藥物進(jìn)行干預(yù)后發(fā)現(xiàn)治療組的NF-κB水平顯著低于模型組,進(jìn)一步得出結(jié)論,通過(guò)調(diào)控NF-κB的活化可以有效保護(hù)子宮內(nèi)膜組織,有效緩解PID。EGFR是受體酪氨酸激酶中的表皮因子生長(zhǎng)受體家族的成員之一,屬于酪氨酸激酶型受體,在細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用[30]。EGFR表達(dá)量增多會(huì)增強(qiáng)上皮細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)因子的敏感度,因此使生長(zhǎng)因子受體更容易與生長(zhǎng)因子配體結(jié)合形成絡(luò)合物,從而影響輸卵管上皮的增殖分化,導(dǎo)致炎癥進(jìn)一步加重[31]。胡曉玲等[32]使用自擬方通關(guān)湯對(duì)輸卵管炎模型大鼠進(jìn)行治療,發(fā)現(xiàn)治療前后輸卵管上皮細(xì)胞中B細(xì)胞淋巴瘤2(Bcl-2)、EGFR表達(dá)的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,表明該藥的作用機(jī)制可能是通過(guò)下調(diào)Bcl-2、EGFR的過(guò)表達(dá)來(lái)達(dá)到治愈輸卵管炎的作用。丹白顆?？赡苁峭ㄟ^(guò)調(diào)節(jié)上述關(guān)鍵靶點(diǎn)來(lái)發(fā)揮治療PID的作用。

GO功能與KEGG通路富集分析結(jié)果顯示,丹白顆粒治療PID的靶點(diǎn)集中在多條炎癥相關(guān)通路中。如PI3K-Akt信號(hào)通路、NF-κB信號(hào)通路等。PI3K-Akt信號(hào)通路可以調(diào)節(jié)多種細(xì)胞因子,參與細(xì)胞分化、增殖、凋亡與新血管的生成等生物學(xué)過(guò)程[33-34]。當(dāng)上游信號(hào)激活PI3K后,下游的Akt開(kāi)始啟動(dòng)磷酸化進(jìn)程,進(jìn)而激活一系列的靶基因如COX-2、Caspase-9,促進(jìn)細(xì)胞新陳代謝、凋亡和增殖等。研究結(jié)果表明,PI3K-Akt信號(hào)通路與子宮內(nèi)膜癌的不良預(yù)后相關(guān)[35]。近年來(lái),炎-癌轉(zhuǎn)化的病理機(jī)制一直是研究的熱點(diǎn)。在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中,炎癥反應(yīng)參與腫瘤的各個(gè)階段,炎癥因子與惡性腫瘤細(xì)胞周?chē)幕|(zhì)產(chǎn)生交互作用,炎癥型腫瘤微環(huán)境不斷促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng)[36-37]。因此,PI3K-Akt信號(hào)通路同樣也會(huì)影響子宮內(nèi)膜炎等炎癥反應(yīng)引發(fā)的疾病。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),PIK3CA是丹白顆粒作用于PID的關(guān)鍵靶點(diǎn),因此,本研究推測(cè)丹白顆?？赡芡ㄟ^(guò)調(diào)控PIK3CA,進(jìn)而影響PI3K-Akt信號(hào)通路的生物學(xué)功能。

綜上所述,丹白顆?？赡苁峭ㄟ^(guò)NF-κB信號(hào)通路、MAPK信號(hào)通路和PI3K-Akt信號(hào)通路等通路作用于TNF-α、IL-6和EGFR等關(guān)鍵靶基因,發(fā)揮其治療PID的作用。本研究主要采用數(shù)據(jù)挖掘開(kāi)展,與已發(fā)表的基礎(chǔ)研究具有很大程度的一致性,因此對(duì)后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究提供了借鑒并奠定了基礎(chǔ)。