劉啟波,麥東媚△,譚俊青,李曉君,蔡棟昊

廣東省第二中醫(yī)院:1.檢驗(yàn)科;2.感染管理科,廣東廣州 510095

醫(yī)院獲得性肺炎是臨床中的常見(jiàn)病癥,是發(fā)生在肺泡、終末氣道或肺間質(zhì)的炎性病變[1]。由于社會(huì)老齡人口增多、病原體診斷難度增大等因素,醫(yī)院獲得性肺炎的患病群體及肺炎相關(guān)死亡人數(shù)呈持續(xù)增長(zhǎng)趨勢(shì)[2]。鮑曼不動(dòng)桿菌廣泛存在于自然環(huán)境與醫(yī)院環(huán)境中,生存要求極低,可定植于人體的呼吸道、消化道或皮膚表層等,對(duì)常規(guī)消毒制劑或紫外線(xiàn)抵抗力較強(qiáng),是國(guó)內(nèi)醫(yī)院感染最常見(jiàn)的致病菌之一[3]。既往研究發(fā)現(xiàn),鮑曼不動(dòng)桿菌以多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌較為多見(jiàn),其耐藥譜持續(xù)擴(kuò)大、感染率及耐藥率逐年升高[4-5]。有研究報(bào)道,多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者發(fā)病率為1.3%～3.4%,病死率為33.1%,患者住院時(shí)間較長(zhǎng),治療費(fèi)用高,如何預(yù)防和減少其發(fā)生是世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題。對(duì)多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者的病情嚴(yán)重程度及預(yù)后進(jìn)行有效評(píng)估一直是急需解決的難題。CXC類(lèi)趨化因子配體5(CXCL5)與其受體CXC類(lèi)趨化因子受體2(CXCR2)結(jié)合可以對(duì)嗜中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞等多種免疫細(xì)胞發(fā)揮趨化作用,促進(jìn)炎癥反應(yīng)的啟動(dòng)和進(jìn)展[7]。本研究旨在探討CXCL5基因多態(tài)性對(duì)多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎及碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性的影響,為多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎的臨床治療及預(yù)防提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2020年7月至2022年7月于本院被明確診斷為多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌感染肺炎的121例患者納入研究作為患者組,年齡(56.38±17.15)歲,男65例、女56例。納入標(biāo)準(zhǔn):痰培養(yǎng)連續(xù)2次以上為多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌陽(yáng)性且影像學(xué)結(jié)果表現(xiàn)異常,根據(jù)中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)醫(yī)院獲得性肺炎的診斷標(biāo)準(zhǔn),確診為醫(yī)院獲得性多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)入院24 h內(nèi)死亡或自動(dòng)出院;(2)伴嚴(yán)重軀體性疾病;(3)合并其他精神疾病或有嚴(yán)重自殺傾向。根據(jù)臨床醫(yī)生對(duì)患者病情的診斷,將患者又分為輕癥組(36例)、中癥組(66例)、重癥組(19例)。另外將同期121例體檢健康者作為對(duì)照組,年齡(57.15±18.11)歲,男70例、女51例。各組年齡、性別比較,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。所有納入研究者均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)。本研究已獲得本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2方法

1.2.1單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SNP)基因分型 在HapMap數(shù)據(jù)庫(kù)中選取中國(guó)漢族人群的SNP中的CXCL5基因相關(guān)位點(diǎn),即rs352046和rs425535。提取患者DNA,通過(guò)毛細(xì)管電泳(采用ABI 3730XL測(cè)序儀進(jìn)行,上海興曼生物科技有限公司)及SNaPshot片段分析技術(shù)(MG-012型SNaPshot法基因型儀,天津邁基生物科技有限公司)對(duì)2個(gè)SNP位點(diǎn)進(jìn)行基因分型。

1.2.2藥敏試驗(yàn)及炎癥指標(biāo)的檢測(cè) 對(duì)納入研究患者的痰液標(biāo)本進(jìn)行痰液分離菌株的菌種鑒定,應(yīng)用梅里埃公司生產(chǎn)的VITEK2-Compact全自動(dòng)微生物分析儀進(jìn)行檢測(cè),根據(jù)2019版CLSI標(biāo)準(zhǔn)評(píng)估藥敏試驗(yàn)結(jié)果。炎癥指標(biāo)使用邁瑞7500血細(xì)胞分析儀與雅培I2000微粒子化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1CXCL5基因位點(diǎn)的基因型及等位基因比較 將對(duì)照組和患者組患者CXCL5基因的rs352046及rs425535位點(diǎn)進(jìn)行比較,rs352046位點(diǎn)的基因型及等位基因分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),rs425535位點(diǎn)的基因型及等位基因分布差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對(duì)照組,G等位基因、GG基因型比例低于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1、2。

表1 對(duì)照組和患者組間CXCL5基因rs352046位點(diǎn)的等位基因、基因型分布比較(n)

表2 對(duì)照組和患者組間CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的等位基因、基因型分布比較(n)

2.2CXCL5基因rs352046、rs425535位點(diǎn)的基因型與炎癥指標(biāo)的關(guān)系 rs352046位點(diǎn)的基因型與患者的白細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)關(guān)(P>0.05),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白、降鈣素原水平有關(guān)(P<0.05),GG基因型的患者上述4項(xiàng)指標(biāo)水平明顯低于GC及CC基因型的患者。rs425535位點(diǎn)的基因型與患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)關(guān)(P>0.05),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平有關(guān)(P<0.05),GG基因型的患者上述4項(xiàng)指標(biāo)水平明顯低于GA及AA基因型的患者,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 CXCL5基因rs352046、rs425535位點(diǎn)基因型與炎癥指標(biāo)的關(guān)系

2.3CXCL5基因rs352046、rs425535位點(diǎn)等位基因和基因型分布與肺炎嚴(yán)重程度的關(guān)系 CXCL5基因rs352046位點(diǎn)基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度無(wú)關(guān)(P>0.05),而CXCL5基因rs425535位點(diǎn)基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度有關(guān)(P<0.05),見(jiàn)表4、5。

表4 不同嚴(yán)重程度肺炎患者CXCL5基因rs352046位點(diǎn)的基因型與等位基因分布比較(n)

表5 不同嚴(yán)重程度肺炎患者CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的基因型與等位基因分布比較(n)

2.4CXCL5基因多態(tài)性與碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性的關(guān)系 121例多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者中,102例患者對(duì)耐碳青霉烯類(lèi)藥物的敏感性較高(敏感組),19例對(duì)這類(lèi)藥物不敏感(不敏感組)。兩組CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的基因型及等位基因分布比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表6。

表6 CXCL5基因位點(diǎn)的基因型與等位基因(n)

3 討 論

醫(yī)院獲得性肺炎占醫(yī)院感染的29.6%～32.7%,病死率為22.3%～33.2%[8],發(fā)病率約為9%[9]。醫(yī)院獲得性肺炎的病原菌中,多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌感染率居首位。若患者的免疫系統(tǒng)紊亂或臟器功能受損,多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的易感性明顯增加,易誘發(fā)肺炎、手術(shù)切口部位感染、泌尿系統(tǒng)感染、導(dǎo)管相關(guān)感染等各種醫(yī)院感染。廣譜抗菌藥物的廣泛使用導(dǎo)致多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)目前臨床常用的抗菌藥物的敏感性明顯降低[10-11]。一項(xiàng)對(duì)國(guó)內(nèi)16家醫(yī)院的細(xì)菌耐藥性通過(guò)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)進(jìn)行監(jiān)測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn),10 120株鮑曼不動(dòng)桿菌菌株中多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌的比例高達(dá)89.2%,多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率可達(dá)36.4%～2.8%[12]?？梢?jiàn),多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌相關(guān)肺炎仍是公共衛(wèi)生事件中棘手的問(wèn)題。趨化因子在炎癥細(xì)胞向炎癥組織部位轉(zhuǎn)運(yùn)的過(guò)程中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用,CXCL5作為關(guān)鍵的趨化因子之一,可以誘導(dǎo)、維持、擴(kuò)大炎癥反應(yīng)或免疫反應(yīng)以促進(jìn)炎癥進(jìn)展[13]。因此,探究CXCL5基因與肺炎多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌感染及碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性之間的關(guān)系具有重要意義。

本研究將兩組患者CXCL5基因的rs352046、rs425535位點(diǎn)進(jìn)行比較,結(jié)果顯示,兩組CXCL5基因的rs352046位點(diǎn)的基因型及等位基因分布比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);兩組CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的基因型及等位基因分布比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),患者組A等位基因、GA基因型比例高于對(duì)照組,G等位基因、GG基因型低于對(duì)照組,表明CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的多態(tài)性與多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。既往有研究報(bào)道CXCL5基因多態(tài)性與肺炎鏈球菌感染的發(fā)生緊密相關(guān)[14]。趨化因子是一種低相對(duì)分子質(zhì)量的蛋白質(zhì),在炎癥反應(yīng)與免疫應(yīng)答的初期與靶細(xì)胞膜上特異性受體相互作用,促使白細(xì)胞、粒細(xì)胞、NK細(xì)胞等在炎癥部位聚集,對(duì)人體的炎癥反應(yīng)、免疫反應(yīng)、組織修復(fù)和造血中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用[15]。

本研究將CXCL5基因rs352046、rs425535位點(diǎn)基因型分布與多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者炎癥指標(biāo)的關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果顯示,rs352046位點(diǎn)的基因型和等位基因分布與患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)關(guān),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平有關(guān),GG基因型患者上述4項(xiàng)指標(biāo)水平明顯低于GC及CC基因型患者。CXCL5基因rs425535位點(diǎn)基因型分布與患者白細(xì)胞計(jì)數(shù)無(wú)關(guān),而與中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原有關(guān),GG基因型患者上述4項(xiàng)指標(biāo)水平明顯低于GA及AA基因型。趨化因子CXCL5多態(tài)性位點(diǎn)基因型的改變導(dǎo)致中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、C反應(yīng)蛋白與降鈣素原水平的升高。在既往探究CXCL5基因多態(tài)性與感染性疾病之間的關(guān)系的研究中,CXCL5-156的基因型及等位基因與巨細(xì)胞病毒感染具有相關(guān)性,而且CXCL5-156 C等位基因的增加使得患兒血清中CXCL5的水平升高,巨細(xì)胞病毒感染及新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的相關(guān)炎癥反應(yīng)加重,患兒相關(guān)死亡風(fēng)險(xiǎn)顯著升高[16]。

本研究分析了CXCL5基因rs352046、rs425535位點(diǎn)分布情況與肺炎患者嚴(yán)重程度之間的相關(guān)性。結(jié)果顯示,CXCL5基因rs425535位點(diǎn)基因型及等位基因分布情況與患者組患者的多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎的嚴(yán)重程度有關(guān),表明CXCL5基因多態(tài)性可以在一定程度上影響患者肺炎的病情。陸秀娟等[17]研究結(jié)果表示,CXCL9基因多態(tài)性與類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān),而且類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)隨CXCL9水平的升高而增加。雖然本研究結(jié)果顯示,CXCL5基因rs352046位點(diǎn)基因型及等位基因分布情況與患者肺炎嚴(yán)重程度無(wú)關(guān),但并不意味著CXCL5基因rs352046位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎的發(fā)生或疾病進(jìn)程不產(chǎn)生影響,未來(lái)還需進(jìn)行深入研究。

本研究結(jié)果顯示,CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的基因型及等位基因分布在碳青霉烯類(lèi)藥物敏感和不敏感患者間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),表明CXCL5基因rs425535位點(diǎn)多態(tài)性的改變與多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物的敏感性有關(guān)。有研究報(bào)道,CXCL5基因rs425535位點(diǎn)的基因型及等位基因與青霉素敏感性有關(guān)[14]。本研究結(jié)果中,CXCL5基因rs352046位點(diǎn)的基因型及等位基因分布與多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎患者碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性無(wú)關(guān),并不意味著CXCL5基因rs352046位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性不產(chǎn)生影響,未來(lái)還需更多研究來(lái)進(jìn)行深入探討。

綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)CXCL5基因多態(tài)性與多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)、嚴(yán)重程度及碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性有關(guān),但本研究也存在樣本量較小的不足,還需要開(kāi)展多中心、大樣本的研究,并且考慮其他基因及環(huán)境因素產(chǎn)生的影響,以深入探討CXCL5基因多態(tài)性對(duì)多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌肺炎及碳青霉烯類(lèi)藥物敏感性的影響。