高楊　田燦　姜京京　唐永凱　張成鋒　馮文榮　李冰　陳銘　盧澤宇　蘇勝彥　朱健

摘要：為了解當(dāng)前我國不同地區(qū)克氏原螯蝦種群的遺傳背景情況，以期為人工養(yǎng)殖、新品種選育和資源保護提供參考依據(jù)。選取江蘇洪澤湖（HZH）、湖北洪湖（HH）、湖南洞庭湖（DTH）、山東微山湖（WSH）、安徽巢湖（CH）、江西鄱陽湖（PYH）6個典型區(qū)域的克氏原螯蝦群體作為研究對象，采用14對微衛(wèi)星引物對來自6個地區(qū)的168份樣品進行遺傳多樣性檢測。結(jié)果可知，各群體不同標記位點的等位基因數(shù)在3～14之間，平均期望雜合度為0.81，平均多態(tài)信息含量分布在0.42～0.59之間，各群體均處于中高度遺傳多樣性水平。6個群體均發(fā)生一定程度Hardy-Weinberg平衡偏離，僅有少數(shù)位點在單一群體滿足Hardy-Weinberg平衡，同時連鎖不平衡檢測發(fā)現(xiàn)9個連鎖座位對處于不平衡狀態(tài)。遺傳距離結(jié)果顯示，6個克氏原螯蝦群體的遺傳一致度（I）處于0.127 8～0.643 9之間，各群體間遺傳距離（D）處于0.440 2～2.057 3之間。群體間遺傳分化指數(shù)（Fst）接近0.5，反映出群體間的基因交流水平較弱，存在高度的遺傳分化。AMOVA分析發(fā)現(xiàn)，39.65%的遺傳變異來源于群體間，97.99%的遺傳變異來源于個體間。遺傳結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)顯示，K=5時，6個群體間存在顯著的結(jié)構(gòu)差異。上敘結(jié)果可知，6個地區(qū)的克氏原螯蝦群體具有豐富的遺傳多樣性，群體間出現(xiàn)了顯著分化，可通過隔離保種、雜交、選擇育種等方式保護利用克氏原螯蝦的種質(zhì)資源，為我國克氏原鰲蝦產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展提供良種支持。

關(guān)鍵詞：克氏原螯蝦；遺傳多樣性：微衛(wèi)星標記；遺傳結(jié)構(gòu)

中圖分類號：S917；S966.12文獻標志碼：A

文章編號：1002-1302（2023）05-0191-09

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）別稱淡水小龍蝦，原產(chǎn)自北美洲，20世紀前中葉引入我國。該蝦具有肉質(zhì)鮮美、生長速度快、環(huán)境適應(yīng)力強的特點，進而深受漁民和消費者的喜愛［1-2］。21世紀以來，我國克氏原螯蝦養(yǎng)殖技術(shù)日益成熟完善，養(yǎng)殖方式愈發(fā)多元，養(yǎng)殖產(chǎn)量也日益增長。據(jù)中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒統(tǒng)計，我國克氏原螯蝦2018年產(chǎn)量達163.87萬t，2019年達208.96萬t，首次突破200萬t，2020年雖受疫情影響，產(chǎn)量仍達239.37萬t［3］，創(chuàng)下歷史新高。當(dāng)前，克氏原螯蝦已成為我國第六大淡水經(jīng)濟養(yǎng)殖品種。然而在逆向選擇、捕大留小的生產(chǎn)模式下，養(yǎng)殖后代病害頻發(fā)、規(guī)格參差不齊，嚴重制約克氏原鰲蝦產(chǎn)業(yè)的持續(xù)健康發(fā)展，亟需通過良種選育來提高種質(zhì)性能，促進產(chǎn)業(yè)持續(xù)健康發(fā)展。大量的水產(chǎn)養(yǎng)殖經(jīng)驗告訴我們，優(yōu)秀的種質(zhì)來源決定了水產(chǎn)生物生產(chǎn)養(yǎng)殖的命脈，而在新品種選育過程中，對國內(nèi)已存在的主要遺傳資源進行遺傳評估成為首先需要解決的問題。

遺傳多樣性常用來評估用于選育種質(zhì)的選擇空間，因而受到國內(nèi)外學(xué)者的重點關(guān)注。對于克氏原螯蝦遺傳多樣性的研究，當(dāng)前主要集中在分子標記及區(qū)域群體的選擇上。關(guān)于分子標記，常用的檢測方法有Random Amplified Polymorphic DNA（RAPD）［4-5］、Amplified fragment length polymorphism （AFLP）［6］和Simple Sequence Repeats（SSR）［7-8］。其中，SSR以高的多態(tài)性和共顯性［9］，成為研究克氏原螯蝦遺傳多樣性和遺傳關(guān)系的首選技術(shù)。關(guān)于區(qū)域群體的選擇則較為廣泛，遍及全國克氏原螯蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)省份。邢智珺等采用8個微衛(wèi)星標記分析了江蘇省境內(nèi)8個地區(qū)克氏原螯蝦的遺傳多樣性［10］；黃小芳等利用8對微衛(wèi)星引物分析了廣西境內(nèi)5個地區(qū)克氏原螯蝦遺傳多樣性［11］。研究結(jié)果均表明，選點區(qū)域內(nèi)克氏原螯蝦群體遺傳多樣性豐富。以上研究選點分布集中于單一或少數(shù)的省份，尚未就全國范圍內(nèi)典型水域的野生克氏原螯蝦群體開展研究。為此本研究進行了江蘇洪澤湖（HZH）、湖北洪湖（HH）、湖南洞庭湖（DTH）、山東微山湖（WSH）、安徽巢湖（CH）、江西鄱陽湖（PYH）6個典型水域克氏原螯蝦野生種質(zhì)資源遺傳多樣性水平的差異研究，以期為克氏原螯蝦養(yǎng)殖提供重要的親本來源，為新品種的選育和野生種的資源保護工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

分別從江蘇洪澤湖（HZH）、湖北洪湖（HH）、湖南洞庭湖（DTH）、山東微山湖（WSH）、安徽巢湖（CH）、江西鄱陽湖（PYH）六大淡水湖泊中捕撈克氏原螯蝦群體，各群體取22～30尾個體。由表1可知，雌雄加以區(qū)分，剪去尾節(jié)，置于預(yù)先備好裝有乙醇的2 mL離心管中，-20 ℃保存。

1.2 基因組DNA提取

總基因組DNA提取采用苯酚/三氯甲烷法［12］提取尾節(jié)組織的總基因組DNA，DNA通過瓊脂糖凝膠電泳檢驗純度，[HJ1.5mm]紫外分光光度計測定D260 nm和D280 nm，合格的DNA稀釋濃度至0.05 mg/L，保存于 -20 ℃ 加以備用。

1.3 微衛(wèi)星引物擴增

參考GenBank已發(fā)表的微衛(wèi)星序列［13］及本實驗室自行開發(fā)的微衛(wèi)星序列共14對（表2）。正向引物的5′端FAM標記，委托無錫天霖生物有限公司加以合成。PCR反應(yīng)總體系：DNA模板 2.0 μL，Taq酶12.5 μL，上下游引物各1.0 μL，最后加滅菌的超純水至25.0 μL。

PCR反應(yīng)程序為：94 ℃預(yù)變性5 min；94 ℃變性10 s，在最適退火溫度下退火10 s，72 ℃延伸 15 s，30個循環(huán)；最后72 ℃再延伸10 min，4 ℃保存。PCR產(chǎn)物通過ABI3730XL測序儀（美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）進行毛細管電泳檢測，通過GeneMarker軟件進行基因型分型。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用14對SSR標記鑒定到的6個克氏原螯蝦群體的基因型，使用Popgene32（v1.3.2）軟件［14］對6個克氏原螯蝦群體的等位基因數(shù)（Na）、有效等位基因數(shù)（Ne）、觀測雜合度（Ho）、期望雜合度（He）、似然比檢驗Hardy-Weinberg平衡、遺傳分化指數(shù)Fst（F-statistics，F(xiàn)st）、Neis標準遺傳距離（Ds）和中性進行分析檢測。使用Genepop的列聯(lián)表方法進行連鎖不平衡分析［15］。使用Botstein等的方法計算每個位點的多態(tài)信息含量（PIC）［16］。遺傳結(jié)構(gòu)分析采用Structue 2.3軟件［17］，遺傳結(jié)構(gòu)圖繪制采用CLUMPP1.1.2［18］和distruct軟件［19］。

2 結(jié)果與分析

2.1 克氏原螯蝦遺傳多樣性分析

通過毛細管電泳檢測14對微衛(wèi)星引物在168份樣品中的基因型及其頻率分布，14個微衛(wèi)星位點在6個克氏原螯蝦群體內(nèi)共檢測到等位基因124個。由表3可知，這些標記在單個的克氏原螯蝦群體中的等位基因數(shù)在3～14之間，等位基因數(shù)最多的是PCLG08位點。各群體內(nèi)的等位基因數(shù)在1～8之間不等，平均等位基因數(shù)最低的是巢湖群體，僅為1.93；最高的是洪澤湖群體，數(shù)值達4.14；其余群體的平均等位基因數(shù)均處于2～3之間不等。各群體的有效等位基因數(shù)在1.00～5.16之間，數(shù)目最多的同樣是PCLG08位點。從等位基因數(shù)和有效等位基因數(shù)的結(jié)果來看，洪澤湖群體分別有11個和9個位點的數(shù)值最高，數(shù)值最高的位點數(shù)量遠超其他群體。而在觀察雜合度和期望雜合度2項指標上，洪澤湖群體同樣多數(shù)位點指標數(shù)值顯著高于其他群體。14對微衛(wèi)星的中性測試分析見表4，可知各個位點都處于95%置信區(qū)間范圍內(nèi)，屬中性位點。

由表5可知，根據(jù)香農(nóng)指數(shù)分析，洪澤湖克氏原螯蝦群體的遺傳多樣性最為豐富， 其余5組克氏原螯蝦群體的遺傳多樣性相差較小，群體間變異程度低。此外，各群體的多態(tài)信息含量介于0.26～0.73之間。當(dāng)PIC值>0.5時，定義為高多態(tài)性；當(dāng)PIC值處于0.25～0.50之間，定義為中度多態(tài)性。本調(diào)查分析中，洪澤湖群體在14個位點中均處于高度多態(tài)水平。巢湖群體有3個中度多態(tài)位點，11個高度多態(tài)；洞庭湖群體有6個中度多態(tài)位點，8個高度多態(tài)位點；洪湖群體有3個中度多態(tài)位點，11個高度多態(tài)位點；鄱陽湖群體有5個中度多態(tài)位點，9個高度多態(tài)位點；微山湖群體有2個中度多態(tài)位點，12個高度多態(tài)位點。綜合可知，洪澤湖群體多態(tài)性水平最高，遺傳多樣性也最為豐富，最適合作為養(yǎng)殖生產(chǎn)中的親本來源。

2.2 6個群體Hardy-Weinberg平衡分析和連鎖不平衡檢驗

Hardy-Weinberg平衡分析結(jié)果，由表6可知，沒有1對位點在6個群體中都符合哈代溫伯格平衡，各個位點在各群體中均存在明顯的哈代溫伯格平衡偏離現(xiàn)象。其中，僅有PCLG10位點在2個群體中存在哈代溫伯格平衡偏離，剩余的標記位點均在多個群體出現(xiàn)Hardy-Weinberg平衡偏離情況。

對6組克氏原螯蝦群體進行連鎖不平衡檢測，共檢測到59個基因座位對，其中，巢湖群體和洪澤湖群體均存在6個連鎖座位對的不平衡狀態(tài)，鄱陽湖群體是連鎖座位對處于不平衡狀態(tài)最少的群體，僅為3對，與此同時，各個群體處于不平衡狀態(tài)時相應(yīng)的連鎖座位對并不相同。對于整個群體而言，一共檢測到9個連鎖座位對處于不平衡狀態(tài)。

2.3 6個群體遺傳距離分析

遺傳距離結(jié)果見表7，可知6個克氏原螯蝦群體的遺傳一致度（I）在0.127 8～0.643 9之間，遺傳距離（D）在0.440 2～2.057 3之間。遺傳一致度的數(shù)值結(jié)果同遺傳距離數(shù)值成反比關(guān)系，遺傳一致度數(shù)值越大，遺傳距離越小，反映出的親緣關(guān)系也越接近。6組不同區(qū)域的克氏原螯蝦群體中，微山湖和鄱陽湖群體間的遺傳一致度最高，數(shù)值達0.643 9，對應(yīng)的遺傳距離則為最小的0.440 2，說明微山湖和鄱陽湖這2個群體親緣關(guān)系較近。親緣關(guān)系最遠的是洪湖和鄱陽湖群體，這2個群體的遺傳距離達2.057 3，數(shù)值相比其他群體差距明顯。長年遷徙下，群體間的遺傳距離結(jié)果偏大，各群體間交流受阻，群體為適應(yīng)當(dāng)?shù)厣瞽h(huán)境而出現(xiàn)分化現(xiàn)象。

2.4 克氏原螯蝦遺傳結(jié)構(gòu)分析

Fis結(jié)果顯示，14個位點均出現(xiàn)負值，數(shù)值最小的是PCLG28位點，F(xiàn)it結(jié)果顯示，8個位點出現(xiàn)負值，數(shù)值最大的是PCLG10位點，僅為0.3，尚未達0.5水平。Nm反映了群體間的交流程度，Nm越大，基因交流越為頻繁［20］，在數(shù)值上同F(xiàn)st值成反比，F(xiàn)st是反映遺傳分化的指標。PCLG02位點下的群體交流程度較為頻繁，達4.81，同時，群體間的Fst數(shù)值大多接近0.5，6個群體僅存在微弱的基因交流，同時群體間已經(jīng)出現(xiàn)高度分化現(xiàn)象。這可能與克氏原螯蝦自身習(xí)性密切相關(guān)，大部分時間棲息于自掘的洞穴內(nèi)，且游泳運動水平不強引起相互間交流較少。AMOVA分析結(jié)果見表8，可知39.65%的變異來自于群體間，97.99%的變異來自于個體間（P<0.01），個體間的遺傳變異程度遠大于群體間。

運用Structure軟件對6個克氏原螯蝦群體的遺傳結(jié)構(gòu)進行分析，執(zhí)行K=2～6的假設(shè)，設(shè)定10次重復(fù)，結(jié)果見圖1。K=2時，巢湖群體和鄱陽湖群體遺傳結(jié)構(gòu)沒有差異；K=3時，鄱陽湖群體和洪澤湖群體遺傳結(jié)構(gòu)沒有差異；K=4時，巢湖群體和洪澤湖群體遺傳結(jié)構(gòu)差異不明顯； K=6時， 各群體間遺傳結(jié)構(gòu)差異不如K=5時更為明顯。綜合來看，K=5時，結(jié)果最佳。

3 結(jié)論

3.1 我國大型淡水湖泊克氏原螯蝦遺傳多樣性豐富

遺傳多樣性作為生物多樣性的重要組成部分，是衡量生物攜帶遺傳信息程度的重要指標，其水平可直接反映物種的遺傳變異程度，而遺傳變異程度恰能反映物種的生長性能、繁育性能等育種指標情況。對克氏原螯蝦的溯源及入侵路線問題，國內(nèi)的許多水產(chǎn)研究者已經(jīng)進行過長足的研究，收集了多個水系多重地域的克氏原螯蝦種質(zhì)群體進行遺傳分析，已經(jīng)初步得出，克氏原螯蝦從我國江蘇省南京市引入，同時伴隨長江、淮河兩大水系逐漸向外擴展［21］。

相較以往的研究，本研究采樣點符合主要克氏原螯蝦群體養(yǎng)殖分布和遷移路線，涉及湖南、湖北、安徽、江西、江蘇、山東6省，且均來源于我國境內(nèi)知名的大型淡水湖泊，研究對象更加富有代表性。其次，所選取的14個微衛(wèi)星位點均為中高度多態(tài)性位點，結(jié)果更能精確反映這些群體的真實遺傳多樣性水平。運用14對微衛(wèi)星引物測出6個不同克氏原螯蝦群體的平均期望雜合度0.81，平均多態(tài)信息含量0.42～0.59，綜合觀察發(fā)現(xiàn)，六大淡水湖泊的克氏原螯蝦具有較高的遺傳多樣性。遺傳多樣性大小依次為洪澤湖>洪湖>微山湖>巢湖>鄱陽湖>洞庭湖。造成這樣的原因可能是克氏原螯蝦從南京市引入，而洪澤湖隸屬淮河水系地理位置上同屬江蘇省，較好地保留了初始時的種質(zhì)特征。另外很重要的一點是洪澤湖水域環(huán)境復(fù)雜，水生植物豐富，給個體間的交流提供了良好的環(huán)境條件。洪湖地處的湖北省近些年來一直都是我國克氏原螯蝦養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的省份，圍繞水域湖泊更是興建了許多人工養(yǎng)殖基地，人為的引進種同野生種之間獲得了基因交流的機會，自身遺傳多樣性相對較高。此外，環(huán)境因素與生物遺傳多樣性息息相關(guān)，物種迫于環(huán)境壓力而引起自身的遺傳變異，同樣也是造成區(qū)域物種遺傳多樣性水平變化的重要原因。綜合發(fā)現(xiàn)，洪澤湖克氏原螯蝦群體遺傳多樣性最豐富，最適合作為人工選育的親本來源。除此外，還可通過建立適當(dāng)規(guī)模的克氏原螯蝦種質(zhì)資源保護區(qū)，進而有效地留住野生種資源。與之前研究相比，雖說存在采樣點經(jīng)緯度上微弱的差異，但產(chǎn)生的結(jié)果卻是一致的，即我國大型淡水湖泊內(nèi)克氏原螯蝦野生種群的遺傳多樣性豐富，可進一步為良種選育提供優(yōu)質(zhì)的種質(zhì)資源。一般來說，外來引進物種常受瓶頸效應(yīng)和遺傳漂變作用影響，生物多樣性會有所降低［22］，外來引入的克氏原螯蝦可能經(jīng)過多次雜交及人為的多次引入，造成自身遺傳多樣性不降反升，這一問題需要引起重點關(guān)注。

3.2 我國克氏原螯蝦群體分化現(xiàn)象嚴重

克氏原螯蝦的引入至今已有60～70年，喜攀爬使其很容易從當(dāng)前水體跨越進入其他水體，進而同其他水體的相同物種進行長期雜交，加上受到不同的空間水文影響、山川河流阻隔，為群體間的分化創(chuàng)造了條件。除此，人為引種也會加劇原本親緣關(guān)系相近的物種在不同區(qū)域的分布［23］。

本研究采用14個多態(tài)位點對6個地域的克氏原螯蝦分析測試發(fā)現(xiàn)，各群體均存在顯著的雜合子不足現(xiàn)象。雜合子不足現(xiàn)象多由物種間非隨機交配或近親雜交引起，常見于多個物種間［24］。其中，近親雜交在克氏原螯蝦的群體內(nèi)極為普遍。首先，幼年蝦體初期會附著于母體腹部尋求庇護，此期間內(nèi)親緣關(guān)系相近的幼蝦會發(fā)生近交現(xiàn)象。更重要的是，受市場需求刺激，大規(guī)模的捕撈引起野生種群數(shù)量銳減，種群世代間基因比例波動大。非隨機交配和近交結(jié)果導(dǎo)致了所有檢測位點在所有群體中均偏離哈代溫伯格平衡，僅有少數(shù)位點在單一群體滿足哈代溫伯格平衡，這說明群體間已經(jīng)出現(xiàn)基因型的分化差異。分化的原因可能源于為了適應(yīng)環(huán)境變化的壓力。除此之外，克氏原螯蝦作為一種經(jīng)濟水產(chǎn)作物，近些年養(yǎng)殖規(guī)模逐漸擴大，人工養(yǎng)殖區(qū)域和密度日益增加，而大型淡水湖泊恰好提供了適合進行克氏原螯蝦養(yǎng)殖的天然理想化場所，再經(jīng)長期的地理隔離效應(yīng)，已形成相對獨立的類群。

參考文獻：

［1］Senol R，Kilic S，Tasdelen K. Pulse timing control for LED plant growth unit and effects on carnation［J］. Computers and Electronics in Agriculture，2016，123：125-134.

［2］倪靜靜. 水溫、pH和飼料對克氏原螯蝦攝食行為及其肉質(zhì)的影響［D］. 揚州：揚州大學(xué)，2016.

［3］農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局. 2020年中國漁業(yè)統(tǒng)計年鑒［M］. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2020.

［4］Barbaresi S，Gherardi F，Mengoni A，et al. Genetics and invasion biology in fresh waters：a pilot study of Procambarus clarkii in Europe［M］. Springer Netherlands，2007：381-400.

［5］Macaranas J，Mather P，Hoeben P，et al. Assessment of genetic variation in wild populations of the redclaw crayfish （Cherax quadricarinatus，von Martens 1868） by means of allozyme and RAPD-PCR markers［J］. Marine and Freshwater Research，1995，46（8）：1217-1228.

［6］黃 羽，戴銀根，畢成武，等. 長江中下游地區(qū)6個克氏原螯蝦群體遺傳多樣性分析［J］. 南昌大學(xué)學(xué)報（工科版），2011，33（3）：243-247.

［7］王長忠. 長江中下游地區(qū)克氏原螯蝦群體遺傳多樣性分析［D］. 武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

［8］邢智珺. 江蘇克氏原螯蝦典型群體遺傳多樣性微衛(wèi)星分析［D］. 上海：上海海洋大學(xué)，2014.

［9］秦海峰，龍 寧，吳建國，等. 甜葉菊微衛(wèi)星富集文庫的構(gòu)建與多態(tài)性標記的篩選［J］. 作物學(xué)報，2014，40（3）：447-456.

［10］邢智珺，姜虎成，陸 偉，等. 江蘇8個克氏原螯蝦群體遺傳多樣性微衛(wèi)星分析［J］. 上海海洋大學(xué)學(xué)報，2014，23（5）：656-662.

［11］黃小芳，唐章生，劉俊丹，等. 廣西不同地區(qū)克氏原螯蝦群體遺傳多樣性微衛(wèi)星分析［J］. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2020，51（2）：437-444.

［12］Sambrook J，F(xiàn)ritsch E F，Maniatis T. Molecular cloning：a laboratory manual［M］. New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989.

［13］Belfiore N M，May B. Variable microsatellite loci in red swamp crayfish，Procambarus clarkii，and their characterization in other crayfish taxa［J］. Molecular Ecology，2000，9（12）：2231-2234.

［14］Yeh F. Population genetic analysis of codominant and dominant markers and quantitative traits［J］. Belgian Journal of Botany，1997，129：157.

［15］Rousset F. GENEPOP007：a complete re-implementation of the genepop software for Windows and Linux［J］. Molecular Ecology Resources，2008，8（1）：103-106.

［16］Botstein D R，White R L，Skolnick M H，et al. Construction of a genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphisms［J］. American Journal of Human Genetics，1980，32（3）：314-331.

［17］Hubisz M J，Daniel F，Matthew S，et al. Inferring weak population structure with the assistance of sample group information［J］. Molecular Ecology Resources，2009，9（5）：1322-1332.

［18］Jakobsson M，Rosenberg N A.CLUMPP：a cluster matching and permutation program for dealing with label switching and multimodality in analysis of population structure［J］. Bioinformatics，2007，23（14）：1801-1806.

［19］Rosenberg N A. Distruct：a program for the graphical display of population structure［J］. Molecular Ecology Notes，2004，4（1）：137-138.

［20］劉倩倩，葉浩婷，李 放，等. 杭白芷種質(zhì)資源遺傳多樣性的SSR分析［J］. 南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2018，49（3）：418-423.

［21］Yeh F C，Boy T J B. Population genetic analysis of codmminant and dominant markers and quantitave traits［J］.Belgian Journal Botany，1997，129：157-163.

［22］Facon? B，Pointier? J? P，Glaubrecht? M，et? al.? A? molecular? phylogeography approach? to? biological? invasions? of? the? New? World? by? parthenogenetic? Thiarid snails［J］. Molecular Ecology，2003，12：3027-3039.

［23］黃 羽. 鄱陽湖流域克氏原螯蝦的資源狀況及長江中下游克氏原螯蝦遺傳多樣性研究［D］. 南昌：南昌大學(xué)，2012.

［24］Serrano M，Calvo J H，Martínez M，et al. Microsatellite based genetic diversity and population structure of the endangered Spanish Guadarrama goat breed［J］. BMC Genetics，2009，10：61.

收稿日期：2022-04-13

資助項目：中國水產(chǎn)科學(xué)研究院基本科研業(yè)務(wù)費（編號：2022XT01）；江蘇省種業(yè)振興“揭榜掛帥”項目（編號：JBGS［2021］123）；中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心基本科研業(yè)務(wù)費項目（編號：2021JBFM21）。

作者簡介：高 楊（1997—），男，安徽銅陵人，碩士研究生，研究方向為水產(chǎn)動物遺傳育種。E-mail：1463455739@qq.com。

通信作者：蘇勝彥，博士，副研究員，研究方向為蝦蟹遺傳育種，E-mail：ouhaicourse@hotmail.com；朱 健，博士，研究員，研究方向為水產(chǎn)動物遺傳育種和水產(chǎn)養(yǎng)殖，E-mail：zhuj@ffrc.cn。