劉紅微 ,張美莉*,池富榮
1. 河套學(xué)院(巴彥淖爾 015000);2. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 食品科學(xué)與工程學(xué)院(呼和浩特 010018);3. 內(nèi)蒙古自治區(qū)巴彥淖爾市杭錦后旗委黨校(巴彥淖爾 015000)
牧區(qū)醪糟是傳統(tǒng)的低醇發(fā)酵飲料,具有地域特色。燕麥醪糟是以燕麥-黍米復(fù)合粉為原料,加水高溫糊化后經(jīng)玉米芽粉液化,而后經(jīng)高溫發(fā)酵得到的固液混合物[1-2]。燕麥醪糟的研制,既豐富了醪糟的種類,又開(kāi)發(fā)了新型燕麥?zhǔn)称?。燕麥醪糟含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分及功能成分,有助于消化、提高免疫力、降血糖、預(yù)防癌癥等[8]。迄今為止,醪糟的生產(chǎn)多為家庭或作坊式生產(chǎn),存在產(chǎn)品品質(zhì)不穩(wěn)定等問(wèn)題。
谷物發(fā)芽處理能夠激活谷物中的酶活力,如α-淀粉酶、蛋白酶等。α-淀粉酶又稱為液化酶,楊蕾[1]研究指出玉米發(fā)芽制粉后,玉米芽粉中α-淀粉酶活力可達(dá)50 U/g,所以玉米芽粉具有使淀粉液化的能力。液化是淀粉高溫糊化后,在液化酶的作用下使糊化后的淀粉水解成小分子的可溶性糖,破壞膠體狀態(tài),從而使淀粉的黏度下降,流動(dòng)性好,形成流動(dòng)性醪液[3-5],為下一步工藝創(chuàng)造條件。液化工藝為燕麥醪糟發(fā)酵前的關(guān)鍵環(huán)節(jié),是后期糖化與發(fā)酵的基礎(chǔ)。研究以燕麥-黍米復(fù)合粉為原料,進(jìn)行燕麥醪糟發(fā)酵前液化工藝的優(yōu)化,為燕麥醪糟發(fā)酵工藝的研究提供前期準(zhǔn)備。
燕麥面、黍米面、玉米芽粉(市售);試劑均為分析純(天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)。
1.2.1 工藝流程玉米芽粉→燕麥→黍米復(fù)合粉→過(guò)篩→糊化→液化→燕麥→黍米液化液
1.2.2 分析方法
1.2.2.1 燕麥-黍米液化液相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定方法
還原糖(以葡萄糖計(jì))測(cè)定:還原糖含量的測(cè)定采用菲林試劑滴定法。
總固形物的測(cè)定:采用105 ℃恒重法。
DE值[6]:葡萄糖當(dāng)量值,是還原糖(以葡萄糖計(jì))占溶液干物質(zhì)的百分比,按式(1)計(jì)算[7-8]。
1.2.3 試驗(yàn)方法
1.2.3.1 單因素試驗(yàn)
將燕麥粉與黍米粉按3∶7(W/W)比例混合,按料水比1∶5(g/mL)蒸煮糊化40 min,然后降低溫度,添加玉米芽粉進(jìn)行液化。試驗(yàn)選取玉米芽粉添加量(100 g原料玉米芽粉用量)、溫度、時(shí)間三個(gè)因素進(jìn)行單因素試驗(yàn)[9-11]。在60 ℃,20 min的條件下,按玉米芽粉添加量5%,10%,15%和20%進(jìn)行試驗(yàn);在玉米芽粉添加量10%、時(shí)間20 min的條件下,按溫度60,65,70和75 ℃進(jìn)行試驗(yàn);在溫度60 ℃,玉米芽粉用量10%(占復(fù)合粉百分比)的條件下,按液化時(shí)間15,20,25和30 min進(jìn)行試驗(yàn)。每組試驗(yàn)平行進(jìn)行3次,確定最優(yōu)單因素水平。
1.2.3.2 正交試驗(yàn)
在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,選取玉米芽粉添加量、溫度、時(shí)間3個(gè)因素,以DE值為考核指標(biāo),設(shè)計(jì)三因素三水平的正交試驗(yàn),以確定燕麥-黍米復(fù)合粉最佳液化工藝參數(shù)。
采用Excel對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理并作圖,用SPSS 25.0分析軟件進(jìn)行正交設(shè)計(jì)及數(shù)據(jù)處理。
DE值可作為燕麥-黍米醪糟發(fā)酵前液化工藝的考核指標(biāo)。當(dāng)DE<10%時(shí),淀粉顆粒會(huì)發(fā)生重結(jié)合現(xiàn)象;當(dāng)DE>20%時(shí),影響催化效果,造成最終糖化DE值變低[12-13]。故燕麥-黍米復(fù)配谷物粉液化至DE值在20%左右為宜。
2.1.1 玉米芽粉添加量對(duì)燕麥-黍米粉液化的影響
由圖1可知,隨著玉米芽粉添加量的增加,燕麥-黍米液化液的DE值呈現(xiàn)升高的趨勢(shì),玉米芽粉添加量為10%及15%時(shí),水解液的DE值上升趨勢(shì)平緩。因?yàn)樵诘孜餄舛纫欢ǖ那闆r下,當(dāng)玉米芽粉添加量小于10%時(shí),底物的濃度大于玉米芽粉中酶的濃度,反應(yīng)速率主要受玉米芽粉中酶的濃度的影響,隨著玉米芽粉中酶的濃度的增加,液化液的DE值迅速增大;當(dāng)玉米芽粉添加量為10%及15%時(shí),此時(shí)底物的濃度和玉米芽粉中酶濃度基本上達(dá)到動(dòng)態(tài)平衡,燕麥-黍米液化液的DE值變化不大。玉米芽粉添加量10%時(shí),燕麥-黍米液化液的DE值近于20%,因此,選10%為較優(yōu)玉米芽粉添加量進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。
圖1 玉米芽粉添加量對(duì)液化液DE值的影響
2.1.2 溫度對(duì)燕麥-黍米粉液化的影響
由圖2可知,隨著溫度的升高,燕麥-黍米液化液的DE值整體呈上升趨勢(shì),但是65 ℃時(shí)燕麥-黍米液化液DE值達(dá)到頂點(diǎn)后,上升趨勢(shì)平緩,略有下降。65℃前溫度升高,酶與底物反應(yīng)速度加快;65 ℃之后溫度繼續(xù)升高,會(huì)使酶蛋白逐漸變性失活,使酶的作用下降。溫度過(guò)高或過(guò)低都會(huì)降低酶的催化效率,影響酶促反應(yīng)速度,甚至可導(dǎo)致酶失活而完全喪失催化作用[14]。因此,考慮能耗及玉米芽粉酶活性,選擇65 ℃進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。
圖2 液化溫度對(duì)液化液DE值的影響
2.1.3 液化時(shí)間對(duì)燕麥-黍米粉液化的影響
因?yàn)槊附饩哂袑R恍?,發(fā)生酶促反應(yīng)前須識(shí)別底物并與之結(jié)合,短時(shí)內(nèi),酶促反應(yīng)不完全,DE值較低;酶促反應(yīng)一定時(shí)間后,反應(yīng)相對(duì)完全,繼續(xù)增加液化時(shí)間,酶分子出現(xiàn)鈍化現(xiàn)象及底物濃度降低,液化效果下降[15-17]。由圖3可知,隨著液化時(shí)間的延長(zhǎng),燕麥-黍米液化液的DE值先升高后略有下降。液化15 min時(shí),燕麥-黍米液化液DE值接近20%,考慮設(shè)備利用率,液化時(shí)間選15 min。
圖3 液化時(shí)間對(duì)液化液DE值的影響
2.1.4 燕麥-黍米復(fù)合粉液化的正交試驗(yàn)結(jié)果
在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,進(jìn)行三因素三水平的正交試驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表1。由表1和表2可知,玉米芽粉添加量與液化溫度顯著影響燕麥-黍米復(fù)配粉的水解效果,影響燕麥-黍米粉DE值的主次因素為玉米芽粉添加量>液化溫度>液化時(shí)間,DE值最為接近20的組合分別為A2B2C1與A1B3C2,即:玉米芽粉添加量10%、液化溫度65 ℃、液化時(shí)間10 min,此時(shí)DE值為20.41%;玉米芽粉添加量8%、液化溫度70 ℃、液化時(shí)間15min,此時(shí)DE值為20.42%。玉米芽粉添加量F值高于液化溫度F值。玉米芽粉添加量對(duì)燕麥-黍米粉液化工藝的影響高于液化溫度,綜合考慮成本、設(shè)備利用率及安全等因素,液化工藝選擇A2B2C1。
表1 液化正交試驗(yàn)結(jié)果
表2 液化正交試驗(yàn)結(jié)果方差分析
研究以燕麥-黍米復(fù)合粉為原料,在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用正交試驗(yàn)確定了燕麥醪糟發(fā)酵前的最佳液化工藝:玉米芽粉添加量10%、液化溫度65 ℃、液化時(shí)間10 min。在此條件下,燕麥-黍米液化液DE值為20.41%。研究確定了燕麥醪糟發(fā)酵前液化工藝,為后續(xù)燕麥醪糟的發(fā)酵提供數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。