◎ 李啟卉，錢 琪

（國家輕工業(yè)食品質(zhì)量監(jiān)督檢測南京站，江蘇 南京 211816）

噻蟲胺是新煙堿類殺蟲劑，在水稻、番茄和茶葉中起到一定的防治害蟲的作用，它可有效殺死吸食和咀嚼昆蟲，如蚜蟲、粉虱、飛虱、薊馬和甲蟲，噻蟲胺具有內(nèi)吸性、觸殺和胃毒作用，對姜蛆等有較好的防效[1]。QuEChERS 是現(xiàn)有的應(yīng)用廣泛的農(nóng)藥殘留前處理技術(shù)，相比傳統(tǒng)的固相萃取方法具有節(jié)約時間、高效且安全等優(yōu)點。但使用QuEChERS 法處理樣品時，會使得樣品中無機(jī)鹽、塑化劑等外源性雜質(zhì)增加，從而在進(jìn)樣時導(dǎo)致多種雜質(zhì)與目標(biāo)組分競爭色譜系統(tǒng)中的活性位點，產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)（Matrix Effec，ME），進(jìn)而影響樣品的準(zhǔn)確定量，它會使分析值偏離真實值，從而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。因此在檢測農(nóng)藥殘留的過程中，應(yīng)盡可能消除基質(zhì)效應(yīng)的影響[2-3]。在使用液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法檢測時，離子化過程中很有可能產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)。例如，基質(zhì)中的某些成分會與農(nóng)藥競爭離子化過程，從而使農(nóng)藥的電離數(shù)量減少，產(chǎn)生離子抑制效應(yīng)。另一種可能是基質(zhì)中的某些成分與農(nóng)藥形成離子對，增強(qiáng)檢測信號，產(chǎn)生離子增強(qiáng)效應(yīng)?；|(zhì)效應(yīng)在很大程度上取決于分析物的化學(xué)性質(zhì)，但某些儀器參數(shù)，如電離源（APCI、ESI）、電離模式和流速在一定程度上也會產(chǎn)生影響[4-5]。因此有必要對基于QuEChERS-液相色譜質(zhì)譜法測定農(nóng)藥殘留的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行研究，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

生姜，購自盒馬；噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品（100 μg·mL-1，北京壇墨公司）；乙腈（質(zhì)譜級，默克集團(tuán)）；甲酸（色譜純，安可化工）；無水硫酸鎂（分析純，西隴科學(xué)）；氯化鈉（分析純，上海占云化工有限公司）；PSA（分析純，青云化學(xué)科技有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

Waters-TQ-XS 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國waters公司）；BSA124S-CW 電子天平（賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司）；移液器（艾本德中國有限公司）；離心機(jī)（上海安亭-GL-20G-Ⅱ）；渦旋儀（其林貝爾儀器-Vortex QL-861）。

1.3 方法

1.3.1 樣品前處理方法

稱取質(zhì)量為5 g 的生姜試樣于50 mL 塑料離心管中，加入噻蟲胺含量為0.50 mg·kg-1的標(biāo)準(zhǔn)品，加入10 mL 乙腈，蓋上離心管蓋，渦旋2 min，靜置后超聲10 min，在樣品中加入2 勺氯化鈉，蓋上瓶蓋后渦旋2 min，在10 000 r·min-1的速度下離心5 min，吸取6 mL 上清液加到內(nèi)含0.75 g 硫酸鎂及0.25 g PSA 的塑料離心管中渦旋，靜置試樣后過0.22 μm 有機(jī)相微孔濾膜。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線配制

（1）標(biāo)準(zhǔn)儲備液的配制。吸取10 μL 噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇稀釋至1 mL，配制成濃度為1 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)使用液。

（2）溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。分別吸取10 μL、20 μL、50 μL、80 μL、100 μL 和200 μL 的噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)使用液，用初始流動相0.1%甲酸水-乙腈稀釋至1 mL，配制成濃度為10 μg·mL-1、20 μg·mL-1、50 μg·mL-1、80 μg·mL-1、100 μg·mL-1和200 μg·mL-1的溶劑標(biāo)準(zhǔn)工作液，上機(jī)測定。

（3）基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制。稱取兩個空白生姜樣品，按照前處理方法進(jìn)行前處理，制得10 mL 空白基質(zhì)提取液，分別吸取10 μL、20 μL、50 μL、80 μL、100 μL 和200 μL 噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)使用液，用空白基質(zhì)提取液稀釋至1 mL，配制成濃度為10 μg·mL-1、20 μg·mL-1、50 μg·mL-1、80 μg·mL-1、100 μg·mL-1和200 μg·mL-1的基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液，上機(jī)測定。

1.3.3 儀器條件

（1）色譜條件。色譜柱為ACQUITY UPLC?B EH C18；柱溫：30 ℃，流動相A 為0.1%甲酸水，B 為乙腈；流速為0.4 mL·min-1；流動相梯度為0 ～2 min，A 為90%，B 為10%，2 ～6 min，A 從90% 到10%，B 從10% 到90%，6 ～10 min，A 為90%，B 為10%。

（2）質(zhì)譜條件。ESI 正離子模式，多反應(yīng)監(jiān)測模式；噻蟲胺離子對為250 ＞169，250 ＞132，定量離子對為250 ＞169；錐孔電壓為25 V，碰撞能量為15 V；碰撞氣：氬氣；霧化氣：氮氣；霧化器溫度：500 ℃；霧化器流速：800 L·h-1；毛細(xì)管電壓：0.50 kV。

2 結(jié)果與分析

2.1 方法的線性關(guān)系及檢出限

按照上述色譜方法和質(zhì)譜方法，待儀器穩(wěn)定后，分別對溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行測定。以濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。圖1為噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品的色譜圖。溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程和相關(guān)系數(shù)如圖2 所示，檢出限為0.001 mg·kg-1；基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程和相關(guān)系數(shù)如圖3 所示，檢出限為0.001 mg·kg-1。

圖1 噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖

圖2 溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程和相關(guān)系數(shù)圖

圖3 基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程和相關(guān)系數(shù)圖

2.2 回收率試驗

分別采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液和溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量分析，在生姜空白基質(zhì)中添加噻蟲胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行加標(biāo)回收率試驗，添加水平為0.5 mg·kg-1、1.0 mg·kg-1和5.0 mg·kg-1，每組水平各重復(fù)測定3 次。兩種標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的回收率如表1 所示。基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液定量的回收率更好。

表1 不同標(biāo)準(zhǔn)曲線定量下樣品的噻蟲胺回收率表

2.3 精密度試驗

采用溶劑標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量，空白生姜樣品在0.5 mg·kg-1添加水平下，連續(xù)測定6 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.56%；采用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行定量，空白生姜樣品在0.5 mg·kg-1添加水平下，連續(xù)測定6 次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.59%。兩種標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的精密度如表2 所示?；|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液定量的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差較小，精密度更高。

表2 不同標(biāo)準(zhǔn)定量下樣品的噻蟲胺相對標(biāo)準(zhǔn)偏差表

3 結(jié)論

本實驗研究了生姜的基質(zhì)效應(yīng)，結(jié)果表明，采用溶劑標(biāo)曲定量得到的樣品回收率為79.8%～87.6%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.56%，采用基質(zhì)標(biāo)曲定量得到的樣品回收率為91.4%～100.3%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.59%。由此可見基質(zhì)效應(yīng)在生姜中存在，且較為明顯?；|(zhì)效應(yīng)在一定程度上影響了實驗的準(zhǔn)確性，在生姜中噻蟲胺含量測定過程中，采用溶劑標(biāo)曲定量的回收率偏低，定量結(jié)果也偏低，會影響實驗數(shù)據(jù)最終的準(zhǔn)確性；采用空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行定量，基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性優(yōu)于溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線，回收率也有明顯的提高，實驗數(shù)據(jù)也更準(zhǔn)確。若想提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，應(yīng)在以后的實驗過程中考慮使用基質(zhì)空白液配制標(biāo)曲，消除基質(zhì)干擾，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。