曹天宇,唐才俊,樊 嬋,李 煜,易宗娓,劉立亞

高血壓是國內(nèi)最常見的心血管疾病之一[1],其中原發(fā)性高血壓約占95%。相關(guān)研究顯示,2015年全球高血壓患者約11.3億,估計到2025年,高血壓患者人數(shù)將增加15%～20%,接近15億人[2]。血壓持續(xù)增高可引起血管內(nèi)皮損傷,會導致動脈粥樣硬化,從而引發(fā)心血管疾病[3]。心血管疾病已成為我國首位死亡原因[4],管理好高血壓患者是遏制我國心腦血管疾病蔓延發(fā)展的關(guān)鍵措施之一。許多環(huán)境因素與原發(fā)性高血壓有關(guān)[5],但高血壓風險的差異高達60%是由于個體基因差異引起的[6]。研究表明遺傳因素在血壓波動中起重要作用,人群中個體血壓變異的30%～70%與基因變異有關(guān)[7],目前發(fā)現(xiàn)超過150種基因突變與原發(fā)性高血壓發(fā)病有相關(guān)性[8]。因此,針對高血壓候選基因多態(tài)性的大樣本,多基因和跨種族綜合研究有助于更好地了解高血壓發(fā)病的遺傳機制[9]。研究表明[10],湘西地區(qū)高血壓的患病率明顯高于其他地區(qū),然而其發(fā)病機制尚不清楚。有研究[11]表明,2型糖尿病與PTPRD(rs17584499)、TOMM7(rs2240727)和PARD3B (rs849230)三個基因位點相關(guān)。由于高血壓和2型糖尿病具有相似的危險因素[12],高血壓是糖尿病的危險因素[13],因此本研究通過對PTPRD(rs649891、rs17584499)、TOMM7(rs2240727)和PARD3B (rs849230)四個基因位點與懷化地區(qū)人群高血壓之間相關(guān)性研究,找出懷化地區(qū)人群高血壓相關(guān)危險因素,為高血壓的防治提供可靠的理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料:研究對象來自2020年4月至5月從懷化地區(qū)菁撫州鎮(zhèn)、牙屯堡鎮(zhèn)、雙江鎮(zhèn)3個鄉(xiāng)鎮(zhèn)隨機抽取的當?shù)鼐用?。本研究共收?16例研究對象(男性163例,女性253例),納入病例組195人(男性82例,女性113例),健康對照組221人(男性81例,女140例),兩組性別構(gòu)成差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

1.1.1 納入標準:年齡均大于18周歲;符合《中國高血壓防治指南(2018)》[14]的診斷標準;在未使用降壓藥物的情況下,非同日3次測量診室血壓,收縮壓≥140 mmHg和 (或) 舒張壓≥90 mmHg;患者既往有高血壓史,目前正在使用降壓藥物,血壓雖然低于140/90 mmHg,仍應診斷為高血壓。

1.1.2 排除標準:嚴重腎病和肝功能障礙者;合并尿毒癥、腦卒中等其他心血管疾病。所有的研究對象在參與研究前都簽署了知情同意書,本研究得到了湖南醫(yī)藥學院倫理審查委員會的同意。

1.2 流行病學調(diào)查:由經(jīng)過專門培訓的調(diào)查人員使用統(tǒng)一設(shè)計的調(diào)查問卷對研究對象進行問卷調(diào)查和體格測量,問卷內(nèi)容包括一般情況、行為飲食習慣、高血壓家族史和既往病史等;體格測量包括身高、體重、腰圍、臀圍和血壓,血壓由經(jīng)過培訓的醫(yī)務人員采用水銀血壓計測定。資料收集的具體內(nèi)容請參見作者同類研究文獻[11]。身體質(zhì)量指數(shù)(BMI)=體重(kg)/身高(m)2。腰臀比(WHR)=腰圍/臀圍。根據(jù)中國成人BMI分類標準[15],18 kg/m2≤BMI<24 kg/m2為正常;24 kg/m2≤BMI<28 kg/m2為超重;BMI≥28 kg/m2為肥胖。WHR分類標準為女性WHR≥0.85或男性WHR≥0.9屬于肥胖。

1.3 基因分型與生化指標檢測:使用由山東3D生物系統(tǒng)公司提供的試劑盒檢測甘油三酯(TG),總膽固醇(TC),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C);使用由德國QIAGEN生物公司提供的 DNA提取試劑盒提取血液中的DNA。采用Multiplex PCR-SNaPshot(基因組DNA的多重PCR擴增方法)對PTPRD(rs649891、rs17584499)、TOMM7(rs2240727)和PARD3B (rs849230)四個基因位點進行基因分型。PCR引物信息見表1。

表1 4個SNP位點的PCR引物

2 結(jié)果

2.1 2組間血壓與生化指標的比較:病例組的甘油三酯和總膽固醇的比例顯著高于對照組(P<0.05),LDL和HDL水平在兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。

表2 2組間血壓與生化指標的比較

2.2 2組人群基本特征的比較:2組患者年齡、WHR、高脂高蛋白飲食、BMI比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。

表3 人群基本特征的比較[n(%)]

2.3 2組間四個基因位點基因型的比較:對四個位點基因型分布進行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗,最小等位基因頻率大于0.05,說明基因頻率分布符合群體遺傳平衡原理,具有穩(wěn)定性。rs649891位點(χ2=7.53,P<0.05)、rs17584499位點(χ2=8.78,P<0.05),基因型在兩組間的分布差異比較有統(tǒng)計學意義,病例組的CC基因型比例均低于對照組(P<0.05),而rs849230、 rs2240727位點的基因型在兩組間的分布比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表4。

表4 多態(tài)位點與高血壓的遺傳關(guān)聯(lián)分析

2.4 高血壓影響因素的二元logistic回歸分析:將研究對象高血壓的診斷結(jié)果作為因變量,年齡、rs649891、rs17584499、BMI、WHR、高血壓家族史、高脂高蛋白飲食等變量作為自變量,利用二元logistic回歸分析方法進行多因素分析,見表5。高血壓病人的回歸模型中常數(shù)項為α=-3.171,模型差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。年齡、BMI為超重或肥胖、中心性肥胖、高脂高蛋白飲食與高血壓發(fā)生呈正相關(guān)(P<0.05),rs649891的CT基因型與高血壓發(fā)生呈負相關(guān)(P<0.05),見表6。

表5 各分類變量賦值結(jié)果

表6 高血壓影響因素的二元logistic回歸分析結(jié)果

3 討論

懷化市處于我國湘西南地區(qū),以往研究表明湘西地區(qū)高血壓的患病率較高(52.3%)[10],明顯高于2015年中國居民營養(yǎng)與慢性病狀況報告中全國成年人25.2%的患病水平[16],這可能與地域和生活方式的不同有關(guān)。飲食習慣是影響高血壓病人血壓控制水平的重要方面,高脂高蛋白飲食、高鈉飲食等不健康的飲食方式對高血壓有顯著影響[17]。懷化地區(qū)人群原發(fā)性高血壓患者血清甘油三酯、總膽固醇、LDL增高和HDL降低也可能與高血壓發(fā)病產(chǎn)生某種關(guān)聯(lián)。

國內(nèi)外對高血壓危險因素的研究很多,但高血壓的病因尚不明確,遺傳和環(huán)境因素及其相互作用在高血壓的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。PTPRD屬于蛋白質(zhì)酪氨酸磷酸酶的受體家族,可以控制基因表達和表觀遺傳變異[18]。TOMM7基因編碼線粒體外膜轉(zhuǎn)位酶復合物的調(diào)節(jié)亞基,在核編碼的線粒體蛋白轉(zhuǎn)位到線粒體中發(fā)揮著重要作用[19]。PARD3B調(diào)控細胞極性的形成,有研究表明[20],極性蛋白可能改善脂質(zhì)及碳水化合物的合成,起到治療肥胖癥的作用。目前,我國高血壓發(fā)病率為29.6%,其遺傳易感性為30%～60%,至少有40%～60%與基因息息相關(guān),表明遺傳因素在高血壓的發(fā)病機制中占有重要作用[21]。因此基因多態(tài)性與高血壓易感性的相關(guān)性也引起了極大的關(guān)注[22]。

研究結(jié)果顯示,BMI為超重或肥胖、中心性肥胖與高血壓發(fā)生呈正相關(guān)(P<0.05),與既往研究結(jié)論一致[23-24]。研究中年齡>60歲組高血壓風險是年齡≤60歲組的1.05倍,(95%CI:1.02～1.07)。與其他研究結(jié)論相似[25],即中老年人群是高血壓的高危人群。本研究中發(fā)現(xiàn)高脂高蛋白飲食OR=1.91(95%CI:1.23～2.94),提示其對高血壓的發(fā)生有一定的影響。馮琤聰[26]的研究表明不飽和脂肪酸可替代碳水化合物提供能量,從而達到良好的血壓控制效果。

本研究發(fā)現(xiàn),PTPRD基因的rs649891位點與懷化地區(qū)人群高血壓存在相關(guān)性,基因多態(tài)在病例組中CT基因型56例(28.7%),對照組92例(41.6%),病例組的CT基因型頻率明顯低于對照組。經(jīng)調(diào)整年齡、高脂高蛋白飲食、BMI、WHR后,rs649891位點的CT基因型與高血壓仍存在有意義的關(guān)聯(lián),與高血壓的發(fā)生呈負相關(guān)(OR=0.51,P<0.05)。

綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)PTPRD基因的rs649891位點與懷化地區(qū)人群高血壓有相關(guān)性,其CT基因型可能是懷化地區(qū)人群高血壓的保護因素,BMI、高脂高蛋白飲食、年齡、WHR為高血壓的主要環(huán)境影響因素。因此,控制這些因素對高血壓的早期預防具有重要意義,同時針對這些危險因素對懷化地區(qū)居民開展健康教育,指導人們采取健康的生活方式和飲食習慣,控制肥胖,從而有效降低高血壓的患病風險。