周偉偉，高 敏，張 寧，劉 迎

（陽(yáng)谷縣疾病預(yù)防控制中心，山東聊城 252300）

水是生命的本源，在人們的日常生活中具有無(wú)可替代的作用[1]。但近年來(lái)隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，工農(nóng)業(yè)、生活污染越來(lái)越嚴(yán)重，導(dǎo)致水質(zhì)受到了一定程度的影響[2]。因此，對(duì)生活飲用水的水質(zhì)進(jìn)行檢驗(yàn)非常必要。微生物檢驗(yàn)是檢驗(yàn)水質(zhì)的重要手段，在認(rèn)真遵照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗(yàn)操作的前提下，可較為準(zhǔn)確地檢驗(yàn)出水中的菌落數(shù)量[3-4]。相關(guān)研究報(bào)道也指出，微生物檢驗(yàn)?zāi)軐?duì)生活飲用水的性質(zhì)進(jìn)行查驗(yàn)，可及時(shí)找到病原菌，且有利于了解生物性有害物質(zhì)的污染情況，能為水質(zhì)的監(jiān)測(cè)提供重要的參考依據(jù)，對(duì)提高水質(zhì)有積極作用[5-7]。但不同檢驗(yàn)方法的檢驗(yàn)結(jié)果存在一定的差異性，因此探討一種更為有效的檢驗(yàn)方法非常有必要。鑒于此，對(duì)2021 年4 個(gè)季度的800 份生活飲用水樣本進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，并對(duì)比多管發(fā)酵法與濾膜法的檢驗(yàn)結(jié)果。

1 材料與方法

1.1 樣品

采集2021 年4 個(gè)季度的生活飲用水樣本800 份，對(duì)樣本進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，根據(jù)不同檢驗(yàn)方法將樣本分為多管發(fā)酵組、濾膜組，每組樣本400 份。兩組樣本均包括豐水期、枯水期的生活飲用水樣本各200份。同時(shí)為了確保樣本的均衡性，采集點(diǎn)的選擇采用隨機(jī)抽樣法。所有樣本采集后，均放在一次性無(wú)菌袋內(nèi)儲(chǔ)存，并盡快送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。

1.2 儀器與試劑

培養(yǎng)箱（天津市萊玻特瑞儀器設(shè)備有限公司）；過(guò)濾儀（上海山姆環(huán)保設(shè)備有限公司）；培養(yǎng)基（北京百因諾生物科技有限公司）；顯微鏡（BXJ602，寧波舜宇儀器有限公司）；培養(yǎng)皿（滄州維康食品藥品包裝有限公司）；載玻片（江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司）；分度吸管（蘇州市聯(lián)統(tǒng)儀器儀表試劑有限公司）；無(wú)菌鑷子（揚(yáng)州亞申醫(yī)療科技有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

全部樣本在送至實(shí)驗(yàn)室后4 h 內(nèi)進(jìn)行檢驗(yàn)，以防出現(xiàn)樣本污染，造成檢驗(yàn)結(jié)果的偏差。檢驗(yàn)過(guò)程中，嚴(yán)格根據(jù)有關(guān)規(guī)定執(zhí)行操作，微生物檢驗(yàn)項(xiàng)目包括總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌和雜菌。

1.3.1 多管發(fā)酵法

將1 mL 水樣接種到10 mL 雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，將1 mL 水樣接種到10 mL 單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中，另將1 mL 水樣注入10 mL 滅菌生理鹽水中，各接種5 管，充分混勻，置于培養(yǎng)箱內(nèi)，培養(yǎng)箱溫度設(shè)置（36±1）℃，培養(yǎng)時(shí)間（24±2）h。如所有培養(yǎng)管不出現(xiàn)產(chǎn)酸產(chǎn)氣，視為樣本中總大腸菌群陰性；若有產(chǎn)酸產(chǎn)氣，挑取產(chǎn)酸產(chǎn)氣發(fā)酵管中的菌落接種于伊紅美藍(lán)瓊脂板上，并置于培養(yǎng)箱，培養(yǎng)箱溫度設(shè)置36 ℃左右，培養(yǎng)時(shí)間18～24 h，定時(shí)觀察瓊脂板狀況。對(duì)符合以下特征菌落進(jìn)行革蘭氏染色、鏡檢和證實(shí)試驗(yàn)，①呈淡紫紅色，中心較深；②呈紫褐色；③深紫黑色，有金屬光澤。

1.3.2 濾膜法

對(duì)濾膜進(jìn)行殺菌，使用無(wú)菌鑷子將微孔濾膜（0.45 μm）放在裝有蒸餾水的燒杯中，蒸餾水煮至沸騰，共3 次，每次15 min，除去前兩次的沸水，以免有殘留物殘存，確保濾膜無(wú)菌。使用無(wú)菌鑷子夾取濾膜置于無(wú)菌濾床上，濾膜粗糙一面處于上方，加固過(guò)濾器，將100 mL 樣本置于過(guò)濾器中，開啟閘門，氣壓設(shè)定為0.05 mmHg，進(jìn)行抽濾。將過(guò)濾后的濾膜取出，用無(wú)菌鑷子夾取濾膜邊緣將濾膜置于含有品紅硫酸鈉的培養(yǎng)基上，濾膜平整置于培養(yǎng)基，以免出現(xiàn)氣泡，培養(yǎng)基倒置放在恒定37 ℃的培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)48 h。

1.4 判定標(biāo)準(zhǔn)

參照《生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》（GB 5749—2006）相關(guān)規(guī)定，樣本中均未檢驗(yàn)出總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌和雜菌，視為樣本質(zhì)量合格；若其中任何一項(xiàng)指標(biāo)未達(dá)到規(guī)定，則視為樣本質(zhì)量不合格。

1.5 觀察指標(biāo)

①對(duì)比兩組微生物檢驗(yàn)的合格率，包括總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌和雜菌的合格率與總合格率。②對(duì)比不同時(shí)期生活飲用水微生物檢驗(yàn)的總合格率。

1.6 數(shù)據(jù)分析

應(yīng)用SPSS 22.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩種方法生活飲用水微生物檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比

多管發(fā)酵組總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌和雜菌的合格率與總合格率低于濾膜組，P均＜0.05。見表1。

表1 兩種方法的微生物檢驗(yàn)結(jié)果

2.2 兩種方法不同時(shí)期生活飲用水微生物檢驗(yàn)結(jié)果對(duì)比

多管發(fā)酵組豐水期、枯水期生活飲用水微生物檢驗(yàn)的總合格率均低于濾膜組，P均＜0.05。見表2。

表2 不同時(shí)期生活飲用水微生物檢驗(yàn)結(jié)果

3 結(jié)論與討論

水是人們生活的必需品，水質(zhì)會(huì)直接影響人們的身體健康，甚至?xí)?duì)生命安全造成威脅[8]。但水質(zhì)問(wèn)題長(zhǎng)期存在，特別是農(nóng)村地區(qū)，水質(zhì)不合格情況較為常見[9]。對(duì)生活飲用水進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，有利于發(fā)現(xiàn)影響水質(zhì)的影響因素，為政府部門強(qiáng)化水質(zhì)管理提供參考，從而采取管理舉措，促進(jìn)水質(zhì)提升[10-11]。

病原微生物侵入人體，可誘發(fā)感染，常使患者出現(xiàn)腸道系統(tǒng)癥狀[12]?？偞竽c桿菌主要用于評(píng)定水質(zhì)的衛(wèi)生質(zhì)量，對(duì)腸道疾病的傳播控制有一定的指導(dǎo)作用[13-14]。耐熱大腸菌群主要來(lái)自人和溫血?jiǎng)游锏募S便，是評(píng)估水質(zhì)的重要參考依據(jù)。

多管發(fā)酵組總大腸菌群、耐熱大腸菌群、大腸埃希菌、雜菌的合格率與總合格率均低于濾膜組，提示多管發(fā)酵法對(duì)生活飲用水微生物檢出率較高，便于檢出總大腸菌群、大腸埃希氏菌、耐熱大腸菌群，可科學(xué)判斷生活飲用水水質(zhì)。多管發(fā)酵組豐水期、枯水期生活飲用水微生物檢驗(yàn)的總合格率均低于濾膜組，進(jìn)一步驗(yàn)證了多管發(fā)酵法在生活飲用水微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。豐水期生活飲用水微生物檢驗(yàn)的總合格率高于枯水期，提示豐水期的水質(zhì)更好。

從以上分析發(fā)現(xiàn)，生活飲用水存在質(zhì)量不合格的現(xiàn)象，應(yīng)引起重視，加強(qiáng)監(jiān)管控制。政府及相關(guān)部門應(yīng)不斷提高生活飲用水管理，定期檢驗(yàn)水質(zhì)，以提高飲用水安全性。建議措施如下：①加強(qiáng)對(duì)水源地的保護(hù)，嚴(yán)禁在水源地鄰近區(qū)域進(jìn)行排污、排放廢氣，嚴(yán)禁使用對(duì)水質(zhì)有危害性的化肥；②加速對(duì)供水管網(wǎng)的改造，合理設(shè)定水價(jià)，號(hào)召居民使用政府統(tǒng)一供應(yīng)的自來(lái)水；③加強(qiáng)水質(zhì)監(jiān)測(cè)，確保其質(zhì)量符合國(guó)家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)；④加強(qiáng)對(duì)居民安全用水的知識(shí)宣教，告知水污染的嚴(yán)重性、飲用不合格水的危害性；⑤加強(qiáng)對(duì)生活飲用水的安全管理，明確各管理人員的工作任務(wù)與職能，尤其應(yīng)明確管理人員的編制，并給予相應(yīng)的管理經(jīng)費(fèi)，以充分發(fā)揮管理者的作用，繼而提高管理效果，切實(shí)提高居民生活飲用水的管理水平；⑥對(duì)于財(cái)政支付承擔(dān)的自來(lái)水工程，應(yīng)由政府代理予以監(jiān)管，并由財(cái)政、審計(jì)等職能部門行使權(quán)力，明確水廠的產(chǎn)權(quán)，以防出現(xiàn)資產(chǎn)流失；⑦由物價(jià)部門對(duì)居民的飲用水進(jìn)行成本核算，合理對(duì)飲用水進(jìn)行定價(jià)，包括供水水價(jià)與入戶費(fèi)，并統(tǒng)一自來(lái)水初裝與水費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)，以減輕居民的用水壓力；⑧成立以社區(qū)為單位的水質(zhì)檢測(cè)中心，對(duì)居民的飲用水進(jìn)行免費(fèi)水質(zhì)檢測(cè)；⑨由政府撥付資金，建立基金制度，從居民水費(fèi)中撥出一部分資金作為維護(hù)基金，助力居民飲用水供應(yīng)的長(zhǎng)久穩(wěn)定。