李 萱，丁 珂，楊 擋，姜夢(mèng)華，李 超，朱法根，何丹丹*，孫 娥*，封 亮，賈曉斌

蒲地藍(lán)消炎口服液中黃芩提取工藝優(yōu)化及其性質(zhì)、含量及藥動(dòng)學(xué)研究

李 萱1, 2，丁 珂1, 2，楊 擋1, 2，姜夢(mèng)華1, 2，李 超3，朱法根3，何丹丹1, 2*，孫 娥1, 2*，封 亮4，賈曉斌4

1. 南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，江蘇 南京 210028 2. 江蘇省中醫(yī)藥研究院 國(guó)家中醫(yī)藥管理局中藥口服釋藥系統(tǒng)重點(diǎn)研究室，江蘇 南京 210028 3. 濟(jì)川藥業(yè)集團(tuán)有限公司 江蘇省兒科中藥與特色制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 泰興 225400 4. 中國(guó)藥科大學(xué)中藥學(xué)院，江蘇 南京 211198

優(yōu)化蒲地藍(lán)消炎口服液（Pudilan Xiaoyan Oral Liquid，PXOL）生產(chǎn)工藝過(guò)程中黃芩提取工藝，比較該提取工藝變更前后PXOL的制劑性質(zhì)、質(zhì)量標(biāo)志物含量及其藥動(dòng)學(xué)特征。以PXOL（原口服液）和黃芩新工藝PXOL（新口服液）的流浸膏物料性質(zhì)為基礎(chǔ)，通過(guò)比較兩者的制劑性質(zhì)、質(zhì)量標(biāo)志物含量以及體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征，評(píng)價(jià)新口服液的合理性和可行性。與原口服液相比，新口服液pH值、濁度和黏度發(fā)生了顯著性變化，不良口感降低了13%；主要有效成分黃芩苷含量增加了25%；同時(shí)通過(guò)藥動(dòng)學(xué)評(píng)價(jià)原口服液和新口服液在成年大鼠體內(nèi)的差異可知，給予新口服液后，黃芩苷、漢黃芩素和腺苷的曲線下面積（area under the curve，AUC）均提高、達(dá)峰時(shí)間（time ofmax，max）均提前，4種質(zhì)量標(biāo)志物的平均滯留時(shí)間（mean residence time，MRT）均延長(zhǎng)，表明新口服液在體內(nèi)吸收快、起效迅速。新口服液相較于原口服液，制劑質(zhì)量和制備效率均提高，降低了安全隱患和環(huán)保壓力，科學(xué)合理。為新口服液的體內(nèi)藥效研究提供了數(shù)據(jù)支撐，也為其安全、合理用藥奠定基礎(chǔ)。

蒲地藍(lán)消炎口服液；黃芩；合理性；物料性質(zhì)；藥動(dòng)學(xué)；黃芩苷；漢黃芩素；腺苷

蒲地藍(lán)消炎口服液（Pudilan Xiaoyan Oral Liquid，PXOL，原口服液）由蒲公英、苦地丁、板藍(lán)根和黃芩4味中草藥組成，前3者均有清熱解毒、消腫利咽的作用，而黃芩具有清熱燥濕、涼血止血的作用，4種藥物結(jié)合起來(lái)能起到清心脾熱毒、燥濕消腫的功效[1-5]。據(jù)《中國(guó)藥典》2020年版記載[6]，該藥原生產(chǎn)工藝是將黃芩單味中藥提取液和其他3味中藥提取液合并后加入輔料后制得，其中黃芩提取液是將黃芩用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值后煎煮2次，提取液合并后醇沉除雜，酸沉靜置得黃芩苷粗品。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，黃芩經(jīng)堿提、醇沉后再經(jīng)酸沉得黃芩苷粗品，工藝復(fù)雜，耗時(shí)長(zhǎng)，操作繁瑣；且黃芩提取液醇沉工序過(guò)程中黃芩苷損耗較多；黃芩在提取生產(chǎn)過(guò)程中需在煮沸10 min后用堿液調(diào)節(jié)pH值，此過(guò)程存在安全隱患。因此，對(duì)黃芩提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，新工藝由原來(lái)的堿提變更為水提，降低安全隱患及環(huán)保壓力；刪除醇沉工藝，降低黃芩苷損失，提高效率，減少能耗；酸沉工序刪除靜置步驟，節(jié)約時(shí)間，提高生產(chǎn)效率。

因此，本實(shí)驗(yàn)在分析黃芩提取工藝優(yōu)化前后口服液的物料性質(zhì)基礎(chǔ)上，對(duì)比其有效成分的變化，同時(shí)結(jié)合二者質(zhì)量標(biāo)志物黃芩苷、漢黃芩素、腺苷和紫堇靈[7-8]在成年大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程，以評(píng)價(jià)其工藝優(yōu)化的科學(xué)性和合理性，為PXOL質(zhì)量和制備效率的提高提供了理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

AB Sciex QTRAP 5500液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有在線脫氣系統(tǒng)、超高壓四元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、Spd-m20a型DAD紫外檢測(cè)器、三重四極桿質(zhì)譜檢測(cè)器及Analyst 1.5分析軟件，美國(guó)AB Sciex公司；Waters X Select C18色譜柱（100 mm×3.0 mm，2.5 μm；SN：01543929018511）；Waters 2695型高效液相色譜儀系統(tǒng)，美國(guó)Waters公司；Agilent SB C18色譜柱（250 mm×4.6 mm，5 μm；SN：USCL035287）；MT5型百萬(wàn)分之一分析天平，瑞士Mettler Toledo公司；FE28型pH計(jì)、AL204型電子天平，梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；RE52CS-1型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海亞榮生化儀器廠；WH-B06型電子秤，廣州市威衡電子有限公司；1.0-1.1型浮子式密度計(jì)，上海方瑞儀器設(shè)備有限公司；NDJ-5S型旋轉(zhuǎn)粘度儀，邦西儀器科技（上海）有限公司；AQ4500型濁度儀，上海昕瑞儀器儀表有限公司；Nano-ZS型粒徑儀，英國(guó)馬爾文儀器有限公司；SD9011B型色度儀，上海昕瑞儀器儀表有限公司；TS-5000Z型電子舌，日本Insent公司；Labconco型離心濃縮儀，北京照生行儀器設(shè)備有限公司；DW-86L578S型?80 ℃低溫冰箱，青島海爾生物醫(yī)療股份有限公司；Centrifuge 5430R型離心機(jī)，中國(guó)艾本德有限公司；VM-300S型混勻儀，群安實(shí)驗(yàn)儀器有限公司。

1.2 原料、藥材及試劑

制劑PXOL（批號(hào)2007094）、黃芩新工藝PXOL（新口服液，批號(hào)2108002）及藥材飲片蒲公英（批號(hào)190112）、板藍(lán)根（批號(hào)190201）、苦地?。ㄅ?hào)190118）、黃芩（批號(hào)190201），以上制劑及飲片均由濟(jì)川藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供。鹽酸購(gòu)自南京化學(xué)試劑股份有限公司，批號(hào)18101781pk；氫氧化鈉購(gòu)自天津市博迪化工有限公司，批號(hào)GB/T629-1997；肝素鈉注射液購(gòu)自常州千紅生化制藥股份有限公司，批號(hào)H32022088；HPLC級(jí)甲醇購(gòu)自南京潤(rùn)凱化玻儀器有限公司，批號(hào)21085133；實(shí)驗(yàn)用水為娃哈哈純凈水，批號(hào)3108NJ；對(duì)照品腺苷（批號(hào)110879-201703，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.7%）、菊苣酸（批號(hào)111752-201703，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.3%）、紫堇靈（批號(hào)111734-201602，質(zhì)量分?jǐn)?shù)98.2%）、黃芩苷（批號(hào)110715-201821，質(zhì)量分?jǐn)?shù)95.4%）和漢黃芩素（批號(hào)111514-201706，質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.92%）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院。

1.3 動(dòng)物

SPF級(jí)SD雄性成年大鼠，體質(zhì)量（220±20）g，由江蘇省中醫(yī)藥研究院/蚌埠依諾佳生物科技有限公司提供，許可證號(hào)：SYXK（蘇）2021-0025。所有動(dòng)物分籠飼養(yǎng)于江蘇省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心SPF環(huán)境下，保持溫度24 ℃，濕度50%左右。本實(shí)驗(yàn)涉及的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)符合倫理學(xué)標(biāo)準(zhǔn)，已獲得江蘇省中醫(yī)藥研究院動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（批準(zhǔn)號(hào)：AEWC-20200702-119）。

2 方法與結(jié)果

2.1 物料性質(zhì)表征法分析原口服液和新口服液性質(zhì)

2.1.1 流浸膏和口服液的制備 黃芩原工藝和新工藝流浸膏及口服液制備方法見(jiàn)表1。

（1）黃芩原工藝流浸膏的制備：取黃芩投入沸水中，每次先煎煮10 min，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，再繼續(xù)煎煮，重復(fù)2次，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至清膏，醇沉濾過(guò)，酸沉靜置得黃芩苷粗品，加水溶解備用。

表1 黃芩原工藝和新工藝流浸膏及口服液制備流程對(duì)比

（2）黃芩新工藝流浸膏的制備：取黃芩投入沸水中，煎煮3次，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至清膏，酸沉得黃芩苷粗品，加水溶解備用。

（3）3味藥流浸膏的制備：取蒲公英、板藍(lán)根、苦地丁加水煎煮2次，濾過(guò)，合并濾液，濃縮至清膏，醇沉除雜，加水備用。

（4）原口服液流浸膏的制備：取黃芩原工藝流浸膏和3味藥流浸膏合并，即得。

（5）新口服液流浸膏的制備：取黃芩新工藝流浸膏和3味藥流浸膏合并，即得。

（6）原口服液的制備：取原口服液流浸膏，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，加入甜菊糖苷，加水分裝，滅菌，即得。

（7）新口服液的制備：取新口服液流浸膏，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值，加入甜菊糖苷，加水分裝，滅菌，即得。

2.1.2 性質(zhì)分析 采用pH計(jì)、浮子式密度計(jì)、濁度儀、旋轉(zhuǎn)粘度儀、色度儀、粒徑儀和電子舌等物理性質(zhì)測(cè)定的相關(guān)儀器，按照《中國(guó)藥典》2020年版規(guī)定的合劑通則[6]對(duì)二者流浸膏和制劑的pH值、密度、濁度、黏度、色度、粒徑和口感進(jìn)行測(cè)定。

（1）pH值：取樣品溶液450 mL，置于500 mL燒杯中，采用pH計(jì)測(cè)定溶液的pH值。

（2）密度：取樣品溶液450 mL，置于500 mL量筒中，采用浮子式密度計(jì)測(cè)定溶液的密度。

（3）濁度：取樣品溶液10 mL，置于濁度測(cè)試比色瓶中，采用濁度儀測(cè)定樣品溶液的濁度。

（4）黏度：取樣品溶液450 mL，置于500 mL燒杯中，采用旋轉(zhuǎn)黏度儀測(cè)定溶液的黏度。測(cè)量時(shí)，應(yīng)選擇規(guī)格合適的轉(zhuǎn)子，待轉(zhuǎn)子凹槽與樣品溶液液面相平時(shí)，可進(jìn)入測(cè)量階段，待讀數(shù)穩(wěn)定后，記錄數(shù)值。

（5）色度：取樣品溶液10 mL，置于色度測(cè)試比色瓶中，采用色度儀測(cè)定樣品溶液的色度。樣品溶液顏色較深，需對(duì)樣品溶液稀釋后測(cè)定。

（6）粒徑：取樣品溶液2 mL，置于溶液粒徑測(cè)試比色皿中，采用馬爾文Nano-ZS儀器測(cè)定樣品溶液中微粒的粒徑。

（7）電子舌法評(píng)價(jià)方法的建立[9-11]：采用電子舌法測(cè)定二者流浸膏和制劑的苦味、澀味、苦味回味、澀味回味和咸味，根據(jù)味道數(shù)值繪成雷達(dá)圖，通過(guò)計(jì)算雷達(dá)曲線面積來(lái)表征其不良口感的程度，其計(jì)算公式和雷達(dá)圖見(jiàn)圖1。面積越大，不良口感越嚴(yán)重，反之則不良口感較輕。同時(shí)以不良口感降低率作為數(shù)字化直觀指標(biāo)，更清晰明了。

圖1 雷達(dá)曲線面積圖示

結(jié)果如表2、3和圖2、3所示，在流浸膏階段，新口服液流浸膏的密度、濁度和黏度發(fā)生了顯著性變化，密度由1.18 g/cm3顯著降低到1.15 g/cm3（＜0.01），濁度由51.70 NTU顯著增加到108.30 NTU（＜0.001），黏度從13.76 mPa?s顯著降低到9.90 mPa?s（＜0.01）；新口服液流浸膏的電子舌口感雷達(dá)曲線面積由385減少到316，不良口感降低8%。在制劑階段，新口服液的pH值、濁度、黏度和發(fā)生了顯著性變化，pH值由5.82顯著降低到5.70 （＜0.05），濁度由7.84 NTU顯著增加到181.70 NTU（＜0.001），黏度由3.70 mPa?s顯著增加到4.00 mPa?s（＜0.05）；新口服液的電子舌口感雷達(dá)曲線面積由250降低到217，不良口感降低13%，其中苦味回味、澀味回味和咸味均較原口服液的好。

表2 流浸膏和制劑性質(zhì)分析(, n = 3)

與原口服液流浸膏相比：#＜0.05##＜0.01###＜0.001；與原口服液相比：*＜0.05**＜0.01***＜0.001

#< 0.05##< 0.01###< 0.001original oral liquid fluid extract;*< 0.05**< 0.01***< 0.001original oral liquid

表3 流浸膏和制劑口感分析

圖2 流浸膏和制劑粒徑分布(, n = 3)

2.2 HPLC法分析原口服液和新口服液的質(zhì)量標(biāo)志物含量

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取黃芩苷、漢黃芩素、腺苷、菊苣酸和紫堇靈對(duì)照品適量，用50%甲醇溶解配制成單一對(duì)照品儲(chǔ)備液；分別精密吸取適量于5 mL量瓶中，50%甲醇定容，配制成混合對(duì)照品儲(chǔ)備液。

2.2.2 供試品溶液的制備 精密吸取原口服液流浸膏1.0 mL于10 mL量瓶中，平行2份，50%甲醇定容，搖勻，0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，即得。

A-原口服液流浸膏 B-新口服液流浸膏 C-原口服液 D-新口服液

原口服液、新口服液流浸膏及新口服液的供試品溶液同法制備。

2.2.3 色譜條件 色譜柱為Agilent SB C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.1%磷酸水溶液，梯度洗脫：0～10 min，0～5%甲醇；10～15 min，5%～15%甲醇；15～30 min，15%甲醇；30～35 min，15%～25%甲醇；35～70 min，25%～50%甲醇；70～90 min，50%～80%甲醇；90～100 min，80%～0甲醇；檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm；體積流量1.0 mL/min；柱溫30 ℃；進(jìn)樣量10 μL。色譜圖見(jiàn)圖4。本方法的線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性和加樣回收率試驗(yàn)均符合要求[12]。

2.2.4 樣品測(cè)定 分別取原口服液和新口服液的流浸膏和制劑，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，并對(duì)樣品中5種成分進(jìn)行HPLC分析，記錄5個(gè)質(zhì)量標(biāo)志物的峰面積并計(jì)算在樣品中的含量，結(jié)果見(jiàn)表4。新口服液的流浸膏和制劑中黃芩苷和漢黃芩素含量均提高，且制劑中黃芩苷質(zhì)量濃度由11.51 mg/mL增加到14.41 mg/mL，增加25%，從而提高了制劑中黃芩苷利用率。

2.3 HPLC-MS法分析原口服液和新口服液在成年大鼠體內(nèi)吸收

由于研究前期根據(jù)藥動(dòng)學(xué)預(yù)實(shí)驗(yàn)分析得出，菊苣酸在吸收和代謝之前會(huì)被腸道微生物降解[13-16]，代謝加快，無(wú)法測(cè)得其原型的藥動(dòng)學(xué)特征，因此本實(shí)驗(yàn)分析了腺苷、黃芩苷、紫堇靈和漢黃芩素在成年大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征。

1-腺苷 2-菊苣酸 3-紫堇靈 4-黃芩苷 5-漢黃芩素

表4 流浸膏和制劑中質(zhì)量標(biāo)志物含量

2.3.1 動(dòng)物分組、給藥及樣品采集 SD成年大鼠12只，隨機(jī)分為2組，每組6只，分別為原口服液組和新口服液組。實(shí)驗(yàn)前禁食12 h，自由飲水，采用眼底靜脈叢取血。大鼠口服給藥（3.78 mL/kg）后，分別在0、5、10、25、45 min及1、2、3、4、6、8、12、24 h時(shí)間點(diǎn)采血150 μL，采集的血樣置于預(yù)先加入肝素鈉抗凝的試管中，將樣本3500 r/min離心5 min（離心力1205×），即得血漿。?80 ℃冰箱保存，備用。

2.3.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取對(duì)照品腺苷、黃芩苷、漢黃芩素和紫堇靈，配制成單一對(duì)照品的甲醇母液，低溫密封保存。根據(jù)各質(zhì)量標(biāo)志物在血漿樣品中的質(zhì)量濃度，分別精密吸取相應(yīng)體積的對(duì)照品溶液混合、稀釋得混標(biāo)母液；一系列稀釋后，得系列混標(biāo)溶液。精密稱取一定量的柚皮苷于5 mL量瓶，用甲醇定容至刻度并稀釋，得內(nèi)標(biāo)溶液質(zhì)量濃度。

2.3.3 血漿樣品處理 精確吸取100 μL血漿于離心管中，加入400 μL甲醇，渦旋2 min，在4 ℃條件下，12 000 r/min離心（離心力14 167×）10 min取上清液，以除去血漿中蛋白，置于氮吹儀中吹干，再加入100 μL甲醇復(fù)溶，12 000 r/min離心10 min取上清液，加入74 ng的內(nèi)標(biāo)物柚皮苷，待測(cè)。

2.3.4 色譜條件 色譜柱為Waters X Select C18柱（100 mm×3.0 mm，2.5 μm）；流動(dòng)相為甲醇-0.1%甲酸水溶液，梯度洗脫程序：0～0.5 min，0～15%甲醇；0.5～2.5 min，15%甲醇；2.5～7 min，15%～80%甲醇；7～9 min，80%甲醇；9～11 min，80%～15%甲醇；11～12 min，15%甲醇；體積流量0.4 mL/min；柱溫40 ℃；進(jìn)樣量4 μL。

2.3.5 質(zhì)譜條件 電噴霧離子源（ESI），正、負(fù)離子切換模式掃描，多重反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（multiple reaction monitoring，MRM），源噴射電壓5500 V（正離子模式），?4500 V（負(fù)離子模式），4個(gè)待測(cè)成分和1個(gè)內(nèi)標(biāo)成分的質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表5。

2.3.6 專屬性考察 取已處理好的空白血漿100 μL，空白血漿中加入一定質(zhì)量濃度混合對(duì)照品溶液和內(nèi)標(biāo)溶液直接進(jìn)樣，獲得相應(yīng)的總離子流色譜圖見(jiàn)圖5。結(jié)果表明，在此色譜和質(zhì)譜條件下，分析物和內(nèi)標(biāo)在空白血漿中無(wú)雜質(zhì)干擾，可用于大鼠血漿樣本中腺苷、黃芩苷、漢黃芩素、紫堇靈的含量測(cè)定。

2.3.7 線性關(guān)系考察 取“2.3.2”項(xiàng)下各質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液，按照“2.3.4”項(xiàng)下色譜條件及“2.3.5”項(xiàng)下質(zhì)譜條件進(jìn)行HPLC-MS分析。分別進(jìn)樣4 μL，以各分析物質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（），各分析物與內(nèi)標(biāo)的峰面積比值為縱坐標(biāo)（），得到線性回歸方程分別為腺苷＝0.013 7＋0.028 6，2＝0.992 1，線性范圍0.734～47.000 μg/L；紫堇靈＝0.033 9＋0.180 5，2＝0.994 2，線性范圍0.432～27.675 μg/L；黃芩苷＝0.000 9＋0.001 1，2＝0.998 9，線性范圍16.716～1 069.810 μg/L；漢黃芩素＝0.081 7＋0.105 2，2＝0.991 2，線性范圍0.644～10.300 μg/L。

表5 質(zhì)量標(biāo)志物和內(nèi)標(biāo)的質(zhì)譜分析參數(shù)

1-腺苷 2-紫堇靈 3-柚皮苷 4-黃芩苷 5-漢黃芩素

2.3.8 精確度試驗(yàn) 取空白血漿100 μL，加入低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液各100 μL，放入1.5 mL EP管中，40 ℃水浴氮?dú)獯蹈珊髲?fù)溶，制成低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控樣品，其質(zhì)量濃度分別為腺苷（1.47、5.88、23.50 ng/mL）、紫堇靈（0.86、3.46、13.84 ng/mL）、黃芩苷（33.43、133.73、534.91 ng/mL）、漢黃芩素（0.32、1.29、5.15 ng/mL），每個(gè)測(cè)定5次，連續(xù)測(cè)定5 d，計(jì)算日內(nèi)精密度的RSD在1.3%～4.8%，日間精密度的RSD在2.8%～3.8%，表明該方法的精密度良好。

2.3.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取空白血漿100 μL，加入低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液各100 μL，按“2.3.3”項(xiàng)下方法處理，處理后的樣品進(jìn)樣室中放置0、2、4、6、8、12 h測(cè)定，考察穩(wěn)定性均在1.0%～9.2%，結(jié)果表明生物樣品在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3.10 回收率試驗(yàn) 取空白血漿100 μL，加入低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液各100 μL，按“2.3.3”項(xiàng)下方法處理，測(cè)定各質(zhì)量標(biāo)志物的峰面積及含量，回收率＝測(cè)得含量/理論含量，得到回收率均在88.76%～114.5%，符合回收率要求。

2.3.11 藥動(dòng)學(xué)參數(shù) 運(yùn)用Phoenix WinNonlin藥動(dòng)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)和非房室統(tǒng)計(jì)模型計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。平均血藥濃度-時(shí)間曲線見(jiàn)圖6，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見(jiàn)表6。由藥動(dòng)學(xué)參數(shù)可知，成年大鼠分別給予原口服液和新口服液后，體內(nèi)腺苷、紫堇靈、黃芩苷和漢黃芩素在半衰期（terminal half-life，1/2）、曲線下面積（area under the curve，AUC）、達(dá)峰時(shí)間（time ofmax，max）、達(dá)峰濃度（maximum observed concentration，max）和體內(nèi)滯留時(shí)間（mean residence time，MRT）中存在差異。

圖6 原口服液(a)和新口服液(b)在成年大鼠體內(nèi)血藥濃度-時(shí)間曲線

表6 原口服液和新口服液藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(, n = 6)

給予新口服液的成年大鼠和給予原口服液的成年大鼠相比，黃芩苷的max由2.39 h提前到2.11 h，max由6.09 ng/L增加到8.24 ng/L，AUC由20.02 ng?h/L增加到37.66 ng?h/L，MRT由7.80 h延遲到9.10 h；漢黃芩素的max由6.92 h提前到2.69 h，AUC由0.41 ng?h/L增加到0.50 ng?h/L，MRT由 8.60 h延遲到9.71 h；腺苷的max由2.50 h提前到0.11 h，MRT由7.08 h延遲到11.33 h。結(jié)果表明，黃芩苷和漢黃芩素在體內(nèi)達(dá)峰時(shí)間提前，AUC總量增加，MRT延長(zhǎng)，因此新口服液吸收速度快，起效迅速，且在體內(nèi)滯留時(shí)間久，有利于發(fā)揮藥效。

將4個(gè)成分的最大血藥濃度用相應(yīng)的給藥劑量標(biāo)準(zhǔn)化（max/Dose），成年大鼠給予原口服液后，黃芩苷（37.891 mg/kg）的max/Dose為0.161，漢黃芩素（0.435 mg/kg）的max/Dose為0.184，紫堇靈（1.546 mg/kg）的max/Dose為0.162，腺苷（0.272 mg/kg）的max/Dose為0.515，可知體內(nèi)吸收程度，腺苷＞漢黃芩素＞紫堇靈＞黃芩苷。

成年大鼠給予新口服液后，黃芩苷（54.470 mg/kg）的max/Dose為0.151，漢黃芩素（0.491 mg/kg）的max/Dose為0.122，紫堇靈（1.149 mg/kg）的max/Dose為0.096，腺苷（0.442 mg/kg）的max/Dose為0.294，可知體內(nèi)吸收程度，腺苷＞黃芩苷＞漢黃芩素＞紫堇靈。

3 討論

本實(shí)驗(yàn)在分析黃芩制備工藝優(yōu)化前后的流浸膏物料性質(zhì)的基礎(chǔ)上，對(duì)比其有效成分的變化，同時(shí)結(jié)合二者黃芩苷、漢黃芩素、腺苷和紫堇靈在成年大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過(guò)程，以評(píng)價(jià)其工藝優(yōu)化的合理性，為PXOL黃芩制備工藝的優(yōu)化提供了理論依據(jù)。

黃芩提取工藝優(yōu)化后，新口服液在pH值、濁度和黏度發(fā)生了顯著性變化，由于黃芩新工藝在煎煮過(guò)程中減少氫氧化鈉的加入，所以使pH值顯著降低；而且提取藥液無(wú)醇沉環(huán)節(jié)，直接酸沉得黃芩苷，使?jié)岫蕊@著性升高，黏度隨之改變。與此同時(shí)，新口服液的不良口感降低了13%，尤其是其中咸味得到了較大的改善。其次，對(duì)比二者流浸膏及制劑中質(zhì)量標(biāo)志物的含量，新口服液的黃芩苷含量增加25%，提高了黃芩苷利用率，說(shuō)明優(yōu)化黃芩工藝合理可行。

研究發(fā)現(xiàn)給予新口服液的成鼠體內(nèi)黃芩苷和漢黃芩素的AUC增加88%，說(shuō)明成鼠給予新口服液后吸收黃芩苷總量和漢黃芩素總量較原口服液的高；除紫堇靈外，其他3個(gè)質(zhì)量標(biāo)志物的max均提前，表明給予新口服液后，吸收速度較給予原工藝口服液快；給予新口服液后4個(gè)質(zhì)量標(biāo)志物的體內(nèi)滯留時(shí)間均延遲，有利于藥物可在體內(nèi)發(fā)揮其藥效。由此可見(jiàn)，由于新口服液質(zhì)量標(biāo)志物含量增加，藥動(dòng)學(xué)參數(shù)AUC增加、max提前、MRT延遲，所以藥物在體內(nèi)吸收增加、吸收快、起效迅速，藥效優(yōu)于工藝變更前[17-19]。

綜上所述，新口服液通過(guò)優(yōu)化黃芩提取工藝后，不僅提高了黃芩苷和漢黃芩素利用率，還改善不良口感，提高服藥順應(yīng)性。因此新口服液較原口服液，提高制劑質(zhì)量和效率，降低安全隱患和環(huán)保壓力，科學(xué)合理。本實(shí)驗(yàn)為新口服液的體內(nèi)藥效研究提供了數(shù)據(jù)支撐，也為其安全、合理用藥奠定基礎(chǔ)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Properties, content and pharmacokinetics offrom Pudilan Xiaoyan Oral Liquid after optimization of extraction process

LI Xuan1, 2, DING Ke1, 2, YANG Dang1, 2, JIANG Meng-hua1, 2, LI Chao3, ZHU Fa-gen3, HE Dan-dan1, 2, SUN E1, 2, FENG Liang4, JIA Xiao-bin4

1. Affiliated Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, Nanjing University of Chinese Medicine, Nanjing 210028, China 2.Key Laboratory of New Drug Delivery Systems of Chinese Materia Medica, Jiangsu Province Academy of Traditional Chinese Medicine, Nanjing 210028, China 3. Jiangsu Key Laboratory of Chinese Medicine and Characteristic Preparations for Paediatrics, Jumpcan Pharmaceutical Co., Ltd., Taixing 225400, China 4. School of Traditional Chinese Pharmacy, China Pharmaceutical University, Nanjing 211198, China

Optimize the extraction process of Huangqin () in the production process of Pudilan Xiaoyan Oral Liquid (蒲地藍(lán)消炎口服液, PXOL), compare the preparation properties, quality marker content, and pharmacokinetic characteristics of PXOL before and after the change in the extraction process.Based on the properties of the flow extract materials of Pudilan Xiaoyan Oral Liquid (PXOL, original oral liquid, OOL) andnew process PXOL (new oral liquid, NOL), the rationality and feasibility of the NOL were evaluated by comparing the preparation properties, quality marker content and pharmacokinetic characteristics of the two.Compared with OOL, the pH, turbidity and viscosity of NOL changed significantly, and the bad taste was reduced by 13%. The main active ingredient baicalin content increased by 25%; At the same time, through pharmacokinetic evaluation of the difference between the OOL and NOL in adult rats, it can be seen that after the administration of NOL, the area under the curve (AUC) of baicalin, wogonin and adenosine were increased, themaxwas advanced, and the mean residence time (MRT) of the four quality markers was prolonged, indicating that the NOL was absorbed quickly and had a rapid onset of effect.Compared with OOL, NOL can improve the quality and preparation efficiency of the preparation, reduce the potential safety hazard and environmental protection pressure, which is scientific and reasonable. It provides data support for the study of the efficacy of PXOL, and also lays a foundation for its safe and rational drug use.

Pudilan Xiaoyan Oral Liquid;; rationality; material properties; pharmacokinetics;baicalin; wogonin; adenosine

R283.6

A

0253 - 2670(2023)10 - 3101 - 08

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.10.007

2022-11-08

國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目（2018YFC1706902）；國(guó)家中醫(yī)藥管理局重點(diǎn)研究室能力提升項(xiàng)目（2022GJJZDYJS-01）；江蘇省兒科中藥與特色制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題（BM2019011）；江蘇省科技成果轉(zhuǎn)化專項(xiàng)資金（BA2020077）；江蘇省醫(yī)學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（CXTDB2017003）；江蘇省研究生實(shí)踐創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目（SJCX21-0716）

李 萱，碩士研究生，研究方向中藥制劑。Tel: (025)52362115 E-mail: lixuan542021@163.com

何丹丹，副主任中藥師，研究方向中藥制劑與中藥臨床藥學(xué)。Tel: 13813005935 E-mail: happydandan007@163.com

孫 娥，研究員，研究方向?yàn)橹兴幹苿┡c炮制。Tel: (025)52362115 E-mail: sune0825@163.com

[責(zé)任編輯 鄭禮勝]