張 蕾 趙 嬋 王海蕊 張曉霞

乳腺癌是指發(fā)生在乳腺的良性或惡性腫瘤,根據(jù)其發(fā)病情況可分為早、中、晚三個(gè)階段[1]。早期乳腺癌癥狀體現(xiàn)為患側(cè)乳房出現(xiàn)無(wú)痛、單發(fā)的小腫塊;中期癥狀體現(xiàn)為鄰近乳頭或乳暈的癌腫因侵入乳管使之縮短,可把乳頭牽向癌腫一側(cè),進(jìn)而可使乳頭扁平、回縮、凹陷;晚期乳房因腫塊的浸潤(rùn)、收縮而變形[2],可使上臂淋巴回流障礙而引起上肢水腫。乳腺癌通常高發(fā)于40～60歲的女性群體,男性患者較為少見(jiàn)[3]。乳腺良性腫瘤患者一般通過(guò)手術(shù)治療,惡性腫瘤患者早期首選手術(shù)治療,中晚期患者手術(shù)加藥物或放療、化療等綜合治療[4]。有研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于癌細(xì)胞與機(jī)體生物指標(biāo)之間的關(guān)系的研究可以幫助癌癥患者建立個(gè)體化治療,對(duì)提高放化療療效和疾病預(yù)后有著重大影響[5]。Survivin和OTUD3分別屬于凋亡抑制因子和去泛素化酶中的一種,與癌細(xì)胞之間存在著密切聯(lián)系,為明確兩者表達(dá)情況與疾病的預(yù)后關(guān)系,特選取79例乳腺癌患者作為觀察對(duì)象,具體研究報(bào)告內(nèi)容如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2019年1月至2021年1月收錄的79例乳腺癌并行擴(kuò)大根治術(shù)的患者作為觀察組,另選取同期健康體檢志愿者55例作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn):①觀察組患者經(jīng)檢查均符合乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[6];②無(wú)術(shù)前癌細(xì)胞遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移;③無(wú)家族遺傳性精神疾病者;④年齡20～65歲。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并有神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;②合并有心臟、腎臟等功能性疾病者;③合并有免疫系統(tǒng)疾病者;④男性患者。觀察組79例,年齡20～65(42.63±1.22)歲,病程1～6(3.14±0.65)年。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn):①X光照射檢查結(jié)果正常;②核磁共振檢查結(jié)果正常。對(duì)照組55例,年齡18～57(41.14±1.06)歲。2組研究對(duì)象一般資料對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

1.2 方法

1.2.1 放射治療 采用6 MV的電子線對(duì)患者胸壁上區(qū)進(jìn)行照射治療,使用9 MV的電子線在鎖骨上區(qū)照射治療,均行18次照射治療,照射治療結(jié)束后在患者胸壁處使用0.5組織等效膜,2 Gy/次,5次/周,總量50 Gy,以21天為1個(gè)完整療程,共進(jìn)行3個(gè)療程的治療。

1.2.2 外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況檢測(cè) 收集對(duì)照組和觀察組患者放療前后外周靜脈血3 mL進(jìn)行低溫冷凍保存,淋巴細(xì)胞分離液對(duì)單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行分析,按照50∶1的比例加入Trizol試劑,并按照標(biāo)準(zhǔn)步驟提取RNA,提取出的RNA用100%的去離子甲酰胺溶解,-70 ℃環(huán)境下保存,對(duì)RNA進(jìn)行逆錄轉(zhuǎn)并且進(jìn)行PCR擴(kuò)增,最后使用2-ΔΔct計(jì)算出Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)量。所有RNA提取試劑盒、PCR試劑盒均從武漢默沙克生物科技有限公司采購(gòu)。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)2組人員外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況對(duì)比,觀察組包括放療前后;(2)觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況的關(guān)系,包括年齡、腫瘤大小、腫瘤分期、腫瘤分化程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等;(3)觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系;(4)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對(duì)放療的預(yù)后價(jià)值評(píng)估。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 2組人員外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況對(duì)比

觀察組放療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)量均高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);觀察組放療后外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA低于放療前,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。如表1。

2.2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況的關(guān)系

表1 2組人員外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況對(duì)比

放療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)與年齡、腫瘤大小無(wú)關(guān)(P>0.05),與腫瘤分期、腫瘤分化和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)(P<0.05)。如表2。

表2 觀察組人員的一般資料和病理特征與Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況的關(guān)系

2.3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系

放療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)量與腫瘤分期都呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(γ=0.622,γ=0.684,γ=0.705,γ=0.714;P<0.001);與腫瘤分化呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(γ=-0.548,γ=-0.629,γ=-0.574,γ=-0.596;P<0.001);與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系(γ=0.685,γ=0.711γ=0.697γ=0.688;P<0.001)。如表3。

表3 觀察組放療前后Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況與病理特征的相關(guān)關(guān)系

2.4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對(duì)放療的預(yù)后價(jià)值評(píng)估

根據(jù)ROC 曲線獲得,最佳界限以Survivin-mRNA(1.67)、OTUD3-mRNA(0.49)可獲得ROC 曲線下最大面積,表明乳腺癌術(shù)后放療與Survivin-mRNA、OTUD3-mRNA密切相關(guān),且兩項(xiàng)聯(lián)合檢測(cè)的敏感度(81.0%)、特異度(83.6%)均高于單項(xiàng)檢測(cè)(P<0.05),見(jiàn)圖1,表4。

圖1 ROC曲線圖

3 討論

流行病學(xué)研究顯示,乳腺癌在全球女性癌癥中的發(fā)病率為24.2%,位居首位,其中52.9%發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家[7]。在我國(guó),每年有30余萬(wàn)女性被診斷出乳腺癌。在東部沿海和經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū),發(fā)病率尤其上升[8]。從發(fā)病年齡看,我國(guó)乳腺癌發(fā)病率從20歲以后逐漸上升,40～50歲達(dá)到高值。隨著新的治療方法普及,全球乳腺癌死亡率逐步下降。然而在我國(guó),特別是廣大農(nóng)村地區(qū),乳腺癌死亡率下降趨勢(shì)并不明顯[9]。近年來(lái)對(duì)于乳腺癌患者進(jìn)行個(gè)體化治療,預(yù)測(cè)早期療效和預(yù)后效果的研究已經(jīng)成為癌癥治療的熱門話題[10]。放射治療在乳腺癌的術(shù)后治療方面占有重要地位,因此如果能夠?qū)Ψ派渲委煹寞熜Ш皖A(yù)后進(jìn)行一定程度上的評(píng)估和預(yù)測(cè),將對(duì)臨床癌癥治療方面起著重大影響[11]。目前來(lái)說(shuō),常用的形態(tài)影像學(xué)預(yù)測(cè)效果并不理想,而對(duì)于生物標(biāo)志物方面的研究似乎可以作為新的方向,因此找到能夠預(yù)測(cè)評(píng)估癌癥術(shù)后放療和預(yù)后效果的生物標(biāo)志物已成為目前研究的重要研究方向[12]。

表4 Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對(duì)放療的預(yù)后價(jià)值評(píng)估

本次研究結(jié)果顯示乳腺癌患者放療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞中Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)量均高于正常人體細(xì)胞的表達(dá)量,且放療后的表達(dá)量比放療前有著明顯降低,這提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)情況與乳腺癌的疾病以及放療存在著密切關(guān)系。Survivin屬于20世紀(jì)初發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制蛋白中新的一員[13]。凋亡抑制蛋白可通過(guò)BIR 結(jié)構(gòu)域直接與Caspase 的IBM 結(jié)合,抑制Caspase3/7/9 的催化活性,阻斷細(xì)胞凋亡進(jìn)程,同時(shí)在人體細(xì)胞漿、細(xì)胞核和染色體上也有表達(dá),Survivin就屬于定位于細(xì)胞核上的一種[14-16]。國(guó)外學(xué)者研究[17]表明,凋亡抑制蛋白介導(dǎo)的凋亡抑制可能是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性的原因之一,是調(diào)控腫瘤細(xì)胞凋亡和對(duì)化療藥物敏感性的關(guān)鍵分子,有可能發(fā)展為逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥、提高療效的新靶點(diǎn)[18]。而OTUD3則是屬于去泛素化酶OTUDs家族中的一種,OTUD3的底物PTEN能夠與OTUD3之間直接進(jìn)行相互作用,通過(guò)阻斷P13/Akt的信號(hào)通路來(lái)抑制癌細(xì)胞的發(fā)展進(jìn)程并起到抑癌基因的作用。有研究[19]表明,OTUD3參與各種癌癥發(fā)展進(jìn)程。本研究結(jié)果顯示放療前后外周血單個(gè)核細(xì)胞Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA的表達(dá)量與腫瘤分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移都呈現(xiàn)顯著正相關(guān)關(guān)系,而與腫瘤分化程度則是呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)關(guān)系,與歷史研究資料的結(jié)果相一致[20]。對(duì)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對(duì)放療的預(yù)后價(jià)值評(píng)估的研究結(jié)果顯示兩者AUC均大于0.7,提示Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA對(duì)于乳腺癌患者術(shù)后放療短期預(yù)后都存在著一定評(píng)估價(jià)值。

綜上,對(duì)乳腺癌患者術(shù)后體內(nèi)Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA表達(dá)情況進(jìn)行監(jiān)測(cè)對(duì)術(shù)后放療短期預(yù)后都存在著一定評(píng)估價(jià)值。因此Survivin-mRNA和OTUD3-mRNA也許能夠作為評(píng)估癌癥術(shù)后放療預(yù)后的重要生物指標(biāo),具有重要臨床價(jià)值。