李瑞宏 董玉芳 張劉璐

結(jié)腸癌為臨床常見消化系統(tǒng)惡性腫瘤,在臨床具有較高的發(fā)生率[1]。以手術(shù)為主的綜合治療方案是延長結(jié)腸癌患者生存期限的有效方法,可通過病灶切除控制癌細胞轉(zhuǎn)移,阻止病情發(fā)展[2-3]。然而結(jié)腸癌早期多無典型癥狀,當(dāng)出現(xiàn)腹痛、消瘦、便血等癥狀時,病情多已處于中晚期,錯失手術(shù)治療最佳時機,治療難度更大,死亡風(fēng)險高[4-5]。臨床需尋找有效的診斷方法,盡早發(fā)現(xiàn)結(jié)腸癌,指導(dǎo)臨床施以個體化的治療,以改善患者預(yù)后。隨著臨床對于分子學(xué)研究的深入,腫瘤分子標(biāo)志物得以在結(jié)腸癌的早期診斷中廣泛運用[6]?；诖?本研究以103例結(jié)腸癌患者為研究對象,分析糖蛋白抗原724(CA724)、微小RNA-183(miR183)、長鏈非編碼RNA(lncRNA)鋅指蛋白反義鏈1(ZFAS1)在血清內(nèi)的表達情況與臨床意義。信息示下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

將2020年4月至2022年4月本院收治的103例結(jié)腸癌患者納入觀察組,同期于本院體檢的95例健康體檢者納入對照組,研究經(jīng)醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn):結(jié)腸癌患者經(jīng)病理檢查證實病情;對照組均身體健康,無重大疾病;所有研究對象依從性均較高,自愿簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn):合并全身性感染者;存有其他惡性腫瘤者;存在精神疾病者;難以進行正常語言交流者;合并嚴(yán)重的臟器受損者;存在酒精、藥物依賴史者;存有嚴(yán)重的腦器質(zhì)性疾病者;合并血液系統(tǒng)疾病者。對照組男性57例,女性38例;年齡41～75歲,平均年齡(60.84±6.59)歲;體重指數(shù)(BMI)18.5～27.5 kg/m2,平均BMI(23.39±1.71)kg/m2。觀察組男性60例,女性43例;年齡42～76歲,平均年齡(60.91±6.68)歲;BMI 18.4～27.7 kg/m2,平均BMI(23.47±1.68)kg/m2。比較2組一般資料,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法

標(biāo)本采集:于研究對象入選后第2天清晨,采集5 ml外周靜脈血,留存待檢。檢測方法:CA724:以酶聯(lián)免疫吸附法測定血清內(nèi)的CA724。miR183、lncRNA ZFAS1:以逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測,首先運用血漿RNA提取試劑盒提取全部血清樣本的總RNA,并以逆轉(zhuǎn)錄試劑盒進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng);之后取逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物擴增,擴增條件為95 ℃預(yù)變性5 min,95 ℃ 30 s,60 ℃ 20 s,72 ℃ 20 s,共進行40次循環(huán);以U6、β-actin當(dāng)成內(nèi)參,以2-ΔΔCt法計算miR183、lncRNA ZFAS1相對表達量。所有檢測操作均嚴(yán)格依據(jù)試劑盒操作說明書行規(guī)范操作,以保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)2組CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達對比。(2)收集患者的年齡(≥60歲、<60歲)、性別(男、女)、BMI(≥24 kg/m2、<24 kg/m2)、腫瘤大小(>5 cm、≤5 cm)、臨床分期(Ⅰ～Ⅱ期、Ⅲ～Ⅳ期)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(有、無)、分化程度(低分化、中高分化)資料,分析CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達與上述臨床病理特征之間的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 2組CA724、miR183、lncRNA ZFAS1對比

觀察組血清CA724、miR183相對表達量、lncRNA ZFAS1相對表達量均高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組CA724、miR183、lncRNA ZFAS1對比

2.2 CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達與患者臨床病理特征間的關(guān)系

CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達與結(jié)腸癌患者的年齡、性別、BMI、腫瘤大小無關(guān),差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達與患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度有關(guān),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

3 討論

結(jié)腸癌的發(fā)病機制較為復(fù)雜,與環(huán)境、飲食、遺傳、精神、不良生活習(xí)慣等相關(guān),多種因素持續(xù)作用,可刺激結(jié)腸黏膜組織,促使黏膜上皮細胞增殖失控,出現(xiàn)癌性變化,最終導(dǎo)致惡性腫瘤的發(fā)生[7-8]。因結(jié)腸癌早期無明顯癥狀,患者確診時病情多已進展到中晚期,此時治療難度較大,探尋可早期判斷結(jié)腸癌患者病情的指標(biāo)具有重要意義[9-10]。

癌細胞于形成代謝過程中可出現(xiàn)少量不同于正常細胞表面蛋白,此類抗原蛋白不僅能夠作為腫瘤標(biāo)志物,還可應(yīng)用于腫瘤輔助診斷與預(yù)后評估中[11]。CA724為常見的腫瘤標(biāo)志物,屬高分子量黏蛋白類抗原之一,在健康人群血清內(nèi)表達水平較低,其表達升高主要見于消化道腫瘤,如胃癌、胰腺癌等[12]。miR是一種內(nèi)源性、非編碼小分子RNA,參與調(diào)節(jié)細胞的增殖、分化與凋亡等。miR具有組織特異性,主要通過與靶基因3＇端非翻譯區(qū)結(jié)合,使得靶基因降解或抑制靶基因表達,進而發(fā)揮調(diào)控作用[13]。miR183為該家族內(nèi)的重要成員之一,在人類多種腫瘤內(nèi)異常表達。lncRNA是一類長度超過200 nt,自主轉(zhuǎn)錄的非編碼RNA,在表觀遺傳、調(diào)控轉(zhuǎn)錄與轉(zhuǎn)錄后基因表達中具有重要作用,異常表達可能對細胞增殖、腫瘤進展等產(chǎn)生影響[14]。而ZFAS1是一種與腫瘤有關(guān)的lncRNA,在不同惡性腫瘤內(nèi)發(fā)揮不同作用機制。腫瘤生長與增殖過程中需新生血管的形成,lncRNA ZFAS1可與miR-150-5p競爭性的結(jié)合,促使血管內(nèi)皮生長因子表達升高,繼而促使結(jié)腸癌進展。本研究結(jié)果顯示,觀察組血清CA724[(26.79±3.36)U/ml]、miR183相對表達量[(2.57±0.46)]、lncRNA ZFAS1相對表達量[(3.75±0.84)]均高于對照組[(5.20±1.05)U/ml、(1.05±0.21)、(1.23±0.39)],表明CA724、miR183、lncRNA ZFAS1在結(jié)腸癌患者的血清內(nèi)表達水平異常升高。本研究結(jié)果顯示,CA724、miR183、lncRNA ZFAS1與結(jié)腸癌患者的年齡、性別、BMI、腫瘤大小無關(guān),與患者的臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度有關(guān),由此提示CA724、miR183、lncRNA ZFAS1可能參與結(jié)腸癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲等過程,三項指標(biāo)可作為結(jié)腸癌早期診斷的輔助指標(biāo)。

表2 CA724、miR183、lncRNA ZFAS1表達與患者臨床病理特征間的關(guān)系

綜上所述,結(jié)腸癌患者血清內(nèi)CA724、miR183、lncRNA ZFAS1呈高表達,三項指標(biāo)與患者臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度密切相關(guān),可為結(jié)腸癌的診治提供參考依據(jù)。