摘 要：采用UPLC-MS/MS法，建立同時(shí)測(cè)定外賣(mài)食品接觸材料中7種抗氧化劑遷移量的定量分析方法。結(jié)果表明：7種目標(biāo)化合物在0.05～1.0 mg/L及0.5～10 mg/L范圍內(nèi)具有較好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R 2≥0.99；方法檢出限為0.02～0.2mg/kg，定量限為0.05～0.5 mg/kg；方法的回收率為81.4%～116.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%～9.8%。該方法前處理簡(jiǎn)單，靈敏度高，適用于外賣(mài)食品接觸材料中抗氧化劑遷移量的定量分析。

關(guān)鍵詞：超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法，外賣(mài)食品接觸材料，抗氧化劑，遷移量

DOI編碼：10.3969/j.issn.1002-5944.2023.06.070

0 引 言

借助互聯(lián)網(wǎng)經(jīng)濟(jì)之風(fēng)，“餓了么”、“美團(tuán)外賣(mài)”、“百度外賣(mài)”等網(wǎng)絡(luò)定餐平臺(tái)如雨后春筍般多了起來(lái)，隨處可見(jiàn)外賣(mài)配送人員穿梭于街頭巷尾。消費(fèi)者在選擇外賣(mài)訂餐時(shí)，往往更關(guān)注食物的賣(mài)相和味道，很容易忽視外賣(mài)食品接觸材料的安全性問(wèn)題，尤其是與高溫、高油的傳統(tǒng)中餐相接觸時(shí)。事實(shí)上，由于直接接觸食物，外賣(mài)食品接觸材料的質(zhì)量對(duì)于食品安全尤為重要。

外賣(mài)食品接觸材料以塑料為主，常見(jiàn)材質(zhì)為聚丙烯、聚苯乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯等。塑料在使用過(guò)程中易發(fā)生氧化、分解，抗氧化劑能有效延緩塑料的氧化、分解，因而被廣泛地作為添加劑加入到塑料中[1-4]。在一定條件下與食品接觸時(shí)，其極可能會(huì)遷移到食品中去，從而危害人體健康[1-2，5]。目前，國(guó)家強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)GB 9685-2016[6]中只對(duì)部分抗氧化劑的使用量和遷移量作了規(guī)定。

目前，已有關(guān)于食品接觸材料中抗氧化劑的檢測(cè)方法主要有氣相色譜法[7]、氣質(zhì)聯(lián)用法[8]、高效液相色譜法[9]、高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法[1，5]。目前，國(guó)內(nèi)鮮少有針對(duì)外賣(mài)食品接觸材料這一特定對(duì)象中抗氧化劑遷移量的報(bào)道。本文擬建立UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定7種抗氧化劑的遷移量，為外賣(mài)食品接觸材料的質(zhì)量安全提供強(qiáng)有力的市場(chǎng)監(jiān)管技術(shù)支撐。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與試劑

電商平臺(tái)上購(gòu)買(mǎi)的29份塑料外賣(mài)食品接觸材料，包括外賣(mài)一次性打包盒、打包袋等。

針式尼龍過(guò)濾器、聚醚砜過(guò)濾器（上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司）；甲醇（色譜純，美國(guó)Fisher公司）；氟化銨、乙醇、乙酸（分析純，上海國(guó)藥集團(tuán)）。

7種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（抗氧化劑BHA、抗氧化劑2，4-二叔丁基苯酚、抗氧化劑264、抗氧化劑22 4 6、抗氧化劑1010、抗氧化劑10 76、抗氧化劑168），純度≥98%，均購(gòu)于上海安譜璀世標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)服務(wù)有限公司。7種抗氧化劑的簡(jiǎn)稱(chēng)、化學(xué)名稱(chēng)、CAS號(hào)、分子式、分子量和遷移量如表1所示。

1.2 儀器與設(shè)備

ExionLC AD + 3500型超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀（美國(guó)A B Sciex公司）；渦旋混合器（德國(guó)IKA公司）；ASE300快速溶劑萃取儀（美國(guó)Dionex公司）； Milli-Q型超純水儀（美國(guó)Millipor公司）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液的配制：分別稱(chēng)取7種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)品10 mg（精確至0.01 mg），用甲醇溶解并定容于10 mL容量瓶，配制成1000 mg/L的7種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，保存于4 ℃冰箱中備用。

標(biāo)準(zhǔn)中間工作液的配制：分別移取1 mL上述7種抗氧化劑的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，用甲醇定容于10 mL容量瓶，稀釋成100 mg/L的7種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)中間工作溶液，保存于4 ℃冰箱中備用。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液的配制：分別準(zhǔn)確移取5 mL抗氧化劑264、2，4-二叔丁基苯酚、抗氧化劑168和0.5 mL抗氧化劑BHA、抗氧化劑2246、抗氧化劑1010、抗氧化劑1076標(biāo)準(zhǔn)中間工作液，用甲醇定容于50 mL容量瓶，稀釋成10 mg/L的抗氧化劑264、2，4-二叔丁基苯酚、抗氧化劑168和1 mg/L的抗氧化劑BHA、抗氧化劑2246、抗氧化劑1010、抗氧化劑1076的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

移取混合標(biāo)準(zhǔn)工作液0.1、0.5、1、3、5 、10 mL于10 mL容量瓶中，用10%乙醇稀釋至刻度，分別得到濃度為0.1、0.5、1、3、5、10 mg/L的抗氧化劑264、2，4-二叔丁基苯酚、抗氧化劑168的標(biāo)準(zhǔn)工作液，以及濃度為0.01、0.05、0.1 、0.3、0.5 、1.0 mg/L的抗氧化劑BHA、抗氧化劑2246、抗氧化劑1010、抗氧化劑1076的標(biāo)準(zhǔn)工作液。再分別用4%乙酸、95%乙醇配制同樣濃度系列的7種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)工作液。取1 mL溶液，經(jīng)針式尼龍過(guò)濾器或針式聚醚砜過(guò)濾器過(guò)濾后，供儀器測(cè)定。

1.4 方法

1.4.1 遷移試驗(yàn)

為減少試驗(yàn)過(guò)程中帶來(lái)的污染，應(yīng)避免使用塑料材質(zhì)的離心管和注射器等。

根據(jù)外賣(mài)食品接觸材料的預(yù)期用途以及使用條件，按照GB 5009.156-2016標(biāo)準(zhǔn)[10]和GB 31604.1-2015標(biāo)準(zhǔn)[11]進(jìn)行遷移試驗(yàn)，分別選用10%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇、4%（體積分?jǐn)?shù)）乙酸、95%（體積分?jǐn)?shù)）乙醇（化學(xué)替代溶劑）模擬中性、酸性和油性食品，在70 ℃，2h（95%乙醇為60 ℃，2 h）條件下進(jìn)行遷移試驗(yàn)。

1.4.2 樣品前處理

將29份外賣(mài)食品接觸材料樣品各剪成5 cm×5cm大小的方形片狀樣（每份樣品至少9塊），按照3塊片狀樣加入125 mL上述食品模擬物，根據(jù)以上3種浸泡條件，在玻璃燒杯中進(jìn)行遷移試驗(yàn)，得到的遷移試驗(yàn)浸泡液經(jīng)針式尼龍過(guò)濾器或針式聚醚砜過(guò)濾器過(guò)濾后，與標(biāo)準(zhǔn)工作液一起供儀器測(cè)定。

1.4.3 液相條件

色譜柱：C18柱（2.1 mm×50 mm×1.8 μm），柱溫：40 ℃，流動(dòng)相A：1 mmol/L氟化銨，流動(dòng)相B：甲醇，流速：0.6 mL/min，進(jìn)樣量：10 μL；洗脫梯度詳如表2所示。

1.4.4 質(zhì)譜條件

離子源：電噴霧離子源；電噴霧電壓：正離子模式5500 V，負(fù)離子模式-4500 V；氣簾氣壓力：30kPa；霧化氣壓力：55 kPa；碰撞氣壓力：8 psi，離子源溫度：400 ℃；掃描方式：正、負(fù)離子同時(shí)掃描；檢測(cè)：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）。每種物質(zhì)的其他主要質(zhì)譜參數(shù)如表3所示。

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)繪制

按照2.4所列的儀器條件參數(shù)，將標(biāo)準(zhǔn)工作液分別注入到U PLC-MS/MS儀中，測(cè)定相應(yīng)的峰面積，以目標(biāo)物的濃度為橫坐標(biāo)，以對(duì)應(yīng)的定量離子峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線(xiàn)。

1.6 定性及定量測(cè)定

按照2.4所列的儀器條件參數(shù)，測(cè)定食品模擬物溶液，根據(jù)保留時(shí)間及色譜圖譜進(jìn)行定性分析；根據(jù)樣品中被測(cè)抗氧化劑的含量，選擇接近濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。待測(cè)樣品中抗氧化劑的峰面積均在線(xiàn)性范圍內(nèi)，用外標(biāo)法定量。

1.7 結(jié)果計(jì)算

食品接觸材料中抗氧化劑的遷移量以mg/kg表示，按以下公式計(jì)算樣品中抗氧化劑的含量：

式中：X i—樣品中抗氧化劑i的含量，mg/kg；C i—樣品浸泡液中抗氧化劑i的濃度，mg/L；C 0—空白浸泡液中抗氧化劑i的濃度，mg/L；V—樣品浸泡液體積，L；S —樣品與浸泡液的接觸面積，dm2；S 0—樣品實(shí)際使用中與食品的接觸面積，dm2；m1—樣品實(shí)際接觸固態(tài)食品的質(zhì)量，或?qū)嶋H接觸液態(tài)食品的體積所對(duì)應(yīng)的食品質(zhì)量，kg。

2 結(jié)果與分析

2.1 樣品前處理?xiàng)l件

根據(jù)外賣(mài)食品接觸材料在實(shí)際使用過(guò)程中可能會(huì)接觸的食品類(lèi)型以及接觸的溫度和時(shí)間，選擇相應(yīng)的食品模擬物，在一定的溫度和時(shí)間條件下進(jìn)行遷移試驗(yàn)，采用10%乙醇模擬不含酒精或乙醇含量≤10%的液態(tài)食品，4%乙酸模擬酸性的液態(tài)食品，95%乙醇用作化學(xué)溶劑替代試驗(yàn)?zāi)M表面含有油脂的固體食品。采用70 ℃，2 h的試驗(yàn)條件模擬食品在T≤70 ℃，t≤2 h，或T≤100 ℃，t≤15 min的熱灌裝及巴氏消毒后，不在室溫或低于室溫下長(zhǎng)期儲(chǔ)存的使用條件[11]。95%乙醇作為化學(xué)溶劑替代試驗(yàn)?zāi)M物時(shí)，試驗(yàn)條件為60 ℃，2 h [12]。

2.2 流動(dòng)相

在方法開(kāi)發(fā)階段，在流動(dòng)相選擇上，對(duì)流動(dòng)相A分別為1 mmol/L氟化銨、純水、0.1%甲酸水，流動(dòng)相B為甲醇，這三種流動(dòng)相組合上進(jìn)行了優(yōu)化。純水和甲醇作為流動(dòng)相時(shí)，有部分抗氧化劑的分離效果并不理想，峰形拖尾且不易分離；而采用0.1%甲酸水和甲醇作為流動(dòng)相時(shí)，各組分的分離效果有所好轉(zhuǎn)，駐留時(shí)間縮短，出峰相對(duì)干脆，但依舊不能很好地分離幾種保留時(shí)間相近的組分；最后采用1 mmol/L氟化銨和甲醇作為流動(dòng)相組合，在1 mmol/L氟化銨微酸性溶液的作用下，各組分分離效果明顯好轉(zhuǎn)，各組分基本都能較好地分離，且峰形相對(duì)之前也有很好改善，各組分的響應(yīng)也相對(duì)較高，在各組分開(kāi)始被洗脫時(shí)，采用98%高純有機(jī)相洗脫程序，其中三種保留時(shí)間非常接近的組分也能做到很好的分離，最終確定了上述的UPLC條件。

2.3 色譜柱

最初在色譜柱的選擇上，選用了C18 柱（2 .1mm×50 mm×3.0 μm）的常規(guī)柱形，但各組分的分離效果并不理想，有三種保留時(shí)間相近的組分始終不能很好地分離。為了達(dá)到更好的分離效果，采用粒徑更小的C18柱（2.1 mm×50 mm×1.8 μm），在柱長(zhǎng)和內(nèi)徑都不作改變的前提下，粒徑小的色譜柱分離度更好，色譜柱壓力更大。1.8 μm粒徑的色譜柱比3.0 μm色譜柱在分離度上更加出色，特別是對(duì)于保留時(shí)間非常接近的組分能做到更好的分離。

2.4 線(xiàn)性關(guān)系和檢出限

按2.4條中的液相和質(zhì)譜條件對(duì)7種抗氧化劑的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行測(cè)定，以質(zhì)量濃度為x軸，以色譜峰面積為y軸，繪制準(zhǔn)曲線(xiàn)。7種抗氧化劑的線(xiàn)性如表4所示，以3倍信噪比計(jì)算檢出限，以10倍信噪比計(jì)算定量限，結(jié)果如表4所示。在各自的濃度范圍內(nèi)，7種抗氧化劑均具有良好的線(xiàn)性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)（R 2）≥0.99，檢出限、定量限分別為0.02～0.2 mg/kg和0.05～0.5 mg/kg。

2.5 回收率和精密度

選擇某一陰性樣品作為空白樣品，按2.4.1條進(jìn)行遷移試驗(yàn)，將浸泡液進(jìn)行低、中、高3個(gè)濃度水平的加標(biāo)回收試驗(yàn)（n =6），回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差如表5所示。結(jié)果表明，3個(gè)加標(biāo)水平的回收率為81.4%～116.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%～9.8%，該方法的回收率和精密度良好。

2.6 實(shí)際樣品檢測(cè)

采用本方法檢測(cè)29份外賣(mài)食品接觸材料樣品中7種抗氧化劑的特定遷移量，結(jié)果表明：在4%乙酸模擬物70 ℃，2h和10%乙醇模擬物70 ℃，2 h的條件下，均未檢出抗氧化劑；而在95%乙醇模擬物60℃，2 h條件下，有16份樣品分別檢出了2，4-二叔丁基苯酚、抗氧化劑264、抗氧化劑1010、抗氧化劑1076和抗氧化劑168，其余樣品的其余組分均未檢出，特定遷移量詳如表6所示。

3 結(jié) 論

本研究建立了UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定外賣(mài)食品接觸材料中7種抗氧化劑的特定遷移量。該方法前處理簡(jiǎn)單，靈敏度高，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。對(duì)29份外賣(mài)食品接觸材料樣品的檢測(cè)結(jié)果表明，其中16份樣品在95%乙醇，60 ℃，2 h遷移條件下檢出了抗氧化劑的遷移量，說(shuō)明這些樣品在與油性食品接觸時(shí)遷移風(fēng)險(xiǎn)較高。

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作者簡(jiǎn)介

陸豪棟，本科，工程師，研究方向?yàn)槭称方佑|材料及制品的質(zhì)量安全。

劉麗霞，通信作者，碩士研究生，正高級(jí)工程師，研究方向?yàn)槭称方佑|材料及制品的質(zhì)量安全。

（責(zé)任編輯：袁文靜）