【摘要】目的：探討子宮內(nèi)膜癌中錯(cuò)配修復(fù)蛋白（MSH2、MLH1、MSH6、PMS2）的表達(dá)情況與表達(dá)組在各臨床病理特征中相關(guān)差異的可能性。方法：收集2019年1月—2022年8月在本院行診刮及手術(shù)治療的子宮內(nèi)膜癌患者，進(jìn)行錯(cuò)配修復(fù)基因的免疫組化染色，分析患者特征與錯(cuò)配修復(fù)（MMR）蛋白的關(guān)系。結(jié)果：子宮內(nèi)膜癌中MMR蛋白表達(dá)缺失14例，缺失率為16.67%（14/84），dMMR組與pMMR組在浸潤深度、分化程度、組織學(xué)類型、FIGO分期等臨床病理特征中比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)論：MMR表達(dá)缺失與子宮內(nèi)膜癌患者臨床特征的關(guān)系不大，僅通過檢測(cè)MMR表達(dá)情況無法準(zhǔn)確篩查子宮內(nèi)膜癌。

【關(guān)鍵詞】錯(cuò)配修復(fù)蛋白；子宮內(nèi)膜癌；免疫組化檢測(cè)

基金項(xiàng)目：廊坊市科技局自籌經(jīng)費(fèi)課題項(xiàng)目《錯(cuò)配修復(fù)基因在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及其與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征、預(yù)后關(guān)系的研究》（2020013103）

The expression of mismatch repair （MMR） protein in patients with endometrial cancer

YUAN Fengxia， SHI Rui， SUN Xuesong， CHEN Guizhou， AN Ziyu

Department of pathology， Xianghe people’s hospital， Langfang City， Hebei， Langfang， Hebei 065400， China

【Abstract】Objective：To investigate the expression of mismatch repair proteins （MSH2，MLH1，MSH6，PMS2） in endometrial carcinoma and the possibility of the relevant differences between the expression groups in various clinicopathological features.Methods：Patients with endometrial cancer who underwent curettage and surgical treatment in our hospital from January 2019 to August 2022 were collected for immunohistochemical staining of mismatch repair genes，and the relationship between patient characteristics and mismatch repair （MMR） protein were analyzed.Results：The deletion of MMR protein expression in endometrial carcinoma was 14 cases，the deletion rate was 16.67% （14/84）.There was no statistically significant difference between the dMMR group and the pMMR group in clinicopathological features such as depth of infiltration，degree of differentiation，histological type and FIGO stage（P>0.05）.Conclusion：The lack of MMR expression is not closely related to the clinical characteristics of endometrial cancer patients，and detecting MMR expression alone cannot accurately screen for endometrial cancer.

【Key Words】Mismatch repair protein； Endometrial carcinoma； Immunohistochemical detection

子宮內(nèi)膜癌多發(fā)于圍經(jīng)期和絕經(jīng)期的女性群體中，屬于上皮性惡性腫瘤，在臨床上較為常見，近年來發(fā)病率逐漸上升且趨于年輕化[1]。根據(jù)以往的調(diào)查分析，發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜癌在林奇（lynch）綜合征中發(fā)病率較高，初步懷疑兩種疾病存在相似的致病因。由于lynch綜合征的主要發(fā)病因是基因突變DNA錯(cuò)配（錯(cuò)配修復(fù)），被稱為“前哨”腫瘤，這些患者會(huì)出現(xiàn)以MSH2、MLH1、MSH6、PMS2為主的錯(cuò)配修復(fù)蛋白表達(dá)的缺失[2]。因此，本研究對(duì)錯(cuò)配修復(fù)（MMR）蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)進(jìn)行深入分析，通過免疫組化檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌中MSH2、MLH1、MSH6、PMS2的表達(dá)情況，并探討錯(cuò)配修復(fù)蛋白表達(dá)缺失組與表達(dá)組在各臨床病理特征中是否存在差異，以此判斷該致病因是否也會(huì)引起子宮內(nèi)膜癌的病變。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 收集本院經(jīng)病理證實(shí)的子宮內(nèi)膜癌患者共84例，包括只有診刮病理標(biāo)本的患者24例，同時(shí)具有診刮病理及手術(shù)標(biāo)本的患者60例。

1.2 方法 通過取標(biāo)本經(jīng)常規(guī)石蠟包埋、連續(xù)切片，取出后進(jìn)行脫蠟、水化，隨后采用免疫組化ELivision 法對(duì)切片MLH1、MSH2、MSH6、PMS2、P53進(jìn)行染色，所有切片均出現(xiàn)陽性對(duì)照顯色，全部終止反應(yīng)。

1.3 結(jié)果判讀 根據(jù)細(xì)胞核明確著色表達(dá)對(duì)檢測(cè)陽性結(jié)果進(jìn)行判定，本研究中為陽性，這和核染色強(qiáng)弱、陽性細(xì)胞彌漫等因素關(guān)系并不明顯。陰性則表示細(xì)胞不著色，以子宮正常內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞為對(duì)照[3-4]。觀察MMR蛋白細(xì)胞核中顏色，若4種細(xì)胞顏色為棕褐色，說明MMR表達(dá)（pMMR），4種細(xì)胞缺一不可，反之則MMR表達(dá)缺失（dMMR）[5-6]。（見圖1與圖2）

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 23.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)數(shù)資料采用（%）表示，進(jìn)行x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（x±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 MMR蛋白在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況 84例子宮內(nèi)膜癌中MMR蛋白表達(dá)缺失14例，缺失率為16.67%（14/84）

2.2 pMMR組與dMMR組患者臨床病理特征的比較pMMR組和dMMR組患者在國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟制定的FIGO分期、浸潤深度、分化程度、組織學(xué)類型等臨床病理特征中比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），詳見表1。

3 討論

錯(cuò)配修復(fù)（MMR）是維護(hù)基因組穩(wěn)定性的重要機(jī)制之一，MMR蛋白負(fù)責(zé)檢測(cè)和修復(fù)DNA復(fù)制過程中的錯(cuò)配和插入/刪除錯(cuò)誤，從而維持基因組的完整性。如果MMR功能發(fā)生異常，會(huì)導(dǎo)致累積大量的突變和DNA損傷，增加腫瘤發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)。研究表明，MMR基因的突變或表達(dá)異常與多種癌癥的發(fā)生和進(jìn)展相關(guān)，包括結(jié)直腸癌、胃癌和卵巢癌等[5-6]。已有研究發(fā)現(xiàn)，MMR蛋白包含MSH2、MSH6、MLH1、PMS2，這些基因和Lynch綜合征有密切聯(lián)系[7]。而林奇綜合征患者又易患多種腫瘤，其中包括子宮內(nèi)膜癌。有文獻(xiàn)報(bào)道，20%～40%的子宮內(nèi)膜癌患者顯示MMR蛋白表達(dá)缺失[8]。這表明，通過對(duì)子宮內(nèi)膜癌MMR蛋白表達(dá)情況，可能進(jìn)一步篩查出Lynch綜合征。

本研究采用免疫組化法檢測(cè)MMR在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)情況，MMR蛋白表達(dá)缺失率為16.67%，低于國外文獻(xiàn)報(bào)道[9]，且與國內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道研究結(jié)果相比存在差異[10-11]。初步分析，可能受樣本量限制，也可能與地區(qū)及人群差異有關(guān)。

進(jìn)一步對(duì)MMR缺失與否進(jìn)行病理特征分析，發(fā)現(xiàn)MMR表達(dá)缺失與MMR表達(dá)在浸潤深度、分化程度、組織學(xué)類型、FIGO分期等臨床病理特征對(duì)比上的差異不大。這表明，僅通過臨床特征判斷子宮內(nèi)膜癌的MMR缺失存在較大局限性，結(jié)合患者病理特征和MMR蛋白表達(dá)結(jié)果篩查子宮內(nèi)膜癌會(huì)存在較大漏診或誤診。

從單因素分析，dMMR組的子宮內(nèi)膜癌病理類型以子宮內(nèi)膜樣癌為主，研究結(jié)果與Kost等[12]一致。另有文獻(xiàn)報(bào)道，dMMR組與高級(jí)別腫瘤相關(guān)，pMMR和dMMR腫瘤在子宮深肌層浸潤、宮頸浸潤、LVSI、盆腔和腹主動(dòng)脈旁淋巴結(jié)受累方面的病理結(jié)果比較差異均不大[13]。對(duì)于子宮內(nèi)膜癌的組織學(xué)類型，pMMR組和dMMR組中的子宮內(nèi)膜樣癌的比例分別為81.33%和18.67%，但非子宮內(nèi)膜樣癌均分布在pMMR組。這表明，pMMR在不同組織學(xué)類型的子宮內(nèi)膜癌中有不同的發(fā)生率，其中dMMR均表現(xiàn)為子宮內(nèi)膜樣癌而不表現(xiàn)為非子宮內(nèi)膜樣癌。具體來說，MMR蛋白表達(dá)缺失更常見于子宮內(nèi)膜樣癌當(dāng)中。初步分析，MMR蛋白的缺失導(dǎo)致錯(cuò)配修復(fù)機(jī)制受損，從而增加基因突變的風(fēng)險(xiǎn)。子宮內(nèi)膜樣癌通常顯示更高的突變負(fù)荷，這個(gè)突變負(fù)荷加重可能與MMR蛋白表達(dá)缺失有關(guān)，即MMR蛋白表達(dá)缺失增加了子宮內(nèi)膜樣癌的發(fā)生，從而可能增加子宮內(nèi)膜癌的病變風(fēng)險(xiǎn)。此外，Garg K及An HJ 等研究表明，MMR蛋白表達(dá)缺失的子宮內(nèi)膜癌表現(xiàn)為更高級(jí)別的、更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及脈管侵犯。Pasanen等發(fā)現(xiàn)相較于無錯(cuò)配修復(fù)基因缺陷，錯(cuò)配修復(fù)基因表達(dá)缺失患者發(fā)病年齡較大。但本研究尚未對(duì)以上因素進(jìn)行納入分析，存在一定的研究缺陷，需要擴(kuò)大樣本做深入分析。

綜上所述，MMR表達(dá)缺失與子宮內(nèi)膜癌患者臨床特征的關(guān)系不大，僅通過檢測(cè)MMR表達(dá)情況無法準(zhǔn)確篩查子宮內(nèi)膜癌。

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