楊嘉琪，張培華，黃海麗

糖尿病是一種臨床高發(fā)的慢性代謝性疾病，易伴發(fā)包括血管病變及周?chē)窠?jīng)病變?cè)趦?nèi)的多種并發(fā)癥［1］。慢性難愈創(chuàng)面是糖尿病常見(jiàn)且嚴(yán)重的并發(fā)癥之一，且缺乏有效的治療方式，是導(dǎo)致糖尿病患者截肢率居高不下的主要原因［1-2］。磷酸酶和張力蛋白同源基因誘導(dǎo)激酶1（PINK1）可能通過(guò)調(diào)控線粒體功能以及炎性反應(yīng)、脂質(zhì)代謝等在糖尿病創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。本文就創(chuàng)面修復(fù)的機(jī)制，線粒體功能，PINK1與糖尿病難愈創(chuàng)面三者的關(guān)系，PINK1在創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程不同階段中的作用等方面進(jìn)行綜述。

本文文獻(xiàn)檢索策略：本文以“磷酸酶和張力蛋白同源基因誘導(dǎo)激酶1”“糖尿病難愈創(chuàng)面”“創(chuàng)面修復(fù)”為中文關(guān)鍵詞，以“Phosphatase and tensin homologueinduced putative kinase 1”“PTEN induced putative kinase 1”“PINK1”“diabetic refractory wounds”“wound repair”為英文關(guān)鍵詞檢索PubMed、萬(wàn)方數(shù)據(jù)知識(shí)服務(wù)平臺(tái)、中國(guó)知網(wǎng)等數(shù)據(jù)庫(kù)，并手工檢索納入文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)；檢索時(shí)限為建庫(kù)至2022年5月；閱讀摘要及全文后納入與本文主題相關(guān)的文獻(xiàn)，排除信息量太少而無(wú)法有效參考的文獻(xiàn)。

1 皮膚創(chuàng)面修復(fù)的機(jī)制

1.1 創(chuàng)面修復(fù)的過(guò)程 創(chuàng)面修復(fù)包括4個(gè)階段：止血期、炎癥期、增生期以及重塑期。止血期自創(chuàng)面產(chǎn)生開(kāi)始，創(chuàng)面處血管收縮并開(kāi)始凝血級(jí)聯(lián)反應(yīng)，血小板在此期間釋放出各種蛋白、細(xì)胞因子、化學(xué)介質(zhì)，對(duì)后續(xù)的愈合過(guò)程有重要的調(diào)節(jié)作用［3］。凝血過(guò)程中被招募至創(chuàng)面周?chē)姆蚀蠹?xì)胞、中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞相互配合、分工合作，共同清除創(chuàng)面部位的細(xì)菌、失活或壞死的組織并促進(jìn)炎性因子的釋放，為新生肉芽組織提供一個(gè)干凈的場(chǎng)地，炎癥期的進(jìn)展情況直接影響創(chuàng)面愈合的發(fā)展方向［4］。糖尿病創(chuàng)面屬于慢性難愈創(chuàng)面，有研究表明這與過(guò)度的炎性反應(yīng)密切相關(guān)［5］。當(dāng)中性粒細(xì)胞釋放的白介素1和腫瘤壞死因子α（TNF-α）激活成纖維細(xì)胞和上皮細(xì)胞，創(chuàng)面修復(fù)進(jìn)入增殖期。在增殖期，修復(fù)細(xì)胞（角質(zhì)形成細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞）遷移、增殖，基質(zhì)生成和降解，新生血管形成，形成新鮮的肉芽組織［6］。重塑期開(kāi)始于肉芽組織的成分沉積，最終形成瘢痕，完成創(chuàng)面修復(fù)［4］。這些活動(dòng)的組合決定修復(fù)的最終結(jié)果。

1.2 糖尿病難愈創(chuàng)面的成因 血糖控制不佳、晚期糖基化終末產(chǎn)物（AGEs）蓄積、炎性反應(yīng)加重、氧化應(yīng)激反應(yīng)增加、細(xì)胞凋亡增加、微循環(huán)障礙等多種病理因素均可導(dǎo)致創(chuàng)面難愈，有研究表明高糖環(huán)境誘發(fā)的氧化應(yīng)激可能在延遲創(chuàng)面愈合中發(fā)揮關(guān)鍵作用［7］。糖尿病患者創(chuàng)面局部持續(xù)的高糖環(huán)境經(jīng)過(guò)復(fù)雜的糖基化過(guò)程產(chǎn)生AGEs，蓄積的AGEs與其主要細(xì)胞表面受體——晚期糖基化終產(chǎn)物受體（RAGE）結(jié)合引發(fā)氧化應(yīng)激，加重炎癥，影響細(xì)胞功能和代謝［8］。創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中，中性粒細(xì)胞在炎癥早期釋放適量氧自由基（ROS）清除細(xì)菌及異物［9］，吞噬細(xì)胞碎片后迅速凋亡并釋放基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）和彈性蛋白酶等酶，進(jìn)一步消化周?chē)氖軗p細(xì)胞［10］。為防止過(guò)度損傷，巨噬細(xì)胞會(huì)及時(shí)清除凋亡中的中性粒細(xì)胞并由促炎表型M1型向促愈合表型M2型極化，抑制炎癥發(fā)展，促進(jìn)組織再生［11］，巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化是促進(jìn)創(chuàng)面修復(fù)進(jìn)展的重要因素［12］。研究證實(shí)，AGEs蓄積會(huì)抑制中性粒細(xì)胞的遷移并促進(jìn)其凋亡，無(wú)法及時(shí)到達(dá)創(chuàng)面基部的中性粒細(xì)胞在創(chuàng)面周?chē)奂Ｔ贏GEs的作用下各種炎性因子的表達(dá)上調(diào)，ROS、MMP、彈性蛋白酶增加，同時(shí)內(nèi)源性抗氧化酶的表達(dá)被抑制，導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)［8］，細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）嚴(yán)重受損［13］，促進(jìn)愈合的生長(zhǎng)因子如血小板衍生生長(zhǎng)因子和腫瘤壞死因子-β（TNF-β）減少［14］，研究證實(shí)ECM降解平衡異常是創(chuàng)面在炎癥期停滯的主要因素之一［10］。其次，KHANNA等［15］發(fā)現(xiàn)糖尿病小鼠創(chuàng)面處巨噬細(xì)胞清除功能下降，炎癥消除受阻。有研究證實(shí)AGE-RAGE通路阻礙巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換［16］，主要分泌促炎因子的M1型巨噬細(xì)胞增多，分泌抗炎因子和促修復(fù)細(xì)胞因子的M2型巨噬細(xì)胞減少，導(dǎo)致修復(fù)細(xì)胞增殖和遷移減少，創(chuàng)面愈合受阻［17］。此外，研究證實(shí)AGEs可能會(huì)惡化糖尿病患者的血糖情況，導(dǎo)致炎性反應(yīng)以及氧化損傷進(jìn)行性加重［18］，最終形成糖尿病慢性難愈創(chuàng)面。

2 線粒體功能與糖尿病難愈創(chuàng)面的關(guān)系

2.1 2型糖尿病導(dǎo)致脂肪組織線粒體異常 線粒體在細(xì)胞穩(wěn)態(tài)、細(xì)胞凋亡、ROS生成、能量底物代謝中起重要作用［19-20］。線粒體除了作為能量供應(yīng)細(xì)胞器，還可作為能量傳感器。線粒體的穩(wěn)態(tài)常與代謝相關(guān)的疾病密不可分［21］。線粒體可能在難愈創(chuàng)面的形成過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。有研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者或db/db小鼠（2型糖尿病動(dòng)物模型）脂肪組織中線粒體表現(xiàn)出功能障礙或減少現(xiàn)象［22-23］。另有研究顯示，與非糖尿病正常體質(zhì)量對(duì)照組相比，肥胖的2型糖尿病患者則會(huì)顯示出異位脂質(zhì)的累積［24］，線粒體來(lái)源ROS增加，抗氧化酶下降［25］，其中抗氧化酶的減少被證實(shí)會(huì)降低胰島素敏感性［26］，加重高血糖狀態(tài)，形成惡性循環(huán)，加速疾病進(jìn)展。

2.2 氧化應(yīng)激損害細(xì)胞功能 線粒體是胞內(nèi)ROS的主要來(lái)源，卻也易受ROS引起的氧化損傷影響［27-28］，適量的ROS對(duì)于維持細(xì)胞功能是必要的，包括基因表達(dá)、分子信號(hào)傳達(dá)、蛋白質(zhì)翻譯后修飾、控制細(xì)胞的增殖分化，維持細(xì)胞衰老等［29］。過(guò)量的ROS會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激損害細(xì)胞生理功能［30］。通常，線粒體具有自限性反饋機(jī)制來(lái)減弱線粒體ROS的產(chǎn)生［31］，但AGEs蓄積會(huì)降低內(nèi)源性抗氧化酶的生成，破壞體內(nèi)氧化還原平衡；其次，過(guò)量的ROS會(huì)促進(jìn)線粒體分泌細(xì)胞死亡相關(guān)分子（DAMPs）激發(fā)炎性反應(yīng)［32］，線粒體分泌的多種DAMPs導(dǎo)致促炎細(xì)胞因子分泌增加、細(xì)胞代謝改變和炎癥誘導(dǎo)。

為保證線粒體的健康和穩(wěn)態(tài)、避免細(xì)胞凋亡，線粒體通過(guò)裂變/融合平衡進(jìn)行質(zhì)量控制。多數(shù)損傷線粒體通過(guò)裂變激活自噬進(jìn)行降解，另一部分損傷程度輕的線粒體被選擇性融合進(jìn)健康的線粒體網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行成分再分配，挽救線粒體功能，防止過(guò)度碎片化［33-34］。自噬是一種細(xì)胞自衛(wèi)機(jī)制，分為非選擇性和選擇性，在正常的生理件下，適度的自噬水平有利于維持穩(wěn)定的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境和應(yīng)對(duì)不利環(huán)境［35］。因此，在創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中線粒體調(diào)控細(xì)胞凋亡的這一功能較其他功能具有更重要的意義。

3 PINK1功能

3.1 PINK1介導(dǎo)線粒體自噬 PINK1是絲氨酸/蘇氨酸激酶家族中的一員。作為線粒體功能障礙的監(jiān)測(cè)器，PINK1能持續(xù)監(jiān)控線粒體狀態(tài)，識(shí)別受損線粒體，并啟動(dòng)選擇性自噬程序清除受損線粒體，維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)。PINK1主要分布于線粒體外膜，屬于線粒體自噬信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的上游因子，與其下游因子E3-泛素連接酶Parkin蛋白一起介導(dǎo)線粒體自噬。首先，PINK1在受損線粒體外膜上活化并蓄積［36］，通過(guò)磷酸化附著在線粒體外膜蛋白上的泛素絲氨酸（Ser）65觸發(fā)起始信號(hào)向細(xì)胞傳遞損傷信息［37］。近期研究發(fā)現(xiàn)，在PINK1中，Ser228磷酸化是將PINK1轉(zhuǎn)化為泛素激酶的先決條件［38］。隨后Parkin蛋白被選擇性地招募至受損線粒體外膜并被活化以促進(jìn)線粒體自噬［39］，并泛素化線粒體外膜上相關(guān)蛋白，活化的Parkin蛋白通過(guò)延長(zhǎng)泛素鏈形成泛素基團(tuán)，泛素基團(tuán)結(jié)合自噬受體蛋白，最后通過(guò)自噬適配器形成自噬小體，完成線粒體自噬［40］。在此過(guò)程中，完全活化的Parkin蛋白可以為PINK1提供更多磷酸化底物，又反過(guò)來(lái)募集和活化更多Parkin蛋白，形成正反饋環(huán)，從而擴(kuò)大線粒體自噬信號(hào)［41］。此外，研究提出PINK1可以不通過(guò)Parkin蛋白通路直接激活線粒體自噬［41］，這表明PINK1可以通過(guò)不同途徑調(diào)控自噬。

3.2 PINK1其他功能 越來(lái)越多的證據(jù)表明，PINK1通過(guò)除自噬外的其他途徑參與調(diào)控細(xì)胞代謝和活性。ARENA等［42］發(fā)現(xiàn)PINK1能通過(guò)磷酸化Bcl-xL（一種抗凋亡蛋白）的Ser62對(duì)抗氧化損傷引起的細(xì)胞凋亡，其次，該作者在另一篇研究中提出PINK1也可能通過(guò)調(diào)節(jié)Ca2+穩(wěn)態(tài)以增強(qiáng)呼吸鏈功能維持線粒體功能［43］；PINK1的下調(diào)導(dǎo)致糖尿病患者體內(nèi)脂滴聚集和線粒體脂肪酸氧化證實(shí)了PINK1能夠影響脂質(zhì)代謝［44］；PINK1對(duì)神經(jīng)元有保護(hù)作用，MARTELLA等［45］發(fā)現(xiàn)PINK1能夠提高線粒體對(duì)魚(yú)藤酮等線粒體毒性物質(zhì)的拮抗能力；AKUNDI等［46］發(fā)現(xiàn)PINK1基因敲除的哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)線粒體碎片化、擴(kuò)大及腫脹等異常形態(tài)，部分線粒體伴隨Parkin蛋白募集或去極化，證實(shí)PINK1能夠影響線粒體形態(tài)［47］。

4 PINK1與2型糖尿病及其難愈創(chuàng)面的關(guān)系

PINK1突變是帕金森綜合征的主要原因之一［48］，但PINK1除神經(jīng)保護(hù)作用外的其他功能正在被逐步挖掘［43］。實(shí)驗(yàn)證實(shí)，PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬可以通過(guò)影響胰島β細(xì)胞的Ca2+穩(wěn)態(tài)、葡萄糖感知及攝取能力和胰島素抵抗參與糖代謝過(guò)程調(diào)控2型糖尿病［49］。有研究表明，PINK1缺乏是2型糖尿病的潛在發(fā)病因素［50］。BHANSALI等［51］發(fā)現(xiàn)，輕度高血糖能上調(diào)線粒體自噬以保證β細(xì)胞功能，中度或高度高血糖會(huì)導(dǎo)致PINK1/Parkin表達(dá)下調(diào)損害線粒體自噬，高血糖誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激造成線粒體功能紊亂及ROS清除功能下降，進(jìn)而導(dǎo)致過(guò)度的炎性反應(yīng)和細(xì)胞修復(fù)能力下降。此外，線粒體自噬的下調(diào)會(huì)促進(jìn)巨噬細(xì)胞向M1型極化［52］，進(jìn)一步促進(jìn)炎性反應(yīng)。這些因素與前文所提到的難愈創(chuàng)面的成因高度契合，這證實(shí)PINK1對(duì)糖尿病及其難愈創(chuàng)面存在重要影響作用。

5 PINK1在創(chuàng)面修復(fù)中的作用

5.1 PINK1在創(chuàng)面修復(fù)炎性反應(yīng)階段的作用

5.1.1 PINK1對(duì)抗內(nèi)外界氧化脅迫 2型糖尿病患者的創(chuàng)面在持續(xù)的高糖微環(huán)境下會(huì)產(chǎn)生大量AGEs、TNF-α、脂多糖等因子，增強(qiáng)氧化應(yīng)激反應(yīng)及加重炎性反應(yīng)，而這是阻礙愈合的關(guān)鍵原因。過(guò)量的ROS會(huì)破壞抗氧化防御系統(tǒng)，引發(fā)氧化應(yīng)激損傷細(xì)胞。研究表明，PINK1可以通過(guò)不同途徑參與對(duì)抗氧化應(yīng)激。第一，為避免過(guò)度的細(xì)胞損傷，PINK1通過(guò)介導(dǎo)選擇性自噬不斷清除產(chǎn)生過(guò)量ROS的異常線粒體。在人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞（HK-2）中，當(dāng)PINK1介導(dǎo)的線粒體選擇性自噬減少時(shí)，會(huì)導(dǎo)致線粒體ROS（mtROS）產(chǎn)生增多以及DNA氧化損傷，加重造影劑誘發(fā)的急性腎損傷［53］。同樣，在外界高氧誘導(dǎo)下，PINK1的缺乏會(huì)增加肺內(nèi)皮細(xì)胞中線粒體氧化劑和mtROS的產(chǎn)生，加重肺部損傷［54］。以上研究表明PINK1介導(dǎo)自噬能有效對(duì)抗內(nèi)外界氧化損傷。第二，PINK1通過(guò)自噬以外的途徑對(duì)抗氧化應(yīng)激。QASIM等［55］報(bào)道了PINK1可以通過(guò)磷酸化Ser637位點(diǎn)的激肽相關(guān)蛋白1（DRP1）抑制細(xì)胞凋亡，減少在腸缺血再灌注時(shí)期過(guò)量的ROS釋放導(dǎo)致的細(xì)胞損傷。ARENA等［42］發(fā)現(xiàn)PINK1能通過(guò)磷酸化Ser62位點(diǎn)的Bcl-xL對(duì)抗細(xì)胞凋亡。此外，研究發(fā)現(xiàn)的調(diào)控PINK1表達(dá)的上游因子正在逐漸增多，MURATA等［56］對(duì)PINK1 mRNA在脅迫條件下的轉(zhuǎn)錄調(diào)控進(jìn)行研究后提出，Nrf2（一種抗氧化劑轉(zhuǎn)錄因子）能夠上調(diào)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞（SH-SY5Y）中PINK1的轉(zhuǎn)錄表達(dá)，增強(qiáng)其線粒體保護(hù)作用，提高細(xì)胞存活率。值得注意的是，在不同細(xì)胞譜系中，Nrf2對(duì)PINK1的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)具有差異性。MEI等［57］發(fā)現(xiàn)FOXO3a在生長(zhǎng)因子/血清減少時(shí)調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞中PINK1的表達(dá)。但在SH-SY5Y細(xì)胞中，Nrf2誘導(dǎo)的PINK1表達(dá)水平遠(yuǎn)高于FOXO3a。

5.1.2 PINK1介導(dǎo)線粒體自噬抑制NOD樣受體熱蛋白結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白3（NLRP3）的激活 研究顯示，過(guò)量的mtROS［58］和氧化線粒體DNA（mtDNA）在中性粒細(xì)胞凋亡期間能夠激活NLRP3炎癥小體［59-60］。NLRP3炎癥小體是炎癥體中被研究的最廣泛的一種炎癥復(fù)合體，是激活半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase-1，細(xì)胞凋亡的主要介質(zhì)之一）的多蛋白復(fù)合物，可誘導(dǎo)促炎細(xì)胞因子白介素1β和白介素18的成熟，也可被多種刺激物激活，并刺激自身免疫的加強(qiáng)，強(qiáng)化炎性反應(yīng)［61］。從該角度出發(fā)，尋找調(diào)節(jié)NLRP3激活的相關(guān)機(jī)制或能成為防止過(guò)度炎性反應(yīng)的重要突破口。研究顯示，線粒體自噬級(jí)聯(lián)反應(yīng)能夠?qū)⒐δ墚惓５木€粒體清除并降低 mtROS［62］；ZHOU 等［63］證實(shí)了 NLRP3 受到自噬的負(fù)性調(diào)節(jié)，且PINK1是介導(dǎo)自噬的主要上游因子之一。關(guān)于PINK1調(diào)節(jié)NLRP3炎癥小體激活具體機(jī)制的研究較少，現(xiàn)有的研究以PINK1調(diào)控自噬清除受損線粒體為主要機(jī)制多關(guān)注上游調(diào)節(jié)因素及其相關(guān)疾病。MOUTON-LIGER等［64］將PINK1與免疫細(xì)胞核因子κB（NF-κB）途徑的負(fù)調(diào)節(jié)因子的抗凋亡信號(hào)蛋白20AD（A20）聯(lián)系起來(lái)，提出PINK1介導(dǎo)的自噬導(dǎo)致A20的缺失會(huì)誘發(fā)NLRP3炎癥小體在體內(nèi)和體外過(guò)度激活，但這是在神經(jīng)細(xì)胞及骨髓來(lái)源的巨噬細(xì)胞中研究發(fā)現(xiàn)的結(jié)果，難愈創(chuàng)面相關(guān)細(xì)胞的情況是否相同還有待進(jìn)一步研究。PINK1-NLRP3通路與各類疾病相關(guān)聯(lián)的證據(jù)近些年正逐步積累：PINK1介導(dǎo)的自噬通路能夠有效降低mtROS及NLRP3炎癥小體活化，以緩解或防治肝缺血-再灌注損傷［65］、致命的多微生物敗血癥［66］、急性胰腺炎［67］、神經(jīng)炎癥［64］、造影劑誘導(dǎo)的急性腎損傷［53］等涉及身體各個(gè)系統(tǒng)的損傷。以上說(shuō)明PINK1介導(dǎo)的自噬對(duì)NLRP3炎癥小體的抑制對(duì)人體炎癥相關(guān)疾病存在重要且廣泛的保護(hù)作用，但其與糖尿病難愈創(chuàng)面關(guān)系的相關(guān)研究尚且較少。

5.2 PINK1在創(chuàng)面修復(fù)增生期的作用 創(chuàng)面修復(fù)時(shí)，糖尿病患者體內(nèi)的代謝應(yīng)激狀態(tài)會(huì)引發(fā)細(xì)胞線粒體功能異常［68］。研究顯示，高糖微環(huán)境中的AGEs對(duì)人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞中的線粒體動(dòng)力學(xué)有顯著影響，通過(guò)促進(jìn)融合和裂變動(dòng)態(tài)平衡向裂變轉(zhuǎn)化，顯著增加線粒體裂變和細(xì)胞凋亡［69］。內(nèi)皮細(xì)胞狀態(tài)異常導(dǎo)致的血管增生障礙是創(chuàng)面修復(fù)增生過(guò)程受阻的重要原因。研究發(fā)現(xiàn)，PINK1在肥胖及糖尿病小鼠中表達(dá)上調(diào)，并對(duì)保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞免受損傷有重要作用［70］，這也許是PINK1促進(jìn)難愈創(chuàng)面肉芽組織增生的作用機(jī)制之一，在糖尿病心血管疾病的研究中常有涉及。YANG等［71］發(fā)現(xiàn)匹伐他汀可以通過(guò)激活PINK1途徑保護(hù)內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖。XI等［72］提出黃芩素可以通過(guò)上調(diào)PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬，保護(hù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）免受氧化損傷。另一方面，ZHANG等［73］則認(rèn)為利拉魯肽（一種胰高血糖素樣肽-1受體激動(dòng)劑）是通過(guò)抑制PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬來(lái)防止高糖誘導(dǎo)的HUVECs功能障礙。XIANG等［74］也提出沙爾維諾酸B通過(guò)下調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞的凋亡和線粒體自噬來(lái)緩解糖尿病內(nèi)皮和線粒體功能障礙。為何通過(guò)上調(diào)或抑制自噬都能夠提高內(nèi)皮細(xì)胞的存活率？通過(guò)對(duì)比得出，損傷來(lái)源于高血糖導(dǎo)致的氧化損傷，PINK1介導(dǎo)線粒體自噬清除過(guò)量的mtROS是為了減少細(xì)胞凋亡，但當(dāng)ROS過(guò)多，自噬功能失調(diào)，細(xì)胞的凋亡率提高。而當(dāng)調(diào)節(jié)因子可直接降低ROS含量，PINK1的表達(dá)就會(huì)隨之降低。即自噬下調(diào)的前提是ROS的降低，自噬行為的減少為跟隨效應(yīng)。因此這些研究的觀點(diǎn)并非相悖，相反其均肯定了PINK1介導(dǎo)的自噬對(duì)于維持線粒體穩(wěn)態(tài)、避免內(nèi)皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。對(duì)此，F(xiàn)AN等［75］提出PINK1途徑可能是氧化銅納米顆粒誘發(fā)的病理性血管內(nèi)皮損傷的治療策略。

5.3 PINK1在創(chuàng)面修復(fù)重塑期的作用 在創(chuàng)面修復(fù)的最后階段，成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞發(fā)揮主要作用，二者之間的相互影響在愈合過(guò)程中起重要作用。研究顯示，PINK1表達(dá)缺失的患者皮膚中的成纖維細(xì)胞更容易發(fā)生由應(yīng)激引發(fā)的細(xì)胞凋亡，并且過(guò)表達(dá)組細(xì)胞中線粒體上的PINK1在應(yīng)激條件下會(huì)被重新分配到細(xì)胞質(zhì)，證實(shí)了PINK1發(fā)揮的細(xì)胞保護(hù)作用［76］。角質(zhì)形成細(xì)胞中的自噬可通過(guò)調(diào)節(jié)CCL2表達(dá)激活成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞，促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化并促進(jìn)創(chuàng)面愈合的進(jìn)展［77］。自噬影響肌成纖維細(xì)胞分化并調(diào)節(jié)ECM降解，在調(diào)節(jié)組織重塑中起重要作用［78］。因此，PINK1可能通過(guò)調(diào)控線粒體自噬發(fā)揮重要作用。

6 間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）在創(chuàng)面修復(fù)中的應(yīng)用

糖尿病難愈創(chuàng)面的治療方式一直在不斷進(jìn)步和發(fā)展，近年來(lái)，MSCs治療逐漸步入人們的視野。作為一種重要的多功能自我更新細(xì)胞，MSCs分泌細(xì)胞因子、免疫調(diào)節(jié)、分化等能力使其在治療糖尿病難愈創(chuàng)面有著巨大的潛力。MSCs對(duì)糖尿病血管疾病的治療與PINK1介導(dǎo)的自噬密切相關(guān)。ZHU等［79］發(fā)現(xiàn)隨高糖處理的劑量升高和作用時(shí)間延長(zhǎng)，PINK1和Parkin蛋白、自噬標(biāo)志物L(fēng)C3-Ⅱ蛋白表達(dá)量降低，促凋亡因子Bax和裂解的Caspase-3蛋白表達(dá)量升高，隨后mtROS的產(chǎn)生增加，說(shuō)明高糖刺激會(huì)導(dǎo)致線粒體功能障礙，減少線粒體自噬，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。MSCs治療逆轉(zhuǎn)了這些改變，并且PINK1的上調(diào)抑制了Drp1的表達(dá)，減少線粒體裂變誘導(dǎo)的碎片化，這可能是降低mtROS的重要途徑。

7 小結(jié)與展望

PINK1介導(dǎo)的線粒體自噬在糖尿病難愈創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程中發(fā)揮重要作用。PINK1通過(guò)調(diào)節(jié)自噬修復(fù)AGEs誘發(fā)的線粒體功能障礙，去除產(chǎn)生的過(guò)量的ROS以及損傷的DNA，對(duì)抗氧化應(yīng)激，維持細(xì)胞的正常功能保護(hù)參與創(chuàng)面修復(fù)的細(xì)胞免受氧化應(yīng)激損傷。PINK1參與調(diào)節(jié)炎性因子激活和炎癥信號(hào)傳導(dǎo)，抑制炎性反應(yīng)的持續(xù)激活，其還能保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞免受高糖微環(huán)境引起的氧化損傷，促進(jìn)新生血管的生成、健康肉芽組織的形成。在創(chuàng)面修復(fù)的重塑期，PINK1參與調(diào)節(jié)膠原生成，維持細(xì)胞間的信號(hào)傳導(dǎo)，促進(jìn)成纖維細(xì)胞和角質(zhì)形成細(xì)胞的增殖和遷移，加速創(chuàng)面修復(fù)。遺憾的是，本文總結(jié)的關(guān)于PINK1調(diào)控創(chuàng)面修復(fù)的機(jī)制均來(lái)源于體外實(shí)驗(yàn)。目前仍缺乏PINK1調(diào)控糖尿病難愈創(chuàng)面修復(fù)的體內(nèi)研究；并且現(xiàn)有研究未能揭示創(chuàng)面修復(fù)的不同階段PINK1參與的分子機(jī)制與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程的時(shí)序性和交互作用。因此，通過(guò)體內(nèi)研究進(jìn)一步揭示PINK1在創(chuàng)面修復(fù)的具體作用機(jī)制，對(duì)研發(fā)治療糖尿病創(chuàng)面的有效措施具有重要意義。

作者貢獻(xiàn)：楊嘉琪進(jìn)行文章的構(gòu)思與設(shè)計(jì)、文獻(xiàn) /資料收集及整理、論文撰寫(xiě)及修訂；張培華負(fù)責(zé)文章的質(zhì)量控制及審校，對(duì)文章監(jiān)督管理；黃海麗負(fù)責(zé)論文最終版的修訂，對(duì)論文負(fù)責(zé)。所有作者確認(rèn)了論文終稿。

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