高娜，楚惠媛 綜述，陳徹 審校

甘肅中醫(yī)藥大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，甘肅 蘭州 730000

蛋白酪氨酸激酶6（protein tyrosine kinase 6，PTK6）是細胞內(nèi)酪氨酸激酶家族中的重要成員，是一種缺乏C-端調(diào)節(jié)酪氨酸和N-末端肉豆蔻酰化位點（SRC-related kinase lacking C-terminal regulatory tyrosine and N-terminal myristoylation sites，SRMS）的酪氨酸激酶，由SRC同源性3（SRC homology 3 domain，SH3）、SRC同源性2（SRC homology 2 domain，SH2）和酪氨酸激酶催化域（tyrosine kinase catalytic domain，TK）組成［1］。PTK6基因位于人染色體20q13.3，并與SRMS 緊密相連［2］，早期在人黑色素細胞中被發(fā)現(xiàn)，屬于非受體酪氨酸激酶家族的一部分，該家族還包括乳腺腫瘤激酶（breasttumor kinase，BRK）和果糖激酶（fructokinase，F(xiàn)RK）［3］。研究表明，PTK6對致癌信號和腫瘤發(fā)生的調(diào)節(jié)，通常取決于其激酶活性，PTK6 在良性病變或正常組織中不表達，但在惡性腫瘤中表達上調(diào)，包括膀胱癌［4］、乳腺癌［5］、前列腺癌［6］和宮頸鱗癌癌［7］等。PTK6 的表達不僅受缺氧［8］和 DNA 損傷［9］的調(diào)節(jié)，還受 miRNA 的調(diào)控，包括 miR-17［10］、miR-93［11］、miR-187［12］和miR-214［13］。微小RNA（micro RNA，miRNA）是一類由內(nèi)源基因編碼的長度約為22 個核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，通過與靶向信使RNA（mRNA）的3′非翻譯區(qū)（3′-untranslated region，3′UTR）不完全結(jié)合來調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄后基因的表達。miRNA的主要功能是調(diào)節(jié)與個體生長、發(fā)育以及疾病發(fā)生過程相關(guān)基因的表達，且在生物發(fā)育過程中調(diào)控細胞分化、細胞凋亡、腫瘤生成等作用［14］。本文就現(xiàn)有文獻報道的有關(guān) PTK6 表達受 miR-17［10］、miR-93［11］、miR-187［12］和miR-214［13］調(diào)控的研究進展作一綜述，旨在說明miRNA和PTK6在各種腫瘤中的調(diào)控關(guān)系。

1 miR-17對PTK6的調(diào)控作用

MicroRNA-17-5p 屬于 miR-17-92a 簇，通過靶向多種腫瘤相關(guān)基因調(diào)控不同組織中的腫瘤進展［15］。多項研究表明，miR-17-5p在不同組織中對癌細胞的細胞周期調(diào)控有重要作用，如乳腺癌［15］、肝細胞癌［16］和卵巢癌［17］。ZHAO 等［10］構(gòu)建了含PTK6基因3′UTR的熒光素酶報告質(zhì)粒，發(fā)現(xiàn)miR-17 直接靶向PTK63′UTR，且 miR-17 沉默后，PTK6 mRNA 和蛋白表達均上調(diào)。在此基礎(chǔ)上進一步研究了ERK1／2活性與miR-17的關(guān)系。免疫印跡分析表明，過表達miR-17抑制 ERK1／2 活性，抑制 miR-17 增強 ERK1／2 活性。當(dāng) PTK6 在質(zhì)膜上被激活時，PTK6 通過 FAK、EGFR和 ERK1／2 促進信號傳導(dǎo)［18］，因此，miR-17 可通過靶向PTK63′UTR 下調(diào) PTK6 表達和 ERK1／2 活性。同時ZHAO 等［10］在甲狀腺乳頭狀癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）中驗證了PTK6和miR-17的作用，通過 RT-PCR 檢測發(fā)現(xiàn)，PTC 中 miR-17 表達下調(diào)時，PTK6 的表達升高，說明miR-17結(jié)合PTK63′UTR，降低PTK6水平，抑制甲狀腺濾泡癌細胞的遷移。神經(jīng)鞘蛋白1-磷酸（sphingosine-1-phosphate，S1P）可促進腫瘤細胞增殖、存活、遷移及血管生成。在肝癌中，血清S1P 可作為肝細胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）診斷的輔助標(biāo)志物，并可用于監(jiān)測HCC 患者HBV 的感染情況［19］。ZHAO 等［10］發(fā)現(xiàn)，S1P 可誘導(dǎo)PTK6的表達，進一步激活ERK1／2信號通路導(dǎo)致甲狀腺濾泡癌細胞的遷移，通過敲低PTK6發(fā)現(xiàn)，miR-17 顯著抑制S1P 誘導(dǎo)的甲狀腺濾泡癌細胞遷移。而miR-17 靶向PTK63′UTR，可降低 PTK6 水平，因此，miR-17 通過直接靶向PTK63′UTR 抑制 S1P 誘導(dǎo)的遷移。

2 PTK6和miR-93的調(diào)控作用

MicroRNA-93 是miR-17 家族的一員，在炎癥和屏障功能中發(fā)揮作用［11］，miR-93 的表達與上皮屏障功能的增加呈正相關(guān)［20］。TNFα 和IFNγ 是在炎癥性腸疾病中介導(dǎo)腸上皮屏障功能障礙的炎性細胞因子［21］，其中包括 SRC 相關(guān)激酶的激活［22］。SRC 相關(guān)激酶包括PTK6，是一種存在于細胞內(nèi)非受體蛋白激酶，是SRC 家族的遠親非受體酪氨酸激酶。研究發(fā)現(xiàn)，PTK6 參與TNFα／IFNγ 介導(dǎo)的上皮屏障功能障礙，PTK6 啟動子包含2 個具有結(jié)合位點的順式作用元件NF-κB 和SP1，TNFα 和IFNγ 這兩個轉(zhuǎn)錄因子在腸上皮細胞中介導(dǎo)基因調(diào)控活動［23-24］。在炎癥損傷過程中，PTK6 可能作為一種新型的腸上皮通透性介質(zhì)［11］，有文獻表明，miR-93 通過激活PI3K／Akt 信號通路直接抑制PTEN［25］，同時，PTK6是PTEN 的底物，PTEN 表達沉默可促進PTK6的激活［26］，因此，miR-93可作用PTK6，并可能通過靶向PTK6 改善小鼠結(jié)腸上皮細胞中促炎細胞因子TNFα／INFγ 引起的屏障功能，起到保護腸上皮的作用。

3 PTK6和miR-187的調(diào)控作用

人類基因 miR-187 位于染色體 18q12.2［27］，參與調(diào)節(jié)多種腫瘤的遷移和侵襲，且miR-187 在不同腫瘤中表達情況也不同，在肝癌［28］、結(jié)直腸癌［29］中表達下調(diào)，在乳腺癌［30］、急性淋巴細胞白血?。?1］中表達上調(diào)。由于miRNA通常作為上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelialmesenchymal transition，EMT）相關(guān)的下游受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)或蛋白激酶的效應(yīng)因子［32］，其可能成為開發(fā)抗轉(zhuǎn)移藥物的新靶點。研究表明，miR-187 作為EMT與受體信號或蛋白激酶的下游效應(yīng)因子，在結(jié)直腸癌中可抑制轉(zhuǎn)化生長因子β（transforming growth factor β，TGFβ）誘導(dǎo)EMT過程，使其表達降低，TGF介導(dǎo)的Smad、MAPK 和PI3K／AKT 信號通路均參與了EMT過程，同時miR-187 的表達顯著削弱了TGFβ 對直腸癌細胞的侵襲作用，從而阻止了Smad 信號的激活，因此，miR-187 的抑制對于 TGFβ／Smad 誘導(dǎo)的 EMT至關(guān)重要［33］。PTK6 在結(jié)腸癌中具有復(fù)雜、特定的功能。PTK6 可促進上皮表型，以一種不依賴于激酶的方式拮抗EMT。PTK6 的激活可促進致癌信號，促進和維持結(jié)腸癌細胞的上皮表型［34］。研究發(fā)現(xiàn)，PTK6可促進結(jié)腸癌細胞的生長和遷移，以及增加異種移植腫瘤的生長。酪氨酸激酶的激活通常與EMT 有關(guān)，表現(xiàn)為上皮標(biāo)記物E-鈣黏蛋白的丟失和間充質(zhì)標(biāo)記物波形蛋白的升高［35］。ZHANG 等［12］報道，PTK6可能是miR-187 的直接靶點，在結(jié)直腸癌中，通過轉(zhuǎn)染 miR-187 可顯著降低 SW480、RKO 和 SW620 細胞中的SOX4、NT5E、PTK6 表達情況，抑制癌癥的發(fā)生發(fā)展。因此，miR-187 在結(jié)直腸癌進展中起抑制作用，并可能作為一種新的結(jié)直腸癌預(yù)后和治療的生物標(biāo)志物。

4 PTK6和miR-214 的調(diào)控作用

miR-214 位于染色體1q24.3，有文獻表明，miR-214在不同類型的癌癥中具有抑癌或致癌的作用［36］。miR-214 作為腫瘤抑制因子，在宮頸癌組織中的表達顯著下調(diào)，通過下調(diào)MEK3、JNK1、FOXM1、Bcl2 和HMGA124-27［37-40］，可抑制宮頸癌細胞的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移。在乳腺癌中，miR-214在乳腺癌組織中表達較正常乳腺組織中顯著降低，可通過下調(diào)WNT／βcatenin 信號通路的活性，在乳腺癌組織中起抑癌作用［41］。在鼻咽癌中，miR-214可通過直接抑制鼻咽癌PTEN 的表達，促進AKT 信號通路激活，進而促進細胞增殖和抑制其凋亡［42］。miR-214 的作用可能受腫瘤微環(huán)境的影響，其不同的功能取決于其特異性目標(biāo)基因。

4.1 前列腺癌中PTK6 和miR-214 調(diào)控作用 在前列腺癌中發(fā)現(xiàn)PTK6表達增加、質(zhì)膜激活和細胞內(nèi)定位改變。在正常前列腺中，PTK6 定位于上皮細胞的細胞核，而在前列腺腫瘤中，PTK6 被重新定位并激活于質(zhì)膜［6］。PTK6 過表達后可通過增強 AKT 表達而增強EMT，進而促進前列腺癌細胞的轉(zhuǎn)移［43］。CAGLE 等［13］表明，miR-214 通過調(diào)節(jié)前列腺癌細胞中的EMT 標(biāo)記物來抑制細胞遷移和侵襲，并發(fā)現(xiàn)PTK6是 miR-214 的靶基因。因此，通過 miR-214 負(fù)向調(diào)控PTK6 的表達，可抑制前列腺癌細胞的增殖生長。

4.2 結(jié)腸癌中PTK6 和miR-214 調(diào)控作用 miR-214可減弱結(jié)腸癌SW620 細胞的增殖和侵襲能力，增強其凋亡率［44］，miR-214 靶向調(diào)控 PTK6 的表達，可降低結(jié)腸癌細胞的活性［45］。文獻報道，JAK2／STAT3通路的誘導(dǎo)與結(jié)腸癌的發(fā)生、增殖、凋亡和轉(zhuǎn)移高度相關(guān)［46］，LI 等［45］發(fā)現(xiàn)，SRF／miR-214／PTK6 介導(dǎo)JAK2／STAT3 通路的活性，SRF 和 PTK6 與 JAK2／STAT3 通路呈正相關(guān)，miR-214 與 JAK2／STAT3 通路呈負(fù)相關(guān)，因此，miR-214抑制PTK6的表達最終損害JAK2／STAT3 通路的激活，從而阻止結(jié)腸癌細胞的增殖、遷移、侵襲、異種移植瘤的生長和轉(zhuǎn)移。miR-214可能作為腫瘤抑制因子在結(jié)腸癌中發(fā)揮作用，因此，SRF／miR-214／PTK6／JAK2／STAT3軸可作為一種潛在的生物標(biāo)志物和治療目標(biāo)。

5 PTK6和miR-183的調(diào)控作用

miR-183家族位于染色體7q32.2，包括miR-183、miR-182、miR-96［47］。有研究報道，miR-183在癌癥的發(fā)生發(fā)展中起促癌或抑癌的雙重作用［48］。WANG等［49］研究發(fā)現(xiàn)，抑制 miR-183 能夠下調(diào) PTK6 的表達，從而抑制肝癌細胞的增殖，但也提到PTK6不是miR-183的靶基因，兩者之間相互作用的具體機制需進一步探索和驗證。

6 小結(jié)及展望

綜上所述，PTK6 在不同癌癥中起不同作用，其在體內(nèi)和體外均可激活大量癌蛋白，促進細胞增殖、轉(zhuǎn)移和癌癥發(fā)展，為抑制其表達,酪氨酸酶抑制劑得到快速發(fā)展。盡管酪氨酸酶抑制劑極大地改變了腫瘤患者的預(yù)后，但仍存在耐藥及不良反應(yīng)等缺陷［50］。多種數(shù)據(jù)表明，靶向PTK6可能對特定癌癥的治療有益處，特別是那些表達高水平PTK6 或維持質(zhì)膜上PTK6激活的癌癥［3］。研究發(fā)現(xiàn)，PTK6也作為自噬相關(guān)基因，成為治療低級膠質(zhì)瘤的潛在靶點［51］。Micro-RNA 在癌癥中的作用也較復(fù)雜，迄今為止已發(fā)現(xiàn)了3 000多種miRNA，且大部分均對轉(zhuǎn)錄后的基因表達水平起關(guān)鍵性的調(diào)控作用，據(jù)統(tǒng)計，人體內(nèi)約2／3 的基因均受某個或一組miRNA 的調(diào)控，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后密切相關(guān)。PTK6 作為一個非常有價值的潛在的癌癥治療靶點，其功能在不同腫瘤中也呈現(xiàn)不同特點，探究miRNA 和PTK6 之間的調(diào)控作用，可為改善患者預(yù)后不良反應(yīng)提供新的方法。通過查閱文獻發(fā)現(xiàn)，有關(guān)miRNA 和PTK6 之間調(diào)控作用的研究較少，因此，下一步將進一步探究兩者在腫瘤中的關(guān)系，以期為臨床治療癌癥提供新的思路。