郭曉玲，張 毅，陳 蕓，張 瑤，胡瑋璟(山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院內(nèi)科教研室，太原 00000；山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院老年病科；山西醫(yī)科大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院外科教研室；通訊作者,E-mail:yizhang95@6.com)

2型糖尿病是一種慢性疾病，老年人需要良好的認(rèn)知功能來(lái)進(jìn)行自我護(hù)理和血糖控制，從而避免急性或長(zhǎng)期的糖尿病相關(guān)并發(fā)癥。2型糖尿病也是老年人中普遍存在的與認(rèn)知能力下降和癡呆相關(guān)的疾病[1]。研究表明，載脂蛋白E4(apolipoprotein E4，APOE-4)等位基因是發(fā)展為阿爾茲海默病(Alzheimer’s disease，AD)的一個(gè)強(qiáng)遺傳風(fēng)險(xiǎn)因素[2]。APOE-4可能是2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)、T2DM合并冠心病和腦梗死的危險(xiǎn)因素[3]。也有研究表明，SLCO1B1作為一種可能在細(xì)胞內(nèi)β淀粉樣蛋白-42(Aβ-42)的攝取中發(fā)揮重要作用的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體，將成為認(rèn)知障礙治療的新靶點(diǎn)[4]。本研究擬分析老年2型糖尿病合并輕度認(rèn)知功能障礙(mild cognitive impairment，MCI)與APOE、SLCO1B1多態(tài)性的相關(guān)性，以期從基因?qū)用鏋樘骄垦泳徖夏闠2DM認(rèn)知功能下降提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020年5月至2022年5月在山西醫(yī)科大學(xué)第一醫(yī)院老年病科門(mén)診及住院的79例老年T2DM患者為研究對(duì)象。所有入選者均知情同意并自愿參與。根據(jù)是否合并MCI，分為老年T2DM合并MCI組(病例組)和老年T2DM認(rèn)知正常組(對(duì)照組)。其中，病例組男33例，女12例，年齡(71.76±9.09)年；正常對(duì)照組男21例，女13例，年齡(68.95±7.21)年；兩組間年齡、性別比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡>60歲；糖尿病診斷符合WHO1999年制定的標(biāo)準(zhǔn),分型明確為2型；MCI診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《2018中國(guó)癡呆與認(rèn)知障礙診治指南》[5]。排除標(biāo)準(zhǔn)：有任何引起認(rèn)知功能改變的疾病史，如帕金森病、精神疾患等；有糖尿病急性并發(fā)癥者及嚴(yán)重肝腎疾病、慢性消耗性疾病、甲減或甲亢者、服用他汀類(lèi)藥物者；其他原因不能配合量表檢查者。

1.3 研究方法

收集研究對(duì)象的一般臨床資料包括姓名、性別、年齡，通過(guò)高通量測(cè)序法檢測(cè)APOE基因多態(tài)性、SLCO1B1基因多態(tài)性，并進(jìn)行蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(Montreal cognitive assessment，MoCA)、簡(jiǎn)易精神狀態(tài)量表(mini-mental state examination，MMSE)得分評(píng)估，評(píng)價(jià)個(gè)體認(rèn)知功能水平及其影響因素。

1.4 評(píng)估指標(biāo)

對(duì)APOE、SLCO1B1多態(tài)性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，其中APOE由E2，E3和E4三個(gè)等位基因構(gòu)成，組成6種基因型：E2/E2，E2/E3，E3/E3，E2/E4，E3/E4，E4/E4[6]。SLCO1B1有388A>G和521T>C兩個(gè)突變位點(diǎn)，其中388A>G位點(diǎn)有A和G兩個(gè)等位基因，組成3種基因型：AA、AG、GG。521T>C位點(diǎn)有T和C兩個(gè)等位基因，組成3種基因型：TT、TC、CC[6]。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS26.0統(tǒng)計(jì)軟件，基因型頻率用Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)。采用χ2檢驗(yàn)分析基因型、等位基因在病例組與對(duì)照組的分布情況，采用Logistic回歸分析老年2型糖尿病患者合并輕度認(rèn)知功能障礙的影響因素。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病例組和對(duì)照組APOE等位基因比較

經(jīng)χ2檢驗(yàn)，病例組和對(duì)照組APOE等位基因分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表1)。

表1 兩組間APOE等位基因比較 例(%)Table 1 Comparison of APOE allele distribution between the two groups cases(%)

2.2 病例組和對(duì)照組APOE基因型比較

經(jīng)χ2檢驗(yàn)分析，兩組間APOE基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表2)。

表2 兩組間APOE基因型比較 例(%)Table 2 Comparison of APOE genotype between the two groups cases(%)

2.3 病例組和對(duì)照組SLCO1B1等位基因比較

兩組間患者SLCO1B1等位基因頻率分布經(jīng)卡方檢驗(yàn)，388A>G和521T>C等位基因頻率分布差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見(jiàn)表3)。

表3 兩組間SLCO1B1等位基因頻率比較 頻次(%)Table 3 Comparison of SLCO1B1 allele frequency between the two groups frequencies(%)

2.4 病例組和對(duì)照組SLCO1B1基因型比較

SLCO1B1基因388A>G位點(diǎn)的基因型分布在兩組的分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，521T>C位點(diǎn)基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表4)。

表4 兩組間SLCO1B1基因型比較 頻次(%)Table 4 Comparison of SLCO1B1 genotype distribution between the two groups frequencies(%)

2.5 老年T2DM患者合并MCI的Logistic分析

以老年T2DM患者是否合并MCI作為因變量，以APOE等位基因、APOE基因型、SLCO1B1基因型作為自變量，采用Logistic回歸分析APOE、SLCO1B1基因多態(tài)性對(duì)老年T2DM合并MCI的影響。結(jié)果顯示，SLCO1B1基因型與老年T2DM合并MCI無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)，APOE等位基因、APOE基因型對(duì)老年T2DM合并MCI的發(fā)病有影響，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表5)。

表5 老年T2DM患者合并MCI的Logistic分析Table 5 Logistic analysis of influencing factors of MCI in elderly T2DM patients

3 討論

人類(lèi)壽命的延長(zhǎng)和人口老齡化是增加T2DM認(rèn)知功能障礙的一個(gè)關(guān)鍵因素[7]。在老年T2DM中，認(rèn)知功能障礙根據(jù)嚴(yán)重程度大致可以分為3個(gè)階段：糖尿病相關(guān)的認(rèn)知衰退、MCI和癡呆[7]。MCI是介于正常衰老和癡呆間的中間狀態(tài)。與年齡和教育程度相稱(chēng)的正常老人對(duì)比，患者存在輕度認(rèn)知功能下降，但日常功能未受到顯著影響[7]。研究表明，認(rèn)知功能障礙在某些認(rèn)知領(lǐng)域中與2型糖尿病存在基因重疊，尤其在老年人群中，2型糖尿病與注意力、工作記憶和面孔記憶之間存在顯著的遺傳相關(guān)性[8]。

APOE是第19號(hào)染色體上的一個(gè)基因，編碼由299個(gè)氨基酸殘基組成的多功能蛋白，廣泛參與機(jī)體代謝，具有參與血脂代謝、細(xì)胞生長(zhǎng)、免疫控制、神經(jīng)細(xì)胞的損傷和修復(fù)等功能[9]。Bradley等[3]研究表明，APOE-4攜帶者患阿爾茲海默病的風(fēng)險(xiǎn)增加，一個(gè)APOE-4等位基因的雜合子攜帶者發(fā)生這種神經(jīng)退行性疾病的可能性是非攜帶者的3～4倍，純合子攜帶者的風(fēng)險(xiǎn)甚至更高[3]。而本研究中，病例組和對(duì)照組均以APOE-3等位基因?yàn)橹?，分別為70.0%和69.1%。病例組中APOE-4等位基因占比22.2%，APOE-2等位基因占比7.8%，在對(duì)照組中，APOE-4等位基因占比10.3%，APOE-2等位基因占比20.6%。病例組中基因型分布以E3/E3最多，占比46.7%，E3/E4次之，占比37.8%。對(duì)照組中E3/E3分布最多，占比50.0%，E2/E3次之，占比29.4%。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，APOE等位基因和基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。經(jīng)Logistic回歸分析示，APOE等位基因和APOE基因型可能是老年2型糖尿病合并輕度認(rèn)知功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。這與Rodriguez等[10]研究結(jié)果一致。

SLCO1B1基因，全稱(chēng)溶質(zhì)載體有機(jī)負(fù)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族成員1B1，位于第12號(hào)染色體上，編碼膜結(jié)合的鈉非依賴(lài)性有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(organic anion transport protein 1B1，OATP1B1)[11]，具有高度遺傳多態(tài)性，在中國(guó)人群中388A>G和521T>C的突變率分別為73.4%和14%[14]，該蛋白介導(dǎo)許多內(nèi)源性和外源性化合物的細(xì)胞內(nèi)流，包括單酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑，如他汀類(lèi)藥物。通過(guò)搜索數(shù)據(jù)庫(kù)、評(píng)估使用他汀類(lèi)藥物患者認(rèn)知功能的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)、隊(duì)列研究及橫斷面研究的最新綜述未顯示他汀類(lèi)藥物對(duì)認(rèn)知有不良影響[12]。相反，他汀類(lèi)藥物可能通過(guò)多種機(jī)制對(duì)認(rèn)知產(chǎn)生有益影響，包括改善內(nèi)皮功能、減少自由基形成和減少炎癥反應(yīng)等[12]。陳小容等[13]的研究也表明，在進(jìn)行個(gè)性化他汀類(lèi)藥物治療后，認(rèn)知障礙患者的認(rèn)知評(píng)分有明顯改善。其次，在認(rèn)知正常的老年人中，腦脊液Aβ-42減少與情景記憶不良和海馬體積減少有關(guān)[14]，SLCO1B1作為一種可能在細(xì)胞對(duì)Aβ-42的攝取中發(fā)揮重要作用的攝取轉(zhuǎn)運(yùn)體，將成為認(rèn)知障礙治療的新靶點(diǎn)[4]，具體機(jī)制有待進(jìn)一步探索。而目前SLCO1B1基因多態(tài)性與疾病相關(guān)性的研究甚少。本研究中，兩組間SLCO1B1等位基因頻率分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩組間SLCO1B1388A>G位點(diǎn)基因型分布無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；521T>C位點(diǎn)的基因型分布中，病例組TC占比55.6%，TT占比37.8%，CC占比6.7%，對(duì)照組中TC占比26.5%，TT占比64.7%，CC占比8.8%，經(jīng)χ2檢驗(yàn)521T>C位點(diǎn)基因型分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Logistic回歸分析顯示，SLCO1B1基因型與老年T2DM合并MCI無(wú)明顯相關(guān)性。之所以出現(xiàn)不同結(jié)論考慮可能原因有，研究樣本量少，不具有代表性，或者在患者的篩選和統(tǒng)計(jì)分析處理過(guò)程中存在偏倚或混雜偏倚等。

綜上所述，APOE基因多態(tài)性與老年2型糖尿病合并輕度認(rèn)知功能障礙有相關(guān)性，APOE等位基因和基因型是老年2型糖尿病合并輕度認(rèn)知功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，SLCO1B1基因多態(tài)性與老年2型糖尿病合并輕度認(rèn)知功能障礙無(wú)相關(guān)性。本實(shí)驗(yàn)中可能存在樣本選取不全面、數(shù)量不足及個(gè)人評(píng)估差異等因素影響，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量及個(gè)體化研究。由于老年T2DM患者本身合并較多并發(fā)癥、認(rèn)知障礙發(fā)生的復(fù)雜性，對(duì)于老年T2DM合并MCI的研究不僅僅是基于基因組學(xué)的方法，同樣需要臨床方法與基礎(chǔ)研究的聯(lián)合，以期實(shí)現(xiàn)老年T2DM合并MCI的精準(zhǔn)化防控和治療。