高 穎, 陳 偉, 王勇鑒, 趙楊琪, 柏忠輝, 段靜雨, 張春平

(徐州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院, 江蘇省新藥研究與臨床藥學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 江蘇 徐州 221004)

向天果隸屬所羅門楝科(Meliaceae), 桃花心木屬植物大葉桃花心木(Swietenia macrophyllaKing)的果實(shí), 因其果實(shí)向天生長而得名。 大葉桃花心木原產(chǎn)自熱帶美洲、 墨西哥、 南美洲。大葉桃花心木是一種重要的藥用植物, 產(chǎn)量稀少, 較為珍貴,《馬來西亞草藥目錄》中記載, 向天果味苦、 澀、 性涼, 解熱、收斂、 種仁強(qiáng)壯[1]。 當(dāng)?shù)厮_門群島的居民煎煮服用向天果來治療糖尿病、 高血壓、 高血脂、 高膽固醇、 過敏性疾病、 內(nèi)分泌失調(diào)、 提高免疫力等病癥[2]。 向天果性涼、 解熱, 雖種仁味苦、 澀, 卻無任何副作用, 富含豐富藥用成分, 是非常難得的一種天然植物。

Mohd 等[3]將向天果石油醚萃取物在正常和糖尿病大鼠中接受腹腔內(nèi)葡萄糖耐力測試的抗高血糖活性進(jìn)行了研究。 GCMS 技術(shù)分析揭示了包括墨角藻甾醇、 谷甾醇的存在, 可能正是這些成分起到了降低血糖的作用。 目前, 關(guān)于向天果乙醇提取物的正丁醇部位的成分研究相對較少, 且關(guān)于單體化合物的研究不夠充分。 因此, 本文將主要對向天果正丁醇層主要活性成分進(jìn)行研究, 并對其促胰島素分泌活性進(jìn)行評價(jià), 對于擴(kuò)大新藥的開發(fā)來說有極大的研究意義。

1 材料與儀器

1.1 材 料

向天果購于印度尼西亞, 經(jīng)徐州醫(yī)科大學(xué)張春平副教授鑒定為楝科植物大葉桃花心木(Swietenia macrophylla King)的果實(shí), 即向天果。

1.2 儀 器

JMTC-400/SS 核磁共振儀, 日本JEOL; RE-2000A 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀, 上海亞榮生化儀器廠; WFH-203B 紫外分析儀, 杭州齊威有限公司; SHZ-95B 循環(huán)水式多用真空泵。

1.3 試 劑

正丁醇, 國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司(分析純); Methanold4, Cambridge Isotope Laboratories 公司(TMS); Chloroform-d,Cambridge Isotope Laboratories 公司; Dimethyl sulfoxide-d6, 美國ALDRICH 公 司 (TMS); Sephadex LH - 20 凝 膠, 美 國 GE Healthcare 公司; 柱層析硅膠(200 ~300 目), 青島海洋化工有限公司; 薄層層析板。

2 方 法

2.1 初步分離

向天果藥材共7 kg, 曬干粉碎后, 使用無水乙醇冷浸3 天后得浸出液, 剩余藥渣再分別使用100%乙醇和75%乙醇加熱回流2 次和1 次, 得兩次的浸出液。 將3 次的浸出液合并, 減壓濃縮蒸發(fā)乙醇后得浸膏。 向分液漏斗中加入不同溶劑萃取浸膏, 首先使用石油醚和乙酸乙酯萃取得石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物, 再用1.5 L 水飽和正丁醇萃取12 h, 萃取4 次后得正丁醇萃取物。 正丁醇萃取物蒸發(fā)溶劑后稱重為67 g, 采用硅膠柱層析法分離純化。 以二氯甲烷-甲醇洗脫體系進(jìn)行梯度洗脫, 薄層色譜法檢測純度, 合并相似流分, 粗分得到9 個(gè)流分(Fr.1-9)。

2.2 向天果正丁醇層分離提取

正正丁醇萃取物67 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以二氯甲烷-甲醇為(100∶0 ~0∶100)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 共得到9 個(gè)流分, 記為 Fr.1 ~Fr.9。 其中 Fr.1 分為2 個(gè)流分, 記為Fr.1-1~Fr.1-2; Fr.2 分為8 個(gè)流分, 記為Fr.2-1~Fr.2-8; Fr.3 分為 2 個(gè)流分, 記為 Fr.3-1 ~Fr.3-2; Fr.4 分為7 個(gè)流分, 記為 Fr.4-1 ~ Fr.4-7; Fr.5 分為 5 個(gè)流分, 記為Fr.5-1 ~Fr.5-5; Fr.6 分為4 個(gè)流分, 記為 Fr.6-1 ~Fr.6-4;Fr.7 分為 4 個(gè)流分, 記為 Fr.7-1 ~Fr.7-4; Fr.8 分為 4 個(gè)流分, 記為Fr.8-1 ~Fr.8-4; Fr.9 分為3 個(gè)流分, 記為Fr.9-1 ~Fr.9-3。

Fr.2-3 共3.547 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(100∶0~0∶100)和二氯甲烷-甲醇為(100∶0 ~9∶1 ~2∶1 ~0∶100)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 得到化合物1(42 mg),其余合并相似流分, 記為Fr.2-3-1 ~Fr.2-3-6。

Fr.2-3-4 共2.043 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, TLC 技術(shù)分析,得化合物2(169 mg), 其余合并相似流分, 記為Fr.2-3-4-1 ~Fr.2-3-4-5。

Fr.2-3-4-5 共377 mg, 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜分離純化, 以二氯甲烷-甲醇為(2 ∶1)洗脫, 得化合物2(105 mg)。

Fr.2-4 共13.729 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(4∶1 ~0∶100)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 得到化合物3(68 mg)。 其余合并為7 個(gè)流分, 記為Fr.2-4-1 ~Fr.2-4-7。

Fr.2-4-2 共475 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(8∶2 ~1∶1)梯度洗脫, 得化合物1(87 mg)。

Fr.2-4-3 共1.693 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(8∶2 ~1∶1)梯度洗脫, 得化合物1(81 mg)。

Fr.2-4-4 共7.138 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(1∶1 ~1∶2)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 得到化合物3(680 mg)。 其余合并為3 個(gè)流分, 記為Fr.2-4-4-1 ~Fr.2-4-4-3。

Fr.2-4-4-2 共2.686 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(1∶1 ~1∶2)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 得化合物11(21 mg)。 其余合并為6 個(gè)流分, 記為Fr.2-4-4-2-1 ~Fr.2-4-4-2-6。

Fr.2-4-4-2-2 共471 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(6∶4 ~2∶3)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 共得到5 個(gè)流分, 記為Fr.2-4-4-2-2-1 ~Fr.2-4-4-2-2-5。

Fr.2-4-4-2-2-2 共341 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(9∶1 ~1∶1)梯度洗脫, 得化合物1(20 mg)和化合物6(149 mg)。

Fr.2-4-4-2-5 共350 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(3∶1 ~2∶3)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 共得到6 個(gè)流分, 記為Fr.2-4-4-2-5-1 ~Fr.2-4-4-2-5-6。

Fr.2-4-4-2-5-5 共272 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(9∶1 ~2∶3)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 得化合物10(16 mg)。

Fr.2-5 共3.13 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(8∶2 ~0∶100)梯度洗脫, 分別得化合物3(1.185 g)和化合物9(95 mg)。

Fr.2-7 共10.029 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(7∶3 ~0∶100)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 共得到7 個(gè)流分, 記為Fr.2-7-1 ~Fr.2-7-7。

Fr.2-7-2 共2.636 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(3∶2 ~2∶3)梯度洗脫, 得化合物2(83 mg)和化合物1(661 mg), TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分, 共得到6 個(gè)流分,記為Fr.2-7-2-1 ~Fr.2-7-2-6。

Fr.2-7-2-2 共269 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(6∶1 ~1∶1)梯度洗脫, 得化合物10(22 mg)。

研究區(qū)內(nèi)已發(fā)現(xiàn)有金、銅、鐵、鎢等金屬礦床，非金屬礦有菱鎂礦、鹽礦等。主要礦床有梧桐溝鐵礦、尖山鐵礦、熊風(fēng)灣金礦、梧桐溝鎢礦、梧桐溝菱鎂礦等[11]。

Fr.2-7-2-3 共548 mg, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(2∶1 ~2∶3)梯度洗脫, 得到化合物4(109 mg)。

Fr.2-7-3 共1.826 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙為(7∶3 ~2∶3)梯度洗脫, 得化合物4(25 mg)。 其余流分記為Fr.2-7-3-1 ~Fr.2-7-3-4。

Fr.2-7-3-2 共1.074 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以石油醚-乙酸乙酯為(8∶2 ~1∶1)梯度洗脫, 得化合物1(57 mg)。

Fr.4-1 共1.256 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以二氯甲烷-甲醇為(9∶1 ~1∶1)梯度洗脫, 析出化合物5(86 mg)。

Fr.5-1 共0.577 g, 經(jīng)硅膠柱色譜分離, 以二氯甲烷-甲醇為(7∶3 ~1∶1)梯度洗脫, TLC 技術(shù)分析, 合并相似流分。 再采用SephadexLH-20 凝膠柱色譜分離純化, 以甲醇進(jìn)行洗脫,得化合物8(34 mg)。

Fr.5-5 共1.247 g, 采用硅膠柱色譜分離, 以二氯甲烷-甲醇為(4∶1 ~0∶100)梯度洗脫, 得化合物7(82 mg)。

3 結(jié)果與討論

3.1 化合物結(jié)構(gòu)鑒定

正丁醇部位化合物鑒定運(yùn)用MS、1H-NMR、13C-NMR 等方法對化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。

化合物1: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 591[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶3.48(1H, d, H-2), 5.52(1H, s, H-17), 0.94(3H, s,H-18), 1.42(3H, s, H-19), 7.54(1H, brs, H-21), 6.36(1H, brs, H-22), 7.42(1H, t, H-23), 1.09(3H, s, H-28), 0.87(3H, s, H-29), 5.30(1H, d, H-30), 6.84(1H,q, H-3'), 1.72(3H, brd, H-4'), 1.78(3H, brs, H-5'),3.74(3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ ∶216.9(C-1), 49.0(C-2), 78.5(C-3), 39.1(C-4), 45.5(C-5), 72.9(C-6), 176.1(C-7), 138.4(C-8), 57.6(C-9),50.4(C-10), 21.3(C-11), 34.6(C-12), 36.8(C-13), 45.1(C-14), 29.6(C-15), 77.4(C-17), 21.3(C-18), 16.6(C-19), 121.4(C-20), 139.2(C-21), 109.3(C-22), 143.3(C-23), 22.8(C-28), 23.1(C-29), 123.6(C-30), 167.0(C-1'), 127.8(C-2'), 140.6(C-3'), 14.7(C-4'), 11.8(C-5'),53.4(-OCH3)。

化合物2: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 575[M+Na]+,1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶3.21(1H, m, H-2), 4.82(1H, d, H-3), 5.53(1H, s,H-17), 1.00(3H, s, H-18), 1.14(3H, s, H-19), 7.55(1H, brs, H-21), 6.46(1H, dd, H-22), 7.39(1H, t, H-23), 0.80(3H, s, H-28), 0.75(3H, s, H-29), 6.94(1H,qq, H - 3′), 1.80 (3H, dd, H - 5′), 3.70 (3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ∶218.5(C-1), 48.4(C-2), 79.3(C-3), 38.8(C-4), 40.6(C-5), 33.5(C-6),174.3(C-7), 127.9(C-8), 52.3(C-9), 53.3(C-10), 18.8(C-11), 29.2(C-12), 38.2(C-13), 132.0(C-14), 33.0(C-15), 170.0(C-16), 81.0(C-17), 17.3(C-18), 16.8(C-19), 121.0(C-20), 141.8(C-21), 110.1(C-22), 142.9(C-23), 20.3(C-28), 23.9(C-29), 33.7(C-30), 167.5(C-1′), 129.0(C-2′), 139.5(C-3′), 14.7(C-4′), 12.5(C-5′), 52.2(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[6-7]對照基本一致,故推定該化合物為khayasin T。

化合物3: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 486[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶3.01(1H, m, H-2), 3.55(1H, d, H-3), 3.22(1H, s,H-5), 4.51(1H, s, H-6), 5.44(1H, s, H-17), 0.95(3H,brs, H-18), 1.37(3H, s, H-19), 7.45(1H, t, H-21),6.37(1H, s, H-22), 7.38(1H, s, H-23), 0.96(3H, s, H-28), 0.85(3H, s, H-29), 1.99(1H, m, H-30), 3.79(3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ∶220.0(C-1), 50.1(C-2), 78.6(C-3), 39.8(C-4), 44.1(C-5),73.7(C-6), 176.0(C-7), 129.2(C-8), 53.1(C-9), 54.1(C-10)29.2(C-11), 18.8(C-12), 37.9(C-13), 130.9(C-14), 33.3(C-15), 171.6(C-16), 80.6(C-16), 18.0(C-18), 18.0(C-19), 120.9(C-20), 141.2(C-21), 109.9(C-22), 143.0(C-23), 23.3(C-28), 23.7(C-29), 33.9(C-30), 53.4(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[6-7]對照基本一致,故推定該化合物為Swietenolide。

化合物4: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 591[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶4.68(1H, d, H-3), 5.40(1H, s, H-17), 0.96(3H, s,H-18), 1.40(3H, s, H-19), 7.46(1H, brs, H-21), 6.38(1H, dd, H-22), 7.41(1H, t, H-23), 1.07(3H, s, H-28), 0.83(3H, s, H-29), 6.91(1H, qq, H-3′), 1.80(3H,dd, H-4′), 3.84(3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz),δ∶218.2(C-1), 48.2(C-2), 80.6(C-3), 39.2(C-4), 45.1(C-5), 73.4(C-6), 175.7(C-7), 128.6(C-8), 53.5(C-9), 53.3(C-10), 19.0(C-11), 29.8(C-12), 38.2(C-13),131.6(C-14), 33.1(C-15), 169.4(C-16), 81.2(C-17),17.8(C-18), 17.8(C-19), 120.9(C-20), 141.1(C-21),109.8(C-22), 143.2(C-23), 23.2(C-28), 23.8(C-29),34.1(C-30), 167.3(C-1′), 129.1(C-2′), 139.1(C-3′),14.7(C-4′), 12.4(C-5′), 53.3(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[5,7-8]對照基本一致,故推定該化合物為3-O-tigloylswietenolide。

化合物5: 白色無定型粉末。 易溶于二氯甲烷。 硫酸乙醇顯色為紫黑色, 提示可能為三萜類或甾體類化合物。

ESI-MS, m/z: 576[M+Na]+.1H-NMR(DMSO-d6, 400 MHz),δ∶5.29(1H, s, H-6)0.61(3H, s, H-18), 0.9(3H, s, H-19), 0.7 ~0.9(12H, H-21), 0.7 ~0.9(12H, H-26), 0.7 ~0.9(12H, H-29), 4.83(1H, brs, H-1'), 2.8 ~3.6(H-2'),2.8 ~3.6(H-3'), 2.8 ~3.6(H-4'), 2.8 ~3.6(H-5'), 2.8 ~3.6(H-6').13C-NMR(DMSO-d6, 100 MHz), δ∶37.4(C-1),29.8(C-2), 77.3(C-3), 24.4(C-4), 141.0(C-5), 121.8(C-6), 31.9(C-7), 31.9(C-8), 50.1(C-9), 36.8(C-10),20.3(C-11), 38.8(C-12), 42.4(C-13), 56.7(C-14), 23.1(C-15), 28.3(C-16), 56.0(C-17), 12.2(C-18), 19.5(C-19), 36.0(C-20), 19.2(C-21), 33.9(C-22), 25.9(C-23), 45.7(C-24), 29.2(C-25), 19.6(C-26), 21.1(C-28), 12.3(C-29), 101.3(C-1'), 74.0(C-2'), 77.5(C-3'),70.6(C-4'), 77.3(C-5'), 61.6(C-6')。

綜合該化合物的核磁數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[9]對照基本一致, 故推定為Anthemisol。

化合物6: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 493[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶3.03(1H, ddd, H-2), 3.73(1H, d, H-3), 3.23(1H,dd, H-5), 1.96(1H, m, H-9), 5.57(1H, s, H-17), 1.01(3H, s, H-18), 1.12(3H, s, H-19), 7.55(1H, brs, H-21), 6.47(1H, brs, H-22), 7.37(1H, s, H-23), 0.71(3H, s, H-28), 0.79(3H, s, H-29), 3.68(3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ∶220.1(C-1), 50.2(C-2), 77.2(C-3), 39.4(C-4), 39.4(C-5), 33.6(C-6),174.5(C-7), 128.3(C-8), 51.9(C-9), 53.7(C-10), 18.8(C-11), 28.7(C-12), 38.0(C-13), 131.4(C-14), 33.2(C-15), 171.7(C-16), 80.3(C-17), 17.6(C-18), 17.0(C-19), 120.9(C-20), 141.8(C-21), 110.2(C-22), 142.7(C-23), 20.2(C-28), 24.0(C-29), 33.4(C-30), 52.1(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[4]對照基本一致, 故推定該化合物為Proceranolide。

化合物7: 無色顆粒狀結(jié)晶, 易溶于甲醇。 硫酸高鈰顯色為紅紫色。

ESI-MS, m/z: 341[M+Na]+.1H-NMR(DMSO-d6, 400 MHz),δ∶5.13(1H, d, H-1), 3.38(1H, m, H-2), 3.72(1, dd,H-5), 3.54(1H, m, H-1'), 3.84(1H, t, H-4'), 3.72(1H, m, H-6').13C-NMR(DMSO-d6, 100 MHz), δ∶92.28(C-1), 72.17(C-2), 74.83(C-3), 70.39(C-4), 73.35(C-5), 62.60(C-6), 62.67(C-1'), 104.58(C-2'), 77.58(C-3'), 73.41(C-4'), 83.1(C-5'), 61.03(C-6')。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[10]對照基本一致,故推定該化合物為sucrose。

化合物8: 白色結(jié)晶狀, 易溶于DMSO。 硫酸高鈰顯色為紅紫色。

ESI-MS, m/z: 268[M+Na]+.1H-NMR(DMSO-d6, 400 MHz),δ∶8.09(1H, s, C-2), 8.31(1H, s, C-8), 5.83(1H, d, C-1'), 4.10(1H, dd, C-3'), 3.62(2H, m, C-5')。13C-NMR(DMSO-d6, 100 MHz), δ ∶ 152.9(C-2), 149.6(C-4),119.9(C-5), 156.7(C-6), 140.5(C-8), 88.4(C-1'), 73.9(C-2'), 71.2(C-3'), 86.4(C-4'), 62.2(C-5')。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[11]對照基本一致,故推定該化合物為adenosine。

化合物9: 白色粉末狀, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 487[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶2.94(1H, ddd, H-2), 3.70(1H, d, H-3), 3.25(1H,brs, H-5), 4.56(1H, brs, H-6), 2.97(1H, m, H-8),1.91(2H, m, H-11), 5.80(1H, d, H-15), 5.07(1H, brs,H-17), 7.45(1H, dd, H-21), 6.38(1H, dd, H-22), 7.39(1H, t, H-23), 2.78(1H, ddd, H-30), 3.85(3H, s, -OCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ∶220.4(C-1), 48.2(C-2), 78.8(C-3), 39.9(C-4), 43.7(C-5), 73.8(C-6),176.5(C-7), 35.3(C-8), 49.7(C-9), 51.6(C-10), 18.9(C-11), 26.7(C-12), 38.2(C-13), 171.4(C-14), 112.8(C-15), 165.2(C-16), 81.3(C-17), 18.3(C-18), 17.3(C-19), 120.2(C-20), 141.3(C-21), 110.0(C-22), 143.1(C-23), 23.0(C-28), 24.3(C-29), 34.9(C-30), 53.5(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[12]對照基本一致,故推定該化合物為3β-6-dihydihydcrocarapin。

化合物10: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 578[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶4.81(1H, d, H-3), 2.38(1H, d, H-5), 2.35(1H, dd,H-6), 5.61(1H, s, H-17), 1.06(3H, s, H-18), 1.13(3H, s, H-19), 7.81(1H, brs, H-21), 6.45(1H, dd, H-22), 7.39(1H, t, H-23), 0.79(3H, s, H-28), 0.82(3H,s, H-29), 3.70(3H, s, -OCH3)。13C-NMR(CDCl3, 100 MHz),δ∶217.4(C-1), 48.9(C-2), 77.1(C-3), 38.7(C-4), 45.3(C-5), 33.0(C-6), 174.2(C-7), 138.6(C-8), 56.9(C-9), 49.9(C-10), 20.8(C-11), 29.8(C-12), 37.1(C-13),41.3(C-14), 34.6(C-15), 169.0(C-16), 76.8(C-17),20.3(C-18), 15.9(C-19), 120.9(C-20), 142.01(C-21),109.8(C-22), 143.1(C-23), 21.8(C-28), 22.7(C-29),123.2(-COOCH3), 167.2(C-1'), 127.6(C-2'), 139.7(C-3'), 14.7(C-4'), 11.9(C-5'), 52.3(-OCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[4,7]對照基本一致,故推定該化合物為Febrifugine。

化合物11: 白色粉末, 易溶于二氯甲烷。 硫酸高鈰顯色為紅紫色, 提示可能為三萜類化合物。

ESI-MS, m/z: 593[M+Na]+.1H-NMR(CDCl3, 400 MHz),δ∶3.14(1H, ddd, H-2), 4.86(1H, d, H-3), 3.39(1H,brs, H-5), 5.45(1H, s, H-6), 2.08(1H, m, H-9), 5.58(1H, s, H-17), 1.03(3H, s, H-18), 1.15(3H, s, H-19), 7.52(1H, dd, H-21), 6.44(1H, dd, H-22), 7.41(1H, t, H-23), 1.06(3H, s, H-28), 0.84(3H, s, H-29), 2.78(1H, dd, H-30), 2.14(3H, s, H-2'), 2.15(3H,s, 6-OCOCH3).13C-NMR(CDCl3, 100 MHz), δ∶217.1(C-1), 47.9(C-2), 79.6(C-3), 38.9(C-4), 44.5(C-5),73.1(C-6), 171.4(C-7), 127.7(C-8), 53.5(C-9), 53.2(C-10), 29.5(C-11), 18.8(C-12), 38.9(C-13), 132.4(C-14), 33.8(C-15), 169.7(C-16), 80.9(C-17), 18.8(C-18), 16.8(C-19), 120.6(C-20), 141.7(C-21), 110.0(C-22), 143.1(C-23), 23.5(C-28), 23.1(C-29), 33.8(C-30), 170.4(C-1'), 21.3(C-2'), 53.2(1′-OCH3), 169.9(6-OCOCH3), 21.1(6-OCOCH3)。

綜合該化合物的波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道[4,6-8]對照基本一致,故推定該化合物為3,6-O,O-diacetylswietenolide。

3.2 討 論

本課題組致力于對向天果中單體化合物的分離與鑒定及抗Ⅱ型糖尿病和糖尿病并發(fā)癥藥理作用研究, 截至目前, 對向天果正丁醇部位和乙酸乙酯部位進(jìn)行降糖活性篩選及改善胰島素敏感性抵抗篩選的實(shí)驗(yàn), 已經(jīng)獲得初步成果, 且分離出含量最高的有Swietenolide、 Swietenine, 有文獻(xiàn)報(bào)道[16]向天果氯仿萃取物中化合物Swietenine 具有降血糖的潛力。 用Swietenine 治療STZ 誘導(dǎo)的T2DM 大鼠, 發(fā)現(xiàn)顯著降低了高膽固醇和甘油三酯的水平, 肝糖原水平接近正常, 血糖水平得到有效控制, 且具有劑量依賴性。 Kalpana 等[17]用向天果醇提物在STZ 誘導(dǎo)的糖尿病大鼠體中探索的降血糖效果, 通過對比檢測糖尿病大鼠的體重、 血糖以及體內(nèi)胰島素、 Hb、 HbA1、 肝糖原、 葡萄糖激酶的水平, 得出結(jié)論向天果醇提物可以提高胰島素水平, 進(jìn)而激活葡萄糖激酶, 增加葡萄糖的利用, 降低了血糖水平。 向天果獨(dú)特的化學(xué)成分和較好的藥理作用, 對其繼續(xù)進(jìn)行成分中化合物單體的分離與結(jié)構(gòu)鑒定, 并結(jié)合藥理學(xué)方法對其化合物單體的活性進(jìn)行深入探究具有十分重要的理論價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。

4 結(jié) 論

本研究對向天果正丁醇層的化學(xué)成分進(jìn)行提取分離、 鑒定, 共分離得 11 個(gè)化合物, 分別為 Swietenine、 khayasin T、Swietenolide、 3-O-tigloylswietenolide、 Anthemisol、 Proceranolide、Sucrose、 β -adenosine、 3-6-dihydihydcrocarapin、 Febrifugine、3,6-O,O-diacetylswietenolide。 其中于該植物中首次分離的化合物為 Anthemisol、 β -adenosine。 其 中 Swietenine、 khayasin T、Swietenolide、 3 - O - tigloylswietenolide、 Proceranolide、 3 - 6 -dihydihydcrocarapin、 Febrifugine 為三萜類化合物, Anthemisol 為甾體類化合物, β-adenosine 為核苷類化合物。