張浩鈿 陶育和 文智舉 覃杰*

（1.第二師畜牧獸醫(yī)工作站，新疆巴音郭楞 841005；2.第二師30 團(tuán)農(nóng)發(fā)中心，新疆巴音郭楞 841005；3.第二師31 團(tuán)農(nóng)發(fā)中心，新疆巴音郭楞 841500）

肺炎是綿羊最常見的一種呼吸道疾病。其病因復(fù)雜，飼養(yǎng)管理不當(dāng)以及細(xì)菌、病毒、支原體、寄生蟲等病原均可引起肺炎。根據(jù)臨床癥狀和病理變化肺炎可分為支氣管肺炎、大葉性肺炎、化膿性肺炎、異物性肺炎等。綿羊肺炎的臨床癥狀發(fā)展速度大多較慢，但部分羔羊發(fā)病迅速，死亡率的高低不定。本試驗對巴州地區(qū)引起綿羊肺炎的病原進(jìn)行篩查，旨在找到主要病原，為綿羊肺炎防治提供參考。

1 材料

1.1 樣品采集

2019—2021 年分別在巴州地區(qū)12 家規(guī)模羊場和24 家散養(yǎng)戶采集肺炎綿羊臟器（肝、肺、心、脾、淋巴和腎），眼結(jié)膜、鼻腔拭子以及相應(yīng)的血清樣品（頸靜脈無菌采血5mL，離心后獲得血清，采集前不對肺炎羊進(jìn)行任何針對性治療和免疫）各240 份，共960 份。巴音布魯克羊、刀郎羊為本地品種，湖羊、小尾寒羊、杜泊羊和薩?？搜驗橥鈦砥贩N。

1.2 主要試劑

主要培養(yǎng)基：普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、血瓊脂培養(yǎng)基、脫纖維羊血。細(xì)菌微量生化反應(yīng)管購自杭州濱和微（生物試劑有限公司。綿羊支原體檢測試劑盒購自雅吉生物（批號202009）、呼吸道合胞體病毒抗體檢測試劑盒購自愛德士蒙利埃有限公司（批號20150）、副流感病毒ELISA 抗體檢測試劑盒購自愛德士蒙利埃有限公司（批號21046）、小反芻獸疫熒光PCR 檢測試劑盒購自北京世紀(jì)元亨生物技術(shù)公司（批號21030）。

1.3 試驗方法

1.3.1 細(xì)菌分離鑒定

將采集的臟器、鼻拭子樣品按照常規(guī)劃線分離細(xì)菌的方法接種于普通營養(yǎng)瓊脂、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、血平板培養(yǎng)基上，于37℃細(xì)菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24h 后挑取單個菌落純化培養(yǎng)后進(jìn)行溶血性曼氏桿菌、鏈球菌、多殺性巴氏桿菌等細(xì)菌的生化鑒定[1-2]。

1.3.2 血清抗體ELISA 檢測和眼結(jié)膜拭子熒光PCR核酸檢測

血清中檢測：支原體抗體、呼吸道合胞體病毒抗體、副流感病毒抗體ELISA 檢測試劑盒分別檢測支原體抗體、呼吸道合胞體病毒抗體、副流感病毒抗體，具體操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。

眼結(jié)膜拭子檢測：小反芻獸疫熒光PCR 檢測試劑盒檢測眼結(jié)膜拭子中小反芻獸疫病毒，具體操作步驟按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3.3 數(shù)據(jù)處理

運(yùn)用統(tǒng)計軟件SPSS19.0 對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 主要病原的檢出率

溶血性曼氏桿菌檢出率27.1%，鏈球菌檢出率為21.6%，多殺性巴氏桿菌檢出率17.9%，支原體檢出率16.7%，結(jié)核分枝桿菌檢出率0.83%，其他細(xì)菌（葡萄球菌，大腸桿菌等）檢出率8.3%，其中溶血性曼氏桿菌檢出率最高，其次鏈球菌，再次為多殺性巴氏桿菌。溶血性曼氏桿菌的檢出率顯著高于多殺性巴氏桿菌、支原體、結(jié)核分枝桿菌抗體。多殺性巴氏桿菌、支原體、鏈球菌檢出率顯著高于結(jié)核分枝桿菌抗體。巴音布魯克羊、刀郎羊、小尾寒羊、沙?？搜蛉苎月蠗U菌檢出率最高，杜泊羊、湖羊多殺性巴氏桿菌檢出率最高，其中小尾寒羊多殺性巴氏桿菌檢出率顯著高于巴音布魯克羊、刀郎羊（表1）。

表1 細(xì)菌檢測結(jié)果

2.2 病毒檢測結(jié)果

呼吸道合胞體病毒檢出率40.0%，副流感病毒抗體檢出率18.8%，小反芻獸疫病毒檢出率0%。其中呼吸道胞合體病毒檢出率均顯著高于副流感病毒。巴音布魯克羊、刀郎羊、杜泊羊、湖羊呼吸道道合胞體病毒檢出率最高，小尾寒羊副流感病毒檢出率最高，其中湖羊、小尾寒羊、杜泊羊和薩福克羊副流感病毒檢出率顯著高于巴音布魯克羊、刀郎羊（表2）。

表2 病毒檢測結(jié)果

3 討論

肺炎病因復(fù)雜，病原性肺炎由病毒、細(xì)菌或寄生蟲引起，非病原性肺炎由營養(yǎng)因素及飼養(yǎng)管理引起。該試驗中有20 份樣品未檢測到任何病原，可能為非病原性肺炎。溶血性曼氏桿菌檢出率與馮旭飛[3]的檢出率基本相同，鏈球菌的檢出率與張丹[4]的檢出率基本相同。支原體抗體檢出率低于剡文亮[5]的檢出率，可能與地域差異有關(guān)。

小尾寒羊多殺性巴氏桿菌檢出率顯著高于巴音布魯克羊和刀郎羊，巴音布魯克羊和刀郎羊副流感抗體顯著低于其他羊，可能與新疆當(dāng)?shù)貢円箿夭畲?，本地羊適應(yīng)當(dāng)?shù)貧夂颦h(huán)境有關(guān)。

副流感病毒、呼吸道合胞體病毒均屬于副黏病毒科，牛、綿羊易感，發(fā)病率高，病死率低[6]，如繼發(fā)細(xì)菌或支原體感染可引起病情加重，導(dǎo)致呼吸道疾病綜合征，造成宿主的死亡。副流感病毒檢出率與毛立[7]檢出率基本相同。在加拿大、美國、北愛爾蘭和新西蘭已在綿羊體內(nèi)檢測到牛呼吸道合胞體病毒抗體[8]，本實驗中檢測到牛呼吸道合胞體病毒抗體達(dá)到40%，說明巴州地區(qū)該病毒感染比較嚴(yán)重。

4 結(jié)論

試驗對幾種綿羊肺炎病的情況進(jìn)行分別檢測，結(jié)果表明，巴州地區(qū)綿羊肺炎為多種細(xì)菌、病毒混合感染，呼吸道合胞體病毒、溶血性曼氏桿菌為其主要致病源，同時存在非病原性肺炎的情況，在巴州地區(qū)開展綿羊養(yǎng)殖需要加強(qiáng)飼養(yǎng)和養(yǎng)殖場所的管理。