徐雨生，申 科，魏 穎，董競成，蔣智林，

（1.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，長沙 410128；2.普洱學(xué)院農(nóng)林學(xué)院，云南 普洱 665000；3.復(fù)旦大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合研究院傳統(tǒng)藥物比較研究所，上海 200040）

藥用黃精為百合科黃精屬植物黃精（Polygonatum sibiricumRed.）、多花黃精（Polygonatum cyrtonemaHua.）、滇黃精（Polygonatum kingianumColl.Et Hemsl.）干燥的根莖［1］。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》［2］，是中國一種傳統(tǒng)藥食兩用植物［3］，具有補(bǔ)氣養(yǎng)陰、健脾、潤肺和益腎等功效［4］。目前隨著人們保健意識的不斷提升，黃精也日益受人青睞，市場需求日益增長［5］。

目前市場上售賣的中藥材主要來源于野生資源，但是因為人們不加節(jié)制地過度采挖，致使環(huán)境遭到破壞，中藥材的野生資源正在慢慢減少，人工種植隨之逐漸興起。在種植過程中，為了提高植株的成活率和避免病蟲害，一些應(yīng)對措施（物理防治、化學(xué)防治、微生物防治等）被采用。因為化學(xué)防治的簡便快捷而備受廣大藥農(nóng)的青睞。而有機(jī)氯農(nóng)藥因為殺蟲效果明顯，被很多藥農(nóng)采用。隨之而來就導(dǎo)致農(nóng)藥殘留含量很容易超標(biāo)，給人們的健康帶來危害［6］。目前被人類使用最多的有機(jī)氯農(nóng)藥為六六六（Benzene hexachloride，BHC）、滴滴涕（Dichlorodiphenyl trichloroethane，DDT）和五氯硝基苯（Pentachloronitrobenzene，PCNB），雖然中國在20世紀(jì)80年代已經(jīng)禁止使用和生產(chǎn)這3種農(nóng)藥［7，8］，但是由于它們性質(zhì)十分穩(wěn)定，直到現(xiàn)在仍能被檢測出存在殘留［9］，其可以長期存在于食物中被人體吸收，導(dǎo)致在人體內(nèi)進(jìn)行蓄積，引發(fā)一系列病癥，嚴(yán)重危害消費者的身體健康。因此，中藥材中有機(jī)氯農(nóng)藥殘留含量過高的現(xiàn)象已經(jīng)成為中藥走向國際化的嚴(yán)重阻礙，據(jù)報告有90%的中藥樣品被檢測出存在有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，且目前只有9種有機(jī)氯農(nóng)藥被明確規(guī)定了限量標(biāo)準(zhǔn)，遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了現(xiàn)在中藥材市場的需求［10-12］。

目前，國內(nèi)外鮮有黃精有機(jī)氯農(nóng)藥的相關(guān)報道，本試驗根據(jù)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T761—2008，通過氣相色譜法對全國范圍內(nèi)市面上出售的黃精進(jìn)行有機(jī)氯農(nóng)藥殘留含量的檢測，為人們安全的藥食選擇、種植過程中農(nóng)藥的合理使用和市場監(jiān)督管理提供一定的試驗參考［13］。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 黃精樣本材料 根據(jù)黃精在全國的產(chǎn)地分布情況，從云南、貴州、四川、重慶、廣西、陜西、寧夏、甘肅、湖南、湖北、江西、內(nèi)蒙古、西藏、廣東、福建、安徽、浙江、河南、河北、吉林、山東、遼寧22個?。ㄊ?、區(qū)）46個產(chǎn)地收集野生新鮮根莖共53個樣本。所收集樣本經(jīng)普洱學(xué)院農(nóng)林學(xué)院蔣智林教授鑒定，樣品信息見表1。

表1 黃精樣品來源信息及其鑒定結(jié)果

1.1.2 儀器與試劑 所用儀器主要有氣相色譜儀（Agilent6890N型）、HP-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm，Agilent）、臺式速凍離心機(jī)（Sorvall ST 16R75004380型）、旋渦混合器（Talboys基本型）、超聲波清洗器（CQ-250-DST型）、固體樣品粉碎機(jī)（XA-1型）、烘箱（定制640 L型）、標(biāo)準(zhǔn)篩65目（250 μm）、電子天平（PX1250DZH型）。

續(xù)表1

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品主要有BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、DDT（p，p＇-DDE、o，p＇-DDE、o，p＇-DDD、p，p＇-DDD、o，p＇-DDT、p，p＇-DDT）、PCNB；氯化鈉、乙腈、丙酮、正乙烷均為分析純級。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)對照溶液的制備 精密稱取BHC、DDT及PCNB農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（精確至0.1 mg），用正乙烷稀釋，逐一配成1 000 mg/L的單一農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)儲備液，根據(jù)各農(nóng)藥儲備液在儀器上的響應(yīng)值，逐一吸取一定體積的單一標(biāo)準(zhǔn)儲備液，移入同一容量瓶中，用正乙烷稀釋至刻度。精密量取一定量混合對照品溶液，用正乙烷分別稀釋成濃度為5×10-6、10-5、2×10-5、5×10-5、10-4mg/mL的溶液。

1.2.2 樣品溶液的制備 將樣品在45℃電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中干燥4 h，粉碎過65目篩，精密稱取2.000 0 g，置于50 mL離心管中，加10.0 mL乙腈和10.0 mL去離子水，手動渦旋2 min后超聲處理10 min（功率300 W，頻率40 kHz），靜置冷卻至室溫，加少許適量NaCl后離心10 min，取上清液5.0 mL置于10 mL試管中，吹干。

過Florid柱：依次用丙酮∶正己烷（體積比為1∶9）溶液5.0 mL和正己烷溶液5.0 mL預(yù)淋洗Florid柱，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時，立即倒入待洗脫樣品，用10 mL試管接收洗脫液，用6.0 mL丙酮∶正己烷（體積比為1∶9）沖洗燒杯后淋洗Florid柱，并重復(fù)1次。將裝有淋洗液的試管置于氮吹儀上，氮吹蒸發(fā)至體積少于2.0 mL，用正乙烷定容至2.0 mL，在旋渦混合器上混勻后分別轉(zhuǎn)至2個2 mL自動進(jìn)樣器的樣品瓶中，待測。

1.2.3 氣相色譜條件HP-5石英毛細(xì)管柱（30 mm×0.32 mm，0.25 μm，Agilent）；載氣：高純氮（N2）；進(jìn)樣口溫度：210℃；檢測器溫度：300℃；柱升溫程序：初始溫度80℃（1 min），以30℃/min升至170℃，以5℃/min升至240℃，以20℃/min升至280℃，保持3 min；流速1.0 mL/min；進(jìn)樣量1 μL。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

吸取已經(jīng)制備好的濃度為5×10-6、10-5、2×10-5、5×10-5、10-4mg/mL的一系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，按“1.2.3”中色譜條件進(jìn)行檢測，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到標(biāo)準(zhǔn)溶液的線性回歸方程，同時得到檢出限為1 μg/kg。線性回歸方程見表2。由表2可知，所有標(biāo)準(zhǔn)品的回歸方程的相關(guān)系數(shù)均在0.9以上，說明建立的回歸方程均可靠。

表2 11種有機(jī)氯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品回歸方程

2.2 加樣回收試驗

精密稱取2.000 0 g樣品置于100 mL的具塞錐形瓶中，精密吸取0.5 mL的混合對照品溶液（100 μg/kg），加入到裝有樣品的錐形瓶中，其余步驟同樣品溶液制備，制成回收樣品溶液，進(jìn)行測定，同時進(jìn)行空白試樣的測定，得到有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的平均回收率為70.0%～115.3%。

2.3 樣品檢測及安全性評價

精密稱取53份樣品制備成供試溶液，按照“1.2.3”中方法，對53份黃精樣品中11種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留含量進(jìn)行檢測，結(jié)果見表3。由表3可以看出，有20個樣品中被檢出存在有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，包括β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PCNB、o，p＇-DDE、p，p＇-DDE、p，p＇-DDD、p，p＇-DDT共8種；沒有檢出的3種有機(jī)氯農(nóng)藥是α-BHC、o，p＇-DDD和o，p＇-DDT。云南省的27個黃精樣品中，有11個樣品檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，檢出率占云南省樣品的40.7%，占總檢出樣品的55.0%。其他省份的26份樣品中，有17個樣品沒有檢測出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，9個樣品檢測出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，除49號貴州凱里（濕）的樣品檢測出3種農(nóng)藥殘留（o，p＇-DDE、p，p＇-DDE和p，p＇-DDT）和44號陜西漢中的樣品檢測出2種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留（γ-BHC和PCNB）外，其他7個地區(qū)的黃精樣品都只檢測出1種有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，包括β-BHC、γ-BHC、PCNB、o，p＇-DDE、p，p＇-DDE和p，p＇-DDT，檢出率占總檢出樣品的45.0%。其中，有機(jī)氯農(nóng)藥檢出率最多的是p，p＇-DDE，占總試驗樣品的18.87%。

表3 樣品有機(jī)氯農(nóng)藥殘留含量檢測結(jié)果統(tǒng)計

試驗樣品中除云南省普洱市、麗江市玉龍縣、文山市富寧縣、昆明市宜良和重慶市潼南區(qū)是人工種植的外，其余的都是野生黃精。人工種植的黃精樣品中只有普洱市（濕樣）和重慶市（干樣）中被檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留，占總試驗樣品的9.43%；野生黃精樣品中檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的樣品占試驗總樣品的28.30%。

3 小結(jié)與討論

根據(jù)GB2763—2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中農(nóng)藥最大殘留限量》《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》和2015版《中國藥典》限量標(biāo)準(zhǔn)綜合得出，中藥材中總六六六殘留含量不得超過0.1 μg/g；中藥材中總滴滴涕殘留含量不得超過0.1 μg/g；中藥材中五氯硝基苯殘留含量不得超過0.1 μg/g［14-16］。根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)來看，所有樣品的有機(jī)氯農(nóng)藥殘留含量都在安全限量內(nèi)，沒有超出標(biāo)準(zhǔn)。從農(nóng)藥殘留量數(shù)據(jù)方面來看，p，p＇-DDE在11種有機(jī)氯農(nóng)藥中對黃精污染的影響最大；部分人工種植的黃精有機(jī)氯農(nóng)藥殘留種類較多，為種植生產(chǎn)廠生產(chǎn)過程中控制農(nóng)藥的使用和劑量的大小提供一定的參考。野生黃精中檢出有機(jī)氯農(nóng)藥殘留的樣品占總野生黃精試驗樣品的41%，而野生黃精一般生長在深山野林里，遠(yuǎn)離農(nóng)田人群，說明現(xiàn)在農(nóng)藥污染的嚴(yán)重性和普遍性，迫切需要市場監(jiān)督管理部門加強(qiáng)監(jiān)督管理和監(jiān)管力度。

本試驗結(jié)果顯示，所測中藥材黃精有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留較低且均處于安全限量內(nèi)，人們可以放心食用。