張小寧，劉 偉

（楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院，陜西咸陽(yáng) 712100）

農(nóng)藥殘留問(wèn)題一直是人們關(guān)注的焦點(diǎn)之一[1-2]。植物性食品的農(nóng)藥殘留主要來(lái)源于水、土壤和農(nóng)藥噴灑這一農(nóng)業(yè)生產(chǎn)活動(dòng)。完善農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)、建立健全的農(nóng)藥使用管理體系是保護(hù)生態(tài)環(huán)境的重要手段之一。

吡蟲啉是煙堿類超高效殺蟲劑，具有廣譜、高效、低毒和低殘留等特點(diǎn)，害蟲不易產(chǎn)生抗性，并有觸殺、胃毒和內(nèi)吸等多重作用[3-4]。害蟲接觸藥劑后，中樞神經(jīng)正常傳導(dǎo)受阻，使其麻痹死亡[5-6]。吡蟲啉可有效防治薊馬、葉蟬、粉虱、蚜蟲、稻甲蟲、負(fù)泥蟲、潛葉蠅和潛葉蛾等刺吸式口器害蟲，對(duì)于鱗翅目和雙翅目害蟲也有很高的防治效果，可用于防治小麥、玉米、水稻、棉花、蔬菜、甜菜和果樹等作物病蟲害[7-10]。目前，農(nóng)檢實(shí)驗(yàn)室吡蟲啉的檢測(cè)方法多采用GB/T 23379—2009，通過(guò)多次提取、濃縮、固相萃取，最后通過(guò)高效液相色譜法測(cè)定[11-12]。

本研究在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 23379—2009的基礎(chǔ)上，借鑒NY/T 761—2008的預(yù)處理方法，采用了QuEChERS方法和固相萃取，比較了兩者優(yōu)劣，簡(jiǎn)化了預(yù)處理和儀器分析過(guò)程，縮短了檢測(cè)分析時(shí)間，方法具有較好的重復(fù)性和靈敏度[13-14]。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)品（GBW（E）084948，北京壇墨質(zhì)檢）；乙腈、甲醇（HPLC級(jí)，美國(guó)天地）；超純水（實(shí)驗(yàn)室自制）；乙酸鈉、硫酸鎂、氫氧化鈉（西隴，分析純）。

1.2 儀器與設(shè)備

1260高效液相色譜儀（安捷倫公司）；D型干式氮吹儀（上海滬析實(shí)業(yè)有限公司）；MS3渦旋振蕩器（德國(guó)IKA公司）；ME204電子天平（瑞士梅特勒公司）；固相萃取柱（C18，1 g/6 mL）。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)中間液：準(zhǔn)確移取100 μg·mL-1吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0 mL，用甲醇稀釋定容至10 mL，配制成濃度為10 μg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)中間液。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別取0.05 mL、0.10 mL、0.20 mL、0.50 mL和1.00 mL中間液用甲醇水（3+7）稀釋定容至10 mL，配制成濃度為0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1系列標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.3.2 樣品處理

稱取約25.0 g蘋果樣品于250 mL燒杯中，加入50.0 mL乙腈，高速勻漿2 min，過(guò)濾置于50 mL盛有3～7 g氯化鈉的具塞量筒中，劇烈振蕩1 min，靜置分層。

固相萃?。何∩锨逡? mL在40 ℃下氮吹至干，用2.5 mL乙腈水（1+3）渦旋復(fù)溶。C18固相萃取柱先用2.5 mL乙腈和乙腈水（1+3）淋洗活化后，將復(fù)溶后樣品全部過(guò)柱，再用5 mL 20 mol·L-1氫氧化鈉、5 mL水淋洗，最后用1.0 mL乙腈洗脫，加水1.0 mL渦旋混合后過(guò)0.45 μm濾膜裝瓶待測(cè)。

QuEChERS：吸取上層清液10.0 mL加入1 g MgSO4，0.5 g NaOAc，渦旋30 s后靜置5 min，取上清2 mL氮吹濃縮后，用乙腈水（1+1）稀釋定容至1.0 mL，溶液過(guò)0.22 μm尼龍濾膜，液相色譜測(cè)定。

1.3.3色譜條件

色譜柱：C18（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量10 μL；柱溫：40 ℃；流動(dòng)相A：甲醇溶液；流動(dòng)相B：水；洗脫程序：70%甲醇（A）等度洗脫；檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm；檢測(cè)器采集頻率：500 ms；外標(biāo)法定量。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)譜圖

本文采用高效液相色譜法-紫外檢測(cè)器測(cè)定吡蟲啉，檢測(cè)波長(zhǎng)為270 nm。得到較好的檢測(cè)結(jié)果，保留時(shí)間為4.922 min，每次樣品分析的時(shí)間小于10 min，大大縮短了GB/T 23379—2009中梯度洗脫的分析時(shí)間。色譜圖如圖1所示。

圖1 吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

依 次 測(cè) 定 濃 度0.05 μg·mL-1、0.10 μg·mL-1、0.20 μg·mL-1、0.50、 μg·mL-1和1.00 μg·mL-1標(biāo)準(zhǔn)工作液，進(jìn)樣量10 μL，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo)，得到線性回歸方程，線性關(guān)系良好。線性方程為A=57.611 34C+0.437 91（R=0.999 366）。

2.3 凈化方法

依據(jù)1.3.2處理方法，添加濃度為2倍檢出限即0.04 mg·kg-1時(shí)，分別采取固相萃取和QuEChERS凈化，比較兩種方法的峰面積和信噪比。通過(guò)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，固相萃取法信噪比大，凈化效果較優(yōu)于QuEChERS法，但QuEChERS方法的回收率更高，詳見(jiàn)表1。

表1 QuEChERS與固相萃取法的比較

2.4 準(zhǔn)確度和精密度

分別選定青菜、白菜和蘋果空白樣品，添加濃度 為0.04 mg·kg-1、0.06 mg·kg-1、0.20 mg·kg-1的 標(biāo)準(zhǔn)溶液，按QuEChERS方法進(jìn)行處理（n=6），計(jì)算加標(biāo)回收率和精密度，見(jiàn)表2。3種果蔬的加標(biāo)回收率為80.2%～110.2%，精密度為1.3%～4.8%。符合實(shí)驗(yàn)室方法的一般要求（回收率在70%～120%質(zhì)檢，偏差小于10%）。

表2 吡蟲啉的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=6）

3 結(jié)論

本研究基于GB/T 23379—2009和NY/T 761—2008，應(yīng)用高效液相色譜法建立了一種處理簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確定量分析水果中吡蟲啉的方法，與GB/T 23379—2009相比，簡(jiǎn)化了提取、凈化過(guò)程，通過(guò)等度洗脫縮短了檢測(cè)時(shí)間，提高了檢測(cè)靈敏度。結(jié)果顯示，該方法可在10 min內(nèi)完成吡蟲啉的檢測(cè)，具有良好的精確度和準(zhǔn)確度，在0.05～1.00 μg·mL-1與 信 號(hào) 響 應(yīng) 值 呈 現(xiàn) 良 好 的 線性關(guān)系，線性相關(guān)系數(shù)大于0.999，檢出限遠(yuǎn)低于

0.02 mg·kg-1，加標(biāo)回收率為80.2%～110.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3%～4.8%。