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        端粒酶和CD147在原發(fā)性肝細(xì)胞癌中的表達(dá)及意義

        2022-12-20 06:25:16陳文芳王為東
        關(guān)鍵詞:無瘤端粒酶癌栓

        陳文芳 王為東

        蒙陰縣人民醫(yī)院病理科 山東 臨沂 276200

        原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的發(fā)病率和死亡率分別位于我國惡性腫瘤的第四位和第三位[1],嚴(yán)重威脅人類的健康。本研究選取端粒酶和CD147作為病理指標(biāo),對HCC和癌旁組織中端粒酶及CD147的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)之間的關(guān)系進(jìn)行對比,探討其與HCC發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后的關(guān)系。

        1 材料與方法

        1.1 材料 選自我院病理科2010年1月至2014年12月經(jīng)常規(guī)石蠟處理的353例HCC組織及81例癌旁組織。在353例原發(fā)性HCC中去除因術(shù)后失訪、組織脫片等原因81例,剩余272例進(jìn)行處理。272例HCC中男性228例,女性44例;年齡最大82歲,最小27歲,平均年齡為(55.03±2.05)歲,中位年齡為55歲;組織學(xué)分級高中分化179例,低分化93例; pTNM分期I/II期242例,III期30例。以上指標(biāo)連同病人性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管癌栓等其他臨床病理因素一起納入分析。

        1.2 實(shí)驗(yàn)方法

        1.2.1 組織芯片的構(gòu)建 本研究利用組織芯片制片機(jī)對HCC典型腫瘤部位和癌旁組織進(jìn)行取樣,應(yīng)用遼寧朝陽恒泰科技發(fā)展有限公司出品的恒泰組織芯片制備系統(tǒng)HT-1型制片,取樣針直徑為2.0 mm,組織芯片間距為1.0 mm。

        1.2.2 免疫組化染色 應(yīng)用免疫組化SP染色法,兔抗人多克隆抗體Telomerase及鼠抗人單克隆抗體CD147購自北京中山金橋生物公司,二抗購自羅氏生物公司。采用羅氏Bench Mark GX 全自動免疫組化染色機(jī)染色,用PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

        1.3 結(jié)果判定 端粒酶定位于細(xì)胞核,CD147定位于細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)。根據(jù)染色強(qiáng)度和陽性細(xì)胞所占百分比進(jìn)行綜合判斷。將染色強(qiáng)度分為4級,分別為0~3分,不著色為0分,淡黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分。細(xì)胞陽性百分?jǐn)?shù)分為5級,分別為0~4分,陽性細(xì)胞數(shù)<5%為0分,5%~25%為1分,26%~50%為2分,51%~75%為3分,>75%為4分。然后將兩者相乘,0~3分為“-”,4~12分為“+”。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行處理。定性資料采用χ2檢驗(yàn)和pearson相關(guān)分析,生存分析采用Kaplan-Meier和Log-rank檢驗(yàn)。P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 端粒酶、CD147在HCC及癌旁組織中的表達(dá) HCC和癌旁組織中端粒酶陽性表達(dá)例數(shù)比較,χ2=54.930,P<0.01。HCC和癌旁組織中CD147陽性表達(dá)例數(shù)比較,χ2=34.572,P<0.01(表1)。

        表1 不同肝臟組織中端粒酶、CD147的表達(dá)情況

        2.2 端粒酶、CD147的表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的關(guān)系 端粒酶的表達(dá)與無瘤生存時間、組織分級、腫瘤大小、是否有衛(wèi)星灶、組織癌栓及臨床分期相關(guān),P<0.05或<0.01,與其它因素?zé)o關(guān)。CD147的表達(dá)與患者的組織分級、臨床分期、無瘤生存時間、腫瘤大小、脈管或/和門靜脈癌栓相關(guān),P<0.01,與其他因素?zé)o關(guān)(表2,圖1、2)。

        2.3 端粒酶、CD147在HCC中的表達(dá)與術(shù)后無瘤生存和總生存的關(guān)系 Kaplan-Meier和Log-rank檢驗(yàn)顯示,端粒酶、CD147陽性表達(dá)患者的術(shù)后無瘤生存及總生存均縮短,P<0.01(表3,圖3、4)。

        圖1 端粒酶在HCC中的陽性表達(dá)(HE×100) 圖2 CD147在HCC中的陽性表達(dá)(HE×100)

        表2 原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌中端粒酶、CD147的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

        表3 端粒酶和CD147的表達(dá)情況與無瘤生存和總生存期的關(guān)系

        圖3 HCC中端粒酶表達(dá)的生存曲線/月 圖4 HCC中CD147表達(dá)的生存曲線/月

        3 討論

        在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中,特別是在腫瘤的起始階段,癌細(xì)胞的永生化起到關(guān)鍵性的作用,也對腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移具有重要的影響。端粒酶使細(xì)胞染色體的端粒延長,使細(xì)胞不斷分裂、增殖[2]。端粒DNA是富含鳥苷酸的簡單串聯(lián)重復(fù)序列(TTAGGG)。在細(xì)胞不斷復(fù)制的過程中,端粒不斷縮短,使細(xì)胞復(fù)制終止。為了避免端粒因縮短而導(dǎo)致的復(fù)制終止,真核細(xì)胞存在一種特殊的逆轉(zhuǎn)錄酶—端粒酶,其作用是將DNA重復(fù)序列添加到染色體3′末端以對抗端粒的持續(xù)降解。它是一種核蛋白復(fù)合物,作用是為端粒DNA的延長提供RNA模板序列[3]。端粒酶保持持續(xù)的活性使端粒的長度保持在穩(wěn)定的狀態(tài),從而使細(xì)胞獲得無限復(fù)制的能力。在正常情況下,有活性的端粒酶主要存在于精子細(xì)胞、干細(xì)胞和胚胎細(xì)胞中[4],某些惡性腫瘤細(xì)胞重新恢復(fù)了端粒酶活性,使細(xì)胞無限增殖而演變?yōu)閻盒阅[瘤。端粒酶在結(jié)直腸癌、鼻咽癌、子宮頸癌及黑色素瘤中均有高表達(dá)[5],與本研究結(jié)果相似。本研究還發(fā)現(xiàn)端粒酶陽性表達(dá)與HCC患者的術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)時間、組織分級、癌栓和臨床分期等有關(guān),即端粒酶的陽性表達(dá)與HCC患者的不良預(yù)后相關(guān)。

        CD147又稱為細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子,是免疫球蛋白超家族(immunoglobulin supperfamily,IGSF)單鏈跨膜糖蛋白。其分子量為58 kD,其基因定位于染色體19p13.3[6],在惡性腫瘤的轉(zhuǎn)化、浸潤轉(zhuǎn)移以及腫瘤新生血管的生成中均發(fā)揮重要作用[6]。CD147在甲狀腺癌、乳腺癌、胃癌等多種惡性腫瘤中高表達(dá),且預(yù)后不良[7],與本研究結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn)CD147的高表達(dá)與HCC的組織學(xué)分級、臨床分期、脈管癌栓等因素相關(guān),因此,CD147也可以作為判斷腫瘤預(yù)后的因子之一。在多耐藥的腫瘤細(xì)胞中CD147的表達(dá)是增加的,并且CD147的高表達(dá)可以致使細(xì)胞對某些抗腫瘤藥物產(chǎn)生抵抗[8],導(dǎo)致抗腫瘤治療不佳,理論上,抑制腫瘤細(xì)胞中CD147的表達(dá)可以增加癌細(xì)胞對抗腫瘤藥物的敏感性,可以成為腫瘤治療的一個靶點(diǎn)。因此,如何抑制CD147的表達(dá)成為抗癌治療的研究熱點(diǎn)。湯北嶺等[9]研究認(rèn)為,下調(diào)CD147蛋白的表達(dá)能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖,并成功誘導(dǎo)了胃癌細(xì)胞的凋亡,抑制CD147基因表達(dá)可以成為胃癌治療的一個靶點(diǎn)。CD147是否可以成為治療其它惡性腫瘤的有意義的靶點(diǎn),也是醫(yī)學(xué)界今后的研究方向之一。

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