張米帥，鄒雨佳，劉如明

（遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所，遵義市醫(yī)藥生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，貴州省轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)工程研究中心，貴州遵義 563003）

戴氏蟲草（Cordyceps taii）是1991年由我國(guó)學(xué)者梁宗琦教授等在貴州省首次發(fā)現(xiàn)、鑒定并命名的蟲草類真菌，屬于子囊菌綱，肉座菌目，麥角菌科，蟲草菌屬，與傳統(tǒng)名貴藥用真菌冬蟲夏草、蟬花和蛹蟲草同屬，貴州民間多將其作滋補(bǔ)強(qiáng)壯藥用[1]?，F(xiàn)代藥理研究證明，多糖是戴氏蟲草主要活性成分之一，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗突變、抗輻射、抗氧化等多種藥理活性[2-6]。特別是其優(yōu)良的降血糖和調(diào)節(jié)血脂的功效[7]，使得戴氏蟲草多糖在功能食品和生物醫(yī)藥領(lǐng)域具有良好的應(yīng)用潛力和前景。

多糖在提取純化時(shí)，色素也很容易被提取出來(lái)，較深的顏色不僅干擾多糖的純度，還影響多糖的定性定量、分離純化及活性方面的研究，所以需要對(duì)多糖進(jìn)行脫色處理[8]。近年來(lái)，有關(guān)戴氏蟲草多糖提取方法的研究已有報(bào)道[9]，但是針對(duì)其提取過(guò)程中的脫色研究，特別是對(duì)水提多糖和堿提多糖的脫色工藝進(jìn)行對(duì)比研究還未見(jiàn)報(bào)道。因此，研究戴氏蟲草多糖的脫色工藝對(duì)其工業(yè)生產(chǎn)和藥用研發(fā)具有重要意義。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)多糖脫色的報(bào)道較多，但由于多糖來(lái)源不同，脫色方法也不盡相同，有H2O2氧化脫色法、金屬絡(luò)合法、離子交換樹脂法、吸附法等[10]。H2O2和金屬絡(luò)合會(huì)破壞多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)，產(chǎn)生雜質(zhì)留在多糖溶液中，降低多糖的生物活性[11]；樹脂脫色法操作相對(duì)復(fù)雜且價(jià)格較貴[12-13]；活性炭吸附法屬于物理吸附，是一種固體表面現(xiàn)象，色素在分子引力或化學(xué)鍵力的作用下，吸附在活性炭表面，從而達(dá)到分離的目的[14-16]?；钚蕴?jī)r(jià)格便宜，對(duì)色素吸附能力較強(qiáng)，且脫色條件溫和，不會(huì)破壞多糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)，是工業(yè)上較常用的一種多糖脫色材料[17-18]。

因此，本研究通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)比研究了活性炭對(duì)戴氏蟲草水提多糖和堿提多糖色素的去除工藝，并確定了兩種多糖最佳的脫色純化工藝條件。研究結(jié)果將為戴氏蟲草水提多糖和堿提多糖的進(jìn)一步開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

戴氏蟲草（Cordyceps taii）GYYA 0601菌株

保存在遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所，戴氏蟲草菌絲體根據(jù)前期開發(fā)的液體深層培養(yǎng)條件，由本實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵制備。活性炭（粉狀炭，食品糖類專業(yè)，≥200目） 阿拉丁試劑（上海）有限公司，使用前進(jìn)行預(yù)處理，105 ℃烘干后備用；氯仿、無(wú)水乙醇、氫氧化鈉、鹽酸、硫酸 重慶川東化工（集團(tuán)）有限公司；正丁醇 天津市富宇精細(xì)化工有限公司；苯酚天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；葡萄糖 北京索萊寶科技有限公司；以上試劑 均為分析純。

T&J-Ctype 50L全自動(dòng)生物反應(yīng)器 上海迪比爾；QHZ-98A搖床 太倉(cāng)華美；UV2700紫外可見(jiàn)分光光度計(jì) 日本島津；Milli-Q Direct 8超純水制備系統(tǒng) 默克密理博；N-1100V旋轉(zhuǎn)減壓蒸發(fā)儀 東京理化；SHZ-III循環(huán)水真空泵 上海亞榮；GZX-9070MBE數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱 上海博訊；TLE204E電子天平、FE20 pH計(jì) 梅特勒-托利多；5810R臺(tái)式高速冷凍離心機(jī) 德國(guó)艾本德公司；KQ-500DE超聲波清洗機(jī) 昆山超聲。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 戴氏蟲草水提多糖和堿提多糖的制備 多糖制備參考實(shí)驗(yàn)室前期方法并進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整[7]。提取流程如下：稱取干燥的戴氏蟲草發(fā)酵菌絲體粉末500 g，以料液比1:6加入95%乙醇除脂除雜，重復(fù)5次。5000 g離心10 min去除上清，濾渣按料液比1:5加入去離子水，85 ℃水浴提取2 h，間歇攪拌，過(guò)濾，此操作重復(fù)5次。濾渣回收備用，合并5次濾液，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上濃縮至原體積的1/5，加入4倍體積無(wú)水乙醇，4 ℃冰箱中醇沉24 h，5000 g離心10 min收集沉淀，依次用無(wú)水乙醇、丙酮洗滌2次。將沉淀用一定體積去離子水溶解，Sevage法[19]除蛋白至水相和氯仿相交界處無(wú)明顯蛋白層，減壓濃縮干燥，得戴氏蟲草水提多糖115 g。取之前回收濾渣，按料液比1:5加入0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液，60 ℃水浴提取2 h，重復(fù)5次后合并上清，用0.1 mol/L HCl溶液將上清pH調(diào)為7，濃縮。后續(xù)操作同水提多糖提取，最終得戴氏蟲草堿提多糖70 g。分別稱取一定量干燥的戴氏蟲草水提多糖和堿提多糖，用去離子水溶解，使兩種多糖的濃度均為5 mg/mL，備用。

1.2.2 活性炭脫色單因素實(shí)驗(yàn) 選取活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度、脫色pH四個(gè)因素[20-22]，分別做單因素實(shí)驗(yàn)。

1.2.2.1 活性炭用量對(duì)脫色率的影響 參考工業(yè)上活性炭脫色的用量范圍，設(shè)置1、1.5、2、2.5、3和3.5 g/100 mL六個(gè)活性炭用量水平。水提多糖和堿提多糖溶液初始pH分別為4.86和7.23，用0.1 mol/L HCl溶液將水提多糖和堿提多糖pH分別調(diào)節(jié)為4和7，在40 ℃條件下振蕩脫色40 min，過(guò)濾除炭后測(cè)定上清液吸光值。

1.2.2.2 脫色時(shí)間對(duì)脫色率的影響 設(shè)置10、20、30、40、50和60 min六個(gè)脫色時(shí)間，水提多糖活性炭用量為2 g/100 mL，用0.1 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH為4，堿提多糖活性炭用量為3 g/100 mL，用0.1 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH為7，然后在40 ℃條件下振蕩脫色，過(guò)濾除炭后測(cè)定上清液吸光值。

1.2.2.3 脫色溫度對(duì)脫色率的影響 設(shè)置30、40、50、60、70、80 ℃六個(gè)脫色溫度，水提多糖活性炭用量為2 g/100 mL，用0.1 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH為4，振蕩脫色20 min，堿提多糖活性炭用量為3 g/100 mL，用0.1 mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)pH為7，振蕩脫色50 min，過(guò)濾除炭后測(cè)定上清液吸光值。

1.2.2.4 脫色pH對(duì)脫色率的影響 設(shè)置3、4、5、6、7和8六個(gè)脫色pH，水提多糖活性炭用量為2 g/100 mL，在70 ℃條件下振蕩脫色20 min，堿提多糖活性炭用量3 g/100 mL，在70 ℃條件下振蕩脫色50 min離心，過(guò)濾除炭后測(cè)定上清液吸光值。

1.2.3 活性炭脫色正交試驗(yàn) 按單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，選擇確定活性炭用量（A）、脫色時(shí)間（B）、脫色溫度（C）、脫色pH（D）的3個(gè)水平，按L9（34）安排正交試驗(yàn)，過(guò)濾除去活性炭后檢測(cè)分析多糖脫色率和多糖保留率，進(jìn)行極差和方差分析，確定多糖脫色工藝的最優(yōu)組合[23]。正交試驗(yàn)因素和水平見(jiàn)表1和表2。

表1 戴氏蟲草水提多糖脫色正交試驗(yàn)的因素水平設(shè)計(jì)Table 1 Factor levels design for orthogonal decolorization experiment of water-extracted polysaccharides from C. taii

表2 戴氏蟲草堿提多糖脫色正交試驗(yàn)的因素水平設(shè)計(jì)Table 2 Factor levels design for orthogonal decolorization experiment of alkali-extracted polysaccharides from C. taii

1.2.4 脫色率的計(jì)算 參考文獻(xiàn)選擇420 nm處測(cè)定戴氏蟲草水提和堿提多糖脫色前后的吸光值，計(jì)算脫色率[24-25]。

式中：A脫色前表示多糖溶液脫色前420 nm處吸光值；A脫色后表示多糖溶液脫色后420 nm處吸光值。

1.2.5 多糖測(cè)定方法和多糖保留率的計(jì)算 多糖含量采用苯酚-硫酸法[26]測(cè)定，用移液管分別吸取葡萄糖對(duì)照品溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL，置于25 mL具塞試管中，再分別加入蒸餾水至體積為1.0 mL，加入1.0 mL 5%的苯酚和5 mL硫酸，混合均勻后置于30 ℃水浴鍋中顯色20 min，以葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液在490 nm下的吸光值為縱坐標(biāo)，溶液濃度（μg/mL）為橫坐標(biāo)作圖得標(biāo)準(zhǔn)曲線：Y=0.01113X-0.0094，R2=0.9991。糖濃度在10～100 μg/mL范圍內(nèi)，戴氏蟲草水提和堿提多糖脫色前后分別使用苯酚-硫酸法測(cè)定490 nm處吸光值，經(jīng)公式換算為糖濃度，計(jì)算多糖保留率。

式中：M脫色后多糖表示多糖溶液脫色后糖濃度，μg/mL；M脫色前多糖表示多糖溶液脫色前糖濃度，μg/mL。

1.2.6 脫色效果評(píng)價(jià) 考慮脫色率和多糖保留率兩項(xiàng)指標(biāo)，且二者對(duì)于脫色影響效果一樣，故本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)處理采用加權(quán)評(píng)分法，將各項(xiàng)指標(biāo)除以該列最大值再乘以100為該項(xiàng)得分[27]。對(duì)脫色率和多糖保留率兩項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行加權(quán)求和，設(shè)定二者的權(quán)重系數(shù)均為0.5，即得：綜合評(píng)分=0.5×脫色率+0.5×多糖保留率。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 21.0對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差和方差分析。*表示P＜0.05顯著性差異，**表示P＜0.01極顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 脫色率計(jì)算所用波長(zhǎng)的確定

對(duì)多糖溶液在400～800 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描（見(jiàn)圖1）。結(jié)果顯示兩種多糖溶液在可見(jiàn)光區(qū)均無(wú)最大吸收峰，且從400～800 nm范圍內(nèi)吸收呈逐漸下降趨勢(shì)。根據(jù)兩種多糖溶液脫色前均為黃褐色，故從溶液的互補(bǔ)色考慮，并參考蛹蟲草多糖和香菇多糖等真菌多糖的脫色方法，選擇420 nm處測(cè)定戴氏蟲草水提和堿提多糖脫色前后的吸光值，計(jì)算脫色率。

圖1 戴氏蟲草水提和堿提多糖脫色前全波長(zhǎng)掃描Fig.1 Full-wavelength scanning before decolorization of waterand alkali-extracted polysaccharides from C. taii

2.2 活性炭用量的影響

圖2A顯示隨著活性炭用量的增加，水提多糖脫色率變化范圍較小，在2 g/100 mL用量時(shí)脫色率最大為80.72%；堿提多糖隨著活性炭用量的增加，脫色率顯著提高（P＜0.05），當(dāng)用量超過(guò)2 g/100 mL以后，隨著炭量的增加，脫色率幾乎不再增加，可能原因是脫色過(guò)程已趨于平衡，在3 g/100 mL用量時(shí)脫色率最大為68.77%。故后續(xù)單因素實(shí)驗(yàn)，水提和堿提多糖脫色的活性炭用量分別選擇2和3 g/100 mL。

圖2 不同條件對(duì)水提多糖和堿提多糖脫色的影響Fig.2 Effect of different conditions on the decolorization of water- and alkali-extracted polysaccharides

2.3 脫色時(shí)間的影響

圖2B顯示，脫色時(shí)間20 min時(shí)，水提多糖脫色率最高為89.02%，隨著時(shí)間繼續(xù)增加，脫色率逐漸降低；堿提多糖脫色率隨著時(shí)間增加逐漸升高，在50 min達(dá)到最大值為68.16%?；钚蕴棵撋且粋€(gè)動(dòng)態(tài)可逆的吸附過(guò)程，由結(jié)果可知：相比于堿提多糖，活性炭對(duì)水提多糖色素的吸附飽和時(shí)間更短；隨著吸附時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)，色素可能從活性炭解析至溶液中，反而影響脫色效果。后續(xù)單因素實(shí)驗(yàn)，水提和堿提多糖脫色的時(shí)間分別選擇20和50 min。

2.4 脫色溫度的影響

圖2C顯示，隨著溫度的增加，水提多糖脫色率變化范圍較小，在70 ℃時(shí)脫色率達(dá)到最大為91.56%；堿提多糖隨著溫度增加，脫色率逐漸升高，同樣在70 ℃時(shí)達(dá)到最大為77.27%，當(dāng)溫度繼續(xù)升高脫色率急劇下降。分析可能原因，溫度增高可降低多糖溶液粘度，使其更易進(jìn)入活性炭空隙，有利于色素的附著；但吸附作為物理過(guò)程，過(guò)高的溫度也會(huì)降低活性炭對(duì)色素的吸附，且可能破壞多糖結(jié)構(gòu)影響其活性[28]。后續(xù)單因素實(shí)驗(yàn)，水提和堿提多糖脫色溫度均采用70 ℃。

2.5 脫色pH的影響

圖2D顯示，pH為3和4時(shí)，水提多糖脫色率分別為91.22%和91.16%，pH繼續(xù)升高，脫色率逐漸降低；當(dāng)調(diào)節(jié)堿提多糖溶液pH為3時(shí)出現(xiàn)沉淀，故從pH為4開始分析，結(jié)果顯示堿提多糖脫色率隨pH增加逐漸升高，在7時(shí)達(dá)到最大值為73.32%。由此推測(cè)，過(guò)低的pH可能影響堿提多糖的溶解度，使其不易進(jìn)入活性炭空隙，從而影響色素的吸附脫除。

2.6 戴氏蟲草水提多糖脫色最佳工藝條件的確定

綜合4種因素對(duì)戴氏蟲草水提多糖脫色效果的影響，采用L9（34）安排正交試驗(yàn)。因素水平表見(jiàn)表1，具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3，并對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行了極差和方差分析，相關(guān)結(jié)果見(jiàn)表4和表5。

表3 戴氏蟲草水提多糖活性炭脫色正交試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Results of orthogonal on decolorization of water-extracted polysaccharides from C. taii with activated carbon

表5 戴氏蟲草水提多糖活性炭脫色率方差分析Table 5 Variance analysis of decolorization rate of water-extracted polysaccharide from C. taii with activated carbon

表4脫色率極差R結(jié)果顯示C＞A＞B＞D，即影響戴氏蟲草水提多糖脫色率的因素依次是溫度（C）、活性炭用量（A）、時(shí)間（B）和pH（D），A、B和C因素具有極顯著差異（P＜0.01），D因素?zé)o顯著性差異（P＞0.05）；最優(yōu)組合為A3B1C2D2，即活性炭用量2.5 g/100 mL、吸附時(shí)間10 min、吸附溫度60 ℃、吸附pH為4。多糖保留率極差R結(jié)果顯示A＞D＞C＞B，即影響戴氏蟲草水提多糖保留率的因素依次是活性炭用量（A）、pH（D）、溫度（C）和時(shí)間（B），4個(gè)因素均具有極顯著差異（P＜0.01）；最優(yōu)組合為A1B1C1D2，即活性炭用量1.5 g/100 mL、吸附時(shí)間10 min、吸附溫度50 ℃、吸附pH為4。從表4極差結(jié)果分析，活性炭用量和脫色溫度對(duì)脫色率和多糖保留率的影響是相反的，活性炭用量越大，脫色率越高而多糖保留率越低，脫色溫度在60 ℃時(shí)，脫色率最高而多糖保留率最低；脫色時(shí)間對(duì)脫色率和多糖保留率的影響均成負(fù)相關(guān)，隨著脫色時(shí)間延長(zhǎng)，脫色率和多糖保留率均呈下降趨勢(shì)；pH變化對(duì)脫色率影響不顯著，但隨著pH增加多糖保留率呈先增后減的趨勢(shì)，當(dāng)pH為4時(shí)，多糖保留率最高。

表4 戴氏蟲草水提多糖正交試驗(yàn)極差分析Table 4 Extremum difference analysis of orthogonal experiment of water-extracted polysaccharide from C. taii

綜合考評(píng)，選擇多糖脫色率和多糖保留率二者的綜合評(píng)分來(lái)確定最佳工藝條件。綜合評(píng)分R結(jié)果顯示A＞D＞B＞C，即影響因素依次是活性炭用量（A）、pH（D）、時(shí)間（B）和溫度（C），四個(gè)因素均具有極顯著差異（P＜0.01）；最優(yōu)組合與多糖保留率一致，為A1B1C1D2，即活性炭用量1.5 g/100 mL、吸附時(shí)間10 min、吸附溫度50 ℃、吸附pH為4。

2.7 戴氏蟲草堿提多糖脫色最佳工藝條件的確定

戴氏蟲草堿提多糖脫色的L9（34）正交試驗(yàn)各因素水平表見(jiàn)表2，具體實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及實(shí)驗(yàn)結(jié)果、極差和方差分析結(jié)果分別見(jiàn)表6、表7和表8。

表6 戴氏蟲草堿提多糖活性炭脫色正交試驗(yàn)結(jié)果Table 6 Results of orthogonal on decolorization of alkali-extracted polysaccharides from C. taii with activated carbon

表8 戴氏蟲草堿提多糖活性炭脫色率方差分析Table 8 Variance analysis of decolorization rate of alkali-extracted polysaccharide from C. taii with activated carbon

表7脫色率極差R結(jié)果顯示C＞B＞D＞A，即影響戴氏蟲草堿提多糖脫色率的因素依次是溫度（C）、時(shí)間（B）、pH（D）和活性炭用量（A），4個(gè)因素均具有極顯著差異（P＜0.01）；最優(yōu)組合為A3B3C3D2，即活性炭用量3 g/100 mL、吸附時(shí)間50 min、吸附溫度70 ℃、吸附pH為7。多糖保留率極差R結(jié)果顯示A＞D＞C＞B，即影響戴氏蟲草堿提多糖保留率的因素依次是活性炭用量（A）、pH（D）、溫度（C）和時(shí)間（B），4個(gè)因素均具有極顯著差異（P＜0.01）；最優(yōu)組合為A1B1C1D3，即活性炭用量2 g/100 mL、吸附時(shí)間30 min、吸附溫度50 ℃、吸附pH為8。從極差結(jié)果分析，活性炭用量對(duì)堿提多糖脫色率和多糖保留率的影響相反，活性炭用量越大，脫色率越高而多糖保留率越低；脫色時(shí)間與多糖保留率成負(fù)相關(guān)，隨著時(shí)間增加，多糖保留率呈下降趨勢(shì)，但多糖脫色率在脫色時(shí)間為40 min時(shí)最低；脫色溫度與多糖脫色率成正相關(guān)，溫度越高脫色率越高，而多糖保留率在脫色溫度為50 ℃時(shí)最高；脫色pH與多糖保留率成正相關(guān)，pH越高多糖保留率越高，但多糖脫色率的最大值出現(xiàn)在pH為7時(shí)。

表7 戴氏蟲草堿提多糖正交試驗(yàn)極差分析Table 7 Extremum difference analysis of orthogonal experiment of alkali-extracted polysaccharide from C. taii

堿提多糖綜合評(píng)分R結(jié)果顯示A＞D＞C＞B，即影響因素依次是活性炭用量（A）、pH（D）、溫度（C）和時(shí)間（B），四個(gè)因素均具有極顯著差異（P＜0.01）；最優(yōu)組合為A1B1C3D3，即活性炭用量2 g/100 mL、吸附時(shí)間30 min、吸附溫度70 ℃、吸附pH為8。

2.8 脫色工藝的驗(yàn)證

使用優(yōu)化后的條件，即：水提多糖活性炭用量1.5 g/100 mL、吸附時(shí)間10 min、吸附溫度50 ℃、吸附pH為4；堿提多糖活性炭用量2 g/100 mL、吸附時(shí)間30 min、吸附溫度70 ℃、吸附pH為8，分別對(duì)二者進(jìn)行脫色，并測(cè)定脫色率和多糖保留率，驗(yàn)證上述脫色工藝。結(jié)果戴氏蟲草水提多糖脫色率和多糖保留率分別為92.12%±0.45%和73.46%±0.33%，戴氏蟲草堿提多糖脫色率和多糖保留率分別為75.67%±0.66%和56.72%±0.47%，表明優(yōu)化后的工藝條件穩(wěn)定可行。

3 討論與結(jié)論

脫色作為多糖提取純化過(guò)程中的重要一環(huán)，對(duì)多糖的結(jié)構(gòu)鑒定和活性評(píng)價(jià)起著至關(guān)重要的影響[29-30]。目前，活性炭因其優(yōu)良的脫色效果、低廉的成本和簡(jiǎn)單易行的操作工藝，且具有安全無(wú)毒、易去除的特性，仍廣泛應(yīng)用于天然活性多糖的脫色，如地參多糖[31]和馬齒蕨多糖[32]。劉福崗等[33]分別使用活性炭法和雙氧水法對(duì)白屈菜多糖的脫色工藝進(jìn)行了對(duì)比研究，證明盡管雙氧水法的多糖脫色率優(yōu)于活性炭法（74.82% vs 70.51%），但多糖保留率明顯劣于活性炭法（80.57% vs 95.79%），其原因可能源于雙氧水對(duì)多糖結(jié)構(gòu)的破壞。課題組前期也將D101型大孔樹脂用于戴氏蟲草水提多糖的純化，該方法多糖脫色率和多糖保留率分別為64.84%和53.43%[9]；而采用本研究開發(fā)的活性炭脫色法，即活性炭用量1.5 g/100 mL、吸附時(shí)間10 min、吸附溫度50 ℃、吸附pH為4，戴氏蟲草水提多糖的脫色率和多糖保留率分別為92.12%和73.46%，均優(yōu)于大孔樹脂法且操作過(guò)程更加簡(jiǎn)單。另外研究結(jié)果顯示，戴氏蟲草水提多糖的活性炭脫色效果明顯優(yōu)于堿提多糖，推測(cè)可能原因?yàn)樗岫嗵敲撋淖罴裵H為酸性，而堿提多糖脫色的最佳pH為堿性。文獻(xiàn)報(bào)道活性炭對(duì)帶電物質(zhì)（如陰離子）的吸附能力與溶液pH有關(guān)：弱酸性物質(zhì)在低pH時(shí)帶電較少或不帶電，較易被吸附，高pH時(shí)電荷較強(qiáng)，不利于吸附，故在酸性條件或偏酸性樣品中活性炭具有更好的脫色效果[34]。

綜上，本研究通過(guò)考察活性炭用量、脫色時(shí)間、脫色溫度和脫色pH四個(gè)因素，對(duì)戴氏蟲草水提和堿提多糖的活性炭脫色工藝進(jìn)行了優(yōu)化，證明活性炭吸附法對(duì)戴氏蟲草水提多糖和堿提多糖具有顯著的脫色效果，且多糖保留率高，該脫色工藝簡(jiǎn)單高效，成本低廉，適合工業(yè)化應(yīng)用。