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        抗核小體、抗雙鏈DNA抗體及抗核內(nèi)核糖蛋白/Sm抗體定量檢測(cè)對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷價(jià)值

        2022-11-28 13:40:06黃水蘭姜麗琴鄧文胡凱余紅英趙娜胡崗
        中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥 2022年30期
        關(guān)鍵詞:免疫性陽(yáng)性率抗體

        黃水蘭 姜麗琴 鄧文 胡凱 余紅英 趙娜 胡崗

        江西省景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科,江西景德鎮(zhèn) 333000

        系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是較為常見(jiàn)的一種自身免疫性疾病,也是彌漫性結(jié)締組織病的典型代表。其常伴有多系統(tǒng)損傷及產(chǎn)生多種針對(duì)自身組織的多克隆免疫球蛋白,對(duì)這類自身抗體的研究是進(jìn)一步深入了解SLE的基礎(chǔ)[1]。因此探求高特異度以及高靈敏度的用于SLE的早期診斷以及治療的自身抗體具有非常重要的意義,有研究表明[2]抗核小體(nucleosome,Nuc)、抗雙鏈DNA(double stranded DNA,dsDNA)抗體及抗核內(nèi)核糖蛋白/Sm(nuclear ribonucleoprotein/Smith,nRNP/Sm)抗體單一檢測(cè)夠能輔助臨床進(jìn)行早期診斷,這些都是常見(jiàn)用于診斷SLE的標(biāo)志物,特點(diǎn)是敏感度較低因而假陽(yáng)性率較高,不利于早期SLE的診斷。鑒于單一自身抗體靈敏度不高,本研究旨在探討聯(lián)合定量檢測(cè)抗Nuc、抗dsDNA和抗nRNP/Sm抗體來(lái)推斷早期診斷SLE的價(jià)值。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        本研究為單中心回顧性病例對(duì)照研究,回顧性選取2020年6月至2021年6月景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院收治的138例自身免疫疾病患者為研究對(duì)象,其中77例SLE患者為SLE組,61例其他自身免疫疾病患者為非SLE組,另選取同期70名健康體檢者為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn):①SLE組患者符合1997年美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)所制定的SLE臨床診斷以及分類標(biāo)準(zhǔn)[3];②非SLE組患者經(jīng)臨床確診為各類自身免疫性疾病主要包括硬皮病,肌炎以及類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病。排除標(biāo)準(zhǔn):①慢性腎臟疾?。虎诟黝惛窝?,包括自身免疫性肝病;③冠心病;④其他慢性疾病。

        SLE組中,男10例,女67例;年齡18~68歲,平均(41.3±9.6)歲;患者按SLE疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分進(jìn)行評(píng)估[4],分值≥8分為活動(dòng)組(45例),分值<8分為非活動(dòng)組(32例)。非SLE組中,男8例,女53例;年齡20~66歲,平均(43.5±11.6)歲;疾病類型:類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎21例,混合性結(jié)締組織病19例,強(qiáng)直性脊柱炎8例,干燥綜合征5例,多發(fā)性肌炎5例,硬皮病3例。對(duì)照組中,男10名,女60名;年齡19~45歲,平均(38.3±11.2)歲。三組的年齡、性別等一般資料比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)景德鎮(zhèn)市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)(倫理審批號(hào):LW2022001),符合醫(yī)學(xué)倫理學(xué)要求,對(duì)患者樣本的檢測(cè)均獲得患者及其家屬的知情同意。

        1.2 方法

        早晨空腹抽取三組研究對(duì)象的手肘靜脈血3 ml,轉(zhuǎn)速3 000 r/min,離心半徑13.5 cm的條件下離心15 min,吸取上層血清并保存于4℃環(huán)境下待檢。使用納博克6500化學(xué)發(fā)光檢測(cè)儀以及浩歐博生物公司抗Nuc、抗dsDNA和nRNP/Sm抗體檢測(cè)試劑盒完成定量檢測(cè)。對(duì)于結(jié)果判斷,抗dsDNA抗體:當(dāng)樣本測(cè)定濃度<10.00 U/ml時(shí),為陰性;當(dāng)樣本測(cè)定濃度≥10.00 U/ml時(shí),為陽(yáng)性。抗Nuc、抗nRNP/Sm抗體:當(dāng)樣本測(cè)定濃度<20.00 RU/ml時(shí),為陰性;當(dāng)樣本測(cè)定濃度≥20.00 RU/ml時(shí),為陽(yáng)性。

        1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

        比較不同疾病活動(dòng)指數(shù)以及不同組別患者自身抗體檢測(cè)水平和表達(dá)陽(yáng)性率差異,繪制ROC曲線,計(jì)算抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體及聯(lián)合檢測(cè)的AUC、靈敏度、特異度等診斷效能指標(biāo)。

        1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

        采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。對(duì)于符合正態(tài)分布的計(jì)量資料,用均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差(±s)的形式進(jìn)行描述,多組間比較采用單因素方差分析,組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn);對(duì)于不符合正態(tài)分布的資料,用中位數(shù)(下四分位數(shù),上四分位數(shù))[M(P25,P75)]進(jìn)行描述,組間整體比較采用Kruskall-WallisH檢驗(yàn),組間兩兩比較采用Nemenyi法,以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。計(jì)數(shù)資料采用率表示,組間整體比較采用χ2檢驗(yàn),兩兩比較采用Bonferroni方法校正,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=原α水平/比較次數(shù),即0.05/3=0.017。

        2 結(jié)果

        2.1 三組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體水平的比較

        三組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體水平分別比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。SLE組的抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體水平高于非SLE組、對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);非SLE組的抗Nuc抗體水平高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表1)。

        表1 三組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體水平的比較[M(P25,P75)]

        2.2 不同SLE組活動(dòng)指數(shù)自身抗體表達(dá)陽(yáng)性率的比較

        活動(dòng)組抗dsDNA陽(yáng)性表達(dá)率高于非活動(dòng)組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。兩組的抗Nuc抗體、抗nRNP/Sm抗體陽(yáng)性表達(dá)率比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表2)。

        表2 SLE組不同活動(dòng)指數(shù)自身抗體表達(dá)陽(yáng)性率的比較[n(%)]

        2.3 三組自身抗體表達(dá)陽(yáng)性率的比較

        SLE組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNPS/Sm抗體陽(yáng)性表達(dá)率高于非SLE組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),非SLE組抗Nuc抗體陽(yáng)性表達(dá)率高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(表3)。

        表3 三組自身抗體表達(dá)陽(yáng)性率的比較[n(%)]

        2.4 抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體聯(lián)合檢測(cè)敏感度與特異度

        抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體定量檢測(cè)的特異度相對(duì)較高也故敏感度較低,結(jié)果表明采用三者聯(lián)合檢測(cè)的敏感度優(yōu)于單一檢測(cè)(表4,圖1)。

        表4 抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體聯(lián)合檢測(cè)敏感度與特異度

        圖1 抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體單一及聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線

        3 討論

        本研究發(fā)現(xiàn)SLE組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體水平均明顯高于非SLE組和對(duì)照組,抗dsDNA抗體在活動(dòng)組中明顯高于非活動(dòng)組,SLE組抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNPS/Sm抗體陽(yáng)性表達(dá)率也顯著高于非SLE組和對(duì)照組,同時(shí)發(fā)現(xiàn)三者聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度和特異度均顯著提高,對(duì)SLE早期診斷具有良好的補(bǔ)充作用。

        抗Nuc抗體是由His(H1、H2A、H2B、H3和H4)與dsDNA所組成的染色體的一種功能亞單位。體內(nèi)Nuc抗原主要是在細(xì)胞凋亡的過(guò)程中所產(chǎn)生的并且隨后釋放到細(xì)胞間質(zhì)之中,繼而誘使機(jī)體形成自身免疫反應(yīng)。一項(xiàng)外部研究結(jié)果表明:抗Nuc抗體獨(dú)立于抗dsDNA抗體[5-7]。18%的SLE患者血清只和Nuc反應(yīng)而不和dsDNA反應(yīng)。因此,聯(lián)合檢測(cè)抗Nuc與dsDNA抗體可大大提高SLE在血清學(xué)上的檢出率。

        抗DNA抗體可分為兩種不同類型:抗天然dsDNA抗體以及抗變性ssDNA抗體??筪sDNA抗體對(duì)SLE具有很高的特異性,常作為診斷SLE的依據(jù)之一[8]??筪sDNA抗體可能會(huì)對(duì)SLE患者的組織造成損傷,SLE患者的血液循環(huán)中,大分子DNA濃度較高,通過(guò)微血管可與多種器官結(jié)合,尤其是腎臟,抗dsDNA與DNA分子形成復(fù)合物在組織中沉淀介導(dǎo)疾病[9-11]。此外,隨著對(duì)疾病活動(dòng)程度加以控制,抗dsDNA抗體的滴度會(huì)出現(xiàn)下降甚至消失,抗dsDNA抗體特異性地與DNA結(jié)合后成為免疫復(fù)合物從而沉積在腎小球基底膜,抗dsDNA抗體還可以直接作用于腎小球抗原從而造成對(duì)SLE患者的腎損傷[12]。

        nRNP和Sm抗原均屬于小核糖核酸蛋白(small nuclear ribonucleo protein particle,snRNP)。有研究表明U-nRNP分子參與了信使RNA前體的剪切,抗U1-nRNP抗體的高滴度狀態(tài)是混合性結(jié)締組織病(mixed connective tissue disease,MTCD)的標(biāo)志,陽(yáng)性率為95%~100%,在部分SLE患者中亦能檢出抗U1-nRNP抗體并總伴有抗Sm抗體[13-14]。

        抗Nuc抗體同樣與各類自身免疫性疾病有關(guān)聯(lián),其最常見(jiàn)于SLE(50%~100%)和自身免疫性肝炎(40%~50%)??筪sDNA抗體針對(duì)SLE具有較高的特異性,常作為診斷SLE的依據(jù)之一,其陽(yáng)性率為40%~90%。研究表明抗dsDNA抗體和SLE的活動(dòng)性有一定的關(guān)系,特別是與SLE的腎損傷有關(guān),在本研究結(jié)果中這一報(bào)道也得到驗(yàn)證[15]??筺RNP/Sm抗體也是SLE的一種特異性標(biāo)志,常作為診斷SLE的依據(jù),約25%的SLE患者體內(nèi)出現(xiàn)抗nRNP/Sm抗體[16]。

        自身免疫性疾病的特征是在造成損傷的組織中出現(xiàn)自身抗體或免疫球蛋白,其是針對(duì)自身反應(yīng)性B淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的。當(dāng)前隨著實(shí)驗(yàn)室內(nèi)新型檢測(cè)技術(shù)的不斷革新,人們逐漸發(fā)現(xiàn)自身抗體也可存在于“健康人群”之中,對(duì)自身抗體研究的重點(diǎn)在于其對(duì)相應(yīng)疾病的預(yù)測(cè)作用以及早期的診斷價(jià)值,也包括對(duì)疾病的預(yù)后判斷和療效評(píng)判[17]。

        綜上所述,聯(lián)合檢測(cè)可大大提高SLE的診斷效率,在靈敏度顯著提高的同時(shí)特異度未明顯降低,其效果優(yōu)于單項(xiàng)檢測(cè)。因此,抗Nuc、抗dsDNA、抗nRNP/Sm抗體聯(lián)合檢測(cè)有利于SLE的早期、及時(shí)、正確的診斷和鑒別診斷,對(duì)SLE的早期治療及療效和預(yù)后監(jiān)測(cè)也尤為重要。

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