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        結(jié)直腸癌中突觸核蛋白-γ的表達及意義

        2022-11-25 00:58:29侯亞彬曹改改李靜茹郝崇華
        臨床與實驗病理學(xué)雜志 2022年6期
        關(guān)鍵詞:因素

        侯亞彬,張 宇,曹改改,李靜茹,郝崇華

        結(jié)直腸癌是消化系統(tǒng)常見的惡性腫瘤之一。2020年全球約有190萬結(jié)直腸癌新發(fā)病例,約93萬人死于結(jié)直腸癌[1]。結(jié)直腸癌早期癥狀不明顯,腸鏡檢查是結(jié)直腸癌早期診斷最可靠的方法,但由于檢查的侵入性、取材差異、患者依從性等因素,仍有一定的局限性[2]。血清CEA和CA199水平可輔助診斷結(jié)直腸癌,但缺乏特異性。突觸核蛋白基因家族是一種高度保守的,主要表達于突觸末梢、外周神經(jīng)組織和某些腫瘤中的小分子可溶蛋白,突觸核蛋白-γ(Synuclein-γ, SNCG)在多種惡性腫瘤中高表達,可通過MAPK、PI3K/AKT/mTOR通路及DNA啟動子甲基化等促進腫瘤細(xì)胞的增殖和遷移,包括乳腺癌、胃癌、肺癌、膀胱癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌以及子宮癌等[3-8]。本文采用免疫組化分析結(jié)直腸癌中SNCG表達及其與臨床病理特征的相關(guān)性,為探討SNCG作為新型腫瘤標(biāo)志物在結(jié)直腸癌中的意義奠定基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 一般資料收集2020年9月~2021年6月山西省人民醫(yī)院存檔的結(jié)直腸癌手術(shù)切除標(biāo)本126例,同時獲取相應(yīng)的癌旁組織及遠(yuǎn)端正常組織。其中男性74例,年齡30~83歲,平均(65.1±11.8)歲;女性52例,年齡37~82歲,平均(62.3±12.0)歲,所有患者術(shù)前均未行放、化療,均有完整的臨床病理資料。

        1.2 方法鼠抗人1#SNCG單克隆抗體由北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗室提供,兔抗人BRAF V600E抗體購自上海羅氏公司,鼠抗人HER-2抗體及二抗小鼠/兔聚合物購自北京中杉金橋公司,組織標(biāo)本經(jīng)10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,5 μm厚連續(xù)切片,免疫組化染色采用EnVision兩步法,按照試劑盒說明書進行操作。

        1.3 結(jié)果判讀SNCG及BRAF V600E染色結(jié)果判讀采用四值分類法進行評分:(1)按染色面積評分:<10%為0分,>10%為1分;(2)按染色強度評分:弱陽性為1分,陽性為2分,強陽性為3分。將兩項得分結(jié)果相加:≥3分為SNCG陽性,<3分為SNCG陰性。HER-2染色結(jié)果判讀:(1)無陽性染色或≤10%細(xì)胞呈現(xiàn)不完整的、微弱的細(xì)胞膜染色為陰性;(2)>10%細(xì)胞呈不完整或完整、微弱~強的細(xì)胞膜染色為陽性。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS 25.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。計數(shù)資料采用n(%)表示;腫瘤組織、癌旁組織及遠(yuǎn)端正常組織中SNCG的表達差異比較采用χ2檢驗;采用單因素分析篩選參數(shù)納入Logistic回歸模型,預(yù)測SNCG表達的危險因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 結(jié)直腸癌組織中SNCG的表達SNCG在結(jié)直腸癌、癌旁組織及遠(yuǎn)端正常組織中染色見圖1。126例結(jié)直腸癌腫瘤組織中SNCG的陽性率為65.1%(82/126),高于癌旁組織(0,0/126)及遠(yuǎn)端組織(0,0/126)(P<0.05)。

        2.2 SNCG表達與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系單因素分析結(jié)果顯示,SNCG表達與結(jié)直腸癌病理類型、血管內(nèi)癌栓、侵犯深度、TNM分期、分級和HER-2表達相關(guān)(P<0.05,表1),即黏液腺癌、血管內(nèi)存在癌栓、侵犯深度T3+T4、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期、腫瘤分級G3級以及HER-2陽性患者組織中SNCG高表達。

        2.3 SNCG表達與結(jié)直腸癌患者預(yù)后的關(guān)系以SNCG表達為因變量,各自變量賦值說明見表2,采用逐步法多因素Logistic回歸分析結(jié)直腸癌中SNCG表達的危險因素,結(jié)果顯示,黏液腺癌、血管內(nèi)存在癌栓、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期以及HER-2陽性是結(jié)直腸癌組織中SNCG表達的獨立危險因素(P<0.05,表2)。

        3 討論

        目前,雖然在結(jié)直腸癌的診斷和治療方面取得了進展,但是結(jié)直腸癌的發(fā)病率仍在增加,生存率未發(fā)生較顯著的變化,因此有必要探尋結(jié)直腸癌新型腫瘤標(biāo)志物和治療靶位。國內(nèi)外有關(guān)SNCG表達與結(jié)直腸癌的相關(guān)性研究較少,因此本實驗對結(jié)直腸癌組織中SNCG的表達及危險因素進行分析。

        SNCG表達主要與腫瘤性疾病相關(guān),其可提高細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases, ERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK)的磷酸化水平,增強絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)通路活性,促進腫瘤的增殖和遷移。同時,還可提高磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)、蛋白激酶B(即AKT)及雷帕霉素受體蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)的蛋白磷酸化水平,介導(dǎo)PI3K/AKT/mTOR信號通路促進癌細(xì)胞的生物學(xué)行為。此外,SNCG啟動子中的胞嘧啶-磷酸-鳥嘌呤(cytosine phosphoric acid guanine, CpG)島的去甲基化可使SNCG基因上調(diào),從而促進癌細(xì)胞的侵襲、遷移和增殖能力[9-12]。本實驗SNCG在結(jié)直腸癌中的陽性率為65.1%,高于對應(yīng)癌旁組織和遠(yuǎn)端正常組織。其在乳腺癌、胃癌、卵巢癌、口腔鱗狀細(xì)胞癌[13-15]中也有類似的表達,表明SNCG可作為一種細(xì)胞惡變的標(biāo)志物。本組單因素和多因素Logistic分析結(jié)果顯示,結(jié)直腸癌中黏液腺癌、腫瘤細(xì)胞浸潤組織越深、浸潤血管、TNM分期越晚、分級越高及HER-2陽性結(jié)直腸癌患者中SNCG陽性率越高。文獻報道黏液腺癌、浸潤血管、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期以及HER-2陽性結(jié)直腸癌患者的預(yù)后較差[16]。本實驗結(jié)果顯示,黏液腺癌、浸潤血管、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期以及HER-2陽性可作為結(jié)直腸癌中SNCG陽性的獨立危險因素,表明SNCG表達與結(jié)直腸癌患者預(yù)后存在一定相關(guān)性。

        綜上,SNCG在結(jié)直腸癌中高表達,其在腫瘤細(xì)胞增殖、浸潤等方面發(fā)揮重要作用,可作為一種反映腫瘤惡性進展程度的標(biāo)志物,對于預(yù)測結(jié)直腸癌患者病情的惡變程度和治療預(yù)后等具有較廣的臨床應(yīng)用價值。

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