李東航 江文洋 汪 巍 耿 慶

武漢大學(xué)人民醫(yī)院胸外科 湖北 武漢 430060

據(jù)全球癌癥統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)報(bào)道，消化系統(tǒng)惡性腫瘤發(fā)病率占據(jù)各系統(tǒng)腫瘤的首位，死亡病例數(shù)約占癌癥總致死量的25%［1］。其病因眾多且相互作用，通常被認(rèn)為是由宿主遺傳和環(huán)境因素引起，但有證據(jù)表明約20%的惡性腫瘤與人體微生物有關(guān)［2］。作為體內(nèi)微生物菌群的巨大儲(chǔ)存庫(kù)，消化道微生物菌群在維持消化道黏膜屏障結(jié)構(gòu)完整性、宿主營(yíng)養(yǎng)與藥物代謝、免疫調(diào)節(jié)及防御等方面發(fā)揮著獨(dú)特的作用，影響著人體正常生理功能和疾病狀態(tài)［3］。而存在于消化道黏膜部位的微生物菌群更是直接成為腫瘤微環(huán)境的一部分，此外瘤內(nèi)的微生物還通過(guò)改變宿主細(xì)胞的增殖與死亡、抑制免疫系統(tǒng)功能、誘導(dǎo)產(chǎn)生炎性與癌癥因子、改變宿主食物藥物代謝等多種方式影響著腫瘤的生長(zhǎng)和擴(kuò)散［4］。最近的研究發(fā)現(xiàn)具核梭桿菌（Fusobacterium nucleatum,F. n）在多種消化道惡性腫瘤中被檢測(cè)到，并與不良預(yù)后相關(guān)，更是作為一種加速結(jié)直腸癌進(jìn)展和嚴(yán)重程度的“腫瘤細(xì)菌”而引起廣泛關(guān)注［5，6］。在此，本文就F. n在消化系統(tǒng)惡性腫瘤的生長(zhǎng)、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及治療反應(yīng)中的作用和可能機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 具核梭桿菌概述

具核梭桿菌是擬桿菌科梭桿菌屬的一種，呈棒狀，末端為梭形，不活動(dòng)，屬革蘭陰性無(wú)芽孢專性厭氧菌，可與宿主共生，常駐于口腔、陰道和胃腸道黏膜，可導(dǎo)致機(jī)會(huì)性感染，并與人體和高等哺乳動(dòng)物的多種疾病相關(guān)［7］。自1992年Korr 首次將F. n定義為梭桿菌屬以來(lái)，先后不少研究發(fā)現(xiàn)F. n對(duì)宿主細(xì)胞有很強(qiáng)的黏附性和侵襲性，并構(gòu)成其毒力的重要組成部分。F. n表面存在FadA、Fap2、RadD 等多種黏附素，可以黏附于上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、多形核白細(xì)胞、T 細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等宿主細(xì)胞表面，也可黏附于唾液大分子和細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，F(xiàn). n表達(dá)的外膜蛋白（outer membrane proteins,OMPs）也參與細(xì)菌共聚集和生物膜的形成，通過(guò)黏附定植宿主細(xì)胞后可誘發(fā)機(jī)體一系列免疫反應(yīng)［8，9］。作為革蘭陰性菌的一員，F(xiàn).n同樣可以分泌外膜囊泡（outer?membrane vesicles，OMVs），用于含有FadA、MORN2 和YadA 等毒力因子的傳遞［10］。此外，F(xiàn). n通過(guò)黏附血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)血液傳播至全身［11］。在代謝途徑上，經(jīng)蛋白組學(xué)分析證實(shí)，F(xiàn). n通過(guò)氨基酸和葡萄糖酵解，引起局部丁酸聚集，并通過(guò)分泌細(xì)菌素等產(chǎn)物，抑制其他微生物的生長(zhǎng)，從而形成優(yōu)勢(shì)菌群［12］。F.n具有基本的電子傳輸鏈，能夠在腫瘤低氧微環(huán)境中持續(xù)緩慢復(fù)制，加之細(xì)菌共聚集和生物膜的形成，增強(qiáng)了其氧耐受性，有利于其在腫瘤厭氧微環(huán)境中的生存［13］。

2 具核梭桿菌與消化系統(tǒng)惡性腫瘤的關(guān)系

近年來(lái)，已有許多研究發(fā)現(xiàn)在消化系統(tǒng)惡性腫瘤患者中檢測(cè)到F. n的存在，包括消化道和消化腺惡性腫瘤。盡管早期研究發(fā)現(xiàn)F.n主要定植于口腔黏膜，但整個(gè)消化道具有多種類似的黏膜結(jié)構(gòu)，為F. n的遷徙定植提供了前提條件，同時(shí)腫瘤組織的厭氧微環(huán)境適于F. n的生長(zhǎng)繁殖［14］。此外，腫瘤患者的淋巴組織中可檢測(cè)到該菌，血液樣本中可檢測(cè)到該菌抗體，這表明F. n可通過(guò)淋巴和血液途徑到達(dá)遠(yuǎn)處病變部位，并可能參與到腫瘤的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［15］。本文通過(guò)以下兩部分闡述F. n與消化系統(tǒng)惡性腫瘤的關(guān)系。

2.1 具核梭桿菌與消化道惡性腫瘤

2.1.1 具核梭桿菌與口腔鱗狀細(xì)胞癌(oral squa?mous cell carcinoma, OSCC) 研究發(fā)現(xiàn)在牙周炎及OSCC 患者的唾液、牙菌斑、腫瘤黏膜中，與相應(yīng)的正常樣本相比，前者均檢測(cè)到F.n的顯著富集，且檢出量與OSCC 的高發(fā)生率、高級(jí)別腫瘤分期及不良預(yù)后有關(guān)［16］。在健康的口腔環(huán)境內(nèi)，F(xiàn). n可在牙齒表面形成口腔生物膜，并與其他微生物形成共生。在某些致病因素下，F(xiàn). n可直接激發(fā)宿主發(fā)生免疫反應(yīng)，也可與其他病原體形成共聚橋，增加牙周炎易感性，而牙周炎可增加OSCC 的發(fā)生率［16］。具體而言，F(xiàn). n通過(guò)促進(jìn)炎癥的發(fā)生和下調(diào)免疫應(yīng)答，參與到OSCC 的發(fā)生發(fā)展。一方面，F(xiàn).n可通過(guò)上調(diào)G 蛋白偶聯(lián)受體和Toll 樣受體（Toll?like recep?tors, TLR）促進(jìn)炎性因子（包括TNF、IL?6 和IL?8）的分泌，而IL?6 已被證實(shí)為癌癥預(yù)后不良標(biāo)志物，在抗腫瘤細(xì)胞凋亡、促腫瘤血管生成和侵襲方面，IL?8 與其有著類似作用，二者共同推動(dòng)著腫瘤的發(fā)生和進(jìn)展［17］。另一方面，F(xiàn). n促使骨髓源性細(xì)胞聚集，誘導(dǎo)產(chǎn)生IL?10 和ROS，經(jīng)Th1 炎性反應(yīng)自我限制途徑介導(dǎo)T 細(xì)胞凋亡、抑制T 細(xì)胞增殖和免疫應(yīng)答，及抑制樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cells,DCs）的抗原提呈來(lái)降低機(jī)體的適應(yīng)性免疫。除此之外，F(xiàn). n可與牙齦卟啉單胞菌協(xié)同作用加重牙周局部炎性反應(yīng)，抑制免疫防御，促進(jìn)OSCC 的進(jìn)展［18］。

2.1.2 具核梭桿菌與食管癌 盡管微生態(tài)在食管癌發(fā)生發(fā)展中的機(jī)制研究相對(duì)不多，但近年來(lái)，已有一些研究顯示，F(xiàn). n參與到食管癌的發(fā)生發(fā)展［19，20］。運(yùn)用高通量16S rRNA 基因擴(kuò)增子對(duì)86例食管黏膜組織測(cè)序，Elliott 等［19］發(fā)現(xiàn)，與正常食管黏膜組織相比，食管癌患者腫瘤黏膜組織中F. n明顯富集，這與我們前期在電子胃鏡下取樣食管黏膜組織得出的結(jié)論一致。同樣地，對(duì)于食管癌手術(shù)切除的癌組織黏膜，Yamamura 等［20］采用qRCR 法檢測(cè)了325例，結(jié)果顯示F. nDNA 含量明顯高于正常食管黏膜，且F. nDNA 陽(yáng)性與患者不良預(yù)后顯著相關(guān)，這一作用是趨化因子CCL20 促進(jìn)腫瘤侵襲所導(dǎo)致的，同時(shí)指出其可作為預(yù)后生物標(biāo)志物［21］。在我國(guó)食管癌高發(fā)地區(qū)，Shao 等［22］對(duì)67例食管癌患者的腫瘤與非腫瘤黏膜組織匹配樣本行16S rRNA 測(cè)序，結(jié)果發(fā)現(xiàn)癌組織中F. n的相對(duì)豐度與腫瘤分期呈正相關(guān)。不論是何種取樣方式、樣本類型、檢測(cè)方法，均表明在食管癌黏膜組織中F.n的顯著富集，其具體參與腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制仍需深入探討。

2.1.3 具核梭桿菌與胃癌(pancreatic carcinoma)幽門(mén)螺桿菌（Helicobacter pylori,H. p）已被公認(rèn)為胃癌發(fā)生的主要病因之一，然而仍有約30%的H. p陰性的胃癌患者，對(duì)于這部分患者已不能用H. p感染加以解釋，這表明其他微生物菌群可能也參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展［23］。盡管在胃癌患者中F. n的檢出率不高（約10%），但這部分患者仍不容忽視［24］。在一個(gè)胃癌高風(fēng)險(xiǎn)地區(qū)，Castano?Rodriguez 等［25］對(duì)胃癌患者和對(duì)照組正常人群的胃微生物群分別行16S rRNA 測(cè)序，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在胃癌中F. n出現(xiàn)富集；Hsieh 等［26］進(jìn)一步將其被認(rèn)定為胃癌特征細(xì)菌，并提出聯(lián)合梭狀芽孢桿菌可作為胃癌診斷的生物標(biāo)志物，其診斷敏感度高達(dá)100%，特異度約70%。在后續(xù)的研究中應(yīng)重視F. n在胃癌發(fā)生發(fā)展中的作用，并進(jìn)一步證實(shí)聯(lián)合其他致病菌診斷并提示胃癌不良預(yù)后的可能性。

2.1.4 具核梭桿菌與結(jié)直腸癌(colorectal cancer，CRC) 鑒于結(jié)直腸長(zhǎng)期暴露于腸道微生物的環(huán)境下，腸道微生物菌群失調(diào)與CRC 的發(fā)生發(fā)展密不可分，甚至是其病因之一。作為口腔及腸道的常見(jiàn)菌群，已有研究表明，CRC 患者的口腔與結(jié)腸直腸黏膜內(nèi)有同源的F. n菌株［15］，并在整個(gè)大腸中均有分布［27］，其豐度與結(jié)直腸腺瘤?癌癥步驟模型高度一致，表明F. n的高富集可作為直腸癌高風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)標(biāo)志物［28］。F. n在CRC 組織中的富集已通過(guò)DNA測(cè)序、RNA 測(cè)序、16S rRNA、基因擴(kuò)增子等全基因組測(cè)序及定量PCR 和熒光原位雜交的全面驗(yàn)證［7］。多項(xiàng)研究表明結(jié)直腸腫瘤中F.n的豐度顯著高于正常對(duì)照樣本［13，29］，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)其含量與腫瘤的大小、臨床分期、KRAS 突變相關(guān)［6，30，31］，并可促進(jìn)結(jié)直腸癌 的 轉(zhuǎn) 移［10，32，33］，同時(shí)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)［14］。日本學(xué)者進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，F(xiàn). n豐度與CRC 患者較短的總 生存期亦相關(guān)［5，34，35］。同樣地，在CRC 患者的糞便中富集的F. n也具有潛在的預(yù)測(cè)和診斷價(jià)值，這一發(fā)現(xiàn)有力地支持糞便微生物因子作為CRC 檢測(cè)無(wú)創(chuàng)性生物標(biāo)志物的可能性［28，36］，聯(lián)合血清中抗F. n的IgA 或IgG 抗體也有助于診斷［33］。此外，F(xiàn). n的富集還會(huì)影響CRC 的治療反應(yīng)，主要表現(xiàn)為增強(qiáng)化療耐藥。Zhang 等［37］的研究表明在根治性手術(shù)后予以標(biāo)準(zhǔn)5?FU 輔助化療的晚期CRC 患者中，其高豐度的F.n與化療耐藥性相關(guān)；另有學(xué)者［38］發(fā)現(xiàn)F.n的高豐度改變了CRC 的化療反應(yīng)；Ramos 等[39]進(jìn)一步指出根除F.n將可能改善化療效果。一些研究還表明，F(xiàn). n還與包含BRAF、KRAS、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI）、CpG 島甲基化表型（CpG island methylator phenotype，CIMP）等在內(nèi)的結(jié)直腸體細(xì)胞突變和表觀遺傳異常有關(guān)［5，34］。

2.2 具核梭桿菌與消化腺惡性腫瘤的關(guān)系

2.2.1 具核梭桿菌與肝癌F. n在原發(fā)性肝癌的癌組織中檢出率很低，Bullman 等［40］與Yamamura等［24］的兩項(xiàng)測(cè)序研究中，在肝癌組織中均沒(méi)有明顯檢測(cè)到F.n的存在。但在肥胖誘導(dǎo)的肝癌小鼠模型中，腸道微生物菌群中F.n明顯富集，這一機(jī)制主要與膽汁酸、腸道菌群的失調(diào)有關(guān)，而F.n在其中也發(fā)揮了一定的作用［41］。

2.2.2 具核梭桿菌與胰腺癌 在胰腺癌組織中，F(xiàn). n的檢出率較低。Mitsuhashi 等［42］利用283例胰腺導(dǎo)管腺癌患者的數(shù)據(jù)庫(kù)，分析出癌組織中梭桿菌檢出率僅為8.8%，且腫瘤中的梭菌狀態(tài)與臨床分期和分子特征均無(wú)明顯相關(guān)，但與胰腺癌預(yù)后不良獨(dú)立相關(guān)，提示梭桿菌屬可能是胰腺癌預(yù)后生物標(biāo)志物。然而，Yamamura 等［24］在胰腺癌組織中沒(méi)有檢測(cè)到F. n。即便如此，但Alkharaan 等［41］發(fā)現(xiàn)，在血液和唾液樣本中抗F. n抗體與胰腺囊性腫瘤（胰腺癌的癌前病變）顯著相關(guān)，并表明口腔微生物的體液免疫程度可反映胰腺囊性腫瘤的嚴(yán)重程度。然而，在目前的研究中，尚無(wú)有明確的證據(jù)表明F.n在胰腺癌發(fā)生發(fā)展中起到確切作用，其具體機(jī)制仍需深入探討。

3 具核梭桿菌在消化系統(tǒng)惡性腫瘤的可能致病機(jī)制

F.n在包含口腔鱗癌、食管癌、結(jié)直腸癌等消化道系統(tǒng)多種惡性腫瘤中均有檢出，且不同程度地與其中一些惡性腫瘤的臨床分期、診斷識(shí)別、治療反應(yīng)及不良預(yù)后相關(guān)。目前關(guān)于F.n對(duì)消化道惡性腫瘤的作用機(jī)制研究取得了一定進(jìn)展，已有的文獻(xiàn)表明，黏附分子、毒力蛋白、外膜囊泡、細(xì)菌代謝物等通過(guò)黏附侵襲、促炎反應(yīng)、免疫抑制和免疫逃逸等方式塑造了有利于腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移的微環(huán)境，從而參與到腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程。本文對(duì)F.n在消化系統(tǒng)惡性腫瘤發(fā)生中的潛在機(jī)制進(jìn)行探討和總結(jié)。

3.1 具核梭桿菌毒力因子與黏附定植F. n表面存在FadA、Fap2、RadD 等多種黏附素、與其分泌的外膜囊泡和蛋白一道構(gòu)成其主要的毒力成分。Fap2 是一種半乳糖抑制黏附素，可參與細(xì)菌共聚集及黏附［43］。盡管F. n主要存在于口腔，但在胃腸道中檢出其同源菌群并影響胃腸道腫瘤的發(fā)生，除了經(jīng)口進(jìn)入胃腸道，血源性遷移也是其遷徙到胃腸道腫瘤中定植的理想途徑［15］。在分別予以APCMin/+小鼠口服、靜脈內(nèi)注射細(xì)菌F.n后，其在小鼠結(jié)直腸腫瘤組織中的定位表達(dá)增加，并促進(jìn)小鼠結(jié)直腸腫瘤的進(jìn)展［44］，后者是通過(guò)F.n的Fap2 結(jié)合腫瘤組織過(guò)表達(dá)特定的糖殘基Gal?GalNAc，經(jīng)血液循環(huán)富集于腫瘤組織［9］，此外，F(xiàn)adA 是F. n中高度保守的黏附蛋白和毒力致癌因子，可與血管內(nèi)皮鈣黏蛋白結(jié)合，使其在細(xì)胞中的分布位置發(fā)生改變，致內(nèi)皮細(xì)胞間連接破壞，通透性增加，從而介導(dǎo)F.n的血管侵入與循環(huán)播散［11］。而F. n這一入血過(guò)程可能與牙周炎相關(guān)性牙齦出血或牙科手術(shù)導(dǎo)致的一過(guò)性菌血癥有關(guān)。在口腔腫瘤中，F(xiàn). n表達(dá)的外膜蛋白FomA，可在細(xì)菌共聚集和生物膜形成中發(fā)揮作用，有利于牙齦卟啉單胞菌等其他致病菌的共生，協(xié)同發(fā)揮促腫瘤作用。

3.2 具核梭桿菌促腫瘤炎性環(huán)境與腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移F. n通過(guò)自身的表面蛋白黏附于宿主細(xì)胞，借助其自身的毒力因子，激活一系列炎性反應(yīng)，為腫瘤細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移提供適宜的微環(huán)境。一方面，F(xiàn)adA 與宿主細(xì)胞E?鈣黏著蛋白結(jié)合，通過(guò)膜蛋白A1 的表達(dá)上調(diào)，激活β?catenin 信號(hào)通路，進(jìn)而誘導(dǎo)NF?κB、Wnt7b 和癌基因Myc（C?Myc）和細(xì)胞周期蛋白D1（Cyclin D1）的表達(dá)［45］，其中，膜聯(lián)蛋白A1是CRC 的關(guān)鍵生長(zhǎng)刺激因子［46］。另一方面，F(xiàn). n表面脂多糖可被Toll 樣受體4（TLR4）所識(shí)別，通過(guò)TLR4/P?PAK1/β?catenin 途徑激活β?catenin 信號(hào)通路，上調(diào)NF?κB、C?Myc 和Cyclin D1 的表達(dá)，NF?κB激活COX?2、IL?8、IL?6 和基質(zhì)金屬蛋白酶?3 和9（MMP3 和MMP9）等一系列促炎因子，形成局部持續(xù)的慢性炎性環(huán)境，并可通過(guò)IKK?β 依賴性激活通路抑制腸道上皮細(xì)胞的凋亡，而Myc、Cyclin D1 也可分別通過(guò)抗細(xì)胞凋亡、影響細(xì)胞周期來(lái)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖，并影響總體生存和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［47］。

同樣具有革蘭陰性菌的特性——分泌OMVs，F(xiàn). n的OMVs 可傳遞毒性因子，在表面蛋白和黏附分子與宿主細(xì)胞結(jié)合后，OMVs 內(nèi)的蛋白酶通過(guò)降解緊密連接蛋白β?catenin，促進(jìn)細(xì)菌入侵后釋放毒力因子，誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)［48］。此外，F(xiàn). n的OMVs 可誘導(dǎo)上皮?間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial to mesenchy?mal tran?sition，EMT），促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移［35］。除了促進(jìn)EMT外，Chen 等［32］發(fā)現(xiàn)通過(guò)特異性靶向CARD3，F(xiàn). n可以誘導(dǎo)自噬流、自噬小體生成，刺激產(chǎn)生自噬相關(guān)蛋白（如p62、Beclin1、ATG5 和ATG7），進(jìn)而激活自噬來(lái)促進(jìn)結(jié)直腸癌的轉(zhuǎn)移。

3.3 具核梭桿菌與免疫抑制F. n可通過(guò)抑制自然殺傷（natural killer cell，NK）細(xì)胞、細(xì)胞毒性T 淋巴細(xì)胞（cytotoxic T lymphocyte，CTL）對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用介導(dǎo)免疫逃逸［8］。NK、CTL、T 輔助細(xì)胞（helper T cell，Th）等浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞可表達(dá)T 細(xì)胞免疫球蛋白和ITIM 結(jié)構(gòu)域蛋白（TIGIT）受體，而F. n的Fap2 通過(guò)與TIGIT 相關(guān)作用并引發(fā)抑制性級(jí)聯(lián)反應(yīng)、下調(diào)TNF 的表達(dá)，進(jìn)而抑制這些細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用，保護(hù)F. n和鄰近腫瘤細(xì)胞免于細(xì)胞殺傷［8］。Gur 等［49］研究發(fā)現(xiàn)F. n還可結(jié)合并激活人體NK 細(xì)胞表達(dá)的抑制性受體CEACAM1，調(diào)節(jié)T 細(xì)胞衰竭和抑制NK 細(xì)胞活性介導(dǎo)免疫逃逸。此外，F(xiàn). n還能夠誘導(dǎo)Jurkat T 細(xì)胞和外周血單核細(xì)胞的凋亡、介導(dǎo)增殖中的T 細(xì)胞停滯于細(xì)胞周期的G1期，以影響T 細(xì)胞的增殖，進(jìn)而抑制T 細(xì)胞的殺傷效應(yīng)［50］。髓源性抑制細(xì)胞（myeloid?derived sup?pressor cells，MDSCs），是DCs 細(xì) 胞、巨 噬 細(xì) 胞 和（或）粒細(xì)胞的前體，具有顯著抑制免疫細(xì)胞應(yīng)答的能力，已證實(shí)可抑制T 細(xì)胞的功能，在癌癥中發(fā)揮著 免 疫 抑 制 作 用［51］。Toor 等［52］發(fā) 現(xiàn) 感 染F. n的CRC 患者，其腫瘤組織和外周血中MDSCs 顯著增加，其表達(dá)高水平的一氧化氮合酶和精氨酸酶1 可抑制T 細(xì)胞而逃避免疫殺傷。MDSCs 還可與巨噬細(xì)胞發(fā)生作用，使其從腫瘤殺傷細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)槔谀[瘤生長(zhǎng)細(xì)胞［53］。此外，在飼喂F. n的小鼠腸道內(nèi)，CD103＋調(diào)節(jié)性DC 細(xì)胞顯著增加，通過(guò)增強(qiáng)Foxp3+調(diào)節(jié)T 細(xì)胞的表達(dá)，減弱抗腫瘤免疫［13］。

F. n還可影響腫瘤局部免疫微環(huán)境，使腫瘤細(xì)胞更易生長(zhǎng)。Kostic 等［13］發(fā)現(xiàn)飼喂F. n的小鼠體內(nèi)腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（tumor?associated macrophages，TAMs）數(shù)量顯著增加，引起CD4+T 細(xì)胞抑制，TAMs 還可通過(guò)產(chǎn)生表皮生長(zhǎng)和促血管生存的介質(zhì)等，介導(dǎo)血管生長(zhǎng)，為腫瘤細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)［54］。此外，缺氧條件下，缺氧誘導(dǎo)因子?1（hypoxia inducible factor?1，HIF?1）可增加血管生成因子的表達(dá)，包括血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth fac?tor，VEGF）及其受體（VEGFR）［55］，據(jù)此，Mendes等［56］發(fā)現(xiàn)感染了F. n的上皮細(xì)胞可通過(guò)VEGF1 和VEGF2 增加血管生成。此外，F(xiàn). n可引起骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表達(dá)，而后者可減少T 細(xì)胞向腫瘤的浸潤(rùn)，并上調(diào)MMP9，從而促進(jìn)血管生成，同時(shí)還可繼續(xù)保持干細(xì)胞特性［57］。

3.4 具核梭桿菌相關(guān)性microRNA 和代謝物F. n相關(guān)性微小核糖核酸（miRNAs）通過(guò)誘發(fā)炎性環(huán)境、促進(jìn)腫瘤增殖和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、調(diào)節(jié)宿主細(xì)胞對(duì)病原體反應(yīng)等方式，在胃腸道惡性腫瘤進(jìn)程中發(fā)揮了一定作用，且血清中特異性高microRNA 水平具有作為不良預(yù)后和預(yù)測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移生物標(biāo)志物的可能［31，58，59］。已有研究表明，miR?21 可以促進(jìn)腸道慢性炎癥和結(jié)腸炎相關(guān)性結(jié)直腸癌的發(fā)生，并被認(rèn)為是細(xì)菌的直接靶標(biāo)［47，59］。Yang 等［47］進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn). n可激活結(jié)直腸癌細(xì)胞中TLR4/MYD88/NFκB 信號(hào)通路，上調(diào)miR?21 的表達(dá)，進(jìn)而下調(diào)其靶標(biāo)RASA1，抑制RASA1 與RAS 癌蛋白結(jié)合并使其失活這一效應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤的發(fā)生。通過(guò)mi?croRNA 相互作用網(wǎng)絡(luò)，Proen?a 等［60］發(fā)現(xiàn)通過(guò)F. n的TLR?2/TLR?4 依賴性反應(yīng)，結(jié)直腸癌患者中miR?34a 表達(dá)上調(diào)，通過(guò)作用于NFκB 激活I(lǐng)L?1β、IL?6、IL?8 等炎性因子，加重腫瘤局部炎性反應(yīng)。Guo等［10］發(fā)現(xiàn)在感染F. n的結(jié)直腸癌患者中，腫瘤細(xì)胞來(lái)源的外泌體通過(guò)選擇性攜帶miR?1246/92b?3p/27a?3p 和CXCL16/RhoA/IL?8，從感染F. n的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到非感染細(xì)胞中，以增加腫瘤細(xì)胞的遷移能力并促進(jìn)腫瘤轉(zhuǎn)移，臨床樣本證實(shí)血液循環(huán)中外泌體攜帶的miR?1246/92b?3p/27a?3p 和CXCL16 水平與結(jié)直腸癌患者的F.n豐度和腫瘤分期密切相關(guān)。在巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)期間，microRNA?21 可被F. n誘導(dǎo)，通過(guò)增加IL?10 和前列腺素E2的水平，降低DC細(xì)胞的抗原呈遞能力和T 細(xì)胞增殖以抑制抗腫瘤T細(xì)胞介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫［58］。有研究［36］發(fā)現(xiàn)microR?NA?21 與CRC 中的F. n的豐度呈正相關(guān)，通過(guò)抑制p38 基因的表達(dá)，減少DC 細(xì)胞的產(chǎn)生，抑制其在TLR 介導(dǎo)的微生物識(shí)別，從而有利于F. n等致病菌的增殖。此外，部分microRNA 也促進(jìn)了腸道腫瘤的化療耐藥和復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，F(xiàn). n通過(guò)靶向TLR4/MYD88 先天性免疫信號(hào)傳導(dǎo)和特定的microRNA，激活自噬途徑，從而影響化學(xué)治療反應(yīng)［37］。

F.n利用腫瘤微環(huán)境中的肽和氨基酸作為營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，其氨基酸代謝產(chǎn)物主要為短鏈脂肪酸（SCFA）和甲?；?甲硫?；?亮氨酰?苯丙氨酸，二者是髓樣細(xì)胞的趨化劑，可誘導(dǎo)髓樣細(xì)胞的聚集。同時(shí)F.n的特異性電子傳遞鏈可使其能夠在低氧條件的腫瘤微環(huán)境中逐漸復(fù)制，維持其富集狀態(tài)，進(jìn)而通過(guò)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、血管生長(zhǎng)或免疫細(xì)胞浸潤(rùn)，使腫瘤微環(huán)境隨著時(shí)間的推移變得更易容瘤［13］。

4 展望

越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)識(shí)到，人體微生物菌群與惡性腫瘤有著廣泛而復(fù)雜的聯(lián)系，尤其是具核梭桿菌，與人體共生還是對(duì)人體致病取決于微生態(tài)的平衡狀況。盡管在消化系統(tǒng)不同部位的惡性腫瘤中檢出率存在差異，但F. n仍通過(guò)多種機(jī)制不同程度地參與到惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。后續(xù)的研究方向包括：利用多組學(xué)和生物信息分析深入探討F. n與宿主的相互作用，包括基因、RNA、蛋白等水平的交互；繼續(xù)揭示F. n在不同部位、不同時(shí)期、不同類型的消化系統(tǒng)惡性腫瘤中的潛在機(jī)制；探討F. n的特性用以惡性腫瘤的早期預(yù)測(cè)、診斷識(shí)別、預(yù)后判斷等；有望開(kāi)發(fā)出微生態(tài)制劑、益生菌移植、菌群疫苗等靶向微生態(tài)療法維持機(jī)體的菌群穩(wěn)態(tài)，制定出菌群相關(guān)惡性腫瘤的精準(zhǔn)化防治策略。