喻斌 伍慶輝

江西省萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院輸血科，江西萍鄉(xiāng) 337000

臨床輸血過程中，僅ABO血型相同時才能輸血，尤其對于輸血量較大者。而對于血型不符合患者，將會發(fā)生凝血反應，嚴重者可增加臨床死亡率[1]。ABO血型系統(tǒng)則主要依據(jù)紅細胞表面是否存在特異性抗原進行分類[2]。目前共發(fā)現(xiàn)35個人類血型系統(tǒng)，但臨床試驗中ABO血型系統(tǒng)與Th血型的臨床意義最為重要。其中，ABO血型分為A、B、AB及O四型，Rh血型則分為陽性與陰性兩種[3]。輸血是臨床上常用的治療干預方法，借助成分輸血技術，能降低輸血不良事件發(fā)生率，但會增加患者溶血性輸血反應發(fā)生率[4]。血型鑒定主要用于臨床腧穴、不孕癥和新生兒溶血癥病因分析、親子鑒定及在皮膚、腎移植等器官移植的時候能選擇ABO血型相符的供體。不規(guī)則抗體是由妊娠、器官移植、輸血/血液制品等免疫刺激作用下產(chǎn)生的ABO血型系統(tǒng)意外的血型抗體，主要為IgG，少數(shù)可為IgM。不規(guī)則抗體的存在能引起正反定血型不一致、主次測交叉配血不合及紅細胞輸血無效，增加新生兒溶血病等。但是，血型鑒定過程中ABO血型正反定型不符發(fā)生率較高，將會增加輸血風險[5]。本研究以進行輸血治療患者為對象，探討凝集法在血型正反定型不符鑒定中的價值及不規(guī)則抗體陽性特異性結果分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年4月至2020年5月進行輸血治療患者181例為研究對象，患者男100例，女81例；年齡21～54歲，平均（41.29±4.35）歲；疾病類型：惡性腫瘤32例，再生障礙性貧血41例，多發(fā)性骨髓瘤30例，腦出血26例，外傷28例，類風濕關節(jié)炎24例。納入標準：①所有患者均擬行輸血治療[6]，且治療前均完成血型正反定型及Rh定型分析；②生命體征尚穩(wěn)定，具有完整的化驗報告單。排除標準：①認知功能異?；蛘J為因素因子的ABO血型正反定型不符；②治療期間死亡、嚴重肝腎功能異常者。本研究已獲萍鄉(xiāng)市人民醫(yī)院倫理委員會批準，患者及家屬均簽署同意書。

1.2 方法

1.2.1 主要儀器與試劑主要儀器：Ortho BioVuo血型分析系統(tǒng)（購自于美國強生公司），血庫專用自動平衡離心機（型號：L600A，購買于湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有限公司），微量可調(diào)移液器（購自于德國Eppendorf公司）。

主要試劑：抗A抗B血型定型試劑、RhD（IgM）血型定型試劑（購自于上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，試劑盒生產(chǎn)批號：20187241）；人ABO血型反定型用紅細胞試劑盒（紅細胞凝集法）（購自于美國Immucor公司，試劑盒生產(chǎn)批號：20140026）；抗D（IgG+IgM）血型定型試劑[購自于宜美康（加拿大）生物制品有限公司，試劑盒生產(chǎn)批號：20167351]；抗D（IgG）血型定型試劑、抗C（IgM）血型定型試劑、抗c（IgM）血型定型試劑、抗E（IgM）血型定型試劑、抗e（IgM）血型定型試劑、抗人球蛋白（IgG，C3d）檢測試劑盒（購自于上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，試劑盒生產(chǎn)批號：20192581）。

1.2.2 血型正反定型和Rh定型分析采用凝集法完成血型正反定型和Rh定型分析。借助全自動血型儀檢測每例患者血液標本的ABO正反型及Rh血型。對于ABO血型正反定型不相符時，則需要根據(jù)ABO疑難血型分布分析法對不符合標本進行正反定型分析[7]。①首先需要排除人為因素和操作失誤、試劑盒質(zhì)量不過關等問題，重新采集血液標本進行檢測；②登錄醫(yī)院信息網(wǎng)，分析醫(yī)院以往正反定型不一致常見原因，必要時可借助可選擇鹽水法、抗人球蛋白試管法及全自動血型分析儀等完成不規(guī)則抗體篩查進行驗證[8]。③根據(jù)正反定型、Rh定型不符的原因?qū)υ囼灲Y果進行綜合判斷，分析血型正反定型不符鑒定結果、原因，對不規(guī)則抗體陽性特異性結果進行分析，以期提高輸血安全性[9-10]。

1.3 觀察指標及評價標準

①血型抗體檢測結果。入組患者均完成血型鑒定，分析所有患者血型抗體檢測結果。②ABO血型正反型不符原因。統(tǒng)計ABO血型正反型不符原因，包括：造血干細胞移植、抗原減弱或發(fā)生缺失、抗體減弱或發(fā)生缺失及正反定型額外反應。③Rh定型分析。統(tǒng)計入組腧穴患者Rh定型情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 血型抗體檢測結果分析

紅細胞為A型46例，血清抗體檢出率為73.91%，正反定型不相符率15.22%；紅細胞為B型78例，血清抗體檢出率為67.95%，正反定型不相符為8.97%；紅細胞為O型患者57例，血清抗體檢出率為73.68%，正反定型不相符為7.02%（表1）。

表1 血型抗體檢測結果分析

2.2 ABO血型正反型不符原因及構成比

181例進行輸血患者均采用凝集法完成血型正反定型分析，結果表明：18例患者正反型不符，占9.94%。ABO血型正反定型不符原因中排在前2位的分別為造血干細胞移植和抗原減弱或發(fā)生缺失，分別占50.0%和27.78%（表2）。

表2 ABO血型正反型不符原因及構成比

2.3 輸血患者Rh定型分析

Rh定型分析結果顯示，21例患者存在不規(guī)則抗體，占11.60%，男性患者與女性患者Rh定型分析中不規(guī)則抗體檢出率比較，差異無統(tǒng)計意義（P>0.05）（表3）。

表3 輸血患者Rh定型分析（例）

3 討論

輸血治療在臨床上使用較多，廣泛用于失血過多、失血性休克等人群中[11]。但是，輸血治療具有一定的適應癥，而血型匹配則是提高患者輸血安全的基礎與前體。研究表明[12]：通過檢索醫(yī)院輸血患者病案，輸血患者中存在血型正反定型不符等現(xiàn)象，導致輸血風險較高。因此，臨床擬進行輸血治療患者，給予抗體篩查、抗體鑒定及配合性輸注血液/成分血，對保證患者輸血安全具有重要的意義。近年來，凝集法在血型正反型與Rh定型中得到應用，且效果理想。本研究中，經(jīng)正定型血清標本檢測，其中紅細胞為A型46例，正反定型不相符為15.22%；紅細胞為B型78例，正反定型不相符為8.97%；紅細胞為O型患者57例，血清抗體檢出率為73.68%，正反定型不相符為7.02%，從本研究結果看出，ABO血型正反型不符以A型血最為突出。因此，加強患者輸血前ABO血型不符、交叉配血不合原因分析，有助于提高輸血安全性[13]。凝反應屬于是一種血清學反應，顆粒型抗原（完整的病原微生物或紅細胞等）與相應抗體結合，在有電解質(zhì)存在的條件下，經(jīng)過一定時間，出現(xiàn)肉眼可見的凝集小塊。臨床上，將凝集反應分為直接凝集反應與間接凝集反應兩種，但是無論何種凝集方法，均能實現(xiàn)血型及不規(guī)則抗體的篩查、鑒定，為患者安全輸血提供參考依據(jù)。

血型鑒定是安全輸血的前提，主要是完成血型的鑒定及不規(guī)則抗體篩查，而前者主要涉及ABO定型與Rh定型兩種[14]。本研究中，181例進行輸血患者均采用凝集法完成血型正反型分析，結果表明：18例患者正反型不符，占9.94%。ABO血型正反型不符原因中排在前2位的分別為造血干細胞移植和抗原減弱或發(fā)生缺失，分別占：50.0%和27.78%，提示輸血治療患者ABO定型不符率較高，其原因亦相對較多，增加輸血風險。既往研究表明[15]：健康群體冷凝激素效價<1∶16，并且血液在0～4℃溫度下具有最高的活性，甚至能發(fā)生凝集反應。對于手術患者或伴有傳染性疾病患者，高效價冷凝激素含量較高，影響檢測結果。對于需要輸血患者，尤其是ABO正反定型不符合者，應善于采用“三步分析法”分析患者血型不符的原因，避免人為因素引起的ABO血型正反型不符；結合收集獲得的病歷資料，分析引起ABO血型正反型不一致的原因，并積極采取措施進行針對性試驗進行驗證，提高患者輸血安全性，促進患者恢復。血型抗體涉及內(nèi)容較多，且臨床上將其分為規(guī)則（ABO血型系統(tǒng)抗體）、不規(guī)則（除抗-A、抗-B以外的Rh、MNS等產(chǎn)生的抗體）與特殊類抗體三種[16-17]。既往研究表明[18]：不規(guī)則抗體產(chǎn)生的原因相對較多，如：輸血、妊娠、自身免疫性疾病等。同時，不規(guī)則抗體亦是溶血性輸血反應產(chǎn)生的重要原因。本研究中，181例進行輸血患者均完成Rh定型分析，結果表明：21例患者存在不規(guī)則抗體，占11.60%，男性患者與女性患者Rh定型分析中不規(guī)則抗體檢出率比較，差異無統(tǒng)計意義（P>0.05），由此看出，輸血患者Rh定型下不規(guī)則抗體檢出率較高，亦是臨床溶血性輸血反應的主要原因之一，加強輸血患者Rh定型下不規(guī)則抗體測定，可指導臨床輸血，降低輸血不良事件發(fā)生率。

對于骨髓瘤患者，持續(xù)的病情發(fā)展將會引起紅細胞發(fā)生緡錢狀凝集，再加上某些藥物主要為血漿擴容劑，均容易引起血漿成分異常；對于血液病患者，進行ABO血型不同的異基因外周血干細胞移植后，將會引起原有的血型紅細胞衰亡，最終被供者血型的紅細胞取代；患者原有的同種凝集素在移植后消失，供者的干細胞在受著體內(nèi)存活時，患者紅細胞上的血型變?yōu)榕c供者血型移植，會造成正反定型不抑制。同時，血漿蛋白異常亦是ABO血型正反定型不符及交叉配血不合的重要因素，尤其是伴有肝臟疾病、惡性腫瘤等，均會增加血型定型困難。因此，患者在進行輸血前應采用凝集法完成血液標本ABO血型及Rh血型定型，篩查不規(guī)則血型抗體，不僅能輔助臨床疾病診斷，亦可提高臨床輸血安全[19]。對于凝集法Rh血型定型中出現(xiàn)不規(guī)則抗體者，應慎重考慮輸血治療，充分考慮輸血利弊，提高患者輸血安全性，降低由于輸血異常引起的死亡[20]。但是，本研究亦存在諸多局限性，一方面研究中納入病例數(shù)較少，再加上研究時間相對較短，導致研究結果存在諸多偏倚性，均需要進一步研究與探討。

綜上所述，凝集法用于血型正反型與Rh定型中準確性較高，具有準確性、可靠性優(yōu)點，能有效節(jié)約試劑，提高血型定型的自動化水平及患者輸血安全性。