邢麗杰，張曉璐，王 遠，，李先義，羅瑞峰，董 娟

（1.新疆農(nóng)墾科學(xué)院，新疆 石河子 832000；2.新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團食品檢驗所，新疆 石河子 832000；3.石河子大學(xué) 食品學(xué)院，新疆 石河子 832000）

黑果枸杞（Lycium ruthenicum Murry），屬茄科枸杞屬，主要分布于我國西北地區(qū)，富含多糖、黃酮類物質(zhì)、花青素、多酚等活性成分，具有增強免疫力、抗氧化、抗腫瘤、抗疲勞、防治阿爾茲海默癥等功效[1]。目前，關(guān)于黑果枸杞功效研究大多集中于降血脂、降血糖、抗疲勞等方面，而有關(guān)黑果枸杞抗腫瘤的研究報道較少。因此，黑果枸杞抗腫瘤的作用機制及其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究越來越受到人們關(guān)注。綜述了黑果枸杞中各類活性成分的抗腫瘤效應(yīng)，并闡述其作用機理及其抗腫瘤的研究進展，為進一步精深加工研究及醫(yī)學(xué)應(yīng)用提供參考依據(jù)。

1 黑果枸杞抗腫瘤作用的主要有效成分

黑果枸杞中含有花青素、黃酮、多糖和甜菜堿等生物活性物質(zhì)，這些活性物質(zhì)已被直接或間接的藥理試驗證明具有抗腫瘤作用。不同提取方法得到的活性物質(zhì)差異較大，會直接影響其抗腫瘤效果。

1.1 黑果枸杞花青素

花青素是一種廣泛存在于植物中的水溶性類色素，屬于黃酮類化合物，是黑果枸杞中的主要功能性成分[2]。黑果枸杞花青素多以糖苷形式存在，樓舒婷[3]采用高效液相串聯(lián)質(zhì)譜結(jié)合二極管陣列檢測器分析了黑果枸杞中的花色苷，矮牽牛素的衍生物為主要花色苷。其中，矮牽牛素-3-O-對香豆先蕓香糖苷-7-O-葡萄糖苷和矮牽牛素-3-O-對香豆先蕓香糖苷-5-O-葡萄糖苷為主要成分，且這2 種物質(zhì)為同分異構(gòu)體。孫楠等人[4]采用分光光度法對黑果枸杞、枸杞和黑加侖中的花青素進行測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)3 種物質(zhì)中花青素的平均含量大小關(guān)系為黑果枸杞>黑加侖>枸杞，黑果枸杞中花青素含量最高，達到5.04%，可作為提取花青素較為理想植物資源，具有很高的應(yīng)用價值。

1.2 黑果枸杞多糖

黑果枸杞多糖是一種不溶于有機溶劑，易溶于水、弱酸、弱堿溶液的蛋白多糖（干燥后為白色纖維狀疏松固體）。Peng Q 等人[5]通過高效凝膠滲透色譜法分析黑果枸杞中糖的組成，單糖組成分析表明，其主要由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖組成。吳翠云等人[6]研究了熱水浸提、微波輔助提取與超聲-微波協(xié)同提取這3 種提取黑果枸杞多糖的工藝，結(jié)果表明這3 種提取工藝中超聲-微波協(xié)同提取多糖效果最好。

1.3 黑果枸杞甜菜堿

甜菜堿是黑果枸杞中主要活性成分之一，是季胺堿類物質(zhì)，在化學(xué)結(jié)構(gòu)上與氨基酸相似。其在體內(nèi)具有維持維生素穩(wěn)定、促進脂肪代謝、調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓、抗腫瘤、抑制脂肪肝、降壓等功能性質(zhì)[7]。

1.4 黑果枸杞黃酮

植物界中廣泛存在黃酮類物質(zhì)，是許多中草藥的功效成分，包括異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、花色苷、橙酮、查爾酮及新黃酮類等。黑果枸杞中總黃酮含量為2.71%，主要含有蘆丁、槲皮素、山奈素等成分。黑果枸杞黃酮具有預(yù)防動脈粥樣硬化、降血脂等作用，在身體狀態(tài)調(diào)節(jié)、腫瘤及心血管等疾病的預(yù)防和治療方面發(fā)揮著重要作用[8-9]。近年來，研究低毒、高效且來源廣泛的黃酮類物質(zhì)在抗腫瘤方面的應(yīng)用成為熱點。

2 活性成分的抗腫瘤作用

一種生物活性成分可同時對多種類型的腫瘤具有拮抗作用。植物活性成分對結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌等均具有抑制作用，其中一些活性物質(zhì)與藥物聯(lián)合還可增強抗腫瘤效果，并且存在一定劑量的依賴性。黑果枸杞中的活性成分種類復(fù)雜多樣，對腫瘤具有一定拮抗作用。

2.1 花青素的抗腫瘤作用

花青素具有抑制腫瘤生長的作用，主要是通過抗氧化、誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化、抗炎、調(diào)節(jié)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路來抑制腫瘤細胞增殖、促進腫瘤細胞凋亡、誘導(dǎo)細胞周期阻滯、誘導(dǎo)自噬、增加對化療的敏感性和逆轉(zhuǎn)腫瘤細胞耐藥性等因素實現(xiàn)[10]。Huang H P 等人[11]發(fā)現(xiàn)在癌細胞轉(zhuǎn)移過程中，B16-F1 細胞經(jīng)不同濃度的桑樹花青素處理后，基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)均下降。證實了桑樹花青素對B16-F1 細胞的生長和轉(zhuǎn)移具有抑制作用。可作為一種抗轉(zhuǎn)移藥物應(yīng)用。高愛霞[12]研究了花青素對NCI-H460 細胞的增殖抑制與誘導(dǎo)凋亡作用，發(fā)現(xiàn)花青素對肺癌細胞有明顯的抑制作用，呈劑量、時間依賴性，并使細胞阻滯于G0/G1期。Syed D N 等人[13]研究了飛燕草素對正常MCF-10A 乳腺細胞系中HGF介導(dǎo)反應(yīng)的抗增殖和抗侵襲作用，發(fā)現(xiàn)飛燕草素能抑制肝細胞生長因子受體的磷酸化和核轉(zhuǎn)位。用飛燕草素治療的表達Met 受體的乳腺癌細胞活力下降，表明該制劑可能在預(yù)防HGF 介導(dǎo)與乳腺癌相關(guān)各種信號通路的激活中發(fā)揮潛在作用。Rossi M 等人[14]通過動物和體外研究表明，原花青素可以降低患癌癥的風(fēng)險，尤其是結(jié)腸直腸癌。

2.2 多糖的抗腫瘤作用

多糖作為抗腫瘤的最大優(yōu)點是毒副作用小，與化療藥物聯(lián)用有協(xié)同效應(yīng)。已進入臨床應(yīng)用的多糖有香菇多糖、豬苓多糖、人參多糖和靈芝多糖等[15]。多糖抗腫瘤的作用機制主要有2 個方面，一是對腫瘤細胞的直接作用；二是增強機體免疫功能，間接發(fā)揮抗腫瘤作用[16]。

2.2.1 多糖對腫瘤細胞的直接作用

多糖對腫瘤細胞的直接作用包括直接抑制腫瘤細胞生長、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡、抑制腫瘤細胞誘導(dǎo)分化、改變腫瘤細胞膜的生化特征和影響腫瘤細胞內(nèi)信號傳遞途徑。樹舌多糖可使Hep A 荷瘤小鼠的腫瘤細胞DNA 合成速度減慢、腫瘤細胞分裂減慢，從而抑制了腫瘤生長[17]。魏小龍等人[18]通過定量PCR的方法檢測p53 基因在Lewis 肺癌組織內(nèi)表達，結(jié)果發(fā)現(xiàn)地黃多糖能使Lewis 肺癌組織內(nèi)p53 基因的表達明顯增加，是其抗腫瘤作用的機制之一。李汾等人[19]總結(jié)了茯苓多糖、刺五加多糖和牛膝多糖抗腫瘤作用，與膜生化特性改變、S180 細胞膜唾液酸含量升高及磷脂蛋白水平下降有關(guān)。豬苓多糖和香菇多糖能抑制HL-60 細胞細胞漿和細胞膜的酪氨酸蛋白酶的表達，對磷酸酪氨酸蛋白酶的表達有明顯激活作用[20]。

2.2.2 多糖對腫瘤的間接作用

多糖對腫瘤的間接作用包括活化淋巴細胞、激活巨噬細胞和促進細胞因子分泌。Yong O K 等人[21]通過免疫刺激觀察到斜曲霉菌內(nèi)多糖可作為免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)劑具有間接抗癌作用。Yang B 等人[22]利用小鼠H22 肝癌模型，研究黃芪多糖（AMP） 對肝癌的抗腫瘤作用及免疫調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，AMP 能有效抑制BALB/c 小鼠移植H22 肝癌實體瘤生長，促進血清中IL-2、IL-12、TNF-α 分泌，降低IL-10 水平，在體內(nèi)具有一定的抗腫瘤活性。韓銓等人[23]通過體內(nèi)和體外試驗考查茶樹花多糖的抗腫瘤活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)茶樹花多糖能抑制S180 腫瘤的生長，增加荷瘤小鼠的存活時間，增強遲發(fā)型超敏和巨噬細胞吞噬作用，從而提高抗腫瘤作用。

2.3 甜菜堿的抗腫瘤作用

甜菜堿具有調(diào)節(jié)體內(nèi)滲透壓、增加細胞Na/KATP 酶的活性、促進脂肪代謝、抑制脂肪肝等功效，可有效預(yù)防肝癌的發(fā)生[24]。季宇彬等人[25]通過對5 種腫瘤標志物酸性磷酸酶、乳酸脫氫酶、肌酸激酶、堿性磷酸酶和醛縮酶研究分析，發(fā)現(xiàn)甜菜堿能抑制S180 小鼠的腫瘤細胞生長，且與劑量有關(guān)，可能是甜菜堿抗腫瘤作用的潛在機制。另外，甜菜堿還是一種甲基化試劑，可被細胞吸收并參與細胞內(nèi)的甲基轉(zhuǎn)移過程[26]。甜菜堿作為甲基供體，是否能夠在治療過程中將腫瘤細胞向正常細胞轉(zhuǎn)化或在腫瘤預(yù)防過程中起作用仍需要進一步研究。

2.4 黃酮的抗腫瘤作用

黃酮類化合物是一類具有生理活性天然產(chǎn)物，廣泛存在于植物中。在癌癥防治過程中具有一定作用。李富華等人[27]開展黃酮對HepG-2 細胞體外抗增殖活性研究試驗，發(fā)現(xiàn)黃酮對HepG-2 細胞增殖的抑制率均超過50%，表明黃酮具有一定的體外細胞抗增殖能力。Kim G 等人[28]研究發(fā)現(xiàn)槲皮素通過產(chǎn)生細胞內(nèi)活性氧和增加Sestrin-2 的表達來誘導(dǎo)細胞凋亡。

Lin C C 等人[29]研究了白楊素的抗腫瘤作用，發(fā)現(xiàn)白楊素治療組的T-細胞器、B 細胞器和巨噬細胞表面標記物的百分比增加，同時小鼠外周血單核細胞中巨噬作用及自然殺傷細胞毒性作用增加。姜英等人[30]研究發(fā)現(xiàn)木犀草素能有效地抑制乳腺癌細胞增殖、基因Bcl-2 蛋白表達、血管新生和乳腺癌細胞的侵襲，達到抗癌的作用。

3 黑果枸杞抗腫瘤作用的研究現(xiàn)狀

黑果枸杞中活性物質(zhì)抗腫瘤的機制主要表現(xiàn)2 個方面，一是通過抗氧化、清除自由基等方式直接抑制腫瘤細胞生長；二是通過激活巨噬細胞、活化淋巴細胞等增強機體免疫功能來抑制腫瘤。

艾克山·吾拉木等人[31]研究黑果枸杞總黃酮體外對肝癌的抑制作用。結(jié)果表明，低濃度時，HepG-2肝癌細胞的抑制率隨給藥時間和濃度的增加而增高；高濃度時，HepG-2 細胞出現(xiàn)大規(guī)模變形和凋亡。其機制可能是通過上調(diào)Bax 和Caspase-3 酶活性，下調(diào)Bcl-2 酶活性來誘導(dǎo)HepG-2 肝癌細胞的凋亡。同時，黑果枸杞中總黃酮純化物誘導(dǎo)HepG-2 肝癌細胞周期阻滯于S 期，進而使細胞停止分裂。Peng Q 等人[32]進行了體外細胞試驗，結(jié)果表明黑果枸杞中多糖通過對巨噬細胞的激活作用而發(fā)揮免疫作用。賈琦珍等人[33]通過動物試驗得出，高劑量黑果枸杞色素對巨噬細胞有一定的激活作用，對由Cy 引起的免疫低下小鼠有增強免疫功能作用。陶大勇等人[34]研究了黑果枸杞色素對由環(huán)磷酞胺引起小鼠免疫力低下的現(xiàn)象，結(jié)果發(fā)現(xiàn)灌喂黑果枸杞色素低、高劑量組小鼠的血清和各器官組織SOD 升高較半乳糖衰老模型組顯著（p<0.05）。

4 結(jié)語

黑果枸杞中含有甜菜堿、花青素、多糖、黃酮類等多種活性物質(zhì)，每一類活性物質(zhì)在抗腫瘤方面都有一定作用。但關(guān)于黑果枸杞中有效功能性成分在抗腫瘤方面的效用及其作用機制的研究缺乏。目前，研究多集中在活性物質(zhì)提取方法及生物活性的初步性質(zhì)研究，對于黑果枸杞中抗腫瘤活性功能性成分理化性質(zhì)及在機體內(nèi)作用機制的研究相對較少。由于黑果枸杞種植面積小，種植成本高，在開發(fā)利用方面有待進一步加強。同時，利用生物化學(xué)技術(shù)和現(xiàn)代食品科學(xué)技術(shù)加快對黑果枸杞的開發(fā)，特別是在黑果枸杞多糖、天然色素等方面，為黑果枸杞的國際市場打開新途徑。