李永春，彭鳳翔，高蓉梅，葉小娟

（武警四川省總隊(duì)醫(yī)院檢驗(yàn)病理科，四川 樂(lè)山 614000）

甲狀腺乳頭狀癌是惡性程度較低且較常見(jiàn)的一種甲狀腺癌[1-2]。此病患者在病程初期多無(wú)明顯癥狀，隨著病情的進(jìn)展，會(huì)出現(xiàn)頸部腫塊、吞咽困難、呼吸困難等典型癥狀，嚴(yán)重影響其生活質(zhì)量，威脅其生命安全。因此，當(dāng)患者觸及頸部有包塊時(shí)，需及時(shí)就醫(yī)，早診斷、早治療，以改善甲狀腺乳頭狀癌患者的預(yù)后，延長(zhǎng)其生存時(shí)間。臨床診斷中，需重視甲狀腺乳頭狀癌與甲狀腺良性結(jié)節(jié)、甲狀腺腫間的鑒別診斷，以確保患者能夠獲得優(yōu)質(zhì)且有針對(duì)性的治療措施。除甲狀腺球蛋白、甲狀腺激素等常見(jiàn)指標(biāo)外，細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK19）、間皮細(xì)胞（mesothelial cell，MC）、甲狀腺過(guò)氧化物酶（thyroid peroxidase，TPO）及神經(jīng)細(xì)胞黏附分子（neural cell adhesion molecule 1，NCAM-1，又稱CD56）這四項(xiàng)指標(biāo)也能反映受檢者甲狀腺的功能、狀態(tài)[3-4]。因此，本研究擬針對(duì)CK19、MC、TPO、CD56 在甲狀腺乳頭狀癌病理診斷中的應(yīng)用情況進(jìn)行探討，分析這四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的診斷價(jià)值，以提升甲狀腺乳頭狀癌臨床診斷的準(zhǔn)確率。具體報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2020 年1 月至2021 年11 月我院收治的102 例甲狀腺乳頭狀癌患者和98 例甲狀腺良性病變患者作為研究對(duì)象。將其中98 例甲狀腺良性病變患者納入對(duì)照組，將其中102 例甲狀腺乳頭狀癌患者納入觀察組。診斷標(biāo)準(zhǔn)：1）觀察組病情符合《甲狀腺微小乳頭狀癌診斷與治療中國(guó)專家共識(shí)（2016 版）》[5]中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；2）對(duì)照組經(jīng)細(xì)針穿刺活檢確診為甲狀腺良性病變。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：1）符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)；2）年齡為24 ～80 歲；3）頸部有可觸及的腫塊且存在吞咽困難等癥狀；4）臨床資料齊全；5）自愿簽署知情通知書(shū)，且經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。病例排除標(biāo)準(zhǔn)：1）合并其他惡性腫瘤；2）有甲狀腺乳頭狀癌病史；3）有語(yǔ)言、精神、意識(shí)障礙，配合度低；4）中途退出本研究。對(duì)照組中有男37 例，女61 例，年齡24 ～80 歲，平均（52.08±4.18）歲。觀察組中有男36 例，女66 例，年齡25 ～78 歲，平均（51.53±3.87）歲。兩組患者的性別、年齡相比無(wú)明顯差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法

兩 組 患 者 均 進(jìn) 行CK19、MC、TPO、CD56 檢測(cè)。檢測(cè)方法：采集患者手術(shù)切除后的甲狀腺病變組織樣本或經(jīng)細(xì)針穿刺獲得的組織樣本，用10% 中性緩沖福爾馬林固定，常規(guī)處理組織，行石蠟包埋及連續(xù)切片，切片厚度為3 ～4 μm。采用免疫組化SP（streptavidin-perosidase） 法 對(duì)CK19、MC、TPO、CD56 這四項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。采用抗體免疫組化試劑盒（GenomeMe，型號(hào)IHC019）進(jìn)行CK19 染色檢測(cè)，采用SP 試劑盒（福州邁新生物技術(shù)有限公司）進(jìn)行MC、TPO、CD56 染色檢測(cè)。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：CK19陽(yáng)性定位于細(xì)胞質(zhì)；MC 陽(yáng)性定位于細(xì)胞膜；TPO 陽(yáng)性定位于細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞膜；CD56 陽(yáng)性定位于細(xì)胞膜和（或）細(xì)胞質(zhì)。上述四項(xiàng)指標(biāo)的陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)均為顯色呈棕黃色，按染色強(qiáng)度計(jì)分：0 分無(wú)著色、1分淡黃色、2 分棕黃色、3 分棕褐色；按陽(yáng)性細(xì)胞比計(jì)分：0 分無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞、1 分占比＜25%、2 分占比25% ～50%、3 分占比＞50%。將兩個(gè)計(jì)分結(jié)果相加進(jìn)行綜合評(píng)估，0 分為陰性（-）、1 ～2 分為弱陽(yáng)性（+）、3 ～4 分為中陽(yáng)性（++）、5 ～6 分為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽(yáng)性檢出率及四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率。陽(yáng)性檢出率= ﹝（+）例數(shù)+（++）例數(shù)+（+++）例數(shù)﹞ / 總例數(shù)×100%。統(tǒng)計(jì)CK19、MC、TPO、CD56 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能。診斷效能包括靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率。靈敏度=真陽(yáng)性例數(shù)/（真陽(yáng)性例數(shù)+ 假陰性例數(shù)）×100%。特異度= 真陰性例數(shù)/（真陰性例數(shù)+假陽(yáng)性例數(shù)）×100%。準(zhǔn)確率=（真陽(yáng)性例數(shù)+真陰性例數(shù)）/ 總例數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用SPSS20.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以%表示，行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以±s表示，行t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)比兩組患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽(yáng)性檢出率

觀察組CK19、MC 的陽(yáng)性檢出率均高于對(duì)照組，TPO、CD56 的陽(yáng)性檢出率均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì) 學(xué) 差 異（P＜0.05）。 觀 察 組CK19、MC、TPO、CD56 聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。詳見(jiàn)表1-表5。

表1 對(duì)比兩組患者CK19 的陽(yáng)性檢出率[例（%）]

表5 對(duì)比兩組患者四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率[例（%）]

表2 對(duì)比兩組患者M(jìn)C 的陽(yáng)性檢出率[例（%）]

表3 對(duì)比兩組患者TPO 的陽(yáng)性檢出率[例（%）]

表4 對(duì)比兩組患者CD56 的陽(yáng)性檢出率[例（%）]

2.2 CK19、MC、TPO、CD56 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能

CK19、MC、TPO、CD56 聯(lián)合檢測(cè)診斷甲狀腺乳頭狀癌的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率均顯著高于四項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)。詳見(jiàn)表6。

表6 CK19、MC、TPO、CD56 單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)診斷甲狀腺乳頭狀癌的效能[%（例/例）]

3 討論

甲狀腺乳頭狀癌是一種最常見(jiàn)的甲狀腺癌。流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，在所有甲狀腺癌患者中，甲狀腺乳頭狀癌患者占85%～89.9%。甲狀腺乳頭狀癌多發(fā)于20 ～40 歲的青年人群，且女性的發(fā)病率高于男性。雖然此病的具體發(fā)病機(jī)理尚未明確，但臨床研究表明，遺傳、輻射、性別等因素會(huì)增加甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。一般情況下，甲狀腺乳頭狀癌進(jìn)展緩慢，惡性程度低，患者多能達(dá)到較好的預(yù)后效果。但此病若長(zhǎng)期得不到有效的診治，腫瘤細(xì)胞仍會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移，導(dǎo)致患者預(yù)后不佳[6-7]。因此，針對(duì)甲狀腺乳頭狀癌臨床上提倡早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療，以改善患者的預(yù)后。為提升甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷效能，本研究探討了聯(lián)合檢測(cè)CK19、MC、TPO 及CD56 在甲狀腺乳頭狀癌病理診斷中的意義。研究結(jié)果顯示，觀察組CK19、MC 的陽(yáng)性檢出率均高于對(duì)照組，TPO、CD56 的陽(yáng)性檢出率均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；觀察組CK19、MC、TPO、CD56 聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性檢出率高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。提示甲狀腺乳頭狀癌患者與甲狀腺良性病變患者CK19、MC、TPO、CD56 的陽(yáng)性檢出率存在顯著差異，將這四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用到甲狀腺乳頭狀癌的臨床診斷中，有助于幫助臨床醫(yī)師分析、評(píng)估患者甲狀腺的功能、狀態(tài)，提高診斷的準(zhǔn)確率，原因可能是：1）CK19 是一種低分子量的細(xì)胞角蛋白，現(xiàn)階段其已成為臨床上常用的一種腫瘤免疫組織化學(xué)標(biāo)記物。在生理學(xué)中，CK 主要有維持上皮組織完整性、連續(xù)性的作用，廣泛分布于上皮細(xì)胞中，并以骨架蛋白的形式存在于角質(zhì)細(xì)胞中。甲狀腺乳頭狀癌作為源于濾泡細(xì)胞的惡性上皮腫瘤，可導(dǎo)致濾泡細(xì)胞嚴(yán)重受損，使細(xì)胞出現(xiàn)異樣的增殖分化，進(jìn)而可在患者的血液及病理組織中檢出CK19 水平呈顯著上升的趨勢(shì)，整體呈彌漫陽(yáng)性表達(dá)，靈敏度較高[8-9]。但由于甲狀腺疾病均易導(dǎo)致CK19 水平上升，甲狀腺結(jié)節(jié)、腺瘤等甲狀腺良性病變患者CK19 的陽(yáng)性檢出率也較高，因此該指標(biāo)的特異度較低。在臨床診斷中，不可將CK19 作為單一的診斷指標(biāo)。2）MC 作為間皮細(xì)胞，主要由中胚層發(fā)育而來(lái)。在生理學(xué)中，MC 主要有潤(rùn)滑、保護(hù)器官的作用，是間皮表面微絨毛的重要抗原成分，屬于特異性標(biāo)志物。甲狀腺一旦發(fā)生病變，即可檢測(cè)到MC 的水平顯著上升，有較高的靈敏度，能有效反映受檢者的甲狀腺病變情況，尤其是在腫瘤新生血管、腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移中的檢出效果較好。但與CK19 相似，MC 在甲狀腺增生結(jié)節(jié)、橋本甲狀腺炎等甲狀腺良性病變中的陽(yáng)性檢出率也較高，故其特異度較低。因而在臨床診斷中，也需盡量避免將MC 作為唯一的診斷指標(biāo)，需結(jié)合其他指標(biāo)或影像學(xué)檢查結(jié)果等，對(duì)受檢者的病情進(jìn)行綜合評(píng)估、預(yù)測(cè)。3）TPO 是催化甲狀腺激素的重要酶，主要由甲狀腺濾泡細(xì)胞合成[10]。甲狀腺濾泡細(xì)胞一旦出現(xiàn)異常增殖分化，TPO 的水平就會(huì)呈顯著下降的趨勢(shì)，即TPO 的水平與甲狀腺乳頭狀癌的惡化程度呈負(fù)相關(guān)，惡化程度越嚴(yán)重則TPO的檢測(cè)值越低。而在甲狀腺良性病變中，濾泡細(xì)胞未受到過(guò)多損傷，能維持較高水平的TPO。因而在TPO檢測(cè)中，若檢測(cè)結(jié)果為（-），則代表TPO 數(shù)目過(guò)少、受檢者甲狀腺乳頭狀癌的患病風(fēng)險(xiǎn)高。4）CD56 屬于神經(jīng)細(xì)胞黏附分子。多項(xiàng)研究表明，神經(jīng)細(xì)胞黏附分子在腫瘤抑制方面可能發(fā)揮一定作用，即CD56 的表達(dá)與腫瘤的惡化程度呈負(fù)相關(guān)。與TPO 相似，若CD56 的檢測(cè)結(jié)果為（-），則表明腫瘤惡化程度嚴(yán)重[11]。本研究的結(jié)果顯示，CK19、MC、TPO、CD56 聯(lián)合檢測(cè)診斷甲狀腺乳頭狀癌的靈敏度、特異度、準(zhǔn)確率均顯著高于四項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測(cè)。這可能是因?yàn)镃K19、MC、TPO、CD56 這四項(xiàng)指標(biāo)均能反映受檢者的甲狀腺病變情況，但各指標(biāo)均會(huì)受到一些因素影響，因而聯(lián)合檢測(cè)的效能更高。其中CK19、MC 在甲狀腺乳頭狀癌中呈高表達(dá)，在甲狀腺良性病變中普遍呈低表達(dá)，腫瘤惡化程度越嚴(yán)重，則CK19、MC 的檢測(cè)值越高；TPO、CD56 在甲狀腺乳頭狀癌中呈失（或低）表達(dá)，在甲狀腺良性病變中普遍呈高表達(dá)，腫瘤惡化程度越嚴(yán)重，則TPO、CD56 的檢測(cè)值越低。四項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用，能有效消除、降低相關(guān)因素對(duì)檢出結(jié)果的影響，對(duì)提升整體的診斷效能有重要作用。張哲等[12]研究指出，CK19、MC、TPO、CD56 這四項(xiàng)指標(biāo)的檢出結(jié)果都有可能出現(xiàn)假陽(yáng)性、假陰性，單一應(yīng)用有一定的局限性，而聯(lián)合應(yīng)用的整體診斷效能則有所上升，這與本研究結(jié)果一致。

綜上所述，將CK19、MC、TPO、CD56 聯(lián)合應(yīng)用到甲狀腺乳頭狀癌患者的病理診斷中，能提升診斷的準(zhǔn)確率，值得推廣應(yīng)用。