羊 晨，涂 鏡，翟 楊，尹文銀，曾糧斌，魏寶陽**

（1．湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 長沙 410128；2．中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院麻類研究所，湖南 長沙 410205；3．懷化鶴城宏興農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)綜合開發(fā)有限公司，湖南 懷化 418000）

肺形側(cè)耳（Pleurotus pulmonarius）屬于蘑菇綱（Agaricomycetes）傘菌目（Agaricales）側(cè)耳科（Pleurotaceae）側(cè)耳屬（Pleurotus），商品名為鳳尾菇，在我國20多個(gè)省份均有分布[1]。肺形側(cè)耳為人工栽培的重要食用菌平菇（Pleurotus ostreatus）的近源品種，其子實(shí)體營養(yǎng)價(jià)值豐富，含多種氨基酸及礦質(zhì)元素，入藥有祛風(fēng)散寒、舒筋活絡(luò)、降膽固醇等功效[2-4]。側(cè)耳屬真菌直接作為食物進(jìn)行生產(chǎn)時(shí)產(chǎn)出的子實(shí)體品質(zhì)較優(yōu)，近來其菌絲體發(fā)酵處理農(nóng)業(yè)副產(chǎn)物的作用也在逐漸受到關(guān)注。

實(shí)驗(yàn)室研究人員從湘鄉(xiāng)市采集、分離獲得1株野生的側(cè)耳屬菌株，通過對(duì)其進(jìn)行分子鑒定，探索其菌絲生長最適培養(yǎng)條件，完成初步出菇試驗(yàn)，為開發(fā)湖南當(dāng)?shù)匾吧秤镁Y源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1．1．1 供試菌株

野生的側(cè)耳屬菌株，于2021年4月采集自湘鄉(xiāng)市翻江鎮(zhèn)洪門村。采集的菌株標(biāo)本在本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行分離、保藏，編號(hào)為ce1。

1．1．2 培養(yǎng)基

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯（去皮）200 g、葡萄糖20 g、瓊脂 18 g，水 1 000 mL，pH 7．0～7．2。用于菌種的分離與保藏。

碳源培養(yǎng)基：碳源20 g、酵母粉2 g、蛋白胨2 g、磷酸二氫鉀3 g、硫酸鎂1．5 g、瓊脂18 g，水1 000 mL，pH 自然[5]。

氮源培養(yǎng)基：葡萄糖20 g、氮元素2 g、磷酸二氫鉀 3 g、硫酸鎂 1．5 g、瓊脂 18 g，水 1 000 mL，pH自然。

1．1．3 培養(yǎng)料

栽培種培養(yǎng)料設(shè)置5個(gè)配方。配方1：稻草秸稈80%、米糠19%、蔗糖1%；配方2：稻草秸稈60%、木屑20%、米糠19%、蔗糖1%；配方3：稻草秸稈40%、木屑40%、米糠19%、蔗糖1%；配方4：稻草秸稈60%、蓮蓬殼20%、米糠19%、蔗糖1%；配方5：稻草秸稈40%、蓮蓬殼40%、米糠19%、蔗糖1%。

1．1．4 原材料

稻草選用當(dāng)年曬干的稻草秸稈，粉碎成小段，長度為2 cm～3 cm，拌料前在質(zhì)量濃度為15 g·L-1的石灰水中浸泡1 d，擠干水分后備用。木屑為本地食用菌基地生產(chǎn)所用雜木屑。蓮蓬殼采用湖南湘潭蓮子產(chǎn)區(qū)干蓮蓬，粉碎，粒徑約為1 cm～2 cm。

1.2 方法

1．2．1 菌株分離

野外采集的野生側(cè)耳于當(dāng)天采用子實(shí)體分離法進(jìn)行分離培養(yǎng)。將子實(shí)體用75%乙醇浸泡1 min，在無菌條件下用解剖刀縱切菌柄，切取菌柄與菌褶交界處的小塊菌肉（直徑為2 mm～3 mm），無菌紙上吸干水分。于PDA平板上涂布質(zhì)量濃度為50 mg·L-1的硫酸鏈霉素200 μL。將切取的菌塊接種至平板上，每皿接種4塊，于25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。經(jīng)過數(shù)次純化后，得到野生側(cè)耳純化菌株。菌株活化后，使用內(nèi)徑為4 mm的打孔器打孔，將菌塊接入裝有1 mL甘油（體積分?jǐn)?shù)為50%）的凍存管中，保存于-20℃冰箱。

1．2．2 分子鑒定

野生側(cè)耳菌株ce1的鑒定采用內(nèi)源轉(zhuǎn)錄間隔ITS（internal transcribed spacer）鑒定法，即對(duì) 5．8 S rDNA及其兩側(cè)的ITS1和ITS2基因片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增、測(cè)序和聚類分析。利用植物DNA提取試劑盒提取菌絲體總DNA。PCR擴(kuò)增采用真菌ITS 通 用 引 物 ITS1（5′-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3′）和 ITS4（5′-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3′），反應(yīng)體系為 25 μL。以 1．5%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，然后交由北京擎科生物科技有限公司進(jìn)行測(cè)序。測(cè)序結(jié)果利用BLAST進(jìn)行比對(duì)分析，選取側(cè)耳菌株ce1的近緣不同種菌株ITS序列，利用MEGA 10軟件以鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，進(jìn)行同源性分析。

1．2．3 光照試驗(yàn)

光照試驗(yàn)采用PDA培養(yǎng)基，配制好的培養(yǎng)基于121℃高溫滅菌20 min，冷卻后倒平板。平板中央接種活化后直徑為4 mm的側(cè)耳菌株ce1菌絲塊，接種后將平板置于25℃光照氣候箱中培養(yǎng)。通過調(diào)整包裹平板的遮光紙，設(shè)置4個(gè)光照強(qiáng)度，分別為0、1 000 lx、3 000 lx、6 000 lx，每組3個(gè)平行。菌絲測(cè)量方法：培養(yǎng)至第7天時(shí)，采用“十”字交叉法測(cè)量菌落直徑，記錄菌絲長勢(shì)。

1．2．4 碳源試驗(yàn)

試驗(yàn)用碳源分別為葡萄糖、甘露醇、果糖、蔗糖、可溶性淀粉、乳糖，每組3個(gè)平行。按照碳源培養(yǎng)基配方分別進(jìn)行配制，121℃高溫滅菌20 min，冷卻制板。接種后將平板置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。菌絲的測(cè)量方法同1．2．3。

1．2．5 氮源試驗(yàn)

試驗(yàn)用氮源分別為酵母粉、尿素、蛋白胨、硫酸銨、牛肉膏、麥麩、豆餅粉、玉米粉，每組3個(gè)平行。計(jì)算各氮源含氮量，在含氮量相等的條件下，按照氮源培養(yǎng)基配方配制氮源培養(yǎng)基。于121℃高溫滅菌20 min，冷卻制板。接種后將平板置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。菌絲測(cè)量方法同1．2．3。

1．2．6 溫度試驗(yàn)

選用 1．2．4 得出的最優(yōu)碳源和 1．2．5 得出的最優(yōu)氮源，配制溫度試驗(yàn)培養(yǎng)基。接種后將平板分別置于19℃、22℃、25℃、28℃、31℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。菌絲測(cè)量方法同1．2．3。

1．2．7 pH 試驗(yàn)

pH 培養(yǎng)基選用 1．2．4 得出的最優(yōu)碳源和 1．2．5 得出的最優(yōu)氮源進(jìn)行配制。分別用1 mol·L-1HCl和1 mol·L-1NaOH調(diào)整培養(yǎng)基的酸堿度，使pH分別為5、6、7、8、9，總共5組，每組3個(gè)平行。接種后的平板置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中暗培養(yǎng)。菌絲測(cè)量方法同 1．2．3。

1．2．8 栽培試驗(yàn)

按照1．1．3中的配方分別配制5組培養(yǎng)料，攪拌均勻后調(diào)整含水量為60%。使用15 cm×30 cm的聚丙烯塑料袋，每袋裝濕料500 g，套環(huán)封口并包上報(bào)紙防止雜菌污染。121℃高溫滅菌2 h，冷卻后接種。為保持試驗(yàn)條件一致，從活化后的肺形側(cè)耳平板中挑取1塊直徑為4 mm的菌塊接入菌包蓋口，于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，記錄菌絲長勢(shì)以及菌絲滿袋時(shí)間。待菌絲長滿后，將套環(huán)打開，卷起上部栽培塑料袋，移入光照氣候箱。出菇條件設(shè)置為溫度20℃、空氣濕度90%、光照強(qiáng)度1 000 lx。采收時(shí)，旋轉(zhuǎn)子實(shí)體根部，盡量保證采收整個(gè)子實(shí)體，避免殘留菇腳在菌包內(nèi)造成污染。采收后，將小菇、死菇和未采凈的菇腳用消毒后的解剖刀剔除，然后將菌包置于25℃恒溫培養(yǎng)箱暗培養(yǎng)1 d，恢復(fù)菌絲活力，待新菌絲形成再將菌包移至光照氣候箱中繼續(xù)出菇。記錄開袋時(shí)間、采收時(shí)間、子實(shí)體鮮質(zhì)量，計(jì)算生物學(xué)效率。子實(shí)體經(jīng)液氮研磨后保存于-20℃冰箱。

1．2．9 菌糠酶活性初步測(cè)定

1）粗酶液制備

出菇期結(jié)束后，挑選正常出菇的菌棒，取菌棒中心部位菌糠，用液氮冷凍后磨碎，保存于-20℃冰箱。纖維素酶粗酶液的浸提條件為溫度30℃、時(shí)間1．0 h、料液比1∶40；木聚糖酶粗酶液的浸提最佳條件為溫度25℃、時(shí)間2．0 h、料液比1∶50。浸提后于4 000 r·min-1離心 10 min，上清液為粗酶液[6]。

2）標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：稱取葡萄糖1．0 g，配制1 mg·mL-1的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液；分別取標(biāo)準(zhǔn)溶液0、0．2 mL、0．4 mL、0．6 mL、0．8 mL、1．0 mL、1．2 mL、1．4 mL、1．6 mL、1．8 mL 和 2．0 mL，再分別加入蒸餾水 3 mL、2．8 mL、2．6 mL、2．4 mL、2．2 mL、2．0 mL、1．8 mL、1．6 mL、1．4 mL、1．2 mL 和 1．0 mL；然后每支試管各加入2 mL DNS顯色液搖勻，沸水浴5 min，迅速冷卻后定容至25 mL，充分搖勻；在520 nm處測(cè)定吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：與葡糖糖標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的方法相同，配制好的木糖溶液在500 nm處測(cè)定吸光度值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[7]。

3）酶活力測(cè)定

取2支10 mL干燥刻度試管，試管1中加入1%羧甲基纖維素鈉溶液（用 0．1 mol·L-1、pH 4．8 的檸檬酸緩沖液配制）2 mL和粗酶液1 mL，試管2中加入 1%木聚糖溶液（用 0．1 mol·L-1、pH 4．6 的醋酸緩沖液配制）2 mL和粗酶液1 mL；均置于40℃水浴，30 min后立即加入DNS試劑2 mL，煮沸5 min后取出冷卻。試管1于520 nm處測(cè)定吸光度值，試管2于500 nm處測(cè)定吸光度值。以加熱滅活的粗酶液為對(duì)照。試管1和試管2分別按照葡糖糖、木糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算被纖維素酶分解的纖維素含量或木聚糖被酶分解的木聚糖含量。

酶活力單位定義：1 g菌糠（干質(zhì)量）1 min水解纖維素或木聚糖生成1 μmol葡萄糖或木糖的酶量定義為一個(gè)酶活力單位，以IU·g-1表示[8-9]。

1．2．10 數(shù)據(jù)分析方法

使用Excel 2016軟件、Word 2016軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖，采用SPSS軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌株鑒定結(jié)果

2．1．1 菌株形態(tài)鑒定

野生菌株ce1的子實(shí)體形態(tài)及菌絲體形態(tài)見圖1。

圖1 野生菌株ce1的子實(shí)體（A）和菌絲體（B）形態(tài)Fig．1 Morphology of fruit bodies(A)and mycelia(B)of wild strain ce1

如圖1所示，野生菌株ce1的子實(shí)體側(cè)生，單生，白色，體積較大，近扇形延展，邊緣呈波浪狀，菌蓋直徑為5 cm～15 cm；菌褶呈白色，致密，長短不等，延申至菌柄基部。其純培養(yǎng)菌絲潔白濃密，不產(chǎn)色素。菌株ce1具有顯著的側(cè)耳科真菌特征，可確定其為側(cè)耳科真菌。

2．1．2 基于ITS序列的系統(tǒng)發(fā)育樹分析

通過PCR擴(kuò)增和序列測(cè)定，獲得菌株ce1菌絲體的ITS序列片段如下。

經(jīng)BLAST在線對(duì)比，該序列與肺形側(cè)耳Pleurotus pulmonarius的相似性為99．41%。利用MEGA 10軟件，以菌株ce1與側(cè)耳屬菌株的ITS片段序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果見圖2。

圖2 基于ITS序列的菌株ce1系統(tǒng)發(fā)育樹Fig．2 Phylogenetic tree of strain ce1 based on ITS sequences

如圖2所示，野生菌株ce1的ITS序列與肺形側(cè)耳聚為一支，可以確定菌株ce1為肺形側(cè)耳。

2.2 光照強(qiáng)度對(duì)肺形側(cè)耳菌絲生長的影響

不同光照強(qiáng)度對(duì)菌絲生長的影響見表1。

表1 不同光照強(qiáng)度下肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長情況Tab．1 Mycelial growth of Pleurotus pulmonarius strain ce1 under different light intensities

由表1可知，供試肺形側(cè)耳菌株的菌絲在0～6 000 lx的光照強(qiáng)度下均能生長，但菌絲生長速度和生長情況有差異。菌絲在光照強(qiáng)度為0（黑暗）條件下培養(yǎng)7天后，菌落直徑和生長情況顯著優(yōu)于其他試驗(yàn)組，此結(jié)果與Davinia等[10]的報(bào)道相同。說明肺形側(cè)耳菌株在菌絲生長階段不需要光照，過強(qiáng)的光照對(duì)菌絲的生長具有抑制作用。

2.3 供試碳源對(duì)肺形側(cè)耳菌株ce1菌絲生長的影響

供試碳源對(duì)菌絲生長的影響見表2。

表2 不同供試碳源培養(yǎng)基中肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長情況Tab．2 Mycelial growth of Pleurotus pulmonarius strain ce1 in different carbon source media for testing

由表2可知，在6種供試碳源培養(yǎng)基上肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲均可生長。其中，可溶性淀粉組的菌落直徑平均值最高，但與蔗糖組和甘露醇組相比沒有顯著差異；蔗糖組的菌落直徑顯著高于葡萄糖組、乳糖組、果糖組，且菌絲生長情況也優(yōu)于除葡萄糖組外的其他4個(gè)試驗(yàn)組。綜合考慮各碳源原料成本和配制方法難度，選用蔗糖為該肺形側(cè)耳菌株的最適碳源。

2.4 供試氮源對(duì)肺形側(cè)耳菌株ce1菌絲生長影響

供試氮源對(duì)菌絲生長的影響見表3。

表3 不同供試氮源培養(yǎng)基中肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長情況Tab．3 Mycelial growth of Pleurotus pulmonarius strain ce1 in different nitrogen source media for testing

由表3可知，在等氮條件下配制氮源培養(yǎng)基，肺形側(cè)耳菌株ce1在除尿素以外的其他7種供試氮源培養(yǎng)基下均可生長；菌絲無法在尿素組正常生長，與鐘麗娟等[5]的研究結(jié)果相符。酵母粉組的菌落直徑顯著高于除玉米粉組外的其他試驗(yàn)組，且菌絲生長情況優(yōu)于玉米粉組。綜合考慮各氮源材料的配制方法和原材料的成本，選用酵母粉為該肺形側(cè)耳菌株菌絲的最適氮源。

2.5 培養(yǎng)溫度對(duì)肺形側(cè)耳菌株ce1菌絲生長的影響

培養(yǎng)溫度對(duì)菌絲生長的影響見表4。

表4 不同培養(yǎng)溫度下肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長情況Tab．4 Mycelial growth of Pleurotus pulmonarius strain ce1 at different culture temperatures

如表4所示，因肺形側(cè)耳屬于高溫食用菌[11]，在19℃～31℃均能生長。肺形側(cè)耳菌株ce1的菌落直徑在25℃、28℃、31℃條件下顯著大于19℃、22℃；培養(yǎng)溫度為22℃、25℃的條件下菌絲生長情況更優(yōu)。綜合考慮，選用培養(yǎng)溫度為25℃作為該肺形側(cè)耳菌株的最適生長溫度。

2.6 pH對(duì)肺形側(cè)耳菌株ce1菌絲生長的影響

pH對(duì)菌絲生長的影響見表5。

表5 不同pH條件下肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長情況Tab．5 Mycelial growth of Pleurotus pulmonarius strain ce1 under different pH conditions

由表5可知，菌絲體在pH為5～9的培養(yǎng)基上均能生長。其中，pH為5時(shí)菌絲生長速度顯著慢于其他試驗(yàn)組，且菌絲長勢(shì)差；pH 8、pH 9的試驗(yàn)組與pH 6、pH 7的試驗(yàn)組相比，菌絲生長速度沒有顯著差異，但菌絲長勢(shì)較差。因此選擇pH 6～7為最適pH范圍，且該試驗(yàn)結(jié)果與劉月廉等[12]報(bào)道的結(jié)果相似。

2.7 初步栽培結(jié)果分析

2．7．1 肺形側(cè)耳菌株ce1的子實(shí)體特征

初步對(duì)肺形側(cè)耳菌株ce1進(jìn)行人工栽培，不同配方條件下兩潮菇的子實(shí)體特征見圖3。

圖3 不同培養(yǎng)料配方栽培肺形側(cè)耳菌株ce1的子實(shí)體特征Fig．3 Fruit body characteristics of Pleurotus pulmonarius strain ce1 cultivated in different formulas of substrates

由圖3可見，肺形側(cè)耳菌株ce1在不同的5個(gè)配方培養(yǎng)料上均可形成子實(shí)體。圖中子實(shí)體形態(tài)由于采摘時(shí)間不一致或栽培條件的限制，部分表現(xiàn)出菌蓋邊緣卷曲、出菇位置不一或不同菌包產(chǎn)量差異較大。但綜合試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，不同配方栽培的子實(shí)體在其他培養(yǎng)條件相同的情況下形態(tài)沒有明顯差異；綜合表現(xiàn)為子實(shí)體叢生，菌蓋體積較小，菌蓋中心偏黑，菌柄較長。人工栽培時(shí)出菇溫度偏高（約20℃），導(dǎo)致菌蓋邊緣顏色偏白，符合市售平菇的特點(diǎn)。

2．7．2 人工栽培肺形側(cè)耳菌株ce1的生長情況

不同培養(yǎng)料配方條件下，人工栽培肺形側(cè)耳菌株ce1的菌絲生長速度及出菇時(shí)間情況見表6。

表6 不同培養(yǎng)料配方栽培肺形側(cè)耳菌株ce1的生長情況Tab．6 The growth situation of Pleurotus pulmonarius strain ce1 cultivated in different formulas of substrates

由表6可知，采用配方1（全稻草培養(yǎng)料）時(shí)菌絲生長速度顯著慢于其他試驗(yàn)組。使用添加了蓮蓬殼的配方4和配方5栽培菌株發(fā)現(xiàn)，在生產(chǎn)第1潮菇時(shí)，菌絲長滿栽培袋之前袋口已經(jīng)生長出部分原基，因此其出菇時(shí)間顯著短于其他試驗(yàn)組；但比較第2潮出菇時(shí)間，各配方之間沒有顯著差異。蓮蓬殼作為栽培肺形側(cè)耳的培養(yǎng)料組分時(shí)可能有促進(jìn)出菇的作用，但在后期營養(yǎng)供給能力可能下降。

2．7．3 肺形側(cè)耳菌株ce1栽培種產(chǎn)量分析

使用不同培養(yǎng)料配方栽培肺形側(cè)耳菌株ce1后，根據(jù)產(chǎn)量計(jì)算其生物學(xué)效率的分析結(jié)果見表7。

表7 不同培養(yǎng)料配方栽培肺形側(cè)耳菌株ce1的生物學(xué)效率Tab．7 Biological efficiency of Pleurotus pulmonarius strain ce1 cultivated in different formulas of substrates

由表7可知，配方2中第1潮菇的生物學(xué)效率顯著高于其他試驗(yàn)組，但第2潮菇的生物學(xué)效率和生物學(xué)效率合計(jì)與其他試驗(yàn)組沒有顯著差異。第2潮菇原基形成的成熟子實(shí)體數(shù)量及生物學(xué)效率較第1潮菇顯著減少，推測(cè)是有以下原因：1）第1潮菇生長消耗了菌棒中的營養(yǎng)；2）經(jīng)過長時(shí)間的開袋處理后，栽培袋表面含水量降低，菌絲無法形成原基；3）第2潮菇菇蕾主要形成于培養(yǎng)料和塑料袋的間隙中，子實(shí)體在間隙中生長可能會(huì)影響產(chǎn)量；4）第1潮菇采收過程中干癟、腐爛的子實(shí)體未處理干凈，同時(shí)氣候箱中空氣濕度較高，導(dǎo)致培養(yǎng)料表面被霉菌污染。綜合以上原因，肺形側(cè)耳子實(shí)體第2潮菇生物學(xué)效率降低。

2.8 菌糠中纖維素酶和木聚糖酶的活力分析

按照標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的試驗(yàn)方法，得到的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)液線性回歸方程為：

該回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2為0．991 7。

得到的木糖標(biāo)準(zhǔn)液線性回歸方程為：

該回歸方程的相關(guān)系數(shù)R2為0．995 8。

由相關(guān)系數(shù)R2可知2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線方程擬合度較好，可分別用其模型進(jìn)行酶活力分析。在人工栽培肺形側(cè)耳菌株ce1出菇后，收集不同配方的菌糠進(jìn)行酶活性測(cè)定，結(jié)果詳見表8。

表8 不同菌糠中纖維素酶和木聚糖酶的活性Tab．8 Viability of cellulase and xylanase in different chaff

由表8可知，在各個(gè)配方的菌糠中纖維素酶和木聚糖酶的活性均沒有顯著差異。表明該肺形側(cè)耳菌株的菌絲均能利用不同配方培養(yǎng)料中的纖維素和木聚糖，肺形側(cè)耳菌絲能利用的碳源種類較廣泛。

3 小結(jié)

目前，可人工栽培的常規(guī)食用菌品種種類較少，隨著市場(chǎng)需求的擴(kuò)大，野生食用菌的價(jià)格居高不下。進(jìn)行野生食用菌的人工馴化栽培，可優(yōu)化人工栽培食用菌品種單一化問題，并獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益。此次在湖南當(dāng)?shù)夭杉⒎蛛x得到了一株野生側(cè)耳菌株，通過分子鑒定技術(shù)確定了其種類為肺形側(cè)耳；此肺形側(cè)耳菌株的菌絲適合在純黑暗條件下生長，菌絲生長最適碳源為淀粉，最適氮源為酵母粉，最適溫度為25℃，最適培養(yǎng)基pH為6～7。采用蓮蓬殼、木屑和稻草作為培養(yǎng)料的主要原料，通過栽培試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該肺形側(cè)耳菌株在溫度為20℃、光照強(qiáng)度為1 000 lx、空氣濕度為90%的條件下成功出菇。

湘潭蓮藕產(chǎn)業(yè)正蓬勃發(fā)展，但其副產(chǎn)物蓮蓬殼尚未得到合理利用。采收蓮子后，蓮蓬殼常廢棄于水田中，造成水體污染。在本試驗(yàn)中，使用蓮蓬殼添加量最多的配方5（稻草秸稈40%、蓮蓬殼40%、米糠19%、蔗糖1%）栽培該肺形側(cè)耳菌株后，其子實(shí)體特征、生物學(xué)效率、纖維素酶和木聚糖酶的活性與其他配方相比沒有顯著差異。證明加入蓮蓬殼可優(yōu)化肺形側(cè)耳培養(yǎng)料內(nèi)部結(jié)構(gòu)，改善稻草培養(yǎng)料持水性不強(qiáng)、前處理難度較大的問題，且對(duì)菌株的出菇產(chǎn)量和栽培周期沒有影響。因此，在湘蓮產(chǎn)地周邊推廣蓮蓬殼栽培食用菌技術(shù)，不僅節(jié)省原料成本、運(yùn)輸成分，同時(shí)可解決蓮藕栽培產(chǎn)業(yè)的副產(chǎn)物處理問題。同時(shí)，通過此次試驗(yàn)，也為食用菌企業(yè)提供新型原料的利用思路，為湖南當(dāng)?shù)毓睫r(nóng)提供技術(shù)參考。