趙麗琴

(鎮(zhèn)雄縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，云南 鎮(zhèn)雄 657200)

版納微型豬近交系具有體型小、性情溫順的特點(diǎn)，通過連續(xù)20世代以上的高度近交，基因高度純合，其純合度已高達(dá)98.6%以上，僅可能有1%左右雜合，用他們進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究時(shí)，不會(huì)因?yàn)殡[性有害基因的暴露而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致性；遺傳穩(wěn)定性高，基因突變的概率很低，由此可以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性，因此，在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、藥學(xué)等領(lǐng)域的研究中應(yīng)用越來越廣泛。版納微型豬近交系成年豬體重為25 kg左右，具有基因純合度高、遺傳穩(wěn)定性好、體型小、飼養(yǎng)成本低、易于實(shí)驗(yàn)操作和標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)量控制等特點(diǎn)，是目前醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究中更為理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物[1]。

對(duì)版納微型豬近交系實(shí)施外科手術(shù)實(shí)驗(yàn)，麻醉是進(jìn)行手術(shù)首先考慮的問題，無(wú)論氣管插管還是剖腹觀察均需在良好的麻醉狀態(tài)下進(jìn)行，成功的麻醉是保障實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要環(huán)節(jié)，實(shí)驗(yàn)中選擇合適的麻醉劑和麻醉方法，既可以減少麻醉過深導(dǎo)致動(dòng)物死亡，又可以避免因麻醉太淺動(dòng)物術(shù)中躁動(dòng)而影響手術(shù)進(jìn)行。以往使用速眠新Ⅱ(864)、靜松靈、保寧定等獸用麻醉藥進(jìn)行麻醉，但其使用效果一直不理想，麻醉維持時(shí)間較短，且需多次給藥，給術(shù)者帶來諸多不便，一直是手術(shù)麻醉過程中難以解決的問題。本研究參照人醫(yī)麻醉管理策略，使用氯胺酮肌內(nèi)注射和丙泊酚靜脈推注分別對(duì)30例版納微型豬近交系實(shí)施麻醉，并在麻醉后施行皮膚取皮和敷料手術(shù)，在整個(gè)操作過程中注意觀察比較丙泊酚靜脈推注麻醉與氯胺酮肌內(nèi)注射麻醉在版納微型豬近交系實(shí)驗(yàn)中的麻醉效果，摸索出適合版納微型豬近交系的麻醉劑，掌握麻醉劑量及其維持時(shí)間，為尋求安全、有效、簡(jiǎn)單、合理的麻醉藥和麻醉方法，以適應(yīng)不同實(shí)驗(yàn)需求，為臨床正確使用提供理論依據(jù)和實(shí)際指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物

版納微型豬近交系，由云南省版納微型豬近交系重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供，年齡8～15月齡，體重15～25 kg，雌雄不限，共30頭。麻醉與手術(shù)均在云南省版納微型豬近交系重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物手術(shù)室完成。

1.2 藥物

鹽酸氯胺酮注射液：100 mg/支，批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字100761663，江蘇中牧倍康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。丙泊酚注射液：200 mg/支，批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字191377031，廣東嘉博制藥有限公司生產(chǎn)。硫酸阿托品注射液：0.5 mg/支，批準(zhǔn)文號(hào)：獸藥字221381510，四川恒通動(dòng)保生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.3 麻醉方法及用量

1.3.1術(shù)前準(zhǔn)備

根據(jù)使用麻醉劑的不同，將版納微型豬近交系隨機(jī)分為2組，每組15頭，A組用氯胺酮注射液肌注麻醉，B組用丙泊酚靜脈注射麻醉。每組實(shí)驗(yàn)豬于術(shù)前12 h禁食不禁水，術(shù)前洗澡；術(shù)前30 min肌內(nèi)注射阿托品每千克體重0.05 mg，抑制腺體分泌，以減少唾液分泌，有利于保持呼吸道通暢。

1.3.2麻醉方法

A組豬在麻醉前先稱重，按每千克體重0.01 mg的劑量在耳后部肌內(nèi)注射鹽酸氯胺酮注射液。B組每頭豬均在術(shù)前稱好體重，按每千克體重2.0 mg的量逐漸給予丙泊酚靜脈注射，待實(shí)驗(yàn)豬呼吸減慢，肢體活動(dòng)逐漸消失，進(jìn)入麻醉狀態(tài)后進(jìn)行手術(shù)。在進(jìn)行丙泊酚麻醉時(shí)，要根據(jù)手術(shù)類型、個(gè)體差異性及并發(fā)癥等因素綜合判斷丙泊酚的注射量，并在手術(shù)過程中不斷觀察隨時(shí)準(zhǔn)備調(diào)整。

1.3.3手術(shù)及麻醉監(jiān)測(cè)

對(duì)上述各組豬的背部?jī)蓚?cè)指定部位刮毛，先后用碘伏、酒精棉球消毒后實(shí)施手術(shù)取皮、敷料和包扎。在整個(gè)手術(shù)過程中記錄麻醉誘導(dǎo)開始至意識(shí)消失時(shí)間，停止麻醉至自主呼吸恢復(fù)時(shí)間、至清醒時(shí)間，同時(shí)在進(jìn)入麻醉維持期開始每隔10 min監(jiān)測(cè)一次體溫、心率和呼吸頻率。

1.4 觀察指標(biāo)及麻醉判定

1.4.1誘導(dǎo)期

從給藥時(shí)間到進(jìn)入麻醉狀態(tài)的時(shí)間。表現(xiàn)為精神沉郁、頭頸下垂、四肢無(wú)力、步履蹣跚，不能避讓障礙物，進(jìn)而倒臥在地，睫毛反射消失，全身肌肉松弛，痛覺消失，皮膚夾捏反應(yīng)減弱，即為進(jìn)入麻醉狀態(tài)。

1.4.2維持期

從進(jìn)入麻醉時(shí)間到開始蘇醒(出現(xiàn)疼痛反應(yīng)和開始騷動(dòng)，不配合手術(shù))時(shí)間。在維持期表現(xiàn)痛覺和觸覺消失，瞳孔散大，腹式呼吸，肌肉松弛，肌張力進(jìn)一步降低，皮膚夾捏反應(yīng)消失，豬體無(wú)振動(dòng)，手術(shù)切割無(wú)反應(yīng)。

1.4.3蘇醒期

從開始蘇醒時(shí)間到站立行走時(shí)間。蘇醒期表現(xiàn)為不配合手術(shù)或有輕微運(yùn)動(dòng)開始到完全能站立行走。

2 結(jié)果與分析

2.1 丙泊酚和氯胺酮麻醉對(duì)豬的誘導(dǎo)期、維持期和蘇醒期的影響

B組丙泊酚靜脈注射麻醉與A組氯胺酮肌內(nèi)注射麻醉的誘導(dǎo)期、維持期和蘇醒期的時(shí)間測(cè)定結(jié)果見表1。丙泊酚靜脈注射的過程中，麻醉起效很快，誘導(dǎo)期時(shí)間為(0.87±0.14)min，很多時(shí)候藥物(按體重計(jì)量的藥物)還未推注完，豬便昏迷倒地。從表1可以看出，B組的誘導(dǎo)期比A組短，差異極顯著(P<0.01)；但從兩種麻醉劑對(duì)豬體麻醉維持時(shí)間和蘇醒時(shí)間來看，用氯胺酮肌內(nèi)注射麻醉的A組明顯比丙泊酚靜脈注射麻醉的B組長(zhǎng)，差異也是極顯著(P<0.01)。

表1 兩組實(shí)驗(yàn)豬在麻醉各期的比較

2.2 麻醉后體溫、心率和呼吸頻率指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果

兩組實(shí)驗(yàn)豬在麻醉維持期間的體溫、心率、呼吸頻率的測(cè)定分析結(jié)果見表2。從兩組動(dòng)物注射麻醉劑后進(jìn)入完全昏迷狀態(tài)開始，測(cè)定0、10、20、30、40 min的體溫、心率、呼吸頻率三個(gè)生理指標(biāo)。從表2可以看出，麻醉維持期體溫從麻醉起效開始至40 min均呈下降趨勢(shì)，但幅度很小，至蘇醒前略有回升；心率從麻醉起效開始至蘇醒前幅度變化較小，較平穩(wěn)，但丙泊酚靜脈注射組在麻醉維持中期(20 min、30 min)比氯胺酮組略有降低外，在其他階段均比氯胺酮組略有升高；呼吸頻率從麻醉起效開始后的前30 min幅度變化較小，較平穩(wěn)，但30 min后，呼吸頻率開始呈現(xiàn)緩慢下降的態(tài)勢(shì)。從表2可以看出，體溫、心率和呼吸頻率在兩組間無(wú)差異。

表2 兩組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在麻醉中的生理指標(biāo)測(cè)定

2.3 麻醉效果

采用的30頭版納微型豬近交系在背部取皮制作創(chuàng)面模型，均已成功麻醉并順利完成手術(shù)，沒有發(fā)生不良反應(yīng)，無(wú)一例麻醉意外發(fā)生，成功率為100%。兩組實(shí)驗(yàn)在麻醉操作之前由于注射麻醉劑均會(huì)對(duì)豬體產(chǎn)生應(yīng)激，所以在麻醉前期心率和呼吸頻率較高。進(jìn)入麻醉狀態(tài)后，表現(xiàn)為呼吸、心率下降，眼球向內(nèi)下方，肌肉松弛，流涎、分泌增多，睫毛、角膜反射消失，肌張力進(jìn)一步降低，皮膚夾捏反應(yīng)消失。從表3可以看出，氯胺酮肌內(nèi)注射麻醉起效慢，自行臥倒時(shí)間和麻醉時(shí)間較長(zhǎng)，平穩(wěn)進(jìn)入麻醉后手術(shù)中體動(dòng)少不易蘇醒，無(wú)躁動(dòng)，效果較好，手術(shù)過程平穩(wěn)順利；丙泊酚靜脈注射麻醉，麻醉起效快，但維持時(shí)間不長(zhǎng)，術(shù)中偶有躁動(dòng)，體動(dòng)次數(shù)較多，疼痛反應(yīng)強(qiáng)，手術(shù)需要多次靜脈追加藥物劑量，但重復(fù)給藥不會(huì)延長(zhǎng)蘇醒時(shí)間，對(duì)劑量要求不是很嚴(yán)格，使用安全，但成本高。

表3 兩種麻醉方法的麻醉效果比較

3 討論

豬在解剖學(xué)、生理學(xué)、疾病發(fā)生機(jī)理等方面與人極其相似，在生命科學(xué)研究領(lǐng)域中具有重要的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值[2，3]，尤其是小型豬，因其體型小，飼養(yǎng)成本低，便于實(shí)驗(yàn)操作，在教學(xué)、科研中應(yīng)用極為廣泛。但由于小型豬生性膽小，不溫順，易躁動(dòng)，皮下脂肪較厚，耳靜脈、大隱靜脈等常用穿刺部位不是很清楚，不易準(zhǔn)確定位，而且脆性大，血管很容易破裂，靜脈穿刺失敗率高，耽誤時(shí)間較長(zhǎng)，常常給靜脈穿刺帶來很大的困難[4]。豬脂肪組織多，麻藥進(jìn)入腦組織除取決于腦/血分布系數(shù)外，在更大程度上受到脂肪組織多少的影響，血藥濃度只有在脂肪組織飽和后才能達(dá)到，因此，用量較大，起效晚，維持時(shí)間長(zhǎng)[5]。

氯胺酮是一種短效麻醉劑，術(shù)中鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)，對(duì)于血壓、心率、呼吸無(wú)明顯改變，易于麻醉管理。氯胺酮肌內(nèi)注射后3～7 min可進(jìn)入麻醉狀態(tài)，呼吸開始平穩(wěn)，睫毛、角膜反射遲鈍或者消失，此時(shí)已進(jìn)入麻醉狀態(tài)可實(shí)施手術(shù)。氯胺酮對(duì)于內(nèi)臟鎮(zhèn)痛作用弱，軀體性鎮(zhèn)痛作用強(qiáng)，特別適合體表及四肢的手術(shù)[6]。由于采取肌內(nèi)注射法麻醉，因而不受手術(shù)時(shí)間長(zhǎng)短的限制，可隨時(shí)掌握麻醉的深淺度，如發(fā)現(xiàn)麻醉出現(xiàn)較淺時(shí)可以隨時(shí)進(jìn)行肌注，1 min后很快進(jìn)入麻醉狀態(tài)，麻醉和止痛作用可維持30～50 min，故在手術(shù)結(jié)束前半小時(shí)應(yīng)停止用藥，術(shù)后在很短的時(shí)間內(nèi)可蘇醒。采用肌內(nèi)注射氯胺酮麻醉，操作簡(jiǎn)單，可操控性好。

丙泊酚是一種烷基石碳酸，以乳劑混懸液形式保存，其藥理特性優(yōu)于其他靜脈麻醉藥物，具有起效快、蘇醒快及術(shù)后不良反應(yīng)少等特點(diǎn)。在人醫(yī)全麻手術(shù)中應(yīng)用較廣，重復(fù)給藥在體內(nèi)無(wú)蓄積作用，不會(huì)延長(zhǎng)蘇醒時(shí)間，因此，采用丙泊酚復(fù)合麻醉的方法對(duì)豬麻醉效果比較理想。但采用靜脈注射，由于靜脈不宜找到，增加注射難度，延長(zhǎng)手術(shù)時(shí)間。丙泊酚麻醉起效快，平均(0.87±0.14)min，無(wú)蓄積作用，停藥則快速平穩(wěn)恢復(fù)，蘇醒時(shí)間是(4.67±1.23)min，重復(fù)給藥不會(huì)延長(zhǎng)蘇醒時(shí)間。此法比氯胺酮肌注給藥(麻醉起效時(shí)間3～7 min，完全蘇醒時(shí)間5～12 min)明顯優(yōu)越。在麻醉策略上，應(yīng)首先于術(shù)前對(duì)每頭豬肌內(nèi)注射阿托品注射液。因阿托品可以減少支氣管和唾液腺分泌，防止氣道阻塞，保證呼吸道暢通，阻斷血管-迷走神經(jīng)反射，但能使心率加快，因此，對(duì)豬要減少用量。在手術(shù)部位肌注一定劑量的局麻藥，有利于減輕手術(shù)部位的疼痛，以減少豬體的疼痛反應(yīng)和體動(dòng)，利于手術(shù)順利進(jìn)行。常用的局部麻醉藥有鹽酸普魯卡因、鹽酸利多卡因、鹽酸丁卡因等，其主要功能是作用于神經(jīng)干、神經(jīng)小結(jié)、神經(jīng)末梢，阻斷神經(jīng)興奮的傳達(dá)，使所支配部位痛覺消失，穿透力強(qiáng)，作用快、擴(kuò)散廣、持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，安全指數(shù)比較高[7]。

不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)麻醉藥的敏感度存在個(gè)體差異，麻醉藥物起效劑量差別較大，因此，麻醉應(yīng)遵循由淺入深的原則。豬由于皮下脂肪組織較多，肌內(nèi)注射時(shí)部分麻藥會(huì)進(jìn)入脂肪組織，因而麻醉時(shí)與其他動(dòng)物相比，藥物用量較大，起效較慢。若手術(shù)時(shí)間較長(zhǎng)，追加麻醉藥要嚴(yán)格控制劑量，一般不超過初始劑量的1/3，因?yàn)橛谢A(chǔ)麻醉，麻醉藥物稍微過量，便可能超過動(dòng)物的耐受閾值，導(dǎo)致麻醉過深。但其短期應(yīng)用可增強(qiáng)肝微粒體藥物酶的活性，產(chǎn)生耐藥現(xiàn)象，故每次應(yīng)用時(shí)劑量應(yīng)較前一次偏大[8-10]。

麻醉的深度是麻醉的關(guān)鍵。手術(shù)中要根據(jù)動(dòng)物的體重及健康狀況，仔細(xì)算好所需的麻醉藥物劑量。在進(jìn)行靜脈注射麻醉時(shí)，要控制給藥速度，不可將藥物一次快速推入，而要間歇性的緩慢推進(jìn)，在注射量達(dá)到預(yù)定劑量的1/2時(shí)，更要減緩給藥速度，并一邊注射，一邊觀察動(dòng)物的睫膜反射、肌松程度和呼吸頻率，一旦達(dá)到所需要的麻醉狀態(tài)時(shí)，立刻停止注射。為防止麻醉過深而引起動(dòng)物死亡，最好在手術(shù)前進(jìn)行氣管插管，以保持呼吸道通暢，爭(zhēng)取搶救時(shí)間，同時(shí)建立靜脈通道，連接三通接頭，利于追加麻醉藥物和輸液，有條件時(shí)還應(yīng)配備心電監(jiān)護(hù)儀，隨時(shí)監(jiān)控動(dòng)物的血壓、脈搏，盡早發(fā)現(xiàn)問題，減少損失。同時(shí)一定要注意保暖，防止豬體因麻醉手術(shù)后低溫死亡。

4 結(jié)論

通過對(duì)30例版納微型豬近交系的麻醉實(shí)驗(yàn)，認(rèn)為氯胺酮肌內(nèi)注射全身麻醉具有操作簡(jiǎn)單，誘導(dǎo)時(shí)間較短，自行臥倒時(shí)間和麻醉時(shí)間較長(zhǎng)，肌肉松弛好，麻醉過程平穩(wěn)，手術(shù)中體動(dòng)少不易蘇醒，無(wú)躁動(dòng)，效果較好，術(shù)后蘇醒快的特點(diǎn)，適合情況復(fù)雜且時(shí)間較長(zhǎng)的手術(shù)，是一種適合版納微型豬近交系手術(shù)的理想麻醉方法。