許倩，汪海宣，劉靜，陳扣寶，汪夢美

(合肥市食品藥品檢驗(yàn)中心，合肥 230001)

缺血性心肌病是發(fā)生率高的一種心臟病，病情發(fā)展速度快，死亡率高[1]。有資料顯示[2]，患者容易轉(zhuǎn)變?yōu)殡y治性心力衰竭，死亡率達(dá)5%。鹽酸多巴酚丁胺注射液是一種擬交感神經(jīng)藥物，激動(dòng)心臟β受體[3-4]，提高血管活性[5-6]，它的主要作用就是治療各種原因?qū)е碌男牧λソ摺Ｐ┝葵}酸多巴酚丁胺注射液在治療嬰幼兒重癥肺炎臨床效果明顯[7]，能夠直接刺激心臟，增強(qiáng)心肌的收縮力，可以使心排血量增加，還可以降低外周血管的阻力，使心肌耗氧量降低，從而使心臟負(fù)擔(dān)減輕，形成良好的循環(huán)。

在實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)含量的過程中，多種因素會(huì)對(duì)測量結(jié)果造成一定的影響[8-9]，測量不確定度評(píng)定已成為實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制的一項(xiàng)重要參數(shù)，普遍用于各類分析中[10-11]。關(guān)于高效液相色譜法測定鹽酸多巴酚丁胺注射液中鹽酸多巴酚丁胺含量的不確定度尚未見報(bào)道。筆者依據(jù)GB/T 27418—2017 《測量不確定度評(píng)定和表示》[12]，結(jié)合基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境和條件，分析了鹽酸多巴酚丁胺含量不確定度的主要原因，對(duì)測定結(jié)果進(jìn)行不確定評(píng)定[13-15]，降低檢驗(yàn)中可能引入的誤差，以此獲得更真實(shí)準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

電子天平：XP205 型，感量為0.01 mg，瑞士梅特勒-托特利多有限公司。

高效液相色譜儀：U3000 型，配有DAD 檢測器，美國賽默飛世爾科技有限公司。

移液管：5 mL，A 級(jí)，美國默克公司。

容量瓶：20、100 mL，A 級(jí)，美國默克公司。

鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品：含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）為99.8%，批號(hào)為101185-201202，中國食品藥品檢定研究院。

甲醇、乙腈：色譜純，美國賽默飛世爾科技公司。

鹽酸多巴酚丁胺注射液樣品：2 mL/支，山東方明藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司。

辛烷磺酸鈉：含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）為99.0%，天津益仁達(dá)試劑廠。實(shí)驗(yàn)所用其它試劑均為分析純。實(shí)驗(yàn)用水為超純水。

1.2 實(shí)驗(yàn)環(huán)境

環(huán)境溫度：22.3 ℃；相對(duì)濕度：55%。

1.3 色譜條件

色譜柱：Agilent zorbax C18柱(250 mm×5 mm，美國安捷倫科技有限公司)；流動(dòng)相：A 相為辛烷磺酸鈉（稱取辛烷磺酸鈉2.6 g，加入1 000 mL 水溶解，再加入3 mL 三乙胺，搖勻，用磷酸調(diào)節(jié)pH 值至2.5）；B 相為乙腈-甲醇(體積比為18∶82)，A 相與B 相體積比為55∶45，流量為1.0 mL/min；檢測波長：280 nm；柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：20 μL[16]。

1.4 溶液制備

鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品溶液：分別精密稱取鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品0.010 10、0.010 74 g，再分別置于兩只20 mL 溶量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至標(biāo)線，搖勻，濾過，分別作為對(duì)照品溶液1 (0.505 mg/mL)和對(duì)照品溶液2 (0.537 mg/mL)。

鹽酸多巴酚丁胺注射液樣品溶液：取鹽酸多巴酚丁胺注射液樣品40 支，混合，用5 mL A 級(jí)移液管精密量取溶液5 mL，置于100 mL 容量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至標(biāo)線，搖勻，濾過，平行制備10 份。

2 數(shù)學(xué)模型

鹽酸多巴酚丁胺注射液樣品中鹽酸多巴酚丁胺的質(zhì)量m由式(1)計(jì)算：

3 不確定度來源

根據(jù)數(shù)學(xué)模型，影響高效液相色譜法測定鹽酸多巴酚丁胺含量不確定度的因素，主要來源于兩個(gè)方面。

(1) A 類不確定度。鹽酸多巴酚丁胺重復(fù)性測量引入的不確定度；

(2) B 類不確定度。鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品稱量、純度引入的不確定度，鹽酸多巴酚丁胺注射液樣品、鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品溶液制備、稀釋及定容引入的不確定度。

4 不確定度評(píng)定

4.1 鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品質(zhì)量引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量urel(ms)

為使重復(fù)性測定引入的不確定度可信，平行稱取對(duì)照品兩份，稱量結(jié)果見表1。

表1 平行2 份對(duì)照品稱量數(shù)據(jù) mg

4.1.1 鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品純度引入的不確定度u1(ms)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書，實(shí)驗(yàn)所用的鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品純度為99.8%，其相對(duì)擴(kuò)展不確定度為2%，k=2，則鹽酸多巴酚丁胺對(duì)照品純度[17]引入的不確定度：

4.1.2 天平稱量的準(zhǔn)確性引入的不確定度u2(ms)

由儀器校準(zhǔn)證書提供，天平稱量允許的最大誤差為0.02 mg，利用差減法稱量2 次，根據(jù)JJF 1059.1—2012 《測量不確定度評(píng)定與表示》，采用B類評(píng)定，按照均勻分布考慮，k= 3，故天平稱量的準(zhǔn)確性引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

4.2 溶液定容及移液引入的不確定度u(V )

4.2.1 溶液定容

上述各不確定度分量互不相關(guān)，溶液定容所引入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

4.2.2 移液

4.3 重復(fù)性測量引入的不確定度

平行取樣10 份，進(jìn)行重復(fù)測定，鹽酸多巴酚丁胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)測定結(jié)果見表2。

表2 重復(fù)性測量鹽酸多巴酚丁胺質(zhì)量分?jǐn)?shù)測定結(jié)果

重復(fù)性測量引入的標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

5 合成相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

將各不確定分量匯總于表3。

表3 不確定度匯總表

上述各不確定度分量的來源彼此獨(dú)立且不相關(guān)，采用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度合成，合成得相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度：

6 擴(kuò)展不確定度

在95%的置信概率情況下，取包含因子k=2，則擴(kuò)展不確定度：

7 測量結(jié)果不確定度的報(bào)告與表示

在95%的置信概率情況下，包含因子k=2，測量結(jié)果：

8 結(jié)語

依據(jù)藥典標(biāo)準(zhǔn)測定鹽酸多巴酚丁胺注射液的含量，經(jīng)過分析計(jì)算和對(duì)照各因素引入的不確定度大小進(jìn)行綜合考量。結(jié)果得出，不確定度主要來源于人員因素，包括天平稱量和定容體積，其它因素引入的不確定度相對(duì)較小。因此在測定過程中，樣品制備過程中應(yīng)選擇校準(zhǔn)過的儀器和容量瓶，定期維護(hù)，使其保持良好的工作狀態(tài)；提高人員操作技能，定期對(duì)檢驗(yàn)人員進(jìn)行實(shí)操培訓(xùn)和加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部人員比對(duì)試驗(yàn)，減少人為誤差，提高實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。