王聯(lián)廣，馬 鵬*，付 雪，石安憲，龔聲信，范 斌

（1.昭通市綠色食品發(fā)展中心，云南昭通 657000；2.水富市人民醫(yī)院，云南水富 657800；3.昭通市昭陽區(qū)農(nóng)業(yè)環(huán)境保護(hù)監(jiān)測站，云南昭通 657000）

近年來，我國蔬菜生產(chǎn)過程中仍然存在非法或違規(guī)使用農(nóng)藥，導(dǎo)致違禁農(nóng)藥不斷檢出和常規(guī)農(nóng)藥超標(biāo)的現(xiàn)象不斷發(fā)生[1]，樂果、甲基對硫磷等農(nóng)藥在蔬菜中檢出及超標(biāo)率非常高，需對高檢出高超標(biāo)農(nóng)藥引起重視，做好實驗室質(zhì)量控制是保證檢測質(zhì)量的前提。

實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制是檢測人員在實驗分析過程中自我質(zhì)量控制的過程，一般采用平行雙樣實驗、加標(biāo)回收實驗、質(zhì)量控制圖等[2]，而使用質(zhì)量控制圖可發(fā)現(xiàn)實驗室實施質(zhì)量控制過程受控的變化趨勢及測量結(jié)果是否可控[3]。

質(zhì)量控制圖在重復(fù)性條件對同一類質(zhì)控品多次測定下，測定結(jié)果與頻次成正態(tài)分布的曲線。用標(biāo)準(zhǔn)差(s)來描述：假設(shè)曲線下的面積為100%，在無數(shù)次重復(fù)測定中，±1s、±2s、±3s 是恒定分布的，其中約95%的測定結(jié)果落在x—±2s 范圍內(nèi)，約99%的測定結(jié)果落在x—±3s 范圍內(nèi)。將正態(tài)分布曲線橫過來，以分析批次為橫坐標(biāo)，測定值在x—±1s、x—±2s、x—±3s區(qū)域打點，就形成S 質(zhì)控圖[4]。通過累積25個質(zhì)控結(jié)果，繪制質(zhì)量控制圖分析操作過程中異?，F(xiàn)象，分析產(chǎn)生誤差的原因，找出解決辦法，即可保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

樂果、甲基對硫磷[1 000 mg·L-1，農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所（天津）]；弗羅里矽柱（1 g/6 mL，天津博納艾杰爾科技有限公司）；丙酮、正己烷[色譜純，賽默飛世爾科技（中國）科技有限公司]；乙腈（分析純，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。

1.2 儀器與設(shè)備

安捷倫7890B 氣相色譜儀（美國安捷倫公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)RE-2000B（上海亞榮生化儀器廠）；電子天平DT-500B（常熟市金羊砝碼儀器有限公司）；勻漿機IKA T18（艾卡有限公司）；固相萃取裝QSE-240011、MFV-36 智能氮吹儀（得泰儀器科技有限公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 質(zhì)控樣品的制備

稱取25.0 g 制備好的番茄、南瓜樣品，按照0.2 mg·kg-1的比例添加樂果、甲基對硫磷標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻靜止30 min。加入50.0 mL 乙腈，勻漿2 min，過濾到加入5 ～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，劇烈振蕩1 min，分層后，移取10.00 mL 上清液于150 mL 雞心瓶中，40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干，加入5 mL 丙酮定容，過0.22 μm 膜待測。

1.3.2 色譜條件

HP-1701 石英毛細(xì)管柱色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）；氮氣為載氣（99.999%）；恒流模式；載氣流量為3.0 mL min-1；進(jìn)樣口220 ℃；檢測器220 ℃；尾 吹 流 量60 mL·min-1；色 譜 柱 柱 溫：150 ℃保持2 min，以8 ℃·min-1升至260 ℃，持續(xù)7.25 min；進(jìn)樣為不分流1.0 μL。

1.3.3 校準(zhǔn)溶液配制

按1.3.1 方法處理不加入農(nóng)藥的番茄、南瓜的空白基質(zhì)溶液；配制樂果、甲基對硫磷0.2 mg·kg-1校準(zhǔn)溶液，以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)單點校準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)量控制樣品測定結(jié)果

以番茄、南瓜累積添加0.2 mg·kg-1樂果、甲基對硫磷的25個回收率結(jié)果，剔除了80%～120%以外的值，如表1 所示，番茄中樂果和甲基對硫磷回收率分別為86.8% ～111.0%、RSD=6.5% 和88.7%～119.7%，RSD=7.9%，南瓜中樂果和甲基對硫磷回收率分別為82.4%～106.6%和RSD=6.9%和85.4%～114.6%、RSD=7.5%，加標(biāo)回收率均在80%～120%，RSD 在10%以內(nèi)，均符合質(zhì)控要求，可作為質(zhì)控圖繪制數(shù)據(jù)。

表1 番茄及南瓜樣品加標(biāo)回收率

2.2 質(zhì)量控制圖的繪制

蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測質(zhì)量控制圖的繪制需要累積至少25個質(zhì)控數(shù)據(jù)，剔除回收率在80%～120%以外的質(zhì)控值，計算回收率平均值x—和標(biāo)準(zhǔn)偏差s，以x—±2s 為警告限，x—±3s 為失控限，在坐標(biāo)圖上繪制x—、x—±1s、x—±2s、x—±3s 直 線 和 每 一 次 的 質(zhì) 控 值x折線，以這25個數(shù)據(jù)為暫定質(zhì)控圖，判斷第26個以后的數(shù)據(jù)在暫定質(zhì)控圖上是否在控，如圖1 ～4所示，當(dāng)累積更多數(shù)據(jù)點后，剔除離群值后（超過x—±3s 的數(shù)據(jù)），重新定均質(zhì)和質(zhì)控限作為新的質(zhì)控圖。

圖1 加標(biāo)番茄樣品0.2·mg kg-1 樂果質(zhì)控圖

圖2 加標(biāo)番茄樣品0.2·mg kg-1 甲基對硫磷質(zhì)控圖

圖3 加標(biāo)南瓜樣品0.2 mg·kg-1 樂果質(zhì)控圖

圖4 加標(biāo)南瓜樣品0.2 mg·kg-1 甲基對硫磷質(zhì)控圖

2.3 質(zhì)量控制圖分析

根據(jù)GB/T 4091—2020[5]判異規(guī)則，即有一個點落在x—±3s 外，有連續(xù)9 點在中心線x同一側(cè)，有連續(xù)6個點遞減或遞增，有14個點連續(xù)上下交替，有連續(xù)3 點中有2 點落在中心線x同一側(cè)x—±2s 以外的，有連續(xù)5 點中有4 點落在中心線同一側(cè)x—±1s 外，有連續(xù)15 點落在x—±1s 內(nèi)，有連續(xù)8 點落在中心線x 兩側(cè)且沒有在x—±1s 內(nèi)。圖1 ～4 前25個點成隨機分布，沒有出現(xiàn)異常判定規(guī)則情況，可作為日常農(nóng)藥殘留檢測圖1 ～4 第26個點以后結(jié)果的判定是否在控，如果檢測結(jié)果在質(zhì)控圖上表現(xiàn)出不符合上述判定規(guī)則，表明此次結(jié)果失控，需重新做樣。

3 結(jié)論與討論

本文建立了農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留檢測回收率質(zhì)控圖，保證實驗室日常農(nóng)藥殘留檢測質(zhì)量受到控制，本次番茄和南瓜中添加的樂果累積的25個結(jié)果回收率在86.8% ～111.0%、RSD=6.5% 和82.4%～106.6%、RSD=6.9%；添加甲基對硫磷累積的25個回收率在88.7%～119.7%、RSD=7.9%和85.4%～114.6%、RSD=7.5%，均符合質(zhì)控要求，可作為質(zhì)控圖繪制數(shù)據(jù)，且沒有違背質(zhì)控圖判異準(zhǔn)則。本次回收率質(zhì)控圖的繪制與應(yīng)用思路，能滿足日常開展農(nóng)藥殘留檢測質(zhì)控圖的應(yīng)用，可對檢測工作質(zhì)量控制增加信心，控制檢測結(jié)果失控的風(fēng)險。