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        奎屯地區(qū)337例哈薩克族和1 000例漢族婦女宮頸人乳頭狀瘤病毒感染狀況研究*

        2022-09-14 06:36:08呂新玲陳慧蕓周志梅
        黑龍江醫(yī)藥 2022年15期
        關鍵詞:哈薩克族年齡組危型

        呂新玲,魯 謹,陳慧蕓,周志梅,鄭 敏

        1.新疆伊犁哈薩克自治州奎屯醫(yī)院病理科,新疆 奎屯 833200;2.新疆石河子大學一附院婦科,新疆 石河子 832003;3.新疆伊犁哈薩克自治州奎屯醫(yī)院婦科,新疆 奎屯 833200

        目前研究已經(jīng)證實人乳頭狀瘤病毒(HPV)是宮頸病變的主要病因,HPV 感染在不同國家、不同地區(qū)、不同民族存在差異,而且不同類型在宮頸病變中的致病性也有差異,目前已有大量有關漢族和維吾爾族婦女宮頸HPV感染的報道,而哈薩克族在此方面的報道很少,哈薩克族與漢族在此方面的對比研究較少,為了解本地區(qū)哈薩克族與漢族婦女宮頸HPV感染狀況及優(yōu)勢,為宮頸病變的防治、高危人群的篩查、流行病學調查提供數(shù)據(jù)資料和參考,本研究對在樣本醫(yī)院婦科進行健康體檢、有性生活、自愿接受宮頸HPV 篩査的哈薩克族和漢族婦女進行了宮頸HPV 檢測,用PCR-反向點雜交法進行基因分型,現(xiàn)將結果報告如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選擇2012 年3 月—2018 年6 月在樣本醫(yī)院婦科門診進行健康體檢的人群中自愿參加HPV感染篩查、有性生活的337 例哈薩克族婦女,年齡18~69 歲,漢族婦女1 000 例,年齡18~76 歲,采集宮頸細胞學標本,進行HPV 分型檢測,由經(jīng)驗豐富的技術人員進行操作。

        1.2 標本采集

        所有研究對象在檢查前3 d 禁止進行陰道沖洗及陰道內用藥,避開月經(jīng)期,且婦檢前24 h未發(fā)生性行為,用窺陰器暴露宮頸,用棉拭子擦除表面分泌物,將樣本采樣刷插入宮頸口鱗柱交界處,單方向旋轉3~5圈,將采樣刷頭部放入洗脫管中,旋緊瓶蓋,做好標識,放入-20 ℃冰箱保存,一周內完成檢測。

        1.3 儀器與試劑

        亞能人乳頭瘤病毒基因分型檢測試劑盒(深圳亞能生物技術有限公司)可檢測23 種HPV 基因型,包括17 種高危型:16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82 型,6 種低危型:6、11、42、43、81、83型;凱普基因擴增儀購自廣東凱普生物科技股份有限公司,雜交儀為廣州安必平DA8000 型。

        1.4 實驗步驟

        (1)樣本預處理、DNA 提取。(2)聚合酶鏈反應:用PCR擴增儀對提取的DNA進行擴增;引物采用的目的基因片段為HPVL1 基因,大小為452 bp。(3)雜交:擴增DNA 產(chǎn)物與膜條上的探針雜交,孵育,避光顯色,具體操作步驟按試劑盒及儀器使用說明進行。(4)結果判讀:實驗結束后每張膜條上PC 位點均出現(xiàn)藍色信號,除PC 位點陽性信號外,23 種HPV 基因型別位點上出現(xiàn)藍色信號為陽性,可以是出現(xiàn)一個陽性信號的單一感染,也可以是出現(xiàn)兩個及以上陽性信號的混合感染。

        1.5 統(tǒng)計學方法

        采用SPSS 13.0 軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差()表示,組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料用例數(shù)和百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

        2 結果

        2.1 兩族婦女宮頸HPV、高危型HPV感染情況

        有94 例哈薩克族婦女宮頸HPV 感染為陽性,總感染率為27.89%,高危型感染率為24.33%,除82、83型別外,其余21種均有檢出;有251例漢族婦女宮頸HPV感染為陽性,總感染率為25.10%,高危型感染率為21.80%,23 種型別均有檢出;兩個民族婦女宮頸HPV總感染率、高危型感染率比較,差異無統(tǒng)計學意義(χ2=1.03、0.93,P>0.05),見表1、表2。

        表1 兩族婦女宮頸HPV感染情況

        表2 兩族婦女高危型HPV感染情況

        2.2 兩族婦女宮頸HPV各亞型單一基因型感染分布情況

        94 例HPV 陽性的哈薩克族婦女中,HPV 單一基因型感染62 例,占感染人數(shù)的65.96%,其中12 例為低危型單一感染,單一基因型感染最常見的亞型依次為52、16、56、81、18、53 型;251 例HPV 陽性的漢族婦女中,HPV單一基因型感染172例,占感染人數(shù)的68.53%,其中31例為低危型單一感染,單一基因型感染最常見的亞型依次為52、16、42、51、53、56型。

        2.3 兩族婦女宮頸HPV 多重(多種基因型)感染的分布情況

        94 例HPV 陽性的哈薩克族婦女中HPV 的多重感染率為34.04%,大多數(shù)是HPV52、16 型與其他亞型混合感染,多為二重感染,其余為三重、四重感染,1例為六重感染,無單純低危型混合感染;251 例HPV 陽性的漢族婦女中HPV 的多重感染率為31.47%,同樣是HPV52、16 型與其他亞型混合感染,大多為二重感染,其余為三重、四重和五重感染,2例為單純低危型混合感染。

        2.4 兩族婦女宮頸高危亞型HPV出現(xiàn)的頻率

        如表3所示,94例宮頸HPV 陽性的哈薩克族婦女中各高危亞型出現(xiàn)的頻率總計為120 次,HPV52 在陽性觀察對象中出現(xiàn)的頻率最高,達到15.83%,其次為HPV16(15.00%)、HPV53(10.00%)、HPV51(9.17%)、HPV39(7.50%)/HPV56(7.50%)和HPV18(6.67%),251 例宮頸HPV 陽性的漢族婦女中各高危亞型出現(xiàn)的頻率總計為302 次,HPV52 在陽性觀察對象中出現(xiàn)的頻率最高,達到25.5%, 其 次 為HPV16 (12.91%)、 HPV51 (8.94%)、HPV53 (6.62%)、HPV58 (6.29%)和HPV56(5.63%)/HPV68(5.63%)型。

        表3 兩族不同型別HR-HPV的檢出情況 例(%)

        2.5 兩族婦女不同年齡組HR-HPV感染的分布情況

        兩族婦女按年齡分成5 組,分別比較HR-HPV 感染率在各年齡組分布情況,哈薩克族婦女不同年齡組HR-HPV感染率比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),哈薩克族婦女HR-HPV感染與年齡相關,在<35歲年齡組明顯高于其他年齡組;漢族婦女不同年齡組HR-HPV 感染率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),漢族婦女HR-HPV 感染與年齡無關;HR-HPV感染在<35歲組、35~40歲組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),其余各年齡組HR-HPV 感染率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);哈薩克族婦女在<35歲年齡組存在感染高峰,而漢族婦女在45~50 歲、>50歲年齡組感染率較高,見表4。兩族婦女低危型HPV 感染例數(shù)較少,共35例,且年齡分布較廣。

        表4 兩族婦女不同年齡組HR-HPV感染分布情況

        3 討論

        近年來大量研究顯示,HPV 感染與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關,目前已有120 多種HPV 基因型被確定,與宮頸癌前病變及宮頸癌密切相關的高危型包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82,與女性生殖道良性濕疣性病變有關的低危型包括HPV6、11、42、43、81、83,本研究首次對新疆奎屯地區(qū)337 例哈薩克族、1 000 例漢族婦女宮頸23 種HPV感染狀況進行了檢測,對比分析如下。

        337 例哈薩克族婦女HPV 總感染率為27.89%,其中高危型感染率為24.33%,高于新疆塔城地區(qū)哈薩克族(5.80%)[1]、新疆奎屯地區(qū)哈薩克族(16.25%)[2]、新疆哈薩克族(14.00%)[3]、新疆伽師縣維吾爾族(10.30%)[4]、低于新疆維吾爾族(27.97%)[3]。1 000 例漢族婦女HPV總感染率為25.10%,其中高危型感染率為21.80%,高于新疆第四師漢族(19.21%)[5]、新疆塔城地區(qū)漢族(11.70%)[1]、新疆漢族(13.42%)[3],也高于世界自然婦女人群水平(10.40%)[6],高于在陽城、深圳和沈陽開展的以人群為基礎的多中心研究(14.80%~16.80%)[7],但是低于在烏魯木齊開展的機會性宮頸癌篩查(30.30%)[8],低于內蒙古地區(qū)(39.80%)[9]。本研究結果顯示,兩族宮頸HPV總感染率、高危型感染率比較差異無統(tǒng)計學意義,與陳志芳等[3]的報道一致,而劉迎春等[1]研究發(fā)現(xiàn),漢族(11.70%)明顯高于哈薩克族(5.80%),且差異有統(tǒng)計學意義,與本研究結論不一致,本組兩族婦女宮頸HPV感染率、兩族間的差異均與文獻報道有差別,可能與HPV感染的地域、種族差異以及樣本量的大小,納入標準和排除標準不一致有關,本研究樣本量較小,還待擴大樣本量進行研究。

        本研究兩族婦女宮頸HPV 感染以單基因型感染為主,單基因型感染率分別為65.96%、68.53%;多重感染占34.04%、31.47%,兩族病例多重感染率均低于陶萍萍等[10]的研究報道(44.60%),高于新疆奎屯地區(qū)哈薩克族(23.08%)[2]、新疆烏魯木齊維吾爾族和漢族(21.30%)[8],不同基因型HPV編碼外殼蛋白的基因變異很大,幾乎無交叉保護抗體,易造成高危型HPV 多重感染。有研究表明HPV 多重感染增加HPV 持續(xù)感染的時間,使其不易清除[11],多型別混合感染對宮頸病變發(fā)展程度有潛在影響,促進宮頸病變進展[12],然而有研究并不支持多重感染可促進宮頸病變的發(fā)展[8],本研究有待后續(xù)繼續(xù)研究多重感染與宮頸病變的關系。

        國際癌癥研究協(xié)會公布的15 種最常見的HPV 亞型依次為(遞減)16、 18、45、 31、 33、 52、 58、 35、59、 56、 39、 51、 73、 68、 66,16亞型與宮頸癌相關度最高,在宮頸癌中感染率為57.4%, 18亞型感染居第二位,占12.6%~25.7%[13],多數(shù)亞洲國家的研究認為HPV 58、 52 亞型居第三、四位[14],李霓等[15]也認為HPV58、52 是繼HPV16 型和18 型之后的重要型別,而也有學者認為我國宮頸癌感染以HPV16、58型為主,HPV18型感染率明顯低于國外報道[16],本研究顯示,本研究兩組觀察對象無論單一感染、還是混合感染最主要的基因型別是52、16型,混合感染中,高危型哈薩克族出現(xiàn)頻率依次為HPV52、16、53、51和39、56、18,漢族出現(xiàn)頻率依次為HPV52、16、51、53、58 和56、68,雖然前兩位均是52、16 型,但是漢族52 型占比明顯高于哈薩克族,16 型則相差不大,兩族前4位的基因型別基本一致,第5、6位則不同,18型感染率較低,以上結果不同于國際癌癥研究協(xié)會的結果及文獻報道,提示HPV 各亞型在兩族感染譜不同,排序不同,可能52、16是本地區(qū)易感染的型別,對本地區(qū)的型別研究除16、18 型外,應重點關注對52 型別感染的研究,再次證實HPV感染型別存在地域、種族差異,將來廣泛應用的二價和四價疫苗,只能預防覆蓋范圍內的感染,在本地區(qū)開展,能否起到廣泛性預防作用還有待繼續(xù)擴大樣本量繼續(xù)研究論證。

        有文獻報道性生活活躍的年齡組HPV 感染率高[17],也有些文獻報道HPV 感染與年齡無關[18],談佩華等[2]的研究結果顯示新疆哈薩克族婦女在45~50 歲年齡段HPV感染率較高,但在不同年齡分組之間差異無統(tǒng)計學意義;狄麗努爾·熱孜木等[4]研究認為新疆喀什伽師縣維吾爾族婦女,年齡在30~34 歲的HPV 陽性較其他年齡段高,但各年齡段HPV 陽性率差異無統(tǒng)計學意義,王英紅等[19]研究發(fā)現(xiàn)維吾爾族婦女HR-HPV 感染與年齡無關,而漢族婦女HR-HPV 感染在<35 歲組顯著高于維吾爾族,差異有統(tǒng)計學意義,漢族存在<35 歲和45~50 歲組兩個感染高峰;黃霞等[4]對新疆第四師20 107 名漢族婦女行HPV 檢測,研究結果為HPV 陽性率高峰值在年齡在40~49 歲年齡組,雖各年齡組間HPV 陽性率差異均無統(tǒng)計學意義。本研究哈薩克族婦女HR-HPV 感染在<35 歲、35~40歲年齡組明顯高于其他年齡組,存在感染高峰,隨著年齡的增高逐漸下降;而漢族婦女HR-HPV 感染雖然在各年齡組的差異無統(tǒng)計學意義,但在45~50 歲、>50 歲年齡組感染率較高;哈薩克族婦女HR-HPV 感染在<35歲組、35~40歲組顯著高于漢族婦女。本研究與文獻報道部分相符,哈薩克族在年輕婦女出現(xiàn)兩個高峰,可能是由于年輕婦女性生活頻繁,病毒持續(xù)感染,病毒負荷量高,免疫系統(tǒng)未被致敏,宿主免疫清除能力弱等多因素相互作用導致;漢族在45~50 歲、>50 歲年齡組感染率較高,可能是因為圍絕經(jīng)期激素水平下降,對宿主的免疫系統(tǒng)調節(jié)產(chǎn)生較大影響,對HPV病毒的清除、抑制能力較弱,導致病毒持續(xù)感染。本研究結果再次顯示HR-HPV 感染狀況的地域、民族、年齡特點,在本地區(qū)針對HPV篩查和干預時,應加強對<35 歲及35~40 歲年齡組哈薩克族人群和45~50歲及>50歲年齡組漢族人群健康宣教。

        本研究提示HPV52、16 亞型在兩族中均居前2 位,其余均存在差異,且兩個民族感染率、感染型別前幾位與國內外其他研究也有不一致之處,HPV52在本地區(qū)兩個民族中均居高位,可能系環(huán)境、遺傳、內分泌、免疫等因素相互作用的結果,應加強監(jiān)測,擴大樣本量繼續(xù)研究論證,未來盡可能找到對本地區(qū)起到廣泛性預防的疫苗。

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