王遠玲， 陳 林

(1.湖北省孝感市中心醫(yī)院兒科， 湖北 孝感 432003 2.湖北省婦幼保健院兒科， 湖北 武漢 430070)

小兒反復(fù)呼吸道感染(Recuerrent respiratory tract infections,RRTIs)指患兒一年中發(fā)生上或下呼吸道感染頻次超出正常范圍，疾病發(fā)生率占兒科門診約30%[1]。在呼吸道感染中，肺炎支原體(Mycoplasma pneumoniae,MP)、嗜肺軍團菌(Legionella pneumophila,LP)、肺炎衣原體(Chamydiae pneumoniae,CP)均為常見病原體類型，有傳染性，可在各個年齡組的兒童中出現(xiàn)[2]?，F(xiàn)階段臨床關(guān)于上述3種病原體感染關(guān)注度越來越高，然而針對RRTIs患兒的相關(guān)文獻報道較少。本研究對186例RRTIs患兒血清MP、CP、LP進行檢測，分析其分布特點，旨在為疾病的預(yù)防治療提供參考，報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料：選取本院2017年9月至2021年9月186例RRTIs患兒，男96例(51.61%)，女90例(48.39%)；0～2歲44例(23.66%)，3～6歲76例(40.86%)，7～12歲66例(35.48%)；篩查季節(jié)：春季51例(27.42%)，夏季39例(20.97%)，秋季55例(29.57%)，冬季41例(22.04%)。

1.2納入標準：符合全國呼吸道學(xué)術(shù)會議修訂的RRTIs診斷標準[3]：①0～2歲：年發(fā)作次數(shù)大于等于7次；②3～6歲患兒：年發(fā)作次數(shù)大于等于6次；③7～12歲患兒：年發(fā)作次數(shù)大于等于5次，2次感染發(fā)生間隔在7d以上(注：①兩次感染間隔至少7d以上；上呼吸道感染次數(shù)不夠時候可加上下呼吸道感染次數(shù)，反之則不能；確定次數(shù)須連續(xù)觀察1年；反復(fù)肺炎：須由肺部體征和影像學(xué)證實，1年內(nèi)發(fā)作≥2次，且期間無肺炎體征和影像學(xué)改變)。0～12歲。未有急性感染表現(xiàn)；血MP、CP或LP病原體感染；倫理委員會批準，監(jiān)護人同意。排除標準：①原發(fā)免疫缺陷性疾??；②重度營養(yǎng)不良；③合并肺部發(fā)育不良、過敏性鼻炎、哮喘等；④長期使用影響免疫的藥物，如糖皮質(zhì)激素等；⑤合并其他傳染疾病。

1.3病原學(xué)檢測：取3mL空腹靜脈血，分離血清，通過間接免疫熒光法測定血清CP、LP病原體IgM，取血清15μL，加入PBS及抗人IgG吸附劑各150μL，對照無須通過抗人Ig G吸附劑處理，離心，于載玻片上滴入15μL血清，置入濕盒，37℃溫度1.5h孵育，PBS沖洗浸泡，輕搖，蒸餾水沖洗后風(fēng)干。滴入15μL抗人Ig M異硫氰酸熒光素，濕盒中37℃下孵育30min，重復(fù)上述PBS沖洗及與風(fēng)干系列操作，蓋上蓋玻片，400倍熒光鏡下觀察，出現(xiàn)特異性熒光，則可判斷為相應(yīng)抗體陽性；如未出現(xiàn)特異性熒光，則判為相應(yīng)抗體陰性。用被動凝集法檢測血清MP-IgM，試劑盒由日本富士瑞必歐株式會社提供，半定量檢測血清MP抗體滴度，操作步驟按說明書執(zhí)行，MP-IgM≥1∶80為MP感染。

1.4統(tǒng)計學(xué)分析：通過SPSS22.0軟件，計數(shù)資料通過構(gòu)成比或率的形式表示，不同性別、年齡、季節(jié)組間病原體陽性率的比較采用卡方檢驗，檢驗水準為0.05；對三組或四組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義者進行兩兩比較，采用Bonferroni校正，三組間兩兩比較檢驗水準α=0.05/3=0.017；四組間兩兩比較檢驗水準α=0.05/6=0.0083。

2 結(jié) 果

2.1三種病原體陽性結(jié)果比較：RRTIs患兒血清MP病原體陽性率31.72%高于CP陽性率19.89%(P<0.017，Bonferroni校正)，CP病原體陽性率19.89%高于LP陽性率8.06%(P<0.017，Bonferroni校正)。見表1。

表1 三種病原體陽性結(jié)果比較

2.2性別差異性比較：不同性別RRTIs患兒血清MP、CP、LP病原體陽性率比較(P>0.05)。見表2。

表2 性別差異性比較

2.3年齡差異性比較：3～6歲年齡段RRTIs患兒血清MP、CP、LP病原體檢測陽性率分別為51.32%、34.21%、17.11%高于0～2歲患兒13.64%、9.09%、2.27%，且高于7～12歲患兒21.21%、10.61%、1.52%(P<0.017，Bonferroni校正)。見表3。

表3 年齡差異性比較

2.4季節(jié)差異性比較：冬季RRTIs患兒血清MP、CP、LP病原體陽性率分別為58.54%、41.46%、24.39%高于春季25.49%、13.73%、3.92%，高于夏季17.95%、12.82%、2.56%，高于秋季27.27%、14.55%、3.64%(P<0.0083，Bonferroni校正)。見表4。

表4 季節(jié)差異性比較

3 討 論

RRTIs病因復(fù)雜，大部分由先天原因、免疫功能低、缺乏微量元素等導(dǎo)致，反復(fù)發(fā)作、遷延不愈，近年來隨著人們生活環(huán)境和生活習(xí)慣的改變，發(fā)病率呈上升趨勢。研究顯示呼吸道感染其流行和季節(jié)、區(qū)域、年齡均有一定關(guān)系，表現(xiàn)出不同流行特點[4]。

不同病原體導(dǎo)致的RRTIs感染癥狀以及采用的治療方式存在一定的差異，確定致病病原體，分析病原體感染特點，針對性做好預(yù)防工作，合理選擇抗菌藥物，有利于患兒早日康復(fù)。MP、CP、LP感染中，MP屬于細胞外寄生生物，可于無細胞培養(yǎng)基中進行生長繁殖，主要經(jīng)呼吸道飛沫傳播，MP感染人口密集地區(qū)發(fā)病率較高，病情重且病程長，易損傷臟器，可引起相關(guān)細胞出現(xiàn)變性甚至死亡，并可致使白介素等升高，同時由于其不具備細胞壁，青霉素和頭孢類抗生素應(yīng)用無效，可選擇敏感抗生素較少[5]。CP作為細胞內(nèi)寄生生物，具有細胞壁，CP感染發(fā)生后可致咽喉、氣管、肺部等炎癥。LP為細胞內(nèi)寄生，屬于條件致病性微生物，可致呼吸性細支氣管、肺部炎癥。明確感染病原學(xué)，指導(dǎo)抗生素的使用，對RRTIs患兒康復(fù)有重要意義。

本研究中MP病原體陽性率31.72%高于CP、LP病原體陽性率19.89%、8.06%，分析其原因在于MP是目前在可獨立生活微生物中已知體積最小的，可由空氣飛沫傳播，與其他感染患者接觸易感[6]。本研究中CP陽性率低于MP且又高于LP，人類是CP唯一宿主，其生物活性較MP差。LP可入侵機體巨噬細胞，其表現(xiàn)出的致病性與胞內(nèi)寄生的能力有關(guān)，受機體免疫制約。本研究中反復(fù)呼吸道感染患兒MP、CP感染率高于Elhussein AM等[7]研究結(jié)果，這可能是由于地域、人群種族、生活習(xí)慣、病原體傳播等的影響。

本研究中RRTIs患兒MP、CP、LP陽性率無性別差異，與韓宏楓等[8]研究結(jié)果一致。Calapodopulos NVI等[9]研究顯示MP、CP、LP感染貫穿各個年齡階段，檢出峰值在學(xué)齡前期兒童。本研究也顯示3～6歲患兒MP、CP、LP病原體感染陽性率高于0～2歲與7～12歲患兒，分析可能原因，一方面由于年齡較小兒童免疫系統(tǒng)尚未完全發(fā)育完善、成熟，為呼吸道感染發(fā)生創(chuàng)造了條件；另一方面，0～2歲兒童受家長精心呵護，和外界的接觸較少，病原體入侵機會較少，而3～6歲患兒普遍處于幼兒園集體學(xué)習(xí)階段，接觸人員多，病原體均可通過飛沫及密切接觸進行傳播，感染率較高。周霞等[10]研究結(jié)果顯示MP、CP、LP呈現(xiàn)一定的季節(jié)性特征，且以冬季陽性率較春夏明顯升高。本研究中3種病原體陽性率以冬季最高，與上述研究結(jié)果一致，冬季天氣寒冷，早晚溫差相對較大，而相較于成年人，兒童溫度敏感性高，氣溫驟變影響機體免疫，更易發(fā)生急性呼吸道感染，這與Tian Y等[11]研究中認為的RRTIs全年散發(fā)，且以秋冬季高發(fā)的特點一致，由此也提示家長應(yīng)做好冬季小兒保暖工作。本研究的不足之處在于，樣本量較少，未針對三種病原體感染，針對性分析其耐藥性，后續(xù)研究過程中可擴大樣本量，在分析病原體感染的同時，進一步分析其耐藥性。

綜上所述，在RRTIs患兒中，呼吸道感染MP、CP、LP病原體中以MP感染率最高，CP感染次之，以LP最低，但在不同年齡段患兒易感性不同，3～6歲患兒MP、CP、LP病原體感染陽性率高于0～2歲與7～12歲患兒，同時病原體流行存在季節(jié)差異，以冬季感染率最高。臨床上應(yīng)針對兒童RRTIs病原菌感染流行特點，制定合理預(yù)防和診療方案。