盧丹玉 王敏麗 楊通飛 王健尤 林柏全 劉國(guó)艷 梁巧妍

1.南寧市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西南寧 530001；2.南寧市第五人民醫(yī)院心理科，廣西南寧 530001；3.南寧市第五人民醫(yī)院婦科，廣西南寧 530001；4.南寧市第五人民醫(yī)院精神科，廣西南寧 530001

炎癥在抑郁癥發(fā)病機(jī)制中的作用已經(jīng)得到確認(rèn)[1]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，抑郁癥患者體內(nèi)促炎細(xì)胞因子升高，尤其是在疾病的早期階段[2-3]。精神分裂癥的陰性癥狀和抑郁癥炎癥標(biāo)志物升高的共同發(fā)現(xiàn)可能與其共同的潛在發(fā)病機(jī)制有關(guān)[4]。研究表明，炎癥細(xì)胞因子可能參與抑郁癥和精神病的發(fā)病機(jī)制，其中白介素-6（interleukin-6，IL-6）是主要的候選者之一[5]。在抑郁癥和精神病患者以及有發(fā)展這些疾病風(fēng)險(xiǎn)的人群中，IL-6水平通常升高[6]。IL-6基因在精神分裂癥和抑郁癥這兩種常見的精神疾病中的作用到底如何，至今尚無定論。IL-6基因啟動(dòng)子區(qū)有多個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)，本研究選擇IL-6基因rs1800795、rs1800796位點(diǎn)，探討IL-6基因多態(tài)性在精神分裂癥和抑郁癥中的作用，為精神分裂癥和抑郁癥的病因?qū)W研究提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年8月至2020年7月在南寧市第五人民醫(yī)院（我院）住院的精神分裂癥和抑郁癥患者及同期在我院進(jìn)行健康體檢者作為研究對(duì)象，分別為精分組、抑郁組及對(duì)照組。精分組113例，男54例，女59例，平均年齡（32.2±9.3）歲；抑 郁 組114例，男55例，女59例，平 均 年 齡（31.21±11.95）歲；對(duì)照組110例，男54例，女56例，平均年齡（32.3±6.3）歲。精分組及抑郁組納入標(biāo)準(zhǔn)：符合《疾病和有關(guān)健康問題的國(guó)際統(tǒng)計(jì)分類》（international statistical classification of diseases and related health problems，ICD-10）[7]精神分裂癥和抑郁癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)；首次發(fā)病或急性復(fù)發(fā)就診的精神分裂癥和抑郁癥患者；年齡18～60歲，性別不限；患者或其監(jiān)護(hù)人對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。精分組及抑郁組排除標(biāo)準(zhǔn)：符合精神分裂癥和抑郁癥以外的其他ICD-10精神障礙的診斷；軀體性疾病或腦器質(zhì)性疾病所致精神障礙者；合并嚴(yán)重軀體疾病、自身免疫性疾病、感染或者其他炎癥疾病者；妊娠期或者哺乳期女性；濫用藥物者。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡18～60歲的健康體檢者；自愿參加本研究并簽署知情同意書。對(duì)照組排除標(biāo)準(zhǔn)：精神疾病或抑郁癥病史及相關(guān)家族史。三組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

所有研究對(duì)象于入組當(dāng)日或次日清晨8∶00～10∶00空腹采集肘靜脈血2 ml置于EDTA抗凝管，分裝后置于-20℃用于DNA提取。所用DNA提取試劑盒購(gòu)自美國(guó)Axygen，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。將提取后的DNA樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增（PCR購(gòu)自德國(guó)AnalytikJena，型號(hào)：Easy Cycler）。采用SNapShot法和Sanger法進(jìn)行IL-6基因分型測(cè)序。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均使用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用t檢驗(yàn)和非參數(shù)檢驗(yàn)比較各組間的一般資料。病例組和對(duì)照組基因型和等位基因頻率采用直接計(jì)算法，采用Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)判斷研究對(duì)象是否來自同一孟德爾群體。

2 結(jié)果

2.1 IL-6基因rs1800795、rs1800796位點(diǎn)測(cè)序結(jié)果

精分組rs1800795位點(diǎn)檢測(cè)到1例CG基因型，其他各組全部為GG基因型；rs1800795位點(diǎn)只檢測(cè)到1例CG基因型，故不做后續(xù)的結(jié)果分析。rs1800796位點(diǎn)在各組均可檢測(cè)到CC、CG、GG基因型。

2.2 三組基因型和等位基因頻率

IL-6基因rs1800796位點(diǎn)在對(duì)照組中的頻率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P＞ 0.05），提示本研究樣本具有代表性。IL-6基因rs1800796位點(diǎn)的CG基因型頻率分布在精分組和對(duì)照組間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.770，P=0.020），等位基因在兩組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）；IL-6基因rs1800796位點(diǎn)的CC基因型頻率分布在抑郁組和對(duì)照組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=14.300，P=0.000），C、G等位基因頻率分布在兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=16.110，P=0.000）。見表1～3。

表1 三組IL-6基因rs1800796位點(diǎn)Hardy-Weinberg平衡檢驗(yàn)[n（%）]

3 討論

IL-6是一種多效促炎細(xì)胞因子，由多種非免疫和免疫細(xì)胞釋放并介導(dǎo)急性炎癥反應(yīng)。有研究顯示，IL-6在精神分裂癥的潛在發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著重要的作用[8-10]，重度抑郁癥的病因與炎癥有關(guān)，而免疫反應(yīng)已被證實(shí)受基因影響[11]，因此推測(cè)免疫功能障礙中的基因因素可能參與了重度抑郁癥的病理生理過程[12]。IL-6/IL-6R通路參與了嚴(yán)重抑郁癥和精神病的發(fā)病機(jī)制[6]，細(xì)胞因子作為精神分裂癥遺傳和環(huán)境共同途徑的一部分出現(xiàn)[13]。全基因組分析已經(jīng)確定染色體7p21.1～22.3區(qū)域，包含IL-6基因，作為精神分裂癥的易感位點(diǎn)之一，IL-6是一種具有促炎、免疫調(diào)節(jié)和神經(jīng)保護(hù)活性的多功能細(xì)胞因子，在精神分裂癥的發(fā)病機(jī)制中有重要意義，精神分裂癥患者血液中IL-6水平升高[14-16]。然而，不同的研究給出的結(jié)果并不一致[17]。

表2 精分組與對(duì)照組IL-6 基因rs1800796位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布比較[n（%）]

表3 抑郁組與對(duì)照組IL-6基因 rs1800796位點(diǎn)基因型和等位基因頻率分布比較[n（%）]

IL-6基因 rs1800795多態(tài)性的分布因地理區(qū)域和種族差異而有所不同。本研究結(jié)果顯示，精神分裂癥患者組的rs1800795位點(diǎn)檢測(cè)出1例CG基因型，多態(tài)性頻率低，與國(guó)內(nèi)的研究rs1800795位點(diǎn)不存在多態(tài)性的結(jié)果不完全一致[18-19]。IL-6基因rs1800795多態(tài)性與亞美尼亞人群精神分裂癥患者有關(guān)聯(lián)，被認(rèn)為是亞美尼亞人精神分裂癥患者的潛在危險(xiǎn)因素[20]。本研究結(jié)果顯示，IL-6基因rs1800796位點(diǎn)存在多態(tài)性，精神分裂癥組CG基因型頻率與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），兩組之間的等位基因C、G頻率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）。近年有研究發(fā)現(xiàn)許多重度抑郁癥的病因?qū)W與免疫系統(tǒng)相關(guān)的易感基因和染色體區(qū)域[21]。據(jù)國(guó)外研究報(bào)道，IL-6基因rs1800795啟動(dòng)子功能多態(tài)性可增加應(yīng)激和干擾素治療誘發(fā)抑郁癥的風(fēng)險(xiǎn)[22-23]。研究報(bào)道，IL-6基因rs1800797多態(tài)性的A等位基因頻率在重度抑郁癥患者組中明顯高于對(duì)照組，rs1800796多態(tài)性在兩組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05）[24]。本研究結(jié)果顯示，IL-6基因rs1800795在抑郁組和對(duì)照組中不存在多態(tài)性。而IL-6基因rs1800796位點(diǎn)的CC基因型頻率和C等位基因頻率在抑郁組均顯著高于對(duì)照組（P＜ 0.05）。本研究結(jié)果與國(guó)內(nèi)外報(bào)道不完全一致的原因可能有：IL-6基因rs1800795、rs1800796位點(diǎn)多態(tài)性存在明顯的種族、民族和地域的差異；也可能與各研究所選取的樣本在種族、民族和地域方面的差異以及研究方法的不同有關(guān)；IL-6基因表達(dá)的調(diào)控機(jī)制存在疾病和組織的特異性；本研究為小樣本量研究，需要再進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量。

綜上所述，IL-6基因rs1800796位點(diǎn)與精神分裂癥及抑郁癥的關(guān)系仍待進(jìn)一步研究。本研究?jī)H探討了IL-6基因rs1800795、rs1800796多態(tài)性兩個(gè)位點(diǎn)，今后應(yīng)注意選擇其他多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行研究，從炎性反應(yīng)因子、分子通路等方面探討研究精神分裂癥和抑郁癥發(fā)病機(jī)制，進(jìn)一步尋求治療疾病的新靶點(diǎn)，為治療提供新的方向。