賈學(xué)敏，程鋮，劉麗婭，聶久偉，付恒建，湯磊,，楊元勇*

(1.貴州醫(yī)科大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550004；2.貴州省化學(xué)合成藥物研發(fā)利用工程技術(shù)研究中心，貴州 貴陽(yáng) 550004)

在過(guò)去的幾十年中，許多含氮雜環(huán)在藥物設(shè)計(jì)中發(fā)揮了重要作用。嘧啶環(huán)被認(rèn)為是藥物化學(xué)中的一種特殊結(jié)構(gòu)，以嘧啶為核心的化合物具有多種類型的生物和藥物活性，嘧啶衍生物常被作為抗菌劑、抗病毒劑及抗腫瘤劑等[1-4]。Nagender等[5]研究開(kāi)發(fā)了一系列新的吡唑[3,4-b]吡啶和嘧啶功能化1,2,3-三唑衍生物，抗菌結(jié)果表明該系列化合物在金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)MTCC 96，S.aureusMLS-16 MTCC 2940的拮抗關(guān)系中都顯示出較好的抑菌活性，其中活性最優(yōu)化合物的最低抑菌濃度可低至15.6 mg/L；Suresh等[6]研究合成了一系列新型吡喃并[2,3-d]嘧啶類化合物，并對(duì)其進(jìn)行了一系列的抗生物膜活性的篩選，結(jié)果顯示此系列化合物對(duì)S.aureusMTCC 96和S.aureusMLS-16 MTCC 2940有著較好的抑菌活性，最低抑菌濃度可分別低至15.6 mg/L和3.9 mg/L。同時(shí)，哌嗪因其廣泛的藥理活性而在藥物化學(xué)中受到關(guān)注[7]。許多哌嗪衍生物通常表現(xiàn)出一系列顯著的治療活性，包括抗分枝桿菌、抗菌、抗病毒、抗真菌、抗腫瘤、抗鎮(zhèn)痛、抗驚厥活性等[8-9]；Chaudhary等[10]合成了一系列取代的哌嗪衍生物并測(cè)試了其抑菌活性，結(jié)果表明1-甲基-4-(3-苯基-2-丙基)哌嗪在30 mg/L的濃度下對(duì)S.aureusMTCCB 737的抑制區(qū)為18 mm；Chandra等[11]設(shè)計(jì)合成了一系列新型取代的 1-[雙(4-氟苯基)甲基]哌嗪衍生物，顯示1-[雙(4-氟苯基)甲基]-4-戊基哌嗪對(duì)S.aureusATCC 25953的最低抑菌濃度約30.00 mg/L。已有研究顯示嘧啶與哌嗪片段耦合的部分化合物對(duì)S.aureus顯示出一定的抗菌活性，但是活性相對(duì)較低[10-12]。因此，本研究根據(jù)活性拼合原理，合成一系列哌嗪取代嘧啶類化合物并對(duì)其進(jìn)行抗菌活性的研究，以期篩選出活性更好的抗菌化合物。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)菌株S.aureusATCC 433000和表皮葡萄球菌(Staphylococcusepidermidis，S.epidermidis)102555購(gòu)于北京北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)研究院，大腸埃希菌(Escherichiacoli，E.coli)Dh5a、銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa，Ps.aeruginosa)ATCCC 9027及MRSA 20151026025為貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科饋贈(zèng)。

1.1.2主要試劑 2-氨基-4,6-二氯嘧啶、哌嗪類底物和酰氯類底物(上海畢得醫(yī)藥)，米勒頓肉湯(mueller-hinton broth，MHB)培養(yǎng)基、96 孔板、無(wú)菌培養(yǎng)皿、無(wú)菌離心管、一次性槍頭及一次性比色皿(貴陽(yáng)超遠(yuǎn)志誠(chéng))，實(shí)驗(yàn)柱層析所用200～300目的硅膠(煙臺(tái)新諾化工)，實(shí)驗(yàn)所用化學(xué)反應(yīng)試劑和層析溶劑均為分析純(上海沃化化工)。

1.1.3主要儀器 SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛(ài)朗)；ZF-Ⅰ型三用紫外分析儀(上海顧村)，81-2型恒溫磁力攪拌器(上海司樂(lè))，WRX-4顯微熔點(diǎn)儀(上海易測(cè))，Xevo G2-XS型四極桿-飛行時(shí)間質(zhì)譜(美國(guó)Waters)；600M超導(dǎo)核磁共振波譜儀(德國(guó)Bruker)，BSC-1600IIB2蘇凈安泰生物安全柜(南京貝登)，震蕩培養(yǎng)箱和THZ-82N臺(tái)式恒溫震蕩培養(yǎng)器(上海躍進(jìn))，DW-86W海爾醫(yī)用超低溫保存箱(青島海爾)，電熱恒溫培養(yǎng)箱(上海一恒)，SH-250生化培養(yǎng)箱(上海精宏)，721G-100紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海儀電)，ZYCGF-II-107超純水機(jī)(四川卓越)，LDZX-75KBS立式壓力蒸汽滅菌器(上海申安)，ELX800型酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(美國(guó)伯騰)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1目標(biāo)化合物的合成 室溫氮?dú)庀聦?.5 mmol/L酰氯原料滴加入含有1 mmol/L 2-氨基-4,6-二氯嘧啶原料和2 mmol/L N, N-二異丙基乙胺的干燥甲苯溶液2 mL中，110 ℃下反應(yīng)4 h，用薄層色譜法(thin-layer chromatography，TLC)監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)度；待2-氨基-4,6-二氯嘧啶完全反應(yīng)后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋干溶劑，經(jīng)乙酸乙酯和1 mol/L鹽酸溶液萃取，飽和碳酸氫鈉溶液萃取有機(jī)層，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉，過(guò)柱層析，得到相應(yīng)的目標(biāo)化合物中間體3；在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，2 mL異丙醇中依次加入1 mmol/L化合物3、1.1 mmol/L取代哌嗪原料、1.5 mmol/L三乙胺，室溫溫反應(yīng)1～2 h，用TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)進(jìn)度；完全反應(yīng)后，經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋干溶劑，乙酸乙酯和1 mol/L鹽酸溶液萃取，飽和碳酸氫鈉溶液萃取有機(jī)層，經(jīng)無(wú)水硫酸鈉，過(guò)柱層析，得到相應(yīng)的目標(biāo)化合物4a～4j[13-14]。見(jiàn)圖1。

圖1 目標(biāo)化合物的合成路線

1.2.2抑菌活性的測(cè)試 根據(jù)美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)(clinical and laboratory standards institute, CLSI)的方法，從-80 ℃冰箱取一環(huán)菌液于含MHB培養(yǎng)基5 mL 的無(wú)菌離心管中，37 ℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h；取200 μL活化后菌液于含 MHB 5 mL培養(yǎng)基的無(wú)菌離心管中，37 ℃恒溫培養(yǎng)3～4 h，菌液濃度調(diào)至1×109CFU/L(D600=0.1時(shí)，菌濃度為1×1010CFU/L)[15]；將待測(cè)化合物配成5120 mg/L后待用；標(biāo)記編號(hào)96孔聚苯乙烯板，從第3列開(kāi)始在每孔中加上述配好的化合物10 μL及MHB 100 μL，每個(gè)化合物設(shè)置1個(gè)復(fù)孔(即每塊96孔聚苯乙烯板測(cè)4個(gè)化合物)，以苯唑西林(Oxacillin)加于96孔板的第1～2行作為陽(yáng)性對(duì)照組，第3～8行分別加3個(gè)目標(biāo)化合物作為實(shí)驗(yàn)組；分別于第1列和第3列加MHB 100 μL和90 μL；將第3列混勻后吸取100 μL混液加入第4列，按此方法等倍稀釋至第12列，第12列吸取混液100 μL后棄之；第2列到第12列分別加上述配好的菌液100 μL；第1列為空白對(duì)照組，第2列為陰性對(duì)照組，藥物的終濃度為256.00、128.00、64.00、32.00、16.00、8.00、4.00、2.00、1.00、0.50、0.25 mg/L，菌液終濃度為5×108CFU/L，總體積為200 μL；96孔板放入37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h，比較觀察孔中培養(yǎng)基渾濁情況，觀察到澄清的1孔濃度即為對(duì)該菌的最低抑制濃度(minimal inhibitory concentration, MIC)[16]；分別選取革蘭陽(yáng)性菌S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555、MRSA 20151026025和革蘭陰性菌E.coliDh5a、Ps.aeruginosaATCC 9027測(cè)定目標(biāo)化合物4a～4j的MIC。

2 結(jié)果

2.1 化合物的結(jié)構(gòu)表征

2.1.1化合物4a系N-[4-氯-6-(4-甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]十四酰胺，白色固體，產(chǎn)率為99%，熔點(diǎn)為128～130 ℃；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ6.55(s，1H)，3.71(s，4 H)，2.55(t，J=7.4 Hz，2H)，2.52～2.47(m，4H)，2.34(s，3H)，1.71～1.61(m，2H)，1.40～1.27(m，20H)，0.91(t，J=7.2 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ173.8，163.1，159.9，156.7，96.6，54.0，44.7，43.5，36.7，31.7，29.4，29.3，29.3，29.2，29.2，29.1，29.0，28.9，24.9，22.3，13.1；HRMS(ESI)C23H40ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值均為438.300 0。

2.1.2化合物4b系N-[4-氯-6-(4-苯基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]十四酰胺，白色固體，產(chǎn)率為30%，熔點(diǎn)為82～84 ℃；1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ7.30(d,J=8.7 Hz，2H)，6.98～6.88(m，3H)，6.25(s，1H)，3.82(s，3H)，3.29～3.24(m，4H)，2.69(s, 2H)，2.36(t，J=7.5 Hz，1H)，1.70(d，J=7.6 Hz，2H)，1.29～1.25(m，20H)，0.88(t，J=7.2 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ163.0，160.0，156.4，150.7，129.3，120.6，116.5，96.3，49.0，44.2，37.6，31.9，29.7，29.6，29.6，29.5，29.5，29.4，29.3，29.3，24.8，22.7，14.1；HRMS(ESI)C28H42ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為500.315 6和500.315 7。

2.1.3化合物4c系N-4-(6-氯-2-十四烷氨基嘧啶-4-基)哌嗪-1-甲酸乙酯，白色固體，產(chǎn)率為63%，熔點(diǎn)為87～89 ℃；1H NMR(600 MHz，CDCl3)δ6.21(s，1H)，4.18(q，J=7.1 Hz，2H)，3.62(m，7H)，2.66(d，J=6.8 Hz，2H)，2.35(t，J=7.5 Hz，1H)，1.69(m，2H)，1.30～1.25(m，23H)，0.88(d，J=6.9 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，CDCl3)δ163.0，160.2，156.3，155.4，96.3，61.8，37.6，31.9，29.7，29.6，29.6，29.5，29.4，29.4，29.3，29.2，29.1，24.8，22.7，14.6，14.1；HRMS(ESI)C23H38ClN5O3[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為468.274 1和468.273 4。

2.1.4化合物4d系N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]十四酰胺，白色固體，產(chǎn)率為95%，熔點(diǎn)為74～76 ℃；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ6.53(s，1H)，3.04(d，J=12.5 Hz，1H)，2.96(t，J=12.0 Hz，1H)，2.82～2.74(m，2H)，2.61(t，J=11.4 Hz，1H)，2.54(t，J=7.2 Hz，2H)，1.71～1.63(m，2H)，1.44～1.20(m，22H)，1.14(d，J=6.4 Hz，3H)，0.90(t，J=7.0 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ173.9，163.1，160.0，156.6，96.6，51.8，43.3，36.7，31.7，29.4，29.3，29.3，29.2，29.2，29.1，29.1，28.9，24.9，22.3，13.0，10.3；HRMS(ESI)C23H40ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為438.300 0和438.299 9。

2.1.5化合物4e系N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]十四酰胺，白色固體，產(chǎn)率為99%，熔點(diǎn)為76～78 ℃；1H NMR(600 MHz，CD3OD)δ6.58(s，1H)，3.76(s，2H)，3.59(s，2H)，3.09～3.02(m，2H)，2.52(t，J=7.4 Hz，2H)，1.66(d，J=7.3 Hz，2H)，1.37～1.26(m，20H)，1.23(s，6H)，0.89(t，J=7.1 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，CD3OD)δ173.9，163.3，160.1，156.6，96.4，53.0，51.7，48.1，42.6，39.3，36.7，31.6，29.4，29.3，29.3，29.2，29.1，29.1，29.0，28.9，24.9，22.7，22.3，13.0；HRMS(ESI)C24H42ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值均為452.315 6。

2.1.6化合物4f系N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]辛酰胺，淺黃色固體，產(chǎn)率為99.0%，熔點(diǎn)為226～228 ℃；1H NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ10.15(s，1H)，6.57(s，1H)，3.52(s，2H)，3.37(s，2H)，2.77～2.70(m，2H)，2.45(t，J=7.0 Hz，2H)，1.53(d，J=14.1，7.0 Hz，2H)，1.25(t，J=7.8 Hz，8H)，0.99(s，6H)，0.85(t，J=7.0 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ172.0，163.4，159.9，157.0，96.8，54.6，38.4，36.9，34.1，31.6，29.0，28.9，25.0，22.5，22.0，14.4；HRMS(ESI)C18H30ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為368.221 7和368.220 2。

2.1.7化合物4g系N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]己酰胺，白色固體，產(chǎn)率為93.3%，熔點(diǎn)為281～282 ℃；1H NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ10.35(s，1H)，6.76(s，1H)，3.96(d，J=6.5 Hz，2H)，3.74(s，2H)，3.15(d，J=6.4 Hz，2H)，2.43(t，J=7.4 Hz，2H)，1.54(d，J=7.2 Hz，2H)，1.31(d,J=7.5 Hz, 6H)，1.26(m，4H)，0.86(t，J=7.2 Hz，3H)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ172.1，163.4，159.9，157.0，96.8，54.6，38.4，36.9，31.3，24.6，22.3，22.0，14.3；HRMS(ESI)C18H22ClN5O2[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為340.190 4和340.189 3。

2.1.8化合物4h系N-2-{[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]氨基}-2-氧代乙酸乙酯，白色固體，產(chǎn)率為93.0%，熔點(diǎn)為253～255 ℃；1H NMR(600 MHz，DMSO-d6/CD3OD)δ6.03(s，1H), 4.30～4.24(m，4H)，3.44(s，3H)，3.25(s，2H)，3.12(s，1H)，2.70～2.68(m，2H)，0.97(s，6H)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ 163.7，162.7，159.6，90.7，61.7，49.9，40.1，39.8，39.7，24.9；HRMS(ESI)C14H20ClN5O3[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為342.133 3和342.131 7。

2.1.9化合物4i系N-N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]-2-(噻吩-2-基)乙酰胺，淺棕色固體，產(chǎn)率為97.0%，熔點(diǎn)為216～219 ℃；1H NMR(600 MHz, DMSO-d6)δ10.64(s，1H)，7.38(dd，J=4.8，1.5 Hz，1H)，7.03～6.87(m，2H)，6.76(s，1H)，4.01(s，2H)，3.89(s，2H)，3.67(s，2H)，3.08～3.04(m，2H)，1.90(s，1H)，1.25(s，6H)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ169.2，163.9，160.3，157.4，137.5，127.6，126.1，97.6，54.5，39.2，38.4，23.0；HRMS(ESI)C16H20ClN5OS[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為366.115 5和366.112 1。

2.1.10化合物4j系N-[4-氯-6-(3,3-二甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基]-2,4,6-三甲基苯甲酰胺，白色固體，產(chǎn)率為97.2%，熔點(diǎn)為423～425 ℃；1H NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ10.68(s，1H)，6.83(s，2H)，6.50(s，1H)，3.46～3.22(m，4H)，2.61(s, 2H)，2.22(s，3H)，2.09(s，6H)，1.86(s，1H), 0.84(s，6H)；13C NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ182.0，170.5，168.1，166.5，162.8，159.5，156.5，136.8，128.1，96.1，40.2，40.1，24.7，20.9，19.1；HRMS(ESI)C20H26ClN5O[M+H]+的理論值和實(shí)際值分別為388.190 4和388.188 2。

2.2 抑菌活性

以O(shè)xacillin作為陽(yáng)性對(duì)照，分別選取革蘭陽(yáng)性菌S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555、MRSA 20151026025和革蘭陰性菌E.coliDh5a、Ps.aeruginosaATCC 9027用于評(píng)估目標(biāo)化合物4a～4j的抑菌活性。結(jié)果顯示，目標(biāo)化合物4a～4j起始濃度256.00 mg/L時(shí)，化合物4a對(duì)S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555及MRSA 20151026025的MIC分別為16.00 mg/L、8.00 mg/L及128.00 mg/L；化合物4d和4e對(duì)S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555及MRSA 20151026025的MIC均為2.00 mg/L；其余化合物于256.00 mg/L濃度時(shí)對(duì)它們沒(méi)有明顯抑菌活性；其中化合物4d、4e對(duì)MRSA 20151026025的MIC明顯優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組，但目標(biāo)化合物對(duì)革蘭陰性菌E.coliDh5a、Ps.aeruginosaATCCC 9027并在256.00 mg/L濃度下未顯示出抑菌活性。見(jiàn)表1。

表1 目標(biāo)化合物4a～4j的抗菌活性

3 討論

S.aureus是分布最廣的細(xì)菌病原體之一，每年在全球范圍內(nèi)引起嚴(yán)重的皮膚感染及難以估計(jì)的侵襲性感染[17]。它是引起呼吸道、手術(shù)部位、假體關(guān)節(jié)與心血管感染，以及醫(yī)院菌血癥和其他感染疾病的主要病原體，通常不會(huì)危及生命，但發(fā)病率較高并可能伴有嚴(yán)重疼痛[18-20]。細(xì)菌感染對(duì)醫(yī)療保健和社區(qū)環(huán)境存在著嚴(yán)重的威脅，尤其是耐藥菌的廣泛傳播。由于S.aureus分離株中經(jīng)常出現(xiàn)抗生素耐藥性，S.aureus感染尤為棘手，其中MRSA與甲氧西林敏感的S.aureus相比，MRSA感染更可能造成公共衛(wèi)生負(fù)擔(dān)增加[21]。MRSA是引起高發(fā)病率醫(yī)院獲得性感染的主要原因，包括軟組織和骨骼感染、菌血癥及心內(nèi)膜炎，其發(fā)病率和死亡率都很高[20，22-23]。同時(shí)，MRSA對(duì)氨基糖苷類、大環(huán)內(nèi)酯類及林可酰胺等抗生素產(chǎn)生耐藥性的菌株的數(shù)量也一直在增加[24]。據(jù)中國(guó)細(xì)菌耐藥監(jiān)測(cè)網(wǎng)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，2020年S.aureus占全國(guó)革蘭陽(yáng)性菌病原菌的32.56%，對(duì)MRSA的檢出率和耐藥率均在35%以上[25]。因此，具有臨床應(yīng)用前景的抗S.aureus活性先導(dǎo)化合物成為科研工作者們的研究熱點(diǎn)。眾所周知，嘧啶和哌嗪是許多大體積化合物的骨架，也是多種上市藥物的重要核心結(jié)構(gòu)[26-27]。Moesslacher等[28]研究表明，在單一結(jié)構(gòu)框架內(nèi)將吡啶環(huán)與哌嗪部分結(jié)合可增強(qiáng)生物活性。近年來(lái)研究結(jié)果顯示，抗MRSA活性的先導(dǎo)化合物常常通過(guò)引入鹵代基團(tuán)或增加化合物的脂溶性提高其抗菌活性[29]。本研究在嘧啶環(huán)與哌嗪環(huán)活性拼接的基礎(chǔ)上，考慮嘧啶環(huán)有較強(qiáng)的親水性，故于2位引入親脂性的酰胺脂肪長(zhǎng)鏈，同時(shí)于4位引入氯原子，得到化合物4a～4j共10個(gè)化合物；后續(xù)抑菌活性測(cè)試結(jié)果提示，當(dāng)哌嗪環(huán)的氮上有給電子基的甲基存在時(shí)，化合物4a對(duì)S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555及MRSA 20151026025有一定的抑制效果；含有空間位阻和吸電子基的化合物4b和4c于256.00 mg/L濃度下，則無(wú)明顯抑制效果；意外的是，當(dāng)哌嗪氮上為氫原子時(shí)，化合物4d和4e對(duì)S.aureusATCC 433000、S.epidermidis102555及MRSA 20151026025的抑菌作用明顯增強(qiáng)，可能是氫鍵作用的影響或者是仲胺較強(qiáng)的親核性使其可以與親電中心進(jìn)行共價(jià)鍵結(jié)合而發(fā)揮作用；隨后對(duì)嘧啶環(huán)上酰胺側(cè)鏈進(jìn)行構(gòu)效關(guān)系的研究顯示，當(dāng)酰胺側(cè)鏈的烷基鏈縮短后抑菌活性也隨之降低，引入酯基后化合物4h于256.00 mg/L濃度時(shí)也沒(méi)有產(chǎn)生抑菌效果；引入芳族基團(tuán)，試圖與抗菌靶點(diǎn)形成潛在的π-π共軛，然而化合物4i和4j于256.00 mg/L濃度時(shí)并沒(méi)有表現(xiàn)出抑菌活性；隨后選用革蘭氏陰性菌E.coliDh5a、Ps.aeruginosaATCCC 9027對(duì)目標(biāo)化合物作進(jìn)一步活性評(píng)估，結(jié)果表明它們并沒(méi)有對(duì)這2個(gè)菌株表現(xiàn)出抑菌活性。

綜上所述，本研究設(shè)計(jì)合成的哌嗪取代嘧啶類化合物4a、4d和4e對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌S.aureusATCC 433000和S.epidermidis102555具有較好的抗菌潛力，尤其是4d與4e對(duì)MRSA 20151026025的抗菌活性明顯優(yōu)于陽(yáng)性藥Oxacillin。因此，本研究可為抗葡萄球菌提供新的先導(dǎo)化合物，并為后續(xù)的抗生素開(kāi)發(fā)提供理論參考，但是對(duì)于目標(biāo)化合物抑菌的作用機(jī)制還需要進(jìn)一步的探索。