華杰，劉根才

（浙江維康藥業(yè)股份有限公司，浙江 麗水 323000）

金錢草具有利濕退黃、利尿通淋、解毒消腫功效，用于治療濕熱黃疸、膽脹脅痛、石淋、熱淋、小便澀痛、癰腫疔瘡、蛇蟲咬傷等疾?。?］229。目前，臨床已有片劑、顆粒劑、膠囊等多種劑型，金錢草片收載于2020 年版《中國藥典（一部）》，是目前以單味金錢草成方收載于《中國藥典》的單味制劑［1］1165。分散片具有崩解迅速、吸收快、服用方便、生物利用度高等特點，是速釋制劑研究的重點劑型［2］1，［3］。為此，本研究中結(jié)合金錢草片的臨床應用及藥材性質(zhì)，篩選金錢草分散片的最優(yōu)處方及最佳制備工藝，并考察其影響因素?，F(xiàn)報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

GM400E 型濕法制粒機、FBD300E 型沸騰干燥機（重慶瀚威迪科技有限公司）；HGD -3500 型固定料斗混合機（武漢恒達昌機械設(shè)備有限公司）；PGS-83型雙出料高速壓片機（北京翰林航宇科技發(fā)展有限公司）；AWH-150TW 型電子臺秤（上海英展機電企業(yè)有限公司）；BS124S 型電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司，精度為萬分之一）；Agilent 1260 型高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；ZRS-8G 型溶出度試驗儀（天津大學精密儀器廠）；ZB-1E 型崩解儀、FT-2000A 型脆碎度檢測儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；KQ500DB 型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，功率為500 W，頻率為40 kHz）。

1.2 試藥

金錢草藥材（四川眾鼎中藥發(fā)展有限公司，批號為190901）；槲皮素對照品（純度為99.1%，批號為100081-201610），山柰酚對照品（純度為93.2%，批號為110861-202013），均購自中國食品藥品檢定研究院；甲醇（色譜純，賽默飛世爾科技<中國>有限公司，批號為196565），磷酸（色譜純，阿拉丁試劑有限公司，批號為C1801089）；甲醇（批號為20190912），鹽酸（批號為20181209），均為AR純，均購自國藥集團化學試劑有限公司；羧甲淀粉鈉（批號為20160936），微晶纖維素（批號為161062），二氧化硅（批號為20161014），低取代羥丙纖維素（批號為20160705），均購自湖州展望藥業(yè)有限公司；硬脂酸鎂（批號為160919），羧甲纖維素鈉（批號為160708），交聯(lián)羧甲纖維素鈉（批號為160503），預膠化淀粉（批號為150320），均購自安徽山河藥用輔料股份有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 提取工藝研究

2.1.1 浸泡時間［4］與吸水率考察

浸泡時間：稱取金錢草藥材200 g，加14 倍水浸泡，使藥材全部浸沒于水中，每隔5 min觀察1次浸潤程度，待藥材全部浸潤透心為止，記錄浸泡時間。重復3次，結(jié)果取平均值，測得浸泡時間為30 min。

吸水率：藥材浸潤透心后，濾過，至水盡，稱定藥渣的質(zhì)量，計算藥材吸水率。吸水率（%）=［（藥渣濕重-藥材干重）/ 藥材干重）× 100%，測得藥材平均吸水率為221%，結(jié)果見表1?？梢?，吸水率對煎煮時的加水量有較大影響，第1次煎煮的加水量應考慮藥材吸水率的因素，即第1次煎煮的加水量較第2次、第3次多2倍。

表1 藥材吸水率測定結(jié)果Tab.1 Results of water absorption determination of medicinal materials

2.1.2 加水量考察

金錢草為全草類藥材，質(zhì)輕，吸水量較大，故選擇加水量為12倍、10倍、8倍3個水平。藥理學研究表明，金錢草的抗炎作用顯著，其抗炎有效成分為黃酮類及酚酸類［5］。出膏率是直接影響成品制成量的重要因素，故選擇以黃酮類成分槲皮素（C15H10O7）和山柰酚（C15H10O6）的總含量和出膏率為考察加水量的評價指標。

樣品制備：稱取金錢草藥材300 g，分別按12 倍、10 倍、8 倍加水量煎煮3次，每次1 h，合并煎液，200 目篩濾過，濾液濃縮至適量，精密移入500 mL 容量瓶中，定容，即得金錢草濃縮液。

在教學中首先應該注意的就是要轉(zhuǎn)變幼兒的學習方式。聲勢教學能夠打破傳統(tǒng)的教學觀念，避免幼兒在學習中感到枯燥，讓幼兒以一種輕松的心情去學習，不會感到累，也不會有負擔，這樣才能夠讓幼兒愿意學、喜歡學，同時也保證教師完成自己的教學內(nèi)容。

評價指標測定：取上述濃縮液約10 mL，精密稱定，置干燥至恒重的蒸發(fā)皿內(nèi)，水浴蒸干，置105 ℃烘箱中干燥3 h，移至干燥器中冷卻30 min，迅速稱定質(zhì)量，計算出膏率。出膏率（%）=［（固形物重/取樣量×濃縮液總量）/ 藥材質(zhì)量］× 100%。槲皮素和山柰酚的總含量測定按2020 年版《中國藥典（四部）》通則0512 項下高效液相色譜法［2］61，以及2020年版《中國藥典（一部）》金錢草含量測定項下方法進行。

考察結(jié)果：見表2?？梢?，加水量對提取效果有較大影響，加12倍、10倍水均優(yōu)于加8倍水，而加12倍、10 倍水的出膏率及槲皮素和山柰酚的總含量均無明顯差異。綜合考慮生產(chǎn)成本和能耗，確定加水量為10倍。

表2 加水量考察結(jié)果Tab.2 Investigation results of water addition

2.2 制劑處方優(yōu)化

2.2.1 單因素考察

崩解劑：崩解劑的類型對分散片的崩解時間影響較大，對制劑成品的分散均勻性至關(guān)重要。對于以不同藥味制成的中成藥中崩解劑的選擇，需要根據(jù)藥材的屬性來選擇合適的崩解劑。本試驗中選擇最常用的羧甲淀粉鈉、羧甲纖維素鈉、交聯(lián)羧甲纖維素鈉、低取代羥丙纖維素作為崩解劑，以崩解時限作為考核指標來判斷分散片的分散均勻性。結(jié)果見表3，故選擇低取代羥丙纖維素為崩解劑。

表3 崩解劑種類篩選（s）Tab.3 Screening of disintegrant types（s）

填充劑：填充劑是可增加片劑質(zhì)量或體積，有利于片劑成型，有利于改善制劑過程物料性能的藥用輔料，片劑制劑中不可或缺。分散片一般選擇有親水溶脹性的填充劑，在增加片劑質(zhì)量的同時，可促進片劑崩解［6］。本試驗中選擇最常用的預膠化淀粉、微晶纖維素、羧甲纖維素鈉、交聯(lián)羧甲纖維素鈉作為填充劑，以分散片的外觀、硬度、溶出度作為考察指標。結(jié)果見表4，故選擇微晶纖維素作為填充劑。

表4 填充劑種類篩選Tab.4 Screening of filler types

助流劑：二氧化硅粒徑很小，藥物粒子間可充分容納二氧化硅微粒，這種填充方式降低了藥物粒子間的相互作用力，使藥物流動性能提升，在制粒壓片時有效地改善顆?；蚍勰┑牧鲃有裕趯ζ瑒┲亓坎町惖陌芽兀?］。二氧化硅作為藥用輔料加入制劑中能顯著提高藥物的崩解與溶出速率，故分散片廣泛采用二氧化硅作助流劑［7-10］。根據(jù)前期預試驗考察結(jié)果，選擇二氧化硅作為助流劑。

2.2.2 正交試驗優(yōu)化

試驗設(shè)計：根據(jù)單因素考察結(jié)果，選擇以低取代羥丙纖維素為崩解劑、微晶纖維素為填充劑，二氧化硅為助流劑，硬脂酸鎂為潤滑劑。前期預試驗結(jié)果提示，對金錢草分散片制劑工藝影響最大的因素是崩解劑、填充劑、助流劑。故本試驗選擇低取代羥丙纖維素占處方總量的百分含量（因素A）、微晶纖維素占處方總量的百分含量（因素B）、二氧化硅占處方總量的百分含量（因素C）為考察因素，每個因素設(shè)3 個水平。根據(jù)小試研究結(jié)果，確定各輔料占金錢草分散片處方總量的百分含量，確定各輔料含量。因素水平表見表5。

表5 正交試驗因素與水平（%）Tab.5 Factors and their levels of the orthogonal test（%）

試驗結(jié)果與分析：以金錢草分散片外觀、硬度、崩解時間、顆粒休止角為評價指標，調(diào)節(jié)金錢草分散片處方中崩解劑、填充劑和助流劑的比例，采用L9（34）正交試驗確定金錢草分散片處方工藝。試驗數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件分析數(shù)據(jù)，結(jié)果見表6?？芍幏?，6，8 崩解時間均在150 s 以上，已接近《中國藥典》分散片標準（3 min 以內(nèi)），在工業(yè)化生產(chǎn)中不易控制；處方3，5，7 崩解時間在標準里，但外觀和硬度達不到要求；處方2 的外觀和硬度一般，且其崩解時間比處方4 和9 稍差；處方4 和9 的硬度和崩解時間無顯著差異，但處方9 的外觀優(yōu)于處方4，且處方9 和用量多于處方4；處方1，6，8 休止角大于30°，顆粒流動性不能滿足生產(chǎn)過程中流動性的需求；處方3，5，7 休止角小于30°，流動性最好，但二氧化硅用量較大，控制重量差異時波動較大；處方2，4，9 休止角小于30°，且無顯著差異，流動性較好，二氧化硅的用量相同。各因素影響分散片分散均勻性和顆粒休止角的大小依次為因素C>因素A>因素B。故確定分散片最佳處方為A3B3C2，即15%低取代羥丙纖維素、64%微晶纖維素、1%二氧化硅。

2.3 制備工藝優(yōu)化

2.3.1 壓片方法選擇

片劑制備時壓片的方法通常有粉末直接壓片法、濕顆粒制片法和干顆粒制片法。粉末直接壓片法制得片劑的崩解時間雖較濕顆粒制片法短，但粉末流動性極差，吸濕性強，加入潤滑劑會大幅延長崩解時間。干顆粒制片法一般用于不加潤滑劑就能直接制成顆粒進行壓片的制劑。前期的研究結(jié)果顯示，金錢草分散片制劑過程需加潤滑劑來改善顆粒的流動性，故干顆粒制片法不適用于金錢草分散片的壓片。濕顆粒制片法工藝重復性好，廣泛應用于片劑的壓片工藝。試驗表明，濕顆粒制片法能有效改善金錢草分散片壓片物料的流動性和可壓性，更適于金錢草分散片的工業(yè)化生產(chǎn)。因此，金錢草分散片選用濕顆粒制片法工藝。

2.3.2 崩解劑加入方法

崩解劑加入方法對分散片外觀、崩解時間和溶出度都會產(chǎn)生一定影響。以金錢草分散片外觀、崩解時間、溶出度為評價指標，考察崩解低取代羥丙纖維素內(nèi)加法、外加法、內(nèi)外加法（內(nèi)外加比例按1∶1）的優(yōu)劣。結(jié)果崩解時間從小到大依次為內(nèi)外加法<內(nèi)加法<外加法，溶出度從大到小依次為內(nèi)外加法>內(nèi)加法>外加法。表明內(nèi)外加法制得的金錢草分散片崩解時間最短，溶出度最高，但分散片外觀粗糙或不平整或有裂隙，可見白色斑點；內(nèi)加法和外加法所得分散片外觀平整、光滑、幾乎無裂片；內(nèi)加法對各方面的影響均較小，利于后期工業(yè)化生產(chǎn)。故選擇低取代羥丙纖維素內(nèi)加法。

2.4 驗證試驗

按最優(yōu)處方且在相同工藝條件下制備3 批金錢草分散片，所得片劑外表光潔，無破損，符合相關(guān)規(guī)定。按2020 年版《中國藥典（四部）》通則進行脆碎度、重量差異、分散均勻性檢查和溶出度測定，結(jié)果見表7。3 批金錢草分散片的重量差異符合限度要求（在±7.5%）；經(jīng)脆碎度檢查未發(fā)現(xiàn)有破碎的片劑，減失質(zhì)量均在1%以內(nèi)。經(jīng)分散均勻性檢查，3批金錢草分散片均能在3 min內(nèi)完全崩解，崩解時間的RSD為3.87%（n=3），表明重復性良好，崩解時間符合相關(guān)規(guī)定。脆碎度、重量差異、分散均勻性均符合2020 年版《中國藥典》的相關(guān)規(guī)定，溶出度良好，表明該試驗篩選的金錢草分散片處方適宜，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。

表7 金錢草分散片驗證試驗結(jié)果Tab.7 Results of the verification test of Jinqiancao Dispersible Tablets

3 討論

3.1 提取工藝影響因素選擇

分散片是近年來中藥固體速釋制劑的研發(fā)熱點，生產(chǎn)工藝無特殊要求，可采用普通片劑生產(chǎn)線生產(chǎn)，兼具片劑和液體制劑的獨特優(yōu)勢［11-13］。影響金錢草出膏率和有效成分含量的因素包括藥材浸泡時間、加水量、提取次數(shù)、提取時間等。結(jié)合金錢草藥材特性和前期預試驗結(jié)果，明確金錢草提取次數(shù)和提取時間。本研究結(jié)果顯示，金錢草浸泡時間、加水量對金錢草出膏率和有效成分含量的影響較大。金錢草為全草類藥材，提取前藥材浸潤透心會導致有效成分無法完全提出，對出膏率和有效成分含量的影響顯著。故在第1次煎煮時，加12倍水，浸泡30 min，再煎煮，第2，3次各加10倍水直接煎煮。

3.2 處方優(yōu)化影響因素選擇

分散片處方設(shè)計的原則是使片劑遇水后在盡可能短的時間內(nèi)成小顆粒并形成均勻混懸液，選擇能提供快速崩解的適宜輔料并能控制藥物輔料的粒度大小是保證分散片質(zhì)量的關(guān)鍵［14］。分散片一般選擇具有親水溶脹性的填充劑，在增加片劑質(zhì)量的同時，可促進片劑崩解［15］。

處方工藝研究結(jié)果顯示，輔料的選擇及相互的配比選擇對片劑的分散性、流動性、溶出度、片重穩(wěn)定性等產(chǎn)生很大影響。微晶纖維素廣泛用作片劑中的黏合劑、填充劑，所得片劑硬度較大，具有較強的結(jié)合力與良好的可壓性，可作為粉末直接壓片的干黏合劑使用，同時具有崩解劑作用，不僅可用于濕法制粒，還可用于直接壓片。低取代羥丙纖維素是國內(nèi)近年來應用較多的一種崩解劑和黏合劑，易成型，適用性較強，特別是對于不易成型、塑性和脆性大的片劑，能提高片劑的硬度和外觀光亮度，還能使片劑崩解迅速。但只加入崩解劑低取代羥丙纖維素，片劑不易成型、吸濕性增加、不易崩解。為此，本研究中以微晶纖維素為填充劑，使得片劑更易成型，崩解速率加快。二氧化硅在高速壓片機上產(chǎn)塵較大，較難順利壓片，會出現(xiàn)裂片、重量差異波動較大、難以下料等風險；且因二氧化硅質(zhì)地輕、表面積大，不易與顆?；旌暇鶆颍辉谏a(chǎn)過程中，二氧化硅的粉塵問題較大，導致粉塵過敏，故實際生產(chǎn)時要降低二氧化硅的用量。硬脂酸鎂呈疏水性，能阻滯藥物從固體劑型中溶出；硬脂酸鎂和片劑顆?；旌蠒r，混合的變異系數(shù)增加，溶出速率降低；硬脂酸鎂可能增加片劑的脆碎度。為增加顆粒的流動性，需進一步提高金錢草分散片崩解速率和溶出速率，故本研究中選擇二氧化硅作助流劑、硬脂酸鎂作潤滑劑。結(jié)合金錢草干膏粉的特點及未來工業(yè)化生產(chǎn)的需求，最終選擇濕顆粒制片法制備金錢草分散片；通過考察金錢草分散片的外觀、崩解時間、溶出度和利于工業(yè)化生產(chǎn)，選擇內(nèi)加法加入崩解劑。

3.3 方法評價

按最優(yōu)處方在相同工藝條件下制備的金錢草分散片外表光潔、無破損，脆碎度、重量差異、分散均勻性均符合2020年版《中國藥典（四部）》的相關(guān)規(guī)定，溶出度良好，篩選的金錢草分散片處方適宜，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。