◎ 羅汝鋒，周靜儀，藍(lán)澤基，黃 成，馬永富，羅 進(jìn)

（廣東一方制藥有限公司，廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點實驗室，廣東 佛山 528200）

靈芝為多孔菌科真菌赤芝或紫芝的干燥子實體，具有補(bǔ)氣安神、止咳平喘等功效[1]。靈芝作為我國中藥和傳統(tǒng)食療的瑰寶，因其功效顯著，早在東漢時期就收錄在《神農(nóng)本草經(jīng)》中，并被稱之為“上藥”，而今更是廣泛應(yīng)用于各類醫(yī)藥及保健養(yǎng)生食品產(chǎn)品中。有研究表明，靈芝中含有豐富的化學(xué)成分，包括多糖、三萜類、多種微量元素等活性成分，具有抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫力、抗氧化等功效[2-8]。同時，靈芝等食用菌普遍具有重金屬元素富集特性，含有對人體有害的鉛、砷、銅、鎘和汞等重金屬元素，而人們常規(guī)的靈芝服用方法為水提取服用[9-19]。因此，研究靈芝水提取前后的重金屬元素提取轉(zhuǎn)移率情況，對于靈芝相關(guān)產(chǎn)品質(zhì)量控制及其合理使用具有重要意義。本研究檢測了安徽省及山東省兩個產(chǎn)地的靈芝藥材重金屬元素及其水提取的轉(zhuǎn)移率情況，為人們科學(xué)選用，安全食用靈芝提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

ICAP-Q電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（賽默飛世爾科技有限公司）；VB24plus石墨消解儀（萊伯泰科有限公司）；OPD-8（T）噴霧干燥機(jī)（上海大川原）。

1.2 材料

靈芝藥材1～10號：山東省臨沂金泰藥業(yè)有限公司提供，經(jīng)廣東一方制藥有限公司質(zhì)量中心鑒定為多孔菌科真菌赤芝的干燥子實體。靈芝藥材11～20號：安徽省本草國藥飲片有限公司提供，經(jīng)廣東一方制藥有限公司質(zhì)量中心鑒定為多孔菌科真菌赤芝的干燥子實體。鉛、鎘、砷、汞和銅等單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，購自國家鋼鐵材料測試中心鋼鐵研究總院。

1.3 試驗方法

1.3.1 靈芝提取工藝

取靈芝藥材，除去雜質(zhì)，用粗碎機(jī)破碎處理（篩網(wǎng)孔徑1.5 cm），用水加熱回流提取2次（第1次 10倍水，煎煮2 h；第2次8倍水，煎煮1 h），所得提取液過350目篩，減壓濃縮，噴霧干燥，得靈芝提取物，備用。

1.3.2 重金屬元素檢測

標(biāo)準(zhǔn)品貯備溶液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、內(nèi)標(biāo)溶液、供試品溶液和試劑空白溶液等溶液的制備及樣品的測定，依據(jù)《中華人民共和國藥典》2020年版四部通則2321鉛、鎘、砷、汞、銅測定法第二法電感耦合等離子體質(zhì)譜法進(jìn)行制備及檢測[20]。

設(shè)備檢測條件設(shè)定。等離子氣流量：14.0 L·min-1；蠕動泵轉(zhuǎn)速：40 r·min-1；霧化室溫度：2 ℃；輔助氣流量：0.8 L·min-1；He氣流量：5 mL·min-1；載氣流量： 0.8 L·min-1；射頻功率：1 550 W；數(shù)據(jù)采樣模式：跳峰采集模式；采樣深度：5 mm；重復(fù)次數(shù)：3次；掃描次數(shù)：50次。

1.3.3 樣品評價

出膏率及其重金屬提取轉(zhuǎn)移率的計算公式如下：

2 結(jié)果與分析

2.1 不同靈芝藥材重金屬含量及其出膏率

分別測定了安徽及山東兩個產(chǎn)地各10批靈芝藥材的重金屬元素鉛、鎘、砷、汞和銅的含量及其提取出膏率，其結(jié)果見表1～2。不同產(chǎn)地的靈芝提取出膏率主要集中在3.7%～5.3%，平均提取出膏率約為4.3%。不同產(chǎn)地的靈芝藥材重金屬含量均符合《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的相關(guān)限量要求（Pb≤5.0 mg·kg-1，Cd≤0.3 mg·kg-1，Hg≤0.2 mg·kg-1，Cu≤20.0 mg·kg-1，As≤2.0 mg·kg-1），但含量上具有一定的差異性，主要表現(xiàn)為山東靈芝藥材的Pb、As及Cu平均含量高于安徽靈芝，其中，Pb平均含量約為0.419 mg·kg-1，約為安徽靈芝藥材的2.3倍，As平均含量約為0.156 mg·kg-1，約為安徽靈芝藥材的2.1倍，Cu平均含量約為4.90 2 mg·kg-1，約為安徽靈芝藥材的1.4倍。安徽靈芝的Cd及Hg的平均含量則高于山東靈芝，Cd平均含量約為0.101 mg·kg-1，約為山東靈芝的2.1倍，Hg平均含量約為0.023 mg·kg-1，約為山東靈芝的3.8倍。不同產(chǎn)地的靈芝重金屬含量表現(xiàn)出的差異性，可能與靈芝品種、栽培方式及地方環(huán)境等因素有關(guān)。因為不同靈芝品種的性狀對重金屬的富集程度具有一定的差異性。此外，安徽靈芝常用椴木栽培的方式進(jìn)行靈芝種植，而山東靈芝習(xí)慣使用袋料栽培的方式進(jìn)行靈芝種植，種植基質(zhì)不一樣，所得靈芝的重金屬含量也會有一定的區(qū)別。不管是椴木栽培還是袋料栽培的靈芝，均需要埋入地下進(jìn)行保溫保濕，促進(jìn)靈芝子實體生長，因此，環(huán)境中的土壤、水資源等也會影響到靈芝的重金屬含量。

表1 靈芝藥材提取出膏率表（單位：%）

表2 不同產(chǎn)地靈芝藥材重金屬含量表（單位：mg·kg-1）

2.2 不同靈芝提取物重金屬含量及其提取轉(zhuǎn)移率

不同靈芝藥材在相同的水提取工藝條件下，所得提取物的重金屬含量及提取轉(zhuǎn)移率結(jié)果分別見表3和表4。山東靈芝所制得的提取物，As平均含量約為2.895 mg·kg-1，遠(yuǎn)高于安徽靈芝所制得的提取物 （1.319 mg·kg-1），且超出《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的相關(guān)限量要求（As≤2.0 mg·kg-1）；安徽靈芝所制得的提取物，Cd平均含量約為0.442 mg·kg-1，遠(yuǎn)高于山東靈芝所制得的提取物（0.134 mg·kg-1）， 且超出《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的相關(guān)限量要求（Cd≤0.3 mg·kg-1）。由表4可知，靈芝不同重金屬的提取轉(zhuǎn)移率差異性較大，轉(zhuǎn)移率從高到低依次為As＞Pb＞Cd＞Hg＞Cu，其中，As的提取轉(zhuǎn)移率高達(dá)80%，說明其在提取加工過程中極其容易轉(zhuǎn)移到產(chǎn)品中，提取物超標(biāo)風(fēng)險較高，過量的As攝入會影響人體細(xì)胞的正常代謝，損害臟器，因此對藥材中砷含量的控制及加工過程中砷元素的去除就顯得尤為重要。此外，由表4也可以看出，不同產(chǎn)地的靈芝重金屬提取轉(zhuǎn)移率也有所區(qū)別，主要表現(xiàn)為安徽靈芝重金屬Pb平均提取轉(zhuǎn)移率約為25.6%，約為山東靈芝重金屬Pb提取轉(zhuǎn)移率的1.8倍；安徽靈芝重金屬Cd平均提取轉(zhuǎn)移率約為20.01%，約為山東靈芝重金屬Cd提取轉(zhuǎn)移率的1.4倍。主要原因可能是不同產(chǎn)地的品種、栽培方式不一樣，重金屬存在的形式可能不一樣，導(dǎo)致水提取的轉(zhuǎn)移率有所差異。

表3 不同靈芝提取物重金屬含量表（單位：mg·kg-1）

表4 不同靈芝重金屬提取轉(zhuǎn)移率表（單位：%）

3 結(jié)論

安徽及山東兩個產(chǎn)地共20批次靈芝藥材的重金屬元素鉛、鎘、砷、汞和銅的含量均符合《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的相關(guān)限量要求，山東靈芝藥材的Pb、As及Cu平均含量高于安徽靈芝，而安徽靈芝的Cd及Hg的平均含量則高于山東靈芝。靈芝重金屬水提取轉(zhuǎn)移率具有較大的差異性，從高到低依次為As＞Pb＞Cd＞Hg＞Cu，As的提取轉(zhuǎn)移率更是高達(dá)80%，在靈芝加工過程中，應(yīng)作為重點控制目標(biāo)，以預(yù)防其產(chǎn)品可能存在的As超標(biāo)風(fēng)險。

安徽靈芝重金屬Pb的提取轉(zhuǎn)移率約為山東靈芝的1.9倍，重金屬Cd的提取轉(zhuǎn)移率約為山東靈芝的1.4倍，說明靈芝產(chǎn)地對重金屬的提取轉(zhuǎn)移率也有一定的影響，揭示人們可以通過篩選靈芝產(chǎn)地，進(jìn)一步控制重金屬潛在的轉(zhuǎn)移風(fēng)險。